联立方程紫外分光光度法测定碘苯甲酸涂剂中苯甲酸、水杨酸的含量
作者：林萍 李蕾
单位：林萍：慈溪市药品检验所 慈溪 315300；李蕾：秦皇岛市药品检验所 秦皇岛 066000
关键词：苯甲酸；水杨酸；联立方程紫外分光光度法
联立方程紫外分光光度法测定碘 苯甲酸涂剂中苯甲酸 提要 用紫外分光光度法测定苯甲酸，水杨酸混合物的含量，不经分离在297 nm、272 nm波长处测定吸光度，以水杨酸的含量，用联立方程推出苯甲酸的含量。平均回收率苯甲酸为100.03%、RSD为0.73%，水杨酸为99.33%，RSD为0.51%(n=5)。
文献[1]用中和法测定水杨酸和苯甲酸的总量。现采用紫外分光光度法，利用混合物的紫外吸收光谱部分重叠在297 nm波长处直接测定水杨酸的含量，根据吸光度加和性法则[2]，在272 nm波长处测混合物吸光度，通过联立方程推导出苯甲酸的含量，简便而快速。
, 百拇医药
1 实验部分
1.1 仪器与试药
751G型分光光度计(上海分析仪器厂)、水杨酸、苯甲酸均符合中国药典1995年版规定，乙醇、甘油(分析纯)；2%碘酊(市售)，碘苯甲酸涂剂。
1.2 方法与结果
1.2.1 贮备液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的水杨酸1.5 g，置50 ml量瓶中，用75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得水杨酸贮备液。精密称取苯甲酸3.0 g，置50 ml量瓶中，用75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得苯甲酸贮备液。精密量取2%碘酊液5 ml，甘油10 ml，置50 ml量瓶中，用75%乙醇稀释至刻度，摇匀，得辅料成份贮备液
1.2.2 条件的选择 分别精密吸取一定量的水杨酸，苯甲酸贮备液，用75%乙醇稀释成含水杨酸15 μg/ml，苯甲酸30 μg/ml及辅料成份贮备液，分别在250～350 nm波长范围内绘制紫外吸收光谱图(图略)，水杨酸在297 nm处有最大吸收，符合文献[3]。苯甲酸在此波长处无干扰。而苯甲酸在272 nm波长处有最大吸收，在此波长处水杨酸有干扰。辅料成份对上述两成份均无干扰吸收。
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1.2.3 标准曲线绘制 分别精密吸取苯甲酸、水杨酸贮备液一定量，用75%乙醇稀释成苯甲酸浓度为9、15、21、24、30 μg/ml，水杨酸浓度为12、15、18、21、24 μg/ml的溶液，以75%乙醇作参比，在297 nm处测定水杨酸吸光度，在272 nm处分别测定苯甲酸(苯)及水杨酸(水)的吸光度，以浓度对吸收值作线性回归，得回归方程：
A苯272nm=-0.00201+0.00737c r＝0.9999 (1)
A水272nm＝0.01439+0.00507c r＝0.9998 (2)
A水297nm＝0.0162+0.02537c r＝0.9999 (3)
结果，苯甲酸在9～30 μg/ml，水杨酸在12～24 μg/ml浓度范围内，浓度与吸光度呈较好的线性关系。
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1.2.4 测定原理及计算 根据吸光度的加和性，分别在297 nm和272 nm处测定吸光度。297 nm处可直接测定水杨酸吸光度，272 nm处测定水杨酸及苯甲酸的混合物吸光度。有下列关系式：
A混297nm＝A水297nm；A混272nm=A水272nm+A苯272nm
将(1)、(2)、(3)回归方程代入关系式得：
C水＝39.4166A水297nm-0.6386 (4)
C苯＝135.6116A混272nm-0.6871C水-1.6790 (5)
, 百拇医药
1.2.5 回收率试验 按处方比例正确配制碘苯甲酸涂剂50 ml，精密吸取1 ml置50 ml量瓶中，用75%乙醇稀释至刻度，再分别取稀释液2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 ml各置100 ml量瓶中，并用75%乙醇稀释至刻度，以75%乙醇作参比，分别在297 nm、272 nm处测定吸光度，代入上述公式(4)、(5)，结果见表。
表 苯甲酸和水杨酸的回收率试验结果(n=5)
编号
投入量(μg)
测得量(μg)
回收率(%)
平均回收率(%)
苯
, http://www.100md.com
水
苯
水
苯
水
苯
水
1
24
12
23.78
11.9
99.08
99.13
, http://www.100md.com
100.03
99.33
2
30
15
30.04
14.82
100.13
98.75
3
36
18
36.26
, 百拇医药
18.0
100.73
100.03
RSD
RSD
4
42
21
41.8
20.8
99.52
99.07
＝0.73
, http://www.100md.com
＝0.51
5
48
24
48.33
23.92
100.7
99.66
1.2.6 样品测定 取碘苯甲酸涂剂3批，精密吸取样品液1 ml，置50 ml量瓶中，加75%乙醇至刻度，再取稀释液2.5 ml置100 ml量瓶中，加75%乙醇稀释至刻度，摇匀，按上述方法测定。3批样品标示量的百分含量水杨酸分别为99.28%，99.0%，100.05%，苯甲酸分别为99.5%，99.17%，100.1%。
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2 讨论
作参比的乙醇浓度与样品新稀释的乙醇浓度最好一致。辅料成份在297nm,272 nm处吸收值接近零，对测定无干扰，如有颜色可将辅料成份用0.1 mol/L Na2S2O3液滴至无色。
参考文献
1 浙江省医院制剂规范.杭州：浙江科学技术出版社，1988.184
2 实用药学计算.长沙：湖南科学技术出版社，1983.230
3 全国医院新制剂与质量控制学术会议论文摘要汇编.1994.10, http://www.100md.com
单位：林萍：慈溪市药品检验所 慈溪 315300；李蕾：秦皇岛市药品检验所 秦皇岛 066000
关键词：苯甲酸；水杨酸；联立方程紫外分光光度法
联立方程紫外分光光度法测定碘 苯甲酸涂剂中苯甲酸 提要 用紫外分光光度法测定苯甲酸，水杨酸混合物的含量，不经分离在297 nm、272 nm波长处测定吸光度，以水杨酸的含量，用联立方程推出苯甲酸的含量。平均回收率苯甲酸为100.03%、RSD为0.73%，水杨酸为99.33%，RSD为0.51%(n=5)。
文献[1]用中和法测定水杨酸和苯甲酸的总量。现采用紫外分光光度法，利用混合物的紫外吸收光谱部分重叠在297 nm波长处直接测定水杨酸的含量，根据吸光度加和性法则[2]，在272 nm波长处测混合物吸光度，通过联立方程推导出苯甲酸的含量，简便而快速。
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1 实验部分
1.1 仪器与试药
751G型分光光度计(上海分析仪器厂)、水杨酸、苯甲酸均符合中国药典1995年版规定，乙醇、甘油(分析纯)；2%碘酊(市售)，碘苯甲酸涂剂。
1.2 方法与结果
1.2.1 贮备液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的水杨酸1.5 g，置50 ml量瓶中，用75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得水杨酸贮备液。精密称取苯甲酸3.0 g，置50 ml量瓶中，用75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得苯甲酸贮备液。精密量取2%碘酊液5 ml，甘油10 ml，置50 ml量瓶中，用75%乙醇稀释至刻度，摇匀，得辅料成份贮备液
1.2.2 条件的选择 分别精密吸取一定量的水杨酸，苯甲酸贮备液，用75%乙醇稀释成含水杨酸15 μg/ml，苯甲酸30 μg/ml及辅料成份贮备液，分别在250～350 nm波长范围内绘制紫外吸收光谱图(图略)，水杨酸在297 nm处有最大吸收，符合文献[3]。苯甲酸在此波长处无干扰。而苯甲酸在272 nm波长处有最大吸收，在此波长处水杨酸有干扰。辅料成份对上述两成份均无干扰吸收。
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1.2.3 标准曲线绘制 分别精密吸取苯甲酸、水杨酸贮备液一定量，用75%乙醇稀释成苯甲酸浓度为9、15、21、24、30 μg/ml，水杨酸浓度为12、15、18、21、24 μg/ml的溶液，以75%乙醇作参比，在297 nm处测定水杨酸吸光度，在272 nm处分别测定苯甲酸(苯)及水杨酸(水)的吸光度，以浓度对吸收值作线性回归，得回归方程：
A苯272nm=-0.00201+0.00737c r＝0.9999 (1)
A水272nm＝0.01439+0.00507c r＝0.9998 (2)
A水297nm＝0.0162+0.02537c r＝0.9999 (3)
结果，苯甲酸在9～30 μg/ml，水杨酸在12～24 μg/ml浓度范围内，浓度与吸光度呈较好的线性关系。
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1.2.4 测定原理及计算 根据吸光度的加和性，分别在297 nm和272 nm处测定吸光度。297 nm处可直接测定水杨酸吸光度，272 nm处测定水杨酸及苯甲酸的混合物吸光度。有下列关系式：
A混297nm＝A水297nm；A混272nm=A水272nm+A苯272nm
将(1)、(2)、(3)回归方程代入关系式得：
C水＝39.4166A水297nm-0.6386 (4)
C苯＝135.6116A混272nm-0.6871C水-1.6790 (5)
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1.2.5 回收率试验 按处方比例正确配制碘苯甲酸涂剂50 ml，精密吸取1 ml置50 ml量瓶中，用75%乙醇稀释至刻度，再分别取稀释液2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 ml各置100 ml量瓶中，并用75%乙醇稀释至刻度，以75%乙醇作参比，分别在297 nm、272 nm处测定吸光度，代入上述公式(4)、(5)，结果见表。
表 苯甲酸和水杨酸的回收率试验结果(n=5)
编号
投入量(μg)
测得量(μg)
回收率(%)
平均回收率(%)
苯
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水
苯
水
苯
水
苯
水
1
24
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23.78
11.9
99.08
99.13
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100.03
99.33
2
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30.04
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18
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4
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＝0.73
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99.66
1.2.6 样品测定 取碘苯甲酸涂剂3批，精密吸取样品液1 ml，置50 ml量瓶中，加75%乙醇至刻度，再取稀释液2.5 ml置100 ml量瓶中，加75%乙醇稀释至刻度，摇匀，按上述方法测定。3批样品标示量的百分含量水杨酸分别为99.28%，99.0%，100.05%，苯甲酸分别为99.5%，99.17%，100.1%。
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2 讨论
作参比的乙醇浓度与样品新稀释的乙醇浓度最好一致。辅料成份在297nm,272 nm处吸收值接近零，对测定无干扰，如有颜色可将辅料成份用0.1 mol/L Na2S2O3液滴至无色。
参考文献
1 浙江省医院制剂规范.杭州：浙江科学技术出版社，1988.184
2 实用药学计算.长沙：湖南科学技术出版社，1983.230
3 全国医院新制剂与质量控制学术会议论文摘要汇编.1994.10, http://www.100md.com