绞股蓝总皂苷对体内外血栓及凝血功能的影响*
作者：张小丽 刘 珍 朱自平 杨甫昭 谢人明
单位：陕西省中医药研究院药理室 西安 710003
关键词：绞股蓝总皂苷；高分子右旋糖苷；血栓；凝血功能
华西药学杂志990512 提要 以静脉注射高分子右旋糖苷(higher molecular weight dextran,HMWD)造模，使实验动物的体内外血栓形成时间延长，凝血功能发生障碍。绞股蓝总皂苷(gypenosides,GPs)对以HMWD所致的血栓形成时间缩短具有较强的对抗作用，对HMWD引起的凝血时间及凝血酶原时间(PT)的缩短亦具有较强对抗作用，对白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)缩短有一定的延长作用，但无统计学意义。
INFLUENCE OF GYPENOSIDES ON THROMBUS AND
, http://www.100md.com
COAGULATION FUNCTION IN VIVO AND IN VITRO
Zhang Xiaoli Liu Zhen Zhu Ziping Yang Puzhao Xie Renming
(Department of Pharmacology, Shanxi Academy of Traditional Chinese Medicine Xi'an 71003)
ABSTRACT A model was established by intravenous injection of higher molecular weight dextran (HMWD), which exhibited extended thrombus development process and malfunctioned coagulation in vivo and in vitro. The results showed that, with the model animals, gypenosides (GPs) significantly reduced the length, fresh and dry weight of thrombus in vitro and shortened thrombosis time, lengthened coagulation time in vivo and prothrombin time in vitro, and significantly increased kaolin part thromboplastin time (KPTT).
, 百拇医药
Key Words Gypenosides Higher molecular weight dextran Thrombus Coagulation function
绞股蓝[Gynistemma pentaphyllum Hum(Thunb.)Makino]为葫芦科绞股蓝属植物，已证实其含有人参皂苷以及多种人体所需的微量元素，具有多种药理活性。临床上观察其降脂作用的同时，还注意到其对血液流变学的异常有改善作用。为了进一步探索此作用，实验观察了绞股蓝总苷对家兔的体外血栓形成、大鼠的体内血栓形成及凝血功能的作用。
1 材料和方法
1.1 动物、药品、试剂与仪器
SD大鼠(陕西省中医药研究院实验动物中心，合格证号：医动证字第08-24号)，♀
各半，220～260 g；大耳白家兔2.0～2.5 kg(陕西省中医研究院动物中心)。绞股蓝总皂苷(含量大于98%，西安神农生化研究所)。白陶土(上海新成精细化工有限公司)。凝血酶原时间测定试剂(上海荣盛生物技术有限公司)；高分子右旋糖苷(高右，分子量25万～30万，天津市生化制品厂)；盐酸川芎嗪注射液(常州制药厂)。SA-B型体外血栓形成血小板粘附二用仪(国营江西省新元技术开发公司)；BT-87-2型实验性体内血栓形成测定仪(包头医学院心血管研究室)。
, 百拇医药
1.2 方法与结果
1.2.1 体外血栓形成的测定 取家兔69只，随机按表1分为6组，除川芎嗪组外，GPs组和水对照组ig 7 d，每天1次。GPs组在给药至第6、7天，由家兔耳缘iv 10%高右生理盐水5 ml/kg两次，对照组iv生理盐水，第7天ig 30 min后，除水对照组给生理盐水外，其余各组iv高右生理盐水，15 min后由颈总动脉插管放血测体外血栓。川芎嗪在放血前一天及当天ip 60 mg/kg，10 min后耳缘iv高右生理盐水5 ml/kg，处死当天iv高右15 min后取动脉血测体外血栓的湿重，干重及长度。各组测量值以
±s表示，进行组间t检验(表1)。
表1 绞股蓝总皂苷对家兔体外血栓形成的影响(±s)
, 百拇医药
Table 1 Effects of GPs on thrombus of rabbits in vitro Groups
No.
rabbits
Doses
(mg/kg)
Thrombus
length(mm)
fresh weight(mg)
dry weight(mg)
Control
12
, http://www.100md.com
43.0±26.7*
86.1±59.0*
32.2±21.1*
HMWD
12
500
78.3±49.3
179.8±128.2
85.9±75.5
GPs
11
, http://www.100md.com 50
45.0±30.9
89.1±68.6*
41.8±35.8
GPs
11
100
18.6±19.7***
41.5±37.6**
17.8±18.3**
GPs
, 百拇医药
12
200
28.1±24.5**
43.6±44.4**
22.7±21.0*
Ligustrazine
11
60
19.7±15.0***
48.8±42.8**
21.8±18.8**
, http://www.100md.com
T-test of significance in groups, compared with HMWD *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
由表1可见，绞股蓝总苷的三个剂量组对以高右为模型的血栓形成均具有抑制作用，GPs 100 mg/kg及200 mg/kg的作用较强，几乎与川芎嗪相当。
1.2.2 GPs对体内血栓形成及凝血功能的影响 取大鼠64只，按表2分为6组，除川芎嗪组外其余5组连续ig 7 d，末次给药后30 min用10%乌拉坦麻醉，舌下iv 10%高右生理盐水5 ml/kg，水对照组iv生理盐水。川芎嗪组ip 60 mg/kg后，10 min行乌拉坦麻醉，舌下iv 10%高右生理盐水5 ml/kg。各组在iv高右或生理盐水10 min后切开颈皮肤，分离左侧颈总动脉，将实验性体内血栓形成测定仪的刺激电极和温控探头钩于颈总动脉，用2.0 mA直流电刺激300 s，温度传感器监测血管表面温度变化。当动脉内血栓形成堵塞血流，血管远端的温度突降时，仪器报警，并自动记录时间。刺激突降所需时间即为血栓形成时间。然后右颈总动脉插管取血，测定每只大鼠的凝血时间并制备血浆，分别用兔脑粉法测凝血酶原时间(PT)及用白陶土法测定大鼠的部分凝血活酶时间(KPTT)，血栓形成超过1 000 s者按1 000 s计。用±s表示各组数据，组间t检验判断其显著性(表2)。
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表2 绞股蓝总皂苷对大鼠体内血栓形成及凝血功能的影响(±s)
Table 2 Effects of GPs on thrombus and coagulation function of rats in vivo Groups
rats
No.
Doses
(mg/kg)
Thrombus
time
(s)
, 百拇医药
Thrombosis
time
(s)
PT
(s)
KPTT
(s)
Control
12
864.0±159.0***
68.3±49.3***
20.2±5.3*
, 百拇医药
75.5±20.5
HMWD
12
500
635.0±98.6
26.5±22.4
15.7±4.4
59.0±20.8
GPs
10
100
852.0±183.2**
, 百拇医药
55.8±9.3**
18.1±1.8
62.7±4.7
GPs
10
200
801.0±194.7*
70.5±21.5***
20.2±4.1*
70.8±11.5
GPs
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10
400
880.9±142.2***
83.9±34.2***
20.7±2.8*
74.2±6.4**
Ligustrazine
10
60
865.5±127.9***
62.2±27.4**
, 百拇医药
25.9±15.7
63.2±9.7
T-test of significance in groups, compared with HMWD * P<0.05,** P<0.01,*** P<0.001
由表2可知，高右模型组与对照组比较，血栓形成时间、凝血时间、PT均显著缩短。造模后，GPs三个剂量及川芎嗪组与模型组比较各项指标均有显著性差异。GPs大剂量与模型组比较，KPTT有统计学意义，其余各组仅具有延长KPTT的趋势，统计无显著性差异。
2 讨论
有报道GPs对血小板聚集及血栓形成具有抑制作用[1]，实验也证实了此作用，并且GPs对以高右为模型的小鼠耳廓微循环也有影响[3]，本文在以高右造成动物血液的高粘、高聚而形成血栓模型的基础上，观察了GPs对体内外动脉血栓的形成及其凝血功能，从结果可知，GPs对体内外血栓形成具有较强的抑制作用，同时对大鼠的凝血功能也具有抑制作用。
, 百拇医药
血栓的形成是一复杂的过程，影响的因素也较多，文中GPs对体外血栓的重量、长度，体内血栓的形成时间、凝血时间、PT均具有较强的抑制作用，但对KPTT影响较弱，其原因可能是白陶土质量的差异，活化性能降低所致。
*陕西省科委资助项目，批准号96K12-G11
参考文献
1 李刚，张莉，李长龄等.绞股蓝总甙对血小板聚集和血栓形成的影响.中草药，1997，28(3)∶163
2 张小丽，冯英菊，谢人明等.绞股蓝总甙抑制家兔血小板聚集的实验研究.陕西中医药研究，1998，2(4)∶34
3 张小丽，朱自平.绞股蓝总甙对小鼠微循环障碍的改善作用.中国药业，1999，8(5)∶19, 百拇医药
单位：陕西省中医药研究院药理室 西安 710003
关键词：绞股蓝总皂苷；高分子右旋糖苷；血栓；凝血功能
华西药学杂志990512 提要 以静脉注射高分子右旋糖苷(higher molecular weight dextran,HMWD)造模，使实验动物的体内外血栓形成时间延长，凝血功能发生障碍。绞股蓝总皂苷(gypenosides,GPs)对以HMWD所致的血栓形成时间缩短具有较强的对抗作用，对HMWD引起的凝血时间及凝血酶原时间(PT)的缩短亦具有较强对抗作用，对白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)缩短有一定的延长作用，但无统计学意义。
INFLUENCE OF GYPENOSIDES ON THROMBUS AND
, http://www.100md.com
COAGULATION FUNCTION IN VIVO AND IN VITRO
Zhang Xiaoli Liu Zhen Zhu Ziping Yang Puzhao Xie Renming
(Department of Pharmacology, Shanxi Academy of Traditional Chinese Medicine Xi'an 71003)
ABSTRACT A model was established by intravenous injection of higher molecular weight dextran (HMWD), which exhibited extended thrombus development process and malfunctioned coagulation in vivo and in vitro. The results showed that, with the model animals, gypenosides (GPs) significantly reduced the length, fresh and dry weight of thrombus in vitro and shortened thrombosis time, lengthened coagulation time in vivo and prothrombin time in vitro, and significantly increased kaolin part thromboplastin time (KPTT).
, 百拇医药
Key Words Gypenosides Higher molecular weight dextran Thrombus Coagulation function
绞股蓝[Gynistemma pentaphyllum Hum(Thunb.)Makino]为葫芦科绞股蓝属植物，已证实其含有人参皂苷以及多种人体所需的微量元素，具有多种药理活性。临床上观察其降脂作用的同时，还注意到其对血液流变学的异常有改善作用。为了进一步探索此作用，实验观察了绞股蓝总苷对家兔的体外血栓形成、大鼠的体内血栓形成及凝血功能的作用。
1 材料和方法
1.1 动物、药品、试剂与仪器
SD大鼠(陕西省中医药研究院实验动物中心，合格证号：医动证字第08-24号)，♀
各半，220～260 g；大耳白家兔2.0～2.5 kg(陕西省中医研究院动物中心)。绞股蓝总皂苷(含量大于98%，西安神农生化研究所)。白陶土(上海新成精细化工有限公司)。凝血酶原时间测定试剂(上海荣盛生物技术有限公司)；高分子右旋糖苷(高右，分子量25万～30万，天津市生化制品厂)；盐酸川芎嗪注射液(常州制药厂)。SA-B型体外血栓形成血小板粘附二用仪(国营江西省新元技术开发公司)；BT-87-2型实验性体内血栓形成测定仪(包头医学院心血管研究室)。, 百拇医药
1.2 方法与结果
1.2.1 体外血栓形成的测定 取家兔69只，随机按表1分为6组，除川芎嗪组外，GPs组和水对照组ig 7 d，每天1次。GPs组在给药至第6、7天，由家兔耳缘iv 10%高右生理盐水5 ml/kg两次，对照组iv生理盐水，第7天ig 30 min后，除水对照组给生理盐水外，其余各组iv高右生理盐水，15 min后由颈总动脉插管放血测体外血栓。川芎嗪在放血前一天及当天ip 60 mg/kg，10 min后耳缘iv高右生理盐水5 ml/kg，处死当天iv高右15 min后取动脉血测体外血栓的湿重，干重及长度。各组测量值以
±s表示，进行组间t检验(表1)。表1 绞股蓝总皂苷对家兔体外血栓形成的影响(
±s), 百拇医药
Table 1 Effects of GPs on thrombus of rabbits in vitro Groups
No.
rabbits
Doses
(mg/kg)
Thrombus
length(mm)
fresh weight(mg)
dry weight(mg)
Control
12
, http://www.100md.com
43.0±26.7*
86.1±59.0*
32.2±21.1*
HMWD
12
500
78.3±49.3
179.8±128.2
85.9±75.5
GPs
11
, http://www.100md.com 50
45.0±30.9
89.1±68.6*
41.8±35.8
GPs
11
100
18.6±19.7***
41.5±37.6**
17.8±18.3**
GPs
, 百拇医药
12
200
28.1±24.5**
43.6±44.4**
22.7±21.0*
Ligustrazine
11
60
19.7±15.0***
48.8±42.8**
21.8±18.8**
, http://www.100md.com
T-test of significance in groups, compared with HMWD *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
由表1可见，绞股蓝总苷的三个剂量组对以高右为模型的血栓形成均具有抑制作用，GPs 100 mg/kg及200 mg/kg的作用较强，几乎与川芎嗪相当。
1.2.2 GPs对体内血栓形成及凝血功能的影响 取大鼠64只，按表2分为6组，除川芎嗪组外其余5组连续ig 7 d，末次给药后30 min用10%乌拉坦麻醉，舌下iv 10%高右生理盐水5 ml/kg，水对照组iv生理盐水。川芎嗪组ip 60 mg/kg后，10 min行乌拉坦麻醉，舌下iv 10%高右生理盐水5 ml/kg。各组在iv高右或生理盐水10 min后切开颈皮肤，分离左侧颈总动脉，将实验性体内血栓形成测定仪的刺激电极和温控探头钩于颈总动脉，用2.0 mA直流电刺激300 s，温度传感器监测血管表面温度变化。当动脉内血栓形成堵塞血流，血管远端的温度突降时，仪器报警，并自动记录时间。刺激突降所需时间即为血栓形成时间。然后右颈总动脉插管取血，测定每只大鼠的凝血时间并制备血浆，分别用兔脑粉法测凝血酶原时间(PT)及用白陶土法测定大鼠的部分凝血活酶时间(KPTT)，血栓形成超过1 000 s者按1 000 s计。用
±s表示各组数据，组间t检验判断其显著性(表2)。, http://www.100md.com
表2 绞股蓝总皂苷对大鼠体内血栓形成及凝血功能的影响(
±s)Table 2 Effects of GPs on thrombus and coagulation function of rats in vivo Groups
rats
No.
Doses
(mg/kg)
Thrombus
time
(s)
, 百拇医药
Thrombosis
time
(s)
PT
(s)
KPTT
(s)
Control
12
864.0±159.0***
68.3±49.3***
20.2±5.3*
, 百拇医药
75.5±20.5
HMWD
12
500
635.0±98.6
26.5±22.4
15.7±4.4
59.0±20.8
GPs
10
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852.0±183.2**
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55.8±9.3**
18.1±1.8
62.7±4.7
GPs
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20.2±4.1*
70.8±11.5
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10
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83.9±34.2***
20.7±2.8*
74.2±6.4**
Ligustrazine
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865.5±127.9***
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, 百拇医药
25.9±15.7
63.2±9.7
T-test of significance in groups, compared with HMWD * P<0.05,** P<0.01,*** P<0.001
由表2可知，高右模型组与对照组比较，血栓形成时间、凝血时间、PT均显著缩短。造模后，GPs三个剂量及川芎嗪组与模型组比较各项指标均有显著性差异。GPs大剂量与模型组比较，KPTT有统计学意义，其余各组仅具有延长KPTT的趋势，统计无显著性差异。
2 讨论
有报道GPs对血小板聚集及血栓形成具有抑制作用[1]，实验也证实了此作用，并且GPs对以高右为模型的小鼠耳廓微循环也有影响[3]，本文在以高右造成动物血液的高粘、高聚而形成血栓模型的基础上，观察了GPs对体内外动脉血栓的形成及其凝血功能，从结果可知，GPs对体内外血栓形成具有较强的抑制作用，同时对大鼠的凝血功能也具有抑制作用。
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血栓的形成是一复杂的过程，影响的因素也较多，文中GPs对体外血栓的重量、长度，体内血栓的形成时间、凝血时间、PT均具有较强的抑制作用，但对KPTT影响较弱，其原因可能是白陶土质量的差异，活化性能降低所致。
*陕西省科委资助项目，批准号96K12-G11
参考文献
1 李刚，张莉，李长龄等.绞股蓝总甙对血小板聚集和血栓形成的影响.中草药，1997，28(3)∶163
2 张小丽，冯英菊，谢人明等.绞股蓝总甙抑制家兔血小板聚集的实验研究.陕西中医药研究，1998，2(4)∶34
3 张小丽，朱自平.绞股蓝总甙对小鼠微循环障碍的改善作用.中国药业，1999，8(5)∶19, 百拇医药