溪黄草口服液制备工艺研究
作者：修连喜 赖善诚
单位：龙岩 364000 福建龙岩市第二医院
关键词：溪黄草口服液；制备工艺；总黄酮；甲壳质
中国现代应用药学990608
摘要 目的：制备质量稳定、澄清的溪黄草口服液。方法：以口服液中总黄酮含量为指标，用正交试验优选提取工艺，用甲壳质与乙醇作澄清工艺比较优选澄清工艺。结果：溪黄草加水15倍，提取3次，每次1h，用350ppm浓度甲壳质吸附澄清，总黄酮含量高、稳定性好。结论：用水提取、甲壳质吸附澄清制备的口服液质量稳定、澄明度好。
Study on preparation procedure for Xihuangcao oral liquid
Xiu Lianxi(Xiu LX),Lai Shancheng(Lai SC)
, 百拇医药
(The Second Hospial of Longyan,Longyan 364000)
ABSTRACT OBJECTIVE：To prepare clear oral liquid of Xihuangcao with stable quality.METHOD:By determining the contents of total flavones in oral liquid,the best extraction procedure was selected by orthogonal test and the clarifying procedures were compared with chitosan,alcohol.RESULTS:The best condition to prepare Xihuangcao oral liquid selected was:add 15 times the amount of water and extract for 3 times(1h per time).The contents of total flavones in oral liquid that clarified with chitosan in 350ppm were high and preparation had good stability.CONCLUSION:Xihuangcao oral liquid extracted by water and clarified with chitosan had stable quality and clarity.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Xihuangcao oral liquid,preparation procedure,total flavones,chitosan
溪黄草为唇形科植物线纹香茶菜[Isodon striatus(Benth.) Kudo]的全草，含黄酮苷、酚类、氨基酸、有机酸等成分，用于治疗急性肝炎，急性胆囊炎等[1]。溪黄草口服液治疗乙型肝炎是我院承担龙岩市科委的科研项目，为此，我们对溪黄草口服液进行了制备工艺研究。以总黄酮含量为指标用正交试验法优选提取工艺，用甲壳质吸附澄清工艺，制得的溪黄草口服液总黄酮含量高、澄明度好、质量稳定。经临床应用疗效肯定。
1 仪器与试药
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)，甲壳质(食用级)，溪黄草(购于市场，经龙岩市药品检验所范贤标主管中药师鉴定)，亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com
7520分光光度计(上海分析仪器厂)。
2 总黄酮含量测定方法
2.1 芦丁对照品溶液的制备 精密称取120℃干燥恒重的芦丁200mg,置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取10ml置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。
2.2 标准曲线的制备 精密取芦丁对照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0和7.0ml分别置25ml量瓶中，各加水3ml,分别加5%亚硝酸钠溶液1ml摇匀放置6min,分别加入1%硝酸铝溶液1ml摇匀放置6min,再加入4%氢氧化钠溶液10ml,加水至刻度，摇匀放置15min,在波长500nm处测吸收值，经回归处理得方程:c=83.612A-0.7671,r=0.9997(c为浓度μg/ml,A为吸收值)。
2.3 样品溶液的总黄酮含量测定 精密取样品溶液1ml置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密取稀释液1ml置25ml量瓶中，依标准曲线下‘加水3ml起’操作，测定吸收值计算样品溶液中总黄酮含量。
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3 提取工艺实验
取溪黄草粗粉100g浸润1h,选择加水倍数(A),煎煮时间(B),煎煮次数(C)三因素为考察对象，每个因素确定不同水平进行试验，试验因素水平见表1。本试验为3因素3水平，故采用L9(34)正交试验设计表安排实验，煎煮液合并浓缩至1∶1浓度(药材g/ml)测定总黄酮含量，结果见表2。
表1 试验因素水平表 水 平
因 素
A/倍数
B/min
C/次数
1
10
, http://www.100md.com
90
1
2
12
30
2
3
15
60
3
表2 正交试验设计与计算表 试验
号
因 素
, http://www.100md.com 指 标
总黄酮含量/mg.ml-1
A
B
C
D
1
1
1
1
1
8.572
2
, 百拇医药
1
2
2
2
12.720
3
1
3
3
3
17.790
4
2
1
, 百拇医药
2
3
19.840
5
2
2
3
1
20.794
6
2
3
1
2
, 百拇医药
11.674
7
3
1
3
2
30.620
8
3
2
1
3
12.904
9
, 百拇医药
3
3
2
1
26.694
I1
39.082
59.083
33.150
56.060
G=161.608
I2
, 百拇医药 52.308
46.418
59.254
55.014
CT=2901.92
I3
70.218
56.152
69.204
50.536
R
31.136
, 百拇医药
12.620
36.054
5.526
表3 方差分析 方差来源
方差平方和
自由度
方差
F
P
A
162.76
2
81.38
, http://www.100md.com
28.06
<0.05
B
29.12
2
14.56
5.02
<0.1
C
231.12
2
115.56
39.85
, http://www.100md.com
<0.05
误差E
5.8
2
2.90
由方差分析表明：影响提取因素主次关系为C、A、B，以C3A3B1为最佳工艺，其中因素C、A有显著差异，因素B没有显著差异，以节约时间和能源考虑，确定提取工艺为:C3A3B3即取溪黄草粗粉每次分别加水15倍，煎煮3次，每次1h。合并3次煎煮液，浓缩为1∶1(药材g/ml),加入防腐剂备用。
4 澄清工艺实验
4.1 用甲壳质澄清工艺[2～5] 分别取浓缩液10ml，加入15ml具塞试管中，加入一定量1%的甲壳质，观察澄清变化情况，结果见表4。
, http://www.100md.com
表4 不同甲壳质用量的澄清效果观察 1%甲壳质加入量
/ml
不同时间的澄清效果/h
1
3
6
12
24
48
168
0
, 百拇医药
0.1
+
+
0.2
, 百拇医药
+
+
+-
0.3
+
+
+-
-
-
0.35
, 百拇医药
+
+-
-
-
-
-
0.4
+
+-
-
-
-
-
-
, http://www.100md.com
0.5
+
+-
-
-
-
-
-
注：-严重浑浊；-浑浊；-微浊；+-极微浊；+--澄清；--清澈透明
4.2 乙醇澄清工艺 取浓缩液分别加95%的乙醇至50%,60%,70%和80%,放置24h,滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水溶解成1∶1浓度。观察澄清效果，均得到澄清液体，但总黄酮含量逐步下降。
, http://www.100md.com
4.3 两种澄清工艺的总黄酮含量对比 分别取浓缩液100ml,置具塞瓶中，分别加入1%的甲壳质3.5ml和95%的乙醇至50%,搅匀，放置24h滤过，滤液浓缩至1∶1浓度，分别测定总黄酮含量。甲壳质组的总黄酮含量明显高于乙醇组(36.458mg/ml和25.378mg/ml)。
5 稳定性试验
将甲壳质与乙醇澄清制得的口服液灌封于安瓿，经多次高压加热试验，静置观察性状，结果见表5。
表5 加热对口服液成品的影响 加热条件
次 数
甲壳质工艺
乙醇工艺
115℃
, http://www.100md.com
1
澄清
澄清
30min
2
澄清
少量沉淀
3
少量沉淀
沉淀
6 实验结论
根据上述实验结果确定溪黄草口服液制备工艺为：取溪黄草粗粉，以适量水浸润1h,每次加水15倍，煎煮3次，每次1h,合并煎煮液浓缩成1∶1浓度，加入1%甲壳质使浓度达350ppm,放置12h，滤过，滤液定容，灌封，灭菌即得。
, 百拇医药
作者简介：修连喜，男，34岁。1983年毕业于福建医科大学，主管药师
参考文献
1 江苏新医学院编.中药大辞典.缩印版.第1版.上海：上海科学技术出版社，1995∶2511.
2 黄兰珍，张嘉珍，苏美凤.中药口服液制剂澄清与过滤的工艺研究.中成药，1993，15(11)∶6.
3 李汉保，谢虞升，任海祥，等.壳聚糖澄清法代替醇沉法制备平疣口服液.中草药，1998，29(2)∶95.
4 倪健，任天池.甲壳质用于中药提取液的澄清.中草药，1995，26(12)∶637.
5 秦雪梅，白云娥，漆小梅.甲壳素在药学中的应用.中国医院药学杂志，1998，18(9)∶414.
收稿日期：1998-11-11, http://www.100md.com
单位：龙岩 364000 福建龙岩市第二医院
关键词：溪黄草口服液；制备工艺；总黄酮；甲壳质
中国现代应用药学990608
摘要 目的：制备质量稳定、澄清的溪黄草口服液。方法：以口服液中总黄酮含量为指标，用正交试验优选提取工艺，用甲壳质与乙醇作澄清工艺比较优选澄清工艺。结果：溪黄草加水15倍，提取3次，每次1h，用350ppm浓度甲壳质吸附澄清，总黄酮含量高、稳定性好。结论：用水提取、甲壳质吸附澄清制备的口服液质量稳定、澄明度好。
Study on preparation procedure for Xihuangcao oral liquid
Xiu Lianxi(Xiu LX),Lai Shancheng(Lai SC)
, 百拇医药
(The Second Hospial of Longyan,Longyan 364000)
ABSTRACT OBJECTIVE：To prepare clear oral liquid of Xihuangcao with stable quality.METHOD:By determining the contents of total flavones in oral liquid,the best extraction procedure was selected by orthogonal test and the clarifying procedures were compared with chitosan,alcohol.RESULTS:The best condition to prepare Xihuangcao oral liquid selected was:add 15 times the amount of water and extract for 3 times(1h per time).The contents of total flavones in oral liquid that clarified with chitosan in 350ppm were high and preparation had good stability.CONCLUSION:Xihuangcao oral liquid extracted by water and clarified with chitosan had stable quality and clarity.
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KEY WORDS Xihuangcao oral liquid,preparation procedure,total flavones,chitosan
溪黄草为唇形科植物线纹香茶菜[Isodon striatus(Benth.) Kudo]的全草，含黄酮苷、酚类、氨基酸、有机酸等成分，用于治疗急性肝炎，急性胆囊炎等[1]。溪黄草口服液治疗乙型肝炎是我院承担龙岩市科委的科研项目，为此，我们对溪黄草口服液进行了制备工艺研究。以总黄酮含量为指标用正交试验法优选提取工艺，用甲壳质吸附澄清工艺，制得的溪黄草口服液总黄酮含量高、澄明度好、质量稳定。经临床应用疗效肯定。
1 仪器与试药
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)，甲壳质(食用级)，溪黄草(购于市场，经龙岩市药品检验所范贤标主管中药师鉴定)，亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯。
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7520分光光度计(上海分析仪器厂)。
2 总黄酮含量测定方法
2.1 芦丁对照品溶液的制备 精密称取120℃干燥恒重的芦丁200mg,置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取10ml置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。
2.2 标准曲线的制备 精密取芦丁对照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0和7.0ml分别置25ml量瓶中，各加水3ml,分别加5%亚硝酸钠溶液1ml摇匀放置6min,分别加入1%硝酸铝溶液1ml摇匀放置6min,再加入4%氢氧化钠溶液10ml,加水至刻度，摇匀放置15min,在波长500nm处测吸收值，经回归处理得方程:c=83.612A-0.7671,r=0.9997(c为浓度μg/ml,A为吸收值)。
2.3 样品溶液的总黄酮含量测定 精密取样品溶液1ml置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密取稀释液1ml置25ml量瓶中，依标准曲线下‘加水3ml起’操作，测定吸收值计算样品溶液中总黄酮含量。
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3 提取工艺实验
取溪黄草粗粉100g浸润1h,选择加水倍数(A),煎煮时间(B),煎煮次数(C)三因素为考察对象，每个因素确定不同水平进行试验，试验因素水平见表1。本试验为3因素3水平，故采用L9(34)正交试验设计表安排实验，煎煮液合并浓缩至1∶1浓度(药材g/ml)测定总黄酮含量，结果见表2。
表1 试验因素水平表 水 平
因 素
A/倍数
B/min
C/次数
1
10
, http://www.100md.com
90
1
2
12
30
2
3
15
60
3
表2 正交试验设计与计算表 试验
号
因 素
, http://www.100md.com 指 标
总黄酮含量/mg.ml-1
A
B
C
D
1
1
1
1
1
8.572
2
, 百拇医药
1
2
2
2
12.720
3
1
3
3
3
17.790
4
2
1
, 百拇医药
2
3
19.840
5
2
2
3
1
20.794
6
2
3
1
2
, 百拇医药
11.674
7
3
1
3
2
30.620
8
3
2
1
3
12.904
9
, 百拇医药
3
3
2
1
26.694
I1
39.082
59.083
33.150
56.060
G=161.608
I2
, 百拇医药 52.308
46.418
59.254
55.014
CT=2901.92
I3
70.218
56.152
69.204
50.536
R
31.136
, 百拇医药
12.620
36.054
5.526
表3 方差分析 方差来源
方差平方和
自由度
方差
F
P
A
162.76
2
81.38
, http://www.100md.com
28.06
<0.05
B
29.12
2
14.56
5.02
<0.1
C
231.12
2
115.56
39.85
, http://www.100md.com
<0.05
误差E
5.8
2
2.90
由方差分析表明：影响提取因素主次关系为C、A、B，以C3A3B1为最佳工艺，其中因素C、A有显著差异，因素B没有显著差异，以节约时间和能源考虑，确定提取工艺为:C3A3B3即取溪黄草粗粉每次分别加水15倍，煎煮3次，每次1h。合并3次煎煮液，浓缩为1∶1(药材g/ml),加入防腐剂备用。
4 澄清工艺实验
4.1 用甲壳质澄清工艺[2～5] 分别取浓缩液10ml，加入15ml具塞试管中，加入一定量1%的甲壳质，观察澄清变化情况，结果见表4。
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表4 不同甲壳质用量的澄清效果观察 1%甲壳质加入量
/ml
不同时间的澄清效果/h
1
3
6
12
24
48
168
0
, 百拇医药
0.1
+
+
0.2
, 百拇医药
+
+
+-
0.3
+
+
+-
-
-
0.35
, 百拇医药
+
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-
-
-
-
0.4
+
+-
-
-
-
-
-
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0.5
+
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-
-
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-
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注：-严重浑浊；-浑浊；-微浊；+-极微浊；+--澄清；--清澈透明
4.2 乙醇澄清工艺 取浓缩液分别加95%的乙醇至50%,60%,70%和80%,放置24h,滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水溶解成1∶1浓度。观察澄清效果，均得到澄清液体，但总黄酮含量逐步下降。
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4.3 两种澄清工艺的总黄酮含量对比 分别取浓缩液100ml,置具塞瓶中，分别加入1%的甲壳质3.5ml和95%的乙醇至50%,搅匀，放置24h滤过，滤液浓缩至1∶1浓度，分别测定总黄酮含量。甲壳质组的总黄酮含量明显高于乙醇组(36.458mg/ml和25.378mg/ml)。
5 稳定性试验
将甲壳质与乙醇澄清制得的口服液灌封于安瓿，经多次高压加热试验，静置观察性状，结果见表5。
表5 加热对口服液成品的影响 加热条件
次 数
甲壳质工艺
乙醇工艺
115℃
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1
澄清
澄清
30min
2
澄清
少量沉淀
3
少量沉淀
沉淀
6 实验结论
根据上述实验结果确定溪黄草口服液制备工艺为：取溪黄草粗粉，以适量水浸润1h,每次加水15倍，煎煮3次，每次1h,合并煎煮液浓缩成1∶1浓度，加入1%甲壳质使浓度达350ppm,放置12h，滤过，滤液定容，灌封，灭菌即得。
, 百拇医药
作者简介：修连喜，男，34岁。1983年毕业于福建医科大学，主管药师
参考文献
1 江苏新医学院编.中药大辞典.缩印版.第1版.上海：上海科学技术出版社，1995∶2511.
2 黄兰珍，张嘉珍，苏美凤.中药口服液制剂澄清与过滤的工艺研究.中成药，1993，15(11)∶6.
3 李汉保，谢虞升，任海祥，等.壳聚糖澄清法代替醇沉法制备平疣口服液.中草药，1998，29(2)∶95.
4 倪健，任天池.甲壳质用于中药提取液的澄清.中草药，1995，26(12)∶637.
5 秦雪梅，白云娥，漆小梅.甲壳素在药学中的应用.中国医院药学杂志，1998，18(9)∶414.
收稿日期：1998-11-11, http://www.100md.com