肿瘤性胸腹水细胞染色体畸变的观察
作者：陈志松 叶家鹤
单位：陈志松 叶家鹤(325200 浙江省瑞安市人民医院检验室)
关键词：
肿瘤性胸腹水细胞染色体畸变的观察 胸腹水中检出肿瘤细胞是一个可靠的诊断手段，但阳性率只有28%～60%[1]。由于积液是一种良好培养基，良性积液中一定数量的间皮细胞和组织细胞在其中增殖，同时发生退化变性，会引起形态上改变，胞体增大，核肿胀，染色质变粗，有时与恶性细胞不易鉴别。我们观察了良性及恶性肿瘤胸腹水细胞染色体，对比两者的差异，总结其特点，以指导临床诊断。
1 病例
病例来源于1996年8月至1998年1月我院内(外)科住院患者。标本均为入院后第1、2次胸腹水，肿瘤患者尚未进行任何化疗或放疗。其确诊手段包括临床检查、胸腹水常规检验加细胞学检查、B超、CT及治疗后果或随防，部分有手术史。恶性肿瘤腹水为胃癌、肝癌或结肠癌腹腔转移(或术后转移)。恶性肿瘤胸水因未在本院手术，肿瘤性质未定。良性组均为结核性胸膜炎，仅1例为系统性红斑狼疮。恶性组30例(32例次)；良性组21例(25例次)。
, 百拇医药
2 检查方法
胸或腹水50ml加肝素。低速离心后留10ml残液，重新打匀后加秋水仙素，使终浓度达0.1μg/ml 37℃恒温3小时或1.0μg/ml恒温10分钟，常规制片、计数，选择部分作G显带。要求计数30个分裂相，若不足者，则观察尽可能多的分裂相，至少10个以上。镜下发现或疑有结构异常者摄影分析。
3 结果
3.1 良性组分裂相明显少于恶性组。良性组均数每例次14.7个，恶性组20.3个。由于本次实验常规定为计数30个，实际上恶性组可见分裂相更多。最多1例120个(该患者转上海同样确诊为肺癌)。
3.2 全部标本都可见到数目异常的分裂相。但两组间有显著差异；包括染色体众数及各种非整倍体出现的频率(表1，2)。
表1 染色体众数偏离或出现两个众数(%)
, 百拇医药
组别
例次数
2n
<2n
2n
>2n
<2n
>2n
2n
>2n
恶性组
32
7(21.9)
, 百拇医药
5(15.6)
13(40.6)
4(12.5)
2(6.25)
良性组
25
20(80)
2(8)
1(4)
0
0
表2 整倍体与非整倍体出现的频率(%)
, 百拇医药 组别
分裂相数
2n
CN<2n
2n
4n
8n
核碎裂
恶性组
650
115(17.7)
208(32)
177(27.2)
, http://www.100md.com
58(8.9)
10(1.6)
82(12.6)
良性组
377
230(61)
79(20.9)
47(12.5)
3(0.8)
0
18(4.8)
注：CN为染色体数目 3.3 除两组均可见染色体单臂断裂、无着丝点片段外，只有恶性组见到下列明显结构，畸变及分布异常；总计12例，占40%。诸如：染色体模糊零乱，浓淡、长短不一，作G带时显示胰蛋白酶消化不匀，个别染色体部分纵裂，部分染色体裂解为单体。另外巨大染色体、环形染色体、其他标记染色体等，有的分裂相呈现染色体分布环形多极化，分布成簇、成堆。
, 百拇医药
3.4 应用体腔积液染色体检查诊断恶性肿瘤的标准各家不一[1，2]。实验结果对照有关标准见表3。
表3 按各家诊断标准对照本实验结果的符合率(%)
细胞遗传学诊断标准
恶性组符合率(阳性率)
良性组符合率(假阳性率)
Dewald1976年提出[1]
28/32 (87.5)
9/25 (36)
Korsgaard 1979年提出[1]
, 百拇医药
7/32 (21.8)
0/25 ( 0 )
Watts 1983年提出[1]
22/32 (68.8)
3/25 (12)
黄勉等 1993年提出[2]
30/32 (93.8)
5/25 (20)
注：Dewald 标准：30个分裂期中至少有3个细胞是超二倍体或含有标记染色体；Korsgaard 标准：至少有15个以上分裂相含有超二倍体或15个假二倍体或5个以上含有标记染色体；Watts 标准：至少有5个以上细胞有超二倍体或3个以上细胞含有形态相同的标记染色体或5个以上细胞含有形态不同的标记染色体；黄勉氏评分法：见参考文献[2] 4 讨论
, 百拇医药
两组标本普遍易见染色体数目异常，说明不仅肿瘤细胞有核内遗传物质复制异常，良性细胞增殖过程中退化变性也有部分复制异常发生。但两组间异常的程度和特点有显著差异，包括量和质的差异。经整理分析后，我们认为下列几点有助于鉴别：(1)肿瘤的分裂相明显多，此可能与肿瘤细胞增殖快或凋亡少、分裂期延缓有关[3]。其中正二倍体比率明显少。(2)亚二倍体在鉴别诊断上意义较小，两组均有较多出现，且不能排除制片时分散过度。(3)超高倍体愈多可视为肿瘤细胞特征。(4)核碎裂两组均有出现，尚难用作鉴别，出现多时有助于肿瘤诊断。(5)个别染色体碎片或单臂断裂无助于鉴别。但如文中所述的明显结构畸变及分布特点有力地支持肿瘤诊断。(6)对照各家诊断标准，黄勉氏评分法效果最佳，阳性率高，假阳性相对低。如能密切注意结构畸变、分布特点，可靠性将明显提高。
参考文献
[1] 彭京敏.腹水细胞染色体检查在诊断恶性肿瘤中的应用.国外医学遗传学分册，1990，13(1)∶25.
[2] 黄勉，李守柔，崔满华，等.腹水细胞染色体检查诊断恶性肿瘤评分法.中华医学遗传学杂志，1993，10(5)∶296.
[3] 张之南，潘华珍.细胞凋亡与血液病.中华血液学杂志，1996，17(5)∶267.
(收稿：1998-06-23 修回：1998-08-04), http://www.100md.com
单位：陈志松 叶家鹤(325200 浙江省瑞安市人民医院检验室)
关键词：
肿瘤性胸腹水细胞染色体畸变的观察 胸腹水中检出肿瘤细胞是一个可靠的诊断手段，但阳性率只有28%～60%[1]。由于积液是一种良好培养基，良性积液中一定数量的间皮细胞和组织细胞在其中增殖，同时发生退化变性，会引起形态上改变，胞体增大，核肿胀，染色质变粗，有时与恶性细胞不易鉴别。我们观察了良性及恶性肿瘤胸腹水细胞染色体，对比两者的差异，总结其特点，以指导临床诊断。
1 病例
病例来源于1996年8月至1998年1月我院内(外)科住院患者。标本均为入院后第1、2次胸腹水，肿瘤患者尚未进行任何化疗或放疗。其确诊手段包括临床检查、胸腹水常规检验加细胞学检查、B超、CT及治疗后果或随防，部分有手术史。恶性肿瘤腹水为胃癌、肝癌或结肠癌腹腔转移(或术后转移)。恶性肿瘤胸水因未在本院手术，肿瘤性质未定。良性组均为结核性胸膜炎，仅1例为系统性红斑狼疮。恶性组30例(32例次)；良性组21例(25例次)。
, 百拇医药
2 检查方法
胸或腹水50ml加肝素。低速离心后留10ml残液，重新打匀后加秋水仙素，使终浓度达0.1μg/ml 37℃恒温3小时或1.0μg/ml恒温10分钟，常规制片、计数，选择部分作G显带。要求计数30个分裂相，若不足者，则观察尽可能多的分裂相，至少10个以上。镜下发现或疑有结构异常者摄影分析。
3 结果
3.1 良性组分裂相明显少于恶性组。良性组均数每例次14.7个，恶性组20.3个。由于本次实验常规定为计数30个，实际上恶性组可见分裂相更多。最多1例120个(该患者转上海同样确诊为肺癌)。
3.2 全部标本都可见到数目异常的分裂相。但两组间有显著差异；包括染色体众数及各种非整倍体出现的频率(表1，2)。
表1 染色体众数偏离或出现两个众数(%)
, 百拇医药
组别
例次数
2n
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恶性组
32
7(21.9)
, 百拇医药
5(15.6)
13(40.6)
4(12.5)
2(6.25)
良性组
25
20(80)
2(8)
1(4)
0
0
表2 整倍体与非整倍体出现的频率(%)
, 百拇医药 组别
分裂相数
2n
CN<2n
2n
4n
8n
核碎裂
恶性组
650
115(17.7)
208(32)
177(27.2)
, http://www.100md.com
58(8.9)
10(1.6)
82(12.6)
良性组
377
230(61)
79(20.9)
47(12.5)
3(0.8)
0
18(4.8)
注：CN为染色体数目 3.3 除两组均可见染色体单臂断裂、无着丝点片段外，只有恶性组见到下列明显结构，畸变及分布异常；总计12例，占40%。诸如：染色体模糊零乱，浓淡、长短不一，作G带时显示胰蛋白酶消化不匀，个别染色体部分纵裂，部分染色体裂解为单体。另外巨大染色体、环形染色体、其他标记染色体等，有的分裂相呈现染色体分布环形多极化，分布成簇、成堆。
, 百拇医药
3.4 应用体腔积液染色体检查诊断恶性肿瘤的标准各家不一[1，2]。实验结果对照有关标准见表3。
表3 按各家诊断标准对照本实验结果的符合率(%)
细胞遗传学诊断标准
恶性组符合率(阳性率)
良性组符合率(假阳性率)
Dewald1976年提出[1]
28/32 (87.5)
9/25 (36)
Korsgaard 1979年提出[1]
, 百拇医药
7/32 (21.8)
0/25 ( 0 )
Watts 1983年提出[1]
22/32 (68.8)
3/25 (12)
黄勉等 1993年提出[2]
30/32 (93.8)
5/25 (20)
注：Dewald 标准：30个分裂期中至少有3个细胞是超二倍体或含有标记染色体；Korsgaard 标准：至少有15个以上分裂相含有超二倍体或15个假二倍体或5个以上含有标记染色体；Watts 标准：至少有5个以上细胞有超二倍体或3个以上细胞含有形态相同的标记染色体或5个以上细胞含有形态不同的标记染色体；黄勉氏评分法：见参考文献[2] 4 讨论
, 百拇医药
两组标本普遍易见染色体数目异常，说明不仅肿瘤细胞有核内遗传物质复制异常，良性细胞增殖过程中退化变性也有部分复制异常发生。但两组间异常的程度和特点有显著差异，包括量和质的差异。经整理分析后，我们认为下列几点有助于鉴别：(1)肿瘤的分裂相明显多，此可能与肿瘤细胞增殖快或凋亡少、分裂期延缓有关[3]。其中正二倍体比率明显少。(2)亚二倍体在鉴别诊断上意义较小，两组均有较多出现，且不能排除制片时分散过度。(3)超高倍体愈多可视为肿瘤细胞特征。(4)核碎裂两组均有出现，尚难用作鉴别，出现多时有助于肿瘤诊断。(5)个别染色体碎片或单臂断裂无助于鉴别。但如文中所述的明显结构畸变及分布特点有力地支持肿瘤诊断。(6)对照各家诊断标准，黄勉氏评分法效果最佳，阳性率高，假阳性相对低。如能密切注意结构畸变、分布特点，可靠性将明显提高。
参考文献
[1] 彭京敏.腹水细胞染色体检查在诊断恶性肿瘤中的应用.国外医学遗传学分册，1990，13(1)∶25.
[2] 黄勉，李守柔，崔满华，等.腹水细胞染色体检查诊断恶性肿瘤评分法.中华医学遗传学杂志，1993，10(5)∶296.
[3] 张之南，潘华珍.细胞凋亡与血液病.中华血液学杂志，1996，17(5)∶267.
(收稿：1998-06-23 修回：1998-08-04), http://www.100md.com