T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠淋巴细胞亚群的影响
作者：闫彩风 张志利 何国芬
单位：闫彩风(山西医科大学第一医院 030001)；张志利(山西医科大学第一医院 030001)；何国芬(山西医科大学第一医院 030001)
关键词：T细胞接种；NOD鼠；环磷酰胺
山西医药杂志000415 【摘要】目的 探讨T细胞接种(TCV)对1型糖尿病预防作用的机制。方法 4周龄未发病的雌性NOD鼠用18周龄新近发病的NOD鼠脾细胞制得的T细胞疫苗接种，检测TCV对环磷酰胺诱导的NOD鼠淋巴细胞亚群的变化情况。结果 TCV可以诱导宿主脾脏CD8+T细胞百分比升高、CD4+/CD8+比值和IL-2R+细胞下降，以及胸腺CD4+、CD8+单阳性细胞百分比升高。结论 TCV可以诱导宿主产生自身免疫低反应性，这种作用可能与宿主脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的变化有关。
, 百拇医药
Effects of T cell vaccination on cyclophosphamide induced diabetes in NOD mice
Yan Caifeng Zhang Zhili He Guofen
(The First Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan,030001,China)
【Abstract】Objective To study the prophylactic effects of T cell vaccination (TCV) on type 1 diabetes.Methods Four-week-old nondiabetic female NOD mice were vaccinated intraperitoneally with the attenuated,activated T lymphocytes isolated from the spleen of 18-week-old newly diadetic NOD mice.Measuring the T lymphocyte subset changes in spleen and thymus after TCV.Result TCV may induce the rising of percentage of CD8+ T lymphocyte subset in spleen and CD4+ CD8+ simple-positive T lymphocyte in thymus,may induce the decreasing of percentage of IL-2R+ T lymphocyte and the decreasing of CD4+/CD8+ rate in spleen.Conclusion TCV may decrease the autoimmune reactivity in host,that can be related with thechanges of T lymphocytes subset in spleen and thymus.
, 百拇医药
【Key words】T cell vaccination; NOD mice; Cyclophosphamide
T细胞接种(T cell vaccination,TCV)即将病理性自身反应性T细胞经体外活化增生，并用物理或化学方法灭活，使其失去致病性而保留免疫原性，并用灭活的自身反应性T细胞作为疫苗接种，诱导机体免疫调节反应，以拮抗那些病理性自身反应性T细胞的致病作用[1]。
1型糖尿病是一种T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病，活化的β细胞特异性自身反应性T细胞对胰岛β细胞的攻击是其发病的主要原因。本课题通过对人类1型糖尿病的动物模型NOD鼠(nonobese diabetic mice)[2]进行T细胞接种，探讨T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠糖尿病[3]的预防作用的机制。以期对人类1型糖尿病高危人群进行一级预防提供科学的实验依据。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 实验动物：雌性NOD小鼠，由澳大利亚WEHI医学研究中心馈赠，4～18周龄，其中18周龄NOD鼠为初发糖尿病鼠，用于T细胞疫苗的制备；6周龄NOD鼠32只，按每组8只随机分组。所有动物均在无病理条件下饲养，自由进食进水，每周测定一次非空腹血糖(小鼠尾静脉剪尾取血，德国宝灵曼血糖仪测定血糖值)，连续两次血糖浓度大于12 mmol/L，诊断为糖尿病。8个月时，自发性糖尿病的发生率雌鼠为50%～60%，雄鼠为10%。
1.2 TCV制备及动物免疫：18周龄新近发病的雌性NOD鼠，断颈处死，无菌取脾，脾脏组织在无菌条件下制备单细胞悬液，用DMEM培养液(每1 000 mL含DMEM 10 g，L-谷氨酰胺0.30 g，青霉素、链霉素各10万U，用7%NaHCO3调pH至7.2)调细胞浓度至(1～2)×109/L，加ConA(Sigma公司产品)2.5 mg/L，IL-2(上海生化所生产)5 μ/mL，混匀后放入100 mL培养瓶中，10 mL/瓶，置5%CO2，37 ℃孵箱中培养48 h后收集细胞[4]。用0.4%台盼蓝测定细胞活率，细胞活率大于90%时证实为活细胞。以0.3%的戊二醛处理细胞15～20 min，沉淀细胞以pH为7.2 PBS洗涤3次后调整细胞数到所需浓度。
, 百拇医药
将实验动物随机分作4组，每组8只小鼠，均为4周龄未发病的雌性NOD鼠，处理前用300 mg/kg环磷酰胺(CP)作一次大剂量腹腔注射，环磷酰胺在注射前用生理盐水临时配制[3]。
Ⅰ组用18周龄新近发病的NOD鼠脾细胞制得的TCV免疫，以每只2×107/0.2 mL腹腔注射免疫动物，每周免疫1次，共3次，同时Ⅱ组以PBS 0.2 mL腹腔注射作为对照[1]。Ⅲ组及Ⅳ组分别用于检测CP作用前及作用后2周淋巴细胞亚群的变化情况。
1.3 淋巴细胞亚群的测定：将待测小鼠断颈处死，取下脾脏、胸腺，用磷酸缓冲液(PBS pH=7.2含0.5%胎牛血清)制得单细胞悬液，用细胞计数器计细胞总数。将制得的单细胞悬液先用PBS漂洗2次，将大约100万个细胞放入2 mL试管中。小鼠脾细胞与FITC直接荧光标记的大鼠抗小鼠CD3、CD4、CD8、CD25单克隆抗体(Sigma公司产品)温育30～40 min，胸腺细胞用FITC/PE直接荧光标记的大鼠抗小鼠CD4、CD8单克隆抗体(Sigma公司产品)温育30～40 min，进行双抗双标染色。标记好的细胞用PBS再洗2次，立即用流式细胞仪(FACSC-2，BECTON-DICKISON)测定，每份标本一般观察1万个细胞，结果分析时设置窗口去除死细胞与非淋巴细胞。
, 百拇医药
1.4 统计学方法：结果采用
±s表示，根据资料性质进行两个样本间均数t检验。
2 结 果
2.1 T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响：见表1。由表1可见在腹腔注射CP后2周，CD3+、CD4+和CD8+细胞百分比均下降，但以CD8+细胞下降的幅度较大，CP作用后8周，也即本实验结束时，作为对照组，其CD3+、CD4+、CD8+细胞均有不同程度恢复，TCV免疫后，处理组CD4+T细胞百分比与对照组相比，差异无显著性(P>0.05)，而TCV免疫后CD8+T细胞百分比有所升高(P<0.05)，CD4+/CD8+比值，处理组较对照组降低(P<0.05)，脾脏IL-2R+细胞百分比与对照组相比有所下降(P<0.05)。
, 百拇医药
表1 T细胞接种对脾脏淋巴细胞亚群的影响(±s) 分组
CD3+
CD4+
CD8+
CD4+/CD8+
IL-2R+
Ⅰ组
54.02±1.021)
27.89±1.25
, 百拇医药
26.05±1.381)
1.08±0.181)
0.24±0.201)
Ⅱ组
39.22±1.13
28.39±1.15
11.21±1.18
2.61±0.19
1.21±0.34
Ⅲ组
35.3±1.21
, 百拇医药
26.22±1.43
8.60±1.41
2.90±0.24
0.58±0.38
Ⅳ组
44.5±1.31
30.89±1.24
14.23±1.25
2.11±0.16
0.83±0.36
1) Ⅰ组：处理组；Ⅱ组：CP作用后8周，也即对照组；Ⅲ组：CP作用后2周；Ⅳ组：CP作用前。
, 百拇医药
2.2 T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响：NOD鼠胸腺细胞经FITC和PE直接荧光标记的大鼠抗小鼠CD4、CD8单克隆抗体双抗双标染色，结果见表2，在CP作用后2周，胸腺淋巴细胞亚群的变化主要为CD4+ CD8+双阳性细胞百分比的显著下降，从而使CD4+ CD8-和CD4- CD8+单阳性细胞百分比较CP注射前有所升高。CP作用后8周，也即对照组，淋巴细胞亚群百分比均有回升。经TC免疫后，CD4+ CD8-单阳性细胞和CD4+ CD8+双阳性细胞百分比与对照组相比差异无显著性(P>0.05)，而CD4- CD8+单阳性细胞百分比较对照组有所升高(P<0.05)。
表2 NOD鼠胸腺细胞双抗双标染色结果(±s) 组别
, http://www.100md.com
CD4+CD8-
CD4-CD8+
CD4+CD8+
CD4-CD8-
Ⅰ组
13.89±1.08
13.90±1.161)
70.25±1.58
2.58±0.64
Ⅱ组
, 百拇医药
14.22±1.45
6.03±1.58
70.72±1.41
8.81±0.12
Ⅲ组
16.53±1.18
5.38±1.32
58.41±1.58
19.61±1.23
Ⅳ组
10.21±1.50
4.12±1.48
, 百拇医药
83.42±1.20
19.61±1.23
1) 与Ⅱ组比较P<0.05。
3 讨 论
那些具有自身反应作用的T细胞并没有在胸腺发育过程中被完全排除，而是有少部分被选择性保留下来，分化成熟，分布在外周血及淋巴组织中，成为机体正常T细胞库(T cell repertoire)的一部分[5]，这些进入外周循环的自身反应性T细胞受体内克隆型调节网络的调控，处于功能灭活状态[6]。
只有在某种特定条件下，一种或几种特异性自身反应T细胞克隆被活化增生，同时伴有功能性调节网络的失衡时，该活化的自身反应性T细胞才能聚集于靶器官，形成自身免疫病，因而活化的自身反应性T细胞是T细胞介导自身免疫病的病原[5]。
, 百拇医药
T细胞接种的概念是基于克隆型调节网络而提出的。疫苗T细胞通过上调机体的克隆型调节网络，抑制和清除相应的自身反应性T细胞[7]，从而特异性地预防和治疗自身免疫病。
在本实验中，我们观察到T细胞接种诱导NOD鼠CD8+T细胞亚群百分比升高，它可能是两种T细胞的总和：①CD8-细胞毒性T细胞。抗克隆型细胞毒型T细胞反应是T细胞接种后出现的主要免疫应答[8]，它能消除周围循环中的β抗原特异性自身反应性T细胞。②CD8+抑制性T细胞，抑制由T细胞介导的β细胞的自身免疫损伤。大量抗克隆型T细胞的存在可诱导T抑制细胞的生成，从而对免疫应答起抑制作用[9]，其他的研究也表明[10]，TCV免疫小鼠脾细胞在ConA刺激的淋转反应和MLR中均表现明显的抑制活性，提示体内抑制细胞的存在。
自身反应性T细胞克隆在胸腺的发育过程中，通过克隆排除而对自身抗原产生耐受，Fowlkes等的研究表明，自身反应性T细胞克隆排除是发生在CD4+ CD8+双阳性阶段。在实验结束时，我们发现，经TCV免疫后，处理组CD4+ CD8+双阳性细胞与对照组相比差异无显著性，从而表明，NOD鼠经TCV免疫，其糖尿病发病率下降，发病时间延迟，并不是通过诱导自身反应性T细胞在胸腺内的CD4+ CD8+双阳性阶段发生细胞凋亡而实现的。
, http://www.100md.com
1型糖尿病发病的具体机制还未阐明，但是活化的自身反应性T细胞对胰岛β细胞的攻击，是其发病的主要原因。T细胞接种，上调了机体的克隆型调节网络，恢复了效应细胞和调节细胞间的平衡状态，诱导宿主产生免疫低反应性，这种作用可能与T细胞接种后宿主脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的变化有关。
基金项目：山西省归国人员基金资助项目(95-55)
作者简介：闫彩风，女，1970年2月生，医师，山西医科大学第一医院，030001
参考文献
1，Zhang JW,Raus J.T-cell vaccination in autoimmune disease:from laboratory to clinic.Human Immunol,1993,15(2)：87-92
2，Su-Sumu M,Kikuko K,Yoshihiro M,et al.Breeding of a non-obese,diabetic strain of mice.Exp Anim,1980,15(1)：1-5
, 百拇医药
3，Zhili Z,Harry MG,Thomas EM.The effect of cyclophosphamide treatment on lymphocyte subsets in the nonobese diabetic mouse:a comparison of various lymphoid organs.Autoimmunity,1993,15(1):1-4
4，陈永良，何球藻.T细胞疫苗诱导同种移植物存活期延长.中国免疫学杂志，1997，13：40-43
5，Zhang J.Multiple sclerosis:perspectives on autoimmune pathology and perspective for therapy.In:Appel S,ed.Current Neurology.Chicago:Mosby-Year Book,1995.115-155
, 百拇医药
6，Cohen IR.Natural Id-anti-Id network and the immunological homunculus,In:Atlan H,Cohen IR Theories of immune Networks.Berlin:Springer Verlag,1989.6
7，Lider O,Rerhef T,Baraud E,et al.Anti-idiotypic network induged by T cell vaccination against experimemtal auto immune encephalomyelitis.Science,1988,239:181-185
8，Zhang J,Medear R,Stinissen P,et al.MHC restricted clonotypic depletion of human myelin basic protein-reactive T cell by T cell vaccination.Science,1993,261:1451-1457
9，毕受华，龚非力.医学免疫学.北京：人民军医出版社，1995.127
10，陈永良，何球藻.活化脾细胞免疫诱导同系小鼠低反应性——抑制细胞作用的分析，上海免疫学杂志，1993，13(2)：134-135
收稿日期：1999-05-15, http://www.100md.com
单位：闫彩风(山西医科大学第一医院 030001)；张志利(山西医科大学第一医院 030001)；何国芬(山西医科大学第一医院 030001)
关键词：T细胞接种；NOD鼠；环磷酰胺
山西医药杂志000415 【摘要】目的 探讨T细胞接种(TCV)对1型糖尿病预防作用的机制。方法 4周龄未发病的雌性NOD鼠用18周龄新近发病的NOD鼠脾细胞制得的T细胞疫苗接种，检测TCV对环磷酰胺诱导的NOD鼠淋巴细胞亚群的变化情况。结果 TCV可以诱导宿主脾脏CD8+T细胞百分比升高、CD4+/CD8+比值和IL-2R+细胞下降，以及胸腺CD4+、CD8+单阳性细胞百分比升高。结论 TCV可以诱导宿主产生自身免疫低反应性，这种作用可能与宿主脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的变化有关。
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Effects of T cell vaccination on cyclophosphamide induced diabetes in NOD mice
Yan Caifeng Zhang Zhili He Guofen
(The First Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan,030001,China)
【Abstract】Objective To study the prophylactic effects of T cell vaccination (TCV) on type 1 diabetes.Methods Four-week-old nondiabetic female NOD mice were vaccinated intraperitoneally with the attenuated,activated T lymphocytes isolated from the spleen of 18-week-old newly diadetic NOD mice.Measuring the T lymphocyte subset changes in spleen and thymus after TCV.Result TCV may induce the rising of percentage of CD8+ T lymphocyte subset in spleen and CD4+ CD8+ simple-positive T lymphocyte in thymus,may induce the decreasing of percentage of IL-2R+ T lymphocyte and the decreasing of CD4+/CD8+ rate in spleen.Conclusion TCV may decrease the autoimmune reactivity in host,that can be related with thechanges of T lymphocytes subset in spleen and thymus.
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【Key words】T cell vaccination; NOD mice; Cyclophosphamide
T细胞接种(T cell vaccination,TCV)即将病理性自身反应性T细胞经体外活化增生，并用物理或化学方法灭活，使其失去致病性而保留免疫原性，并用灭活的自身反应性T细胞作为疫苗接种，诱导机体免疫调节反应，以拮抗那些病理性自身反应性T细胞的致病作用[1]。
1型糖尿病是一种T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病，活化的β细胞特异性自身反应性T细胞对胰岛β细胞的攻击是其发病的主要原因。本课题通过对人类1型糖尿病的动物模型NOD鼠(nonobese diabetic mice)[2]进行T细胞接种，探讨T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠糖尿病[3]的预防作用的机制。以期对人类1型糖尿病高危人群进行一级预防提供科学的实验依据。
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1 材料与方法
1.1 实验动物：雌性NOD小鼠，由澳大利亚WEHI医学研究中心馈赠，4～18周龄，其中18周龄NOD鼠为初发糖尿病鼠，用于T细胞疫苗的制备；6周龄NOD鼠32只，按每组8只随机分组。所有动物均在无病理条件下饲养，自由进食进水，每周测定一次非空腹血糖(小鼠尾静脉剪尾取血，德国宝灵曼血糖仪测定血糖值)，连续两次血糖浓度大于12 mmol/L，诊断为糖尿病。8个月时，自发性糖尿病的发生率雌鼠为50%～60%，雄鼠为10%。
1.2 TCV制备及动物免疫：18周龄新近发病的雌性NOD鼠，断颈处死，无菌取脾，脾脏组织在无菌条件下制备单细胞悬液，用DMEM培养液(每1 000 mL含DMEM 10 g，L-谷氨酰胺0.30 g，青霉素、链霉素各10万U，用7%NaHCO3调pH至7.2)调细胞浓度至(1～2)×109/L，加ConA(Sigma公司产品)2.5 mg/L，IL-2(上海生化所生产)5 μ/mL，混匀后放入100 mL培养瓶中，10 mL/瓶，置5%CO2，37 ℃孵箱中培养48 h后收集细胞[4]。用0.4%台盼蓝测定细胞活率，细胞活率大于90%时证实为活细胞。以0.3%的戊二醛处理细胞15～20 min，沉淀细胞以pH为7.2 PBS洗涤3次后调整细胞数到所需浓度。
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将实验动物随机分作4组，每组8只小鼠，均为4周龄未发病的雌性NOD鼠，处理前用300 mg/kg环磷酰胺(CP)作一次大剂量腹腔注射，环磷酰胺在注射前用生理盐水临时配制[3]。
Ⅰ组用18周龄新近发病的NOD鼠脾细胞制得的TCV免疫，以每只2×107/0.2 mL腹腔注射免疫动物，每周免疫1次，共3次，同时Ⅱ组以PBS 0.2 mL腹腔注射作为对照[1]。Ⅲ组及Ⅳ组分别用于检测CP作用前及作用后2周淋巴细胞亚群的变化情况。
1.3 淋巴细胞亚群的测定：将待测小鼠断颈处死，取下脾脏、胸腺，用磷酸缓冲液(PBS pH=7.2含0.5%胎牛血清)制得单细胞悬液，用细胞计数器计细胞总数。将制得的单细胞悬液先用PBS漂洗2次，将大约100万个细胞放入2 mL试管中。小鼠脾细胞与FITC直接荧光标记的大鼠抗小鼠CD3、CD4、CD8、CD25单克隆抗体(Sigma公司产品)温育30～40 min，胸腺细胞用FITC/PE直接荧光标记的大鼠抗小鼠CD4、CD8单克隆抗体(Sigma公司产品)温育30～40 min，进行双抗双标染色。标记好的细胞用PBS再洗2次，立即用流式细胞仪(FACSC-2，BECTON-DICKISON)测定，每份标本一般观察1万个细胞，结果分析时设置窗口去除死细胞与非淋巴细胞。
, 百拇医药
1.4 统计学方法：结果采用
±s表示，根据资料性质进行两个样本间均数t检验。2 结 果
2.1 T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响：见表1。由表1可见在腹腔注射CP后2周，CD3+、CD4+和CD8+细胞百分比均下降，但以CD8+细胞下降的幅度较大，CP作用后8周，也即本实验结束时，作为对照组，其CD3+、CD4+、CD8+细胞均有不同程度恢复，TCV免疫后，处理组CD4+T细胞百分比与对照组相比，差异无显著性(P>0.05)，而TCV免疫后CD8+T细胞百分比有所升高(P<0.05)，CD4+/CD8+比值，处理组较对照组降低(P<0.05)，脾脏IL-2R+细胞百分比与对照组相比有所下降(P<0.05)。
, 百拇医药
表1 T细胞接种对脾脏淋巴细胞亚群的影响(
±s) 分组CD3+
CD4+
CD8+
CD4+/CD8+
IL-2R+
Ⅰ组
54.02±1.021)
27.89±1.25
, 百拇医药
26.05±1.381)
1.08±0.181)
0.24±0.201)
Ⅱ组
39.22±1.13
28.39±1.15
11.21±1.18
2.61±0.19
1.21±0.34
Ⅲ组
35.3±1.21
, 百拇医药
26.22±1.43
8.60±1.41
2.90±0.24
0.58±0.38
Ⅳ组
44.5±1.31
30.89±1.24
14.23±1.25
2.11±0.16
0.83±0.36
1) Ⅰ组：处理组；Ⅱ组：CP作用后8周，也即对照组；Ⅲ组：CP作用后2周；Ⅳ组：CP作用前。
, 百拇医药
2.2 T细胞接种对环磷酰胺诱导的NOD鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响：NOD鼠胸腺细胞经FITC和PE直接荧光标记的大鼠抗小鼠CD4、CD8单克隆抗体双抗双标染色，结果见表2，在CP作用后2周，胸腺淋巴细胞亚群的变化主要为CD4+ CD8+双阳性细胞百分比的显著下降，从而使CD4+ CD8-和CD4- CD8+单阳性细胞百分比较CP注射前有所升高。CP作用后8周，也即对照组，淋巴细胞亚群百分比均有回升。经TC免疫后，CD4+ CD8-单阳性细胞和CD4+ CD8+双阳性细胞百分比与对照组相比差异无显著性(P>0.05)，而CD4- CD8+单阳性细胞百分比较对照组有所升高(P<0.05)。
表2 NOD鼠胸腺细胞双抗双标染色结果(
±s) 组别, http://www.100md.com
CD4+CD8-
CD4-CD8+
CD4+CD8+
CD4-CD8-
Ⅰ组
13.89±1.08
13.90±1.161)
70.25±1.58
2.58±0.64
Ⅱ组
, 百拇医药
14.22±1.45
6.03±1.58
70.72±1.41
8.81±0.12
Ⅲ组
16.53±1.18
5.38±1.32
58.41±1.58
19.61±1.23
Ⅳ组
10.21±1.50
4.12±1.48
, 百拇医药
83.42±1.20
19.61±1.23
1) 与Ⅱ组比较P<0.05。
3 讨 论
那些具有自身反应作用的T细胞并没有在胸腺发育过程中被完全排除，而是有少部分被选择性保留下来，分化成熟，分布在外周血及淋巴组织中，成为机体正常T细胞库(T cell repertoire)的一部分[5]，这些进入外周循环的自身反应性T细胞受体内克隆型调节网络的调控，处于功能灭活状态[6]。
只有在某种特定条件下，一种或几种特异性自身反应T细胞克隆被活化增生，同时伴有功能性调节网络的失衡时，该活化的自身反应性T细胞才能聚集于靶器官，形成自身免疫病，因而活化的自身反应性T细胞是T细胞介导自身免疫病的病原[5]。
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T细胞接种的概念是基于克隆型调节网络而提出的。疫苗T细胞通过上调机体的克隆型调节网络，抑制和清除相应的自身反应性T细胞[7]，从而特异性地预防和治疗自身免疫病。
在本实验中，我们观察到T细胞接种诱导NOD鼠CD8+T细胞亚群百分比升高，它可能是两种T细胞的总和：①CD8-细胞毒性T细胞。抗克隆型细胞毒型T细胞反应是T细胞接种后出现的主要免疫应答[8]，它能消除周围循环中的β抗原特异性自身反应性T细胞。②CD8+抑制性T细胞，抑制由T细胞介导的β细胞的自身免疫损伤。大量抗克隆型T细胞的存在可诱导T抑制细胞的生成，从而对免疫应答起抑制作用[9]，其他的研究也表明[10]，TCV免疫小鼠脾细胞在ConA刺激的淋转反应和MLR中均表现明显的抑制活性，提示体内抑制细胞的存在。
自身反应性T细胞克隆在胸腺的发育过程中，通过克隆排除而对自身抗原产生耐受，Fowlkes等的研究表明，自身反应性T细胞克隆排除是发生在CD4+ CD8+双阳性阶段。在实验结束时，我们发现，经TCV免疫后，处理组CD4+ CD8+双阳性细胞与对照组相比差异无显著性，从而表明，NOD鼠经TCV免疫，其糖尿病发病率下降，发病时间延迟，并不是通过诱导自身反应性T细胞在胸腺内的CD4+ CD8+双阳性阶段发生细胞凋亡而实现的。
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1型糖尿病发病的具体机制还未阐明，但是活化的自身反应性T细胞对胰岛β细胞的攻击，是其发病的主要原因。T细胞接种，上调了机体的克隆型调节网络，恢复了效应细胞和调节细胞间的平衡状态，诱导宿主产生免疫低反应性，这种作用可能与T细胞接种后宿主脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的变化有关。
基金项目：山西省归国人员基金资助项目(95-55)
作者简介：闫彩风，女，1970年2月生，医师，山西医科大学第一医院，030001
参考文献
1，Zhang JW,Raus J.T-cell vaccination in autoimmune disease:from laboratory to clinic.Human Immunol,1993,15(2)：87-92
2，Su-Sumu M,Kikuko K,Yoshihiro M,et al.Breeding of a non-obese,diabetic strain of mice.Exp Anim,1980,15(1)：1-5
, 百拇医药
3，Zhili Z,Harry MG,Thomas EM.The effect of cyclophosphamide treatment on lymphocyte subsets in the nonobese diabetic mouse:a comparison of various lymphoid organs.Autoimmunity,1993,15(1):1-4
4，陈永良，何球藻.T细胞疫苗诱导同种移植物存活期延长.中国免疫学杂志，1997，13：40-43
5，Zhang J.Multiple sclerosis:perspectives on autoimmune pathology and perspective for therapy.In:Appel S,ed.Current Neurology.Chicago:Mosby-Year Book,1995.115-155
, 百拇医药
6，Cohen IR.Natural Id-anti-Id network and the immunological homunculus,In:Atlan H,Cohen IR Theories of immune Networks.Berlin:Springer Verlag,1989.6
7，Lider O,Rerhef T,Baraud E,et al.Anti-idiotypic network induged by T cell vaccination against experimemtal auto immune encephalomyelitis.Science,1988,239:181-185
8，Zhang J,Medear R,Stinissen P,et al.MHC restricted clonotypic depletion of human myelin basic protein-reactive T cell by T cell vaccination.Science,1993,261:1451-1457
9，毕受华，龚非力.医学免疫学.北京：人民军医出版社，1995.127
10，陈永良，何球藻.活化脾细胞免疫诱导同系小鼠低反应性——抑制细胞作用的分析，上海免疫学杂志，1993，13(2)：134-135
收稿日期：1999-05-15, http://www.100md.com