鳄鱼骨胶对小鼠应激功能及造血机能的影响
作者:李辉 彭芳 张华明 王成军
单位:李辉 彭芳 张华明 王成军(大理医学院药理学教研室,大理 671000)
关键词:鳄鱼,骨胶,应激功能,血小板
中国海洋药物000604 摘 要 研究鳄鱼骨胶(CBG)对小鼠应激功能及造血机能的影响,结果表明CBG能显著提高小鼠在高温及低温环境中的耐受力,但不能提高小鼠的抗疲劳及耐缺氧能力;对环磷酰胺引起的造血机能障碍CBG能升高血小板数量,但对白细胞未见明显影响。结果提示CBG有增强机体应激功能及升高血小板的作用。
EFFECTS OF CROCODILE BONE GELATIN ON STRESS REACTION AND BLOOD-FORMING FUNCTION IN MICE
Li Hui,Peng Fang,Zhang Huaming,Wang Chengjun
, http://www.100md.com
(Department of pharmacology,Dali Medical College, Dali 671000)
ABSTRACT To investigate the effects of Crocodile Bone Gelatin(CBG) on stress reaction and blood-forming function in mice. Results showed CBG increased staying power for high temperature and low temperature, but didn′t increase anti-exhaustion ability and hypoxia tolerance of mice. CBG increased platelet count, didn′t increase white blood cell count on Cyclophosphamidum causing blood-forming functional obstruction.
, 百拇医药
KEY WORDS
KEY WORDS Crocodile, Bone gelatin, Stress reaction, Platelet
鳄鱼系爬行类动物,分布于温带及热带地区。《本草纲目》等古代医籍曾有鳄鱼药用的记载。泰国是养鳄大国,主产泰国鳄(Crocodilus siamensis),鳄鱼的食用及药用在泰国较为广泛,民间认为有强壮作用。为了解鳄鱼的药用价值,我们就鳄鱼骨胶(Crocodile Bone Gelatin, CBG)对应激功能及造血机能的作用进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料 CBG,源于泰国鳄,昆明滇虹药业有限公司提供;环磷酰胺,上海华联制药有限公司,批号980406;ICR小鼠,18~23g,雌雄各半,云南省天然药物药理重点实验室提供。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1小鼠游泳实验(抗疲劳实验) 将小鼠随机分为4组:对照组、CBG低剂量组(200mg.kg-1)、CBG中剂量组(400mg.kg-1),CBG高剂量组(800mg.kg-1),每天灌胃给药1次,共7d。于末次给药40min后将小鼠尾巴捆2g重的锡丝置100cm×50cm的水池中游泳并计时,水深20cm,水温25±0.5℃。当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面时即停止计时。实验数据用±s表示,用t-test法进行统计学处理(下同)。
1.2.2 小鼠耐缺氧实验 动物分组、给药方法及时间同上。于末次给药40min后将各组小鼠随机分批置于含钠石灰的250mL广口瓶内,一鼠一瓶,关紧瓶塞后立即计时,以呼吸停止为指标记录小鼠耐缺氧时间。
, 百拇医药
1.2.3 小鼠耐寒实验[1] 动物分组、给药方法及时间同上。于末次给药40min后将各组小鼠置于-8~-10℃的冰箱内并立即计时。以呼吸停止为指标记录小鼠死亡时间及4h、5h、6h时各组小鼠的死亡率。
1.2.4 小鼠耐高温实验[1] 动物分组、给药方法及时间同上。于末次给药40min后将各组小鼠置于45±1℃的恒温箱内并立即计时。以呼吸停止为指标记录小鼠死亡时间及80、100、120min时各组小鼠的死亡率。
1.2.5 对小鼠血象的影响[2] 将小鼠分为5组:生理盐水对照组、环磷酰胺模型组、CBG低剂量组、CBG中剂量组、CBG高剂量组。灌胃给药12d,每天1次(前2组给生理盐水)。在给药的第1~3天,除生理盐水对照组外,各组均腹腔注射环磷酰胺(100mg.kg-1.d-1)。于实验第6、9、12天各取6只小鼠眼球取血,测定白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量。
, http://www.100md.com
2 结果与讨论
2.1 对游泳时间及耐缺氧能力的影响
实验结果显示给药组小鼠的游泳时间及耐缺氧时间与对照组相比无明显差别。说明CBG对小鼠无抗疲劳及提高耐缺氧能力的作用(见表1)。
表1 CBG对小鼠游泳时间、耐缺氧时间的影响(±s,n=11) 分组
剂量(mg.kg-1)
游泳时间(min)
耐缺氧时间(min)
对照组(N.S)
, http://www.100md.com
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
200
400
800
20±7.3
19±6.3
17±5.4
22±6.8
21±2.7
, 百拇医药
22±3.7
19±1.9
22±3.4
注:P>0.05 vs 对照组
2.2 对耐受高、低温环境能力的影响 结果显示CBG高剂量组在持续低温5h时能明显降低小鼠死亡率(χ2检验),有提高小鼠耐寒能力的作用(见表2)。
表2 CBG对小鼠耐受低温能力的影响 分组
剂量
(mg.kg-1)
, http://www.100md.com
死亡率(%)
4h
5h
6h
对照组(N.S)
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
200
400
800
20
, 百拇医药
10
10
0
90
90
70
50
100
100
100
100
注:n=10,P<0.05(χ2检验) vs 对照组
, http://www.100md.com
在耐高温实验中,CBG高、中剂量组在持续高温80、100min时能明显降低小鼠死亡率(χ2检验),表现出明显的量效关系,且CBG高剂量组的死亡时间明显长于对照组(t-test),说明CBG有提高小鼠耐高温能力的作用(见表3)。
表3 CBG对小鼠耐受高温能力的影响 分组
剂量
(mg.kg-1)
死亡时间
(min)
死亡率(%)
80min
100min
, 百拇医药
120min
对照组(N.S)
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
200
400
800
86±11
89±12
94±14
105±13
, 百拇医药
70
60
40
10
90
80
60
40
100
100
100
90
, 百拇医药
注:n=10,P<0.05,P<0.01 vs 对照组
2.3 CBG对环磷酰胺所致血象降低作用的影响 小鼠连续3d注射环磷酰胺,可引起WBC、PLT显著降低,在口服CBG后显示CBG高、中剂量组于试验第9天对PLT有明显升高作用(见表4),但对WBC无显示升高作用(见表5)。
表4 CBG对环磷酰胺所致PLT(109/L)降低作用的影响
分组
剂量
(mg.kg-1)
第6天
第9天
, 百拇医药
第12天
对照组(N.S)
环磷酰胺模型组
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
等体积
200
400
800
1021±62
764±126
, 百拇医药
746±141
783±137
812±92
943±70
663±113
772±138
1009±30..
878±101..
888±87
849±168
886±143
, 百拇医药
982±139
997±42
注:n=10,P<0.01 vs 环磷酰胺模型组表5 CBG对环磷酰胺所致WBC(109/L)降低作用的影响 分组
剂量
(mg.kg-1)
第6天
第9天
第12天
对照组(N.S)
环磷酰胺模型组
, 百拇医药
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
等体积
200
400
800
7.4±1.5
1.5±0.3
1.8±0.5
1.9±0.6
, 百拇医药
1.9±0.7
9.0±1.7
5.1±1.6
5.9±2.2
6.6±2.8
6.7±4.4
9.4±1.6
8.8±5.0
8.6±3.7
8.8±1.8
, 百拇医药 12.0±4.0
注:n=10,P>0.05 vs 环磷酰胺模型组
4 讨论
鳄鱼古称鼍龙、土龙,《本草纲目》曾记载其甲味辛、性温,有破血逐淤、消肿生肌之功效[3]。《中华本草》第二十六卷载:扬子鳄(Alligator sinensis)的甲片,药名鼍甲,有化瘀、消积、杀虫功能,主治 瘕积聚,崩中带下,疮疥、恶疮,肠风痔疾。近有报道鳄鱼有增强小鼠免疫功能的作用[4]。CBG的主要成分为蛋白质及肽类,与阿胶等滋补强壮的动物药有相似之处。本实验结果证实CBG确有增强机体应激功能的作用,但此作用有一定的选择性,即对小鼠耐缺氧、抗疲劳无明显增强作用,而对环境条件的剧烈改变如低温、高温状态下小鼠的耐受力有明显的增强作用(CBG用量在400mg.kg-1以上)。对环磷酰胺造成的小鼠血象降低(主要是WBC及PLT降低),CBG有升高PLT的作用(CBG用量在400mg.kg-1以上),而无升高WBC的作用。上述作用的机理及选择性原理目前尚不清楚,有待进一步研究。
, http://www.100md.com
参考文献
1,宗瑞义.人参镇静抗疲劳及抗高温低温作用.生理学报1964.(4):32
2,戴培兴.女贞子中的升白细胞有效成分的实验研究.中成药研究,1982.(1):42
3,李时珍(明).本草纲目.北京:人民卫生出版社,1982.2382
4,郭喜玲,俞晓进,史智扬,等.鳄鱼精滋补液对小鼠免疫功能的影响.江苏预防医学,1997.8(5):24.
(收稿日期:2000-07-26), http://www.100md.com
单位:李辉 彭芳 张华明 王成军(大理医学院药理学教研室,大理 671000)
关键词:鳄鱼,骨胶,应激功能,血小板
中国海洋药物000604 摘 要 研究鳄鱼骨胶(CBG)对小鼠应激功能及造血机能的影响,结果表明CBG能显著提高小鼠在高温及低温环境中的耐受力,但不能提高小鼠的抗疲劳及耐缺氧能力;对环磷酰胺引起的造血机能障碍CBG能升高血小板数量,但对白细胞未见明显影响。结果提示CBG有增强机体应激功能及升高血小板的作用。
EFFECTS OF CROCODILE BONE GELATIN ON STRESS REACTION AND BLOOD-FORMING FUNCTION IN MICE
Li Hui,Peng Fang,Zhang Huaming,Wang Chengjun
, http://www.100md.com
(Department of pharmacology,Dali Medical College, Dali 671000)
ABSTRACT To investigate the effects of Crocodile Bone Gelatin(CBG) on stress reaction and blood-forming function in mice. Results showed CBG increased staying power for high temperature and low temperature, but didn′t increase anti-exhaustion ability and hypoxia tolerance of mice. CBG increased platelet count, didn′t increase white blood cell count on Cyclophosphamidum causing blood-forming functional obstruction.
, 百拇医药
KEY WORDS
KEY WORDS Crocodile, Bone gelatin, Stress reaction, Platelet
鳄鱼系爬行类动物,分布于温带及热带地区。《本草纲目》等古代医籍曾有鳄鱼药用的记载。泰国是养鳄大国,主产泰国鳄(Crocodilus siamensis),鳄鱼的食用及药用在泰国较为广泛,民间认为有强壮作用。为了解鳄鱼的药用价值,我们就鳄鱼骨胶(Crocodile Bone Gelatin, CBG)对应激功能及造血机能的作用进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料 CBG,源于泰国鳄,昆明滇虹药业有限公司提供;环磷酰胺,上海华联制药有限公司,批号980406;ICR小鼠,18~23g,雌雄各半,云南省天然药物药理重点实验室提供。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1小鼠游泳实验(抗疲劳实验) 将小鼠随机分为4组:对照组、CBG低剂量组(200mg.kg-1)、CBG中剂量组(400mg.kg-1),CBG高剂量组(800mg.kg-1),每天灌胃给药1次,共7d。于末次给药40min后将小鼠尾巴捆2g重的锡丝置100cm×50cm的水池中游泳并计时,水深20cm,水温25±0.5℃。当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面时即停止计时。实验数据用±s表示,用t-test法进行统计学处理(下同)。
1.2.2 小鼠耐缺氧实验 动物分组、给药方法及时间同上。于末次给药40min后将各组小鼠随机分批置于含钠石灰的250mL广口瓶内,一鼠一瓶,关紧瓶塞后立即计时,以呼吸停止为指标记录小鼠耐缺氧时间。
, 百拇医药
1.2.3 小鼠耐寒实验[1] 动物分组、给药方法及时间同上。于末次给药40min后将各组小鼠置于-8~-10℃的冰箱内并立即计时。以呼吸停止为指标记录小鼠死亡时间及4h、5h、6h时各组小鼠的死亡率。
1.2.4 小鼠耐高温实验[1] 动物分组、给药方法及时间同上。于末次给药40min后将各组小鼠置于45±1℃的恒温箱内并立即计时。以呼吸停止为指标记录小鼠死亡时间及80、100、120min时各组小鼠的死亡率。
1.2.5 对小鼠血象的影响[2] 将小鼠分为5组:生理盐水对照组、环磷酰胺模型组、CBG低剂量组、CBG中剂量组、CBG高剂量组。灌胃给药12d,每天1次(前2组给生理盐水)。在给药的第1~3天,除生理盐水对照组外,各组均腹腔注射环磷酰胺(100mg.kg-1.d-1)。于实验第6、9、12天各取6只小鼠眼球取血,测定白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量。
, http://www.100md.com
2 结果与讨论
2.1 对游泳时间及耐缺氧能力的影响
实验结果显示给药组小鼠的游泳时间及耐缺氧时间与对照组相比无明显差别。说明CBG对小鼠无抗疲劳及提高耐缺氧能力的作用(见表1)。
表1 CBG对小鼠游泳时间、耐缺氧时间的影响(±s,n=11) 分组
剂量(mg.kg-1)
游泳时间(min)
耐缺氧时间(min)
对照组(N.S)
, http://www.100md.com
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
200
400
800
20±7.3
19±6.3
17±5.4
22±6.8
21±2.7
, 百拇医药
22±3.7
19±1.9
22±3.4
注:P>0.05 vs 对照组
2.2 对耐受高、低温环境能力的影响 结果显示CBG高剂量组在持续低温5h时能明显降低小鼠死亡率(χ2检验),有提高小鼠耐寒能力的作用(见表2)。
表2 CBG对小鼠耐受低温能力的影响 分组
剂量
(mg.kg-1)
, http://www.100md.com
死亡率(%)
4h
5h
6h
对照组(N.S)
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
200
400
800
20
, 百拇医药
10
10
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90
90
70
50
100
100
100
100
注:n=10,P<0.05(χ2检验) vs 对照组
, http://www.100md.com
在耐高温实验中,CBG高、中剂量组在持续高温80、100min时能明显降低小鼠死亡率(χ2检验),表现出明显的量效关系,且CBG高剂量组的死亡时间明显长于对照组(t-test),说明CBG有提高小鼠耐高温能力的作用(见表3)。
表3 CBG对小鼠耐受高温能力的影响 分组
剂量
(mg.kg-1)
死亡时间
(min)
死亡率(%)
80min
100min
, 百拇医药
120min
对照组(N.S)
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
200
400
800
86±11
89±12
94±14
105±13
, 百拇医药
70
60
40
10
90
80
60
40
100
100
100
90
, 百拇医药
注:n=10,P<0.05,P<0.01 vs 对照组
2.3 CBG对环磷酰胺所致血象降低作用的影响 小鼠连续3d注射环磷酰胺,可引起WBC、PLT显著降低,在口服CBG后显示CBG高、中剂量组于试验第9天对PLT有明显升高作用(见表4),但对WBC无显示升高作用(见表5)。
表4 CBG对环磷酰胺所致PLT(109/L)降低作用的影响
分组
剂量
(mg.kg-1)
第6天
第9天
, 百拇医药
第12天
对照组(N.S)
环磷酰胺模型组
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
等体积
200
400
800
1021±62
764±126
, 百拇医药
746±141
783±137
812±92
943±70
663±113
772±138
1009±30..
878±101..
888±87
849±168
886±143
, 百拇医药
982±139
997±42
注:n=10,P<0.01 vs 环磷酰胺模型组表5 CBG对环磷酰胺所致WBC(109/L)降低作用的影响 分组
剂量
(mg.kg-1)
第6天
第9天
第12天
对照组(N.S)
环磷酰胺模型组
, 百拇医药
CBG低剂量组
CBG中剂量组
CBG高剂量组
等体积
等体积
200
400
800
7.4±1.5
1.5±0.3
1.8±0.5
1.9±0.6
, 百拇医药
1.9±0.7
9.0±1.7
5.1±1.6
5.9±2.2
6.6±2.8
6.7±4.4
9.4±1.6
8.8±5.0
8.6±3.7
8.8±1.8
, 百拇医药 12.0±4.0
注:n=10,P>0.05 vs 环磷酰胺模型组
4 讨论
鳄鱼古称鼍龙、土龙,《本草纲目》曾记载其甲味辛、性温,有破血逐淤、消肿生肌之功效[3]。《中华本草》第二十六卷载:扬子鳄(Alligator sinensis)的甲片,药名鼍甲,有化瘀、消积、杀虫功能,主治 瘕积聚,崩中带下,疮疥、恶疮,肠风痔疾。近有报道鳄鱼有增强小鼠免疫功能的作用[4]。CBG的主要成分为蛋白质及肽类,与阿胶等滋补强壮的动物药有相似之处。本实验结果证实CBG确有增强机体应激功能的作用,但此作用有一定的选择性,即对小鼠耐缺氧、抗疲劳无明显增强作用,而对环境条件的剧烈改变如低温、高温状态下小鼠的耐受力有明显的增强作用(CBG用量在400mg.kg-1以上)。对环磷酰胺造成的小鼠血象降低(主要是WBC及PLT降低),CBG有升高PLT的作用(CBG用量在400mg.kg-1以上),而无升高WBC的作用。上述作用的机理及选择性原理目前尚不清楚,有待进一步研究。
, http://www.100md.com
参考文献
1,宗瑞义.人参镇静抗疲劳及抗高温低温作用.生理学报1964.(4):32
2,戴培兴.女贞子中的升白细胞有效成分的实验研究.中成药研究,1982.(1):42
3,李时珍(明).本草纲目.北京:人民卫生出版社,1982.2382
4,郭喜玲,俞晓进,史智扬,等.鳄鱼精滋补液对小鼠免疫功能的影响.江苏预防医学,1997.8(5):24.
(收稿日期:2000-07-26), http://www.100md.com