紫外法测定葡萄籽中花青素的含量
作者：温普红 王晓玲
单位：温普红 王晓玲(宝鸡文理学院化学化工系 宝鸡 721007)
关键词：
西北药学杂志000408 中图分类号：R284 文献标识码：A
花青素(anthocyanidin)，又称花色素，系黄酮类化合物，广泛存在于植物的花果等部位，有多种药理作用，主要用于治疗心脑血管疾病〔1〕。本文采用紫外分光光度法测定葡萄籽中花青素的含量。
1 仪器与试药
1.1 仪器 751G型紫外—可见分光光度计(上海分析仪表厂)。
1.2 试药 花青素对照品(Sigma公司，纯度95.0%)；葡萄籽(市售，陕西宝鸡产巨峰葡萄)。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择 取花青素对照品适量，加水溶解，配成497μg/ml贮备液。精密吸取10.0ml，置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度。以水作空白，于200～400nm范围内扫描，结果表明，花青素在280nm处有一吸收峰，故确定280nm为测定波长。
2.2 标准曲线的制备 精密吸取花青素贮备液0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10ml分别置于100ml量瓶中，加水稀至刻度，摇匀，在280nm处测定吸收度。以吸收度A对浓度C回归得方程C＝6.76×10-2A-0.002(r＝0.9998)，线性范围为：0～50μg/ml。
2.3 花青素的提取
2.3.1 提取温度的选择 称取葡萄籽0.2～0.4g，置于50ml水中，在不同温度下，提取10min，结果(见表1)表明沸水(98℃)中花青素提取率最大。
, 百拇医药
表1 提取温度对提取率的影响 温度(℃)
时间(min)
花青素(%)
提取率(%)
25
10
0.09
4.4
50
10
0.16
7.8
80
, http://www.100md.com
10
0.74
36.1
98
10
1.05
51.2
2.3.2 提取时间的选择 称取葡萄籽0.2～0.4g，置于50ml沸水中，测定不同提取时间提取率，结果(见表2)表明提取30min花青素基本达到最大值。表2 提取时间对提取率的影响 时间(min)
花青素(%)
提取率(%)
5
, 百拇医药
0.63
30.7
10
1.05
51.2
20
1.85
90.2
25
2.04
99.5
30
2.05
, 百拇医药
100
40
2.04
100
50
2.04
100
2.4 样品含量分析 称取葡萄籽0.2g，置于50ml沸水中，保持微沸状态30min；放冷，滤入100ml量瓶中，用水洗涤滤渣，定容；在280nm处测定吸收度，结果花青素含量为2.05%(n＝5)。
2.5 回收率测定 称取葡萄籽样品适量，分别加入不同量花青素对照品溶液，依法操作，结果见表3。表3 花青素回收率试验结果 加入量(μg)
, http://www.100md.com
测得量(μg)
回收率(%)
平均回收率(%)
104
184
99.4
208
287
99.2
99.6
312
392
99.8
, 百拇医药
(RSD＝0.35%)
416
495
99.6
520
601
100.1
3 讨论
以水提取葡萄籽中的花青素时，须保持葡萄籽完好，否则提取液在放置过程中易析出白色絮状沉淀。
陕西省教委专项科研基金资助项目(99JK098)
参考文献
〔1〕 肖崇原.中药化学.上海：科学技术出版社，1997：273
(收稿：2000-01-06), 百拇医药
单位：温普红 王晓玲(宝鸡文理学院化学化工系 宝鸡 721007)
关键词：
西北药学杂志000408 中图分类号：R284 文献标识码：A
花青素(anthocyanidin)，又称花色素，系黄酮类化合物，广泛存在于植物的花果等部位，有多种药理作用，主要用于治疗心脑血管疾病〔1〕。本文采用紫外分光光度法测定葡萄籽中花青素的含量。
1 仪器与试药
1.1 仪器 751G型紫外—可见分光光度计(上海分析仪表厂)。
1.2 试药 花青素对照品(Sigma公司，纯度95.0%)；葡萄籽(市售，陕西宝鸡产巨峰葡萄)。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择 取花青素对照品适量，加水溶解，配成497μg/ml贮备液。精密吸取10.0ml，置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度。以水作空白，于200～400nm范围内扫描，结果表明，花青素在280nm处有一吸收峰，故确定280nm为测定波长。
2.2 标准曲线的制备 精密吸取花青素贮备液0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10ml分别置于100ml量瓶中，加水稀至刻度，摇匀，在280nm处测定吸收度。以吸收度A对浓度C回归得方程C＝6.76×10-2A-0.002(r＝0.9998)，线性范围为：0～50μg/ml。
2.3 花青素的提取
2.3.1 提取温度的选择 称取葡萄籽0.2～0.4g，置于50ml水中，在不同温度下，提取10min，结果(见表1)表明沸水(98℃)中花青素提取率最大。
, 百拇医药
表1 提取温度对提取率的影响 温度(℃)
时间(min)
花青素(%)
提取率(%)
25
10
0.09
4.4
50
10
0.16
7.8
80
, http://www.100md.com
10
0.74
36.1
98
10
1.05
51.2
2.3.2 提取时间的选择 称取葡萄籽0.2～0.4g，置于50ml沸水中，测定不同提取时间提取率，结果(见表2)表明提取30min花青素基本达到最大值。表2 提取时间对提取率的影响 时间(min)
花青素(%)
提取率(%)
5
, 百拇医药
0.63
30.7
10
1.05
51.2
20
1.85
90.2
25
2.04
99.5
30
2.05
, 百拇医药
100
40
2.04
100
50
2.04
100
2.4 样品含量分析 称取葡萄籽0.2g，置于50ml沸水中，保持微沸状态30min；放冷，滤入100ml量瓶中，用水洗涤滤渣，定容；在280nm处测定吸收度，结果花青素含量为2.05%(n＝5)。
2.5 回收率测定 称取葡萄籽样品适量，分别加入不同量花青素对照品溶液，依法操作，结果见表3。表3 花青素回收率试验结果 加入量(μg)
, http://www.100md.com
测得量(μg)
回收率(%)
平均回收率(%)
104
184
99.4
208
287
99.2
99.6
312
392
99.8
, 百拇医药
(RSD＝0.35%)
416
495
99.6
520
601
100.1
3 讨论
以水提取葡萄籽中的花青素时，须保持葡萄籽完好，否则提取液在放置过程中易析出白色絮状沉淀。
陕西省教委专项科研基金资助项目(99JK098)
参考文献
〔1〕 肖崇原.中药化学.上海：科学技术出版社，1997：273
(收稿：2000-01-06), 百拇医药