湖北汉族人群对乙肝疫苗免疫应答的水平与HLA-I类分子多态性的相关研究
作者：涂正坤 吴雄文 刘 敏 姜晓丹 杨志章 吴 锋 龚非力 赵修竹
单位：同济医科大学免疫学教研室，武汉430030
关键词：人类白细胞抗原；乙肝疫苗；免疫应答
中国免疫学杂志990106 中国图书分类号 R392.11 R394.5 R311.144 R730.3
摘 要 目的：探讨人群对乙肝疫苗免疫应答与HLA遗传多态性的相关性。方法：对52名湖北汉族健康自愿者进行HBV血源疫苗标准全程接种，共3次(第0、1、6月)，末次接种后8 w用酶免疫法(EIA)检测血清抗HBs抗体水平：S/N≥2.1为应答者；S/N<2.1为无应答者。同时对受试者进行HLA-I类抗原多态性检测。结果：应答者42人(81.0%)，无应答者10人(19.0%)；无应答者与HLA-B39具有显著相关性，RR＝17.5，χ2＝5.22，P<0.05，而与HLA-B62呈负相关，χ2＝6.41，P<0.05。结论：在湖北汉族人群中，HLA-B39表型阳性个体对乙肝疫苗免疫应答水平明显低于其他个体，而HLA-B62表型阳性个体明显高于其他个体。
, 百拇医药
Association between the feature of the immune response to hepatitis B vaccine and HLA class I polymorphism in a Hubei population of the Han nationality
TU Zheng-Kun ，WU Xiong-Wen， LIU Min et al.
Department of Immunology,Tongji Medical University,Wuhan 430030
Abstract Objective:To study association between the feature of the immune response to hepatitis B vaccine and HLA genetic polymorphism on human.Methods:52 healthy volunteers of the Han nationality from Hubei province were subjected to a standard course of immunization with HBV plasma vaccine at month 0,1 and 6 successively. 8 weeks after the last immunization,serum level of anti-HBs antibody were assayed with EIA.Individuals with S/N≥2.1 are responders,and S/N<2.1 are nonresponders. Results:42(81.0%) of the 52 subjects were responders,10(19.0%) individuals were nonresponders.Unresponsiveness of the 10 individuals to hepatitis B vaccine were found to be positively associated with HLA-B39(RR＝17.5,χ2=5.22,P<0.05) and negatively associated with HLA-B62(χ2=6.41,P<0.05),as demonstrated by HLA-I antigen polymorphism analysis.Conclusion:The level of immune response to hepatitis B vaccine of individuals bearing HLA-B39 antigen was significantly lower than others,individuals bearing HLA-B62 antigen was significantly higher than others.
, 百拇医药
Key words HLA Hepatitis B vaccine Immune response
乙肝疫苗是取自慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者血液、通过灭活并纯化的乙肝表面抗原(HBsAg)，它的问世为乙型肝炎的预防提供了有力的武器，使乙型肝炎及其续发症(慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌等)得到了有效的控制。但并非所有接种乙肝疫苗者均能免遭HBV感染，人群对乙肝疫苗的免疫应答存在明显的个体差异，据此可将接种人群分为应答者和无应答者。影响个体对乙肝疫苗应答能力的因素包括年龄、性别、疫苗的品牌、是否吸烟、HLA型别等，其中HLA在人类对乙肝疫苗的免疫应答中起重要作用。研究无应答人群的免疫遗传学背景，将有助于进一步完善无应答人群的HBV预防对策，也有助于进一步阐明人类免疫应答基因(Ir gene)的生物学意义。本课题选择湖北汉族人群进行乙肝疫苗标准全程接种，观察其应答水平，并分析该组人群HLA-I类表型频率，以探讨无应答人群与HLA-I类抗原多态性的关联情况。
, 百拇医药 1 材料与方法
1.1 主要材料 HLA-I类分型血清板(澳大利亚皇家佩思医院临床免疫科Dawkins教授惠赠)可检出HLA-A抗原特异性11种，HLA-B抗原特异性25种；血源型加热灭活乙肝疫苗(卫生部武汉生物制品研究所)；抗-HBs(EIA)酶免疫法试剂盒(上海实业科华生物技术有限公司)；RPMI 1640(Gibco公司)。
1.2 实验对象及接种程序 选择湖北省鄂州市汀祖镇王边村52名健康自愿者进行乙肝疫苗标准全程接种(第0、1、6月肌肉注射)，受试者年龄在10～40岁之间，其中男性28名、女性24名。在全程接种后8 w采集外周静脉血标本。
1.3 方法
1.3.1 外周血单个核细胞的分离 取2.5 ml全血与等量RPMI 1640培养液混匀，小心加在5 ml淋巴细胞分离液上，1 600 r/min离心30 min，收集单个核细胞层，用RPMI 1640培养液洗2次，离心去上清，重新用20%FCS RPMI 1640培养液悬浮，调整细胞浓度为1×106个/mm3。
, 百拇医药
1.3.2 HLA-I类抗原分型 采用国际通用的微量淋巴细胞毒试验。简言之，在含有已知HLA-I类抗血清的反应板中加入外周血淋巴细胞，然后加入兔补体，充分作用后加入染料，在倒置相差显微镜下判断结果。阳性细胞着色且体积增大，表示待检淋巴细胞表面具有已知抗血清所针对的抗原；存活细胞不着色，透明而较小。
1.3.3 抗HBs抗体测定 取受试者血清，借助酶免疫法(EIA)检测抗HBs抗体水平。简言之，加入待测标本于包被HBsAg的反应板中，设抗HBs抗体阴性对照和阳性对照各2孔，空白对照1孔，然后加酶结合物，充分混匀，孵育37℃ 1 h，洗涤后加底物液，置37℃孵育15 min，然后加终止液。用酶联检测仪测定OD492nm值，按下列公式计算并判断结果S/N：
。
由于多种因素可能影响EIA检测结果，为避免实验操作而致的误差，对每份样本连续检测3次，取平均OD值判断结果。S/N≥2.1为应答者，S/N<2.1为无应答者。
, 百拇医药
1.4 统计处理 相对危险性(Relative risk,RR)按Woolf公式：RR=ad/bc。a为携带特定HLA型别的无应答者人数；d为不携带特定HLA型别的应答者人数；b为不携带特定HLA型别的无应答者人数；c为携带特定HLA型别的应答者人数。四格表卡方检验按公式：
。 如140，则采用校正公式：
2 结果
52名受试者HLA-I类分型结果和抗HBs抗体水平见表1。52例中无应答者为10名(19.0%)，应答者为42名(81.0%)。HLA-I类抗原型别与乙肝疫苗无应答的相关性见表2。10名无应答者中携带HLA-B39表型者为3人，其比例明显高于应答者(42人)中携带HLA-B39表型者(1人，χ2=5.22，P<0.05，RR=17.5)。42名应答者中携带HLA-B62表型者为14人，而10名无应答者中无一人携带HLA-B62(χ2=6.41，P<0.05)。此外，HLA-A2、A24、B16、B17、B40、B46等表型与乙肝疫苗免疫应答无明显关联。其他HLA型别由于在本实验中检出的频率较低，无统计学意义。
, 百拇医药
表1 湖北汉族人群52名个体HLA-I类分子多态性和抗HBs抗体水平
Tab.1 HLA class I phenotype and level of anti-HBs antibody in 52 individuals tested in this study Specimen ID
HLA-I phenotype
Level of anti-HbsAb
Specimen ID
HLA-I phenotype
Level of anti-HbsAb
A
, 百拇医药
B
OD
S/N
A
B
OD
S/N
D409
A1 A2
B5 B62
0.49
5.76
D4371)
, 百拇医药
A2 A10
B39
0.16
1.88
D4101)
A2
B12 B39
0.13
1.52
D438
A2
—
2.69
, http://www.100md.com
31.64
D411
A2
—
3.00
35.29
D439
A10
B35
3.32
39.05
D412
A25
, 百拇医药
B53
1.60
18.82
D4411)
A10
B40B17
0.13
1.52
D4131)
A2A24
B16B46
0.14
, 百拇医药
1.64
D442
A2A10
B40
1.37
16.11
D414
A2A10
B40B62
2.21
26.00
D443
A2A10
, 百拇医药
B46
0.19
2.23
D417
A2
B46B17
0.18
2.11
D444
A2A11
B62
0.28
3.29
, 百拇医药
D4181)
A2
B16B13
0.09
1.05
D446
A11A2
B12B5
2.47
29.05
00D419
A10A24
, http://www.100md.com B62
2.73
32.11
D447
A2A11
B5B46
1.78
20.94
D420
A2
—
2.36
27.76
, 百拇医药
D548
A2
B5
2.84
33.41
D421
—
B5
3.32
39.05
D549
A2
B62
, 百拇医药
1.07
12.58
D4221)
A33
B17
0.15
1.76
D550
A2
B16B27
0.78
9.17
D423
, http://www.100md.com
A10
—
0.44
5.17
D551
A2
B16B13
3.19
37.52
D424
A25
B7B14
1.21
, 百拇医药
14.23
D5521)
A9
B39B27
0.15
1.76
D425
A2
B46
0.19
2.23
D553
A2
, 百拇医药
B13B46
2.43
28.58
D426
A2A25
B62
0.33
3.88
D554
A2
B46
0.54
6.35
, 百拇医药
D427
A33A25
B46B17
1.22
14.35
D555
A2
B62
2.79
32.87
D428
A1A2
B46B62
, http://www.100md.com
0.42
4.94
D556
A2
B46
0.29
3.41
D429
A1A2
B7B62
0.78
9.17
D5571)
, http://www.100md.com
A11
B5B40
0.15
1.76
D430
A10
B40
1.46
17.17
D558
A24
B40B46
3.04
, http://www.100md.com
35.76
D431
A28
B35
3.32
39.05
D5591)
A2
B5
0.15
1.76
D4321)
, http://www.100md.com A24A25
B46
0.11
1.29
D560
A9
B40
0.20
2.35
D433
A2
B46
3.32
, 百拇医药
39.05
D561
A9A10
B62B40
0.32
3.76
D434
A2
B5B15
3.20
37.64
D561
A9A10
, 百拇医药
B62B40
0.32
3.76
D435
—
B35B12
2.19
25.76
D563
A2A33
B62
1.08
12.70
, 百拇医药
D436
A2
B62
2.58
30.35
D564
A2A33
B62
2.53
29.76
Note:1)Nonresponder,ie anti-HBs S/N<2.1.The reaction to the used HLA anti-sera is negative表2 乙肝疫苗应答者与无应答者HLA-I类表型频率的比较
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Tab.2 Comparison of HLA class I phenotype frequencies in responders and nonresponders to hepatitis B vaccine HLA-phenotype
Nonresponders
Responders
P
B39
3
1
<0.05
B62
0
, http://www.100md.com
14
<0.05
B16
2
2
N.s
B46
2
11
N.s
B17
2
2
N.s
, 百拇医药
B40
2
6
N.s
A2
5
25
N.s
A24
2
2
N.s
Note:N.s:not significant
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3 讨论
HLA复合体是位于人类第6号染色体短臂上的一组紧密连锁的基因群，其编码产物在抗原提呈和免疫调节中发挥重要作用；并且，HLA基因还控制人类对各种抗原的应答能力和对疾病的易感性。已证实，小鼠对HBsAg的免疫应答与H-2相关；H-2f和H-2s单体型表现为无应答；H-2b和H-2k为中度应答；而H-2d和H-2a为高应答[1，2]。HBsAg是最早发现的一种在人和小鼠的免疫应答中与MHC相关的抗原，虽然人和小鼠MHC的结构与功能有许多共同特点，然而与人类免疫应答相关的特异性MHC基因的定位，迄今尚无直接证据。其原因在于，人群为随机婚配群体，且HLA基因系统具有高度多态性。尽管如此，已有许多研究者报道，人类对乙肝疫苗的免疫应答与HLA相关。由于所研究的人群不同，各家所获得的结果不尽相同。
本课题对52名健康个体进行血源型乙肝疫苗标准全程接种，结果发现应答者为42人(81.0%)，无应答者为10人(19.0%)，无应答率介于白种人群(7.0%～15.0%)和日本人群(22.4%)之间[3，4]。此外，通过HLA多态性分析证实，无应答者与HLA-B39表型显著相关(RR＝17.5，P<0.05)；无应答与HLA-B62表型呈负相关(P<0.05)。本课题未观察到其他HLA-I类表型与乙肝疫苗免疫应答关联。在本实验中，人群对乙肝疫苗的免疫应答与年龄、性别无关。
, 百拇医药
在日本人群中，乙肝疫苗无应答者与HLA-Bw54、DR4、DRw53表型具有极强相关性，RR值分别为5.47、2.57和15.93[4]，但未发现HLA与HBsAg高应答存在关联[5]。在白种人群中，携带HLA-DR3、-DR7表型或携带扩展单体型HLA-B8-SC91-DR3、HLA-B44-Fe31-DR7的个体无应答率极高[6，7]；而HLA-DR1与HBsAg高应答相关[8]。上述结果与本课题所获结果不同，其原因可能是由于不同人群遗传背景存在差异，从而与HBsAg无应答关联的HLA表型亦不同。
涂正坤 现在广州市妇婴医院医学遗传研究所，广州510180
作者简介：涂正坤，男，33岁，免疫遗传学专业硕士生；
指导教师，龚非力，男，教授，博士生导师，主要从事分子免疫和免疫遗传学研究
, 百拇医药
4 参考文献
1 Milich D R,Leroux-Roels G G,Chisari I V.Genetic regulation of the immune response to the hepatitis B surface antigen (HBsAg) ，qualiative characteristic of the humoral immune response to the a，d and y determinates of HBsAg .J Immunol,1983;130:1395
2 Milich D R， Leroux-Roels G G,louie R E et al Genetic regulation of the immune response to the hepatitis B surface antigen(HBsAg)IV，distinct H-2-linked Ir gene control antibody response to different HBsAg determinates on the same molecule and map to the I-A and I-C subregions.J Exp Med,1984;159:41
, 百拇医药
3 Nowicki M J， Tong M J， Bohman R E. Alterations in the immune response in nonresponders to the hepatitis B vaccine. J Infect Dis,1985;152:1245
4 Watanabe H， Matsushita S， Nobuhiro K et al. Immunosuppressor gene on HLA-Bw54,DR4,DRw53 haplotype controls nonresponsiveness in humans to hepatitis B surface antigen via CD8+suppressor T cell. Human Immunol,1988;22:9
5 Hatae K,Kimara A,Okubo R et al. Genetic control of nonresponsiveness to hepatitis B vrius vaccine by an extended HLA haplotype.Eur J Immunol,1992;22:1899
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6 Walker H E,Szmuness W,Stevens C E et al.Genetics of anti-HBs responsiveness I HLA-DR7 and nonresponsiveness to hepatitis B vaccination.Transfusion,1981;21:601
7 Cooksley W G E,Hanson R G,Powell L W et al. Effects of dose and HLA statuson the response to hepatitis B vaccine in man. Hepatology,1985;5:1057
8 Alper C A,Kruskall.M S.Marcus-Bagley D et al. Genetic prediction of nonresponse to hepatitis B vaccine.N Engl J Med,1989;321:708
〔收稿1997-04-13 二次修回1998-05-28〕, 百拇医药
单位：同济医科大学免疫学教研室，武汉430030
关键词：人类白细胞抗原；乙肝疫苗；免疫应答
中国免疫学杂志990106 中国图书分类号 R392.11 R394.5 R311.144 R730.3
摘 要 目的：探讨人群对乙肝疫苗免疫应答与HLA遗传多态性的相关性。方法：对52名湖北汉族健康自愿者进行HBV血源疫苗标准全程接种，共3次(第0、1、6月)，末次接种后8 w用酶免疫法(EIA)检测血清抗HBs抗体水平：S/N≥2.1为应答者；S/N<2.1为无应答者。同时对受试者进行HLA-I类抗原多态性检测。结果：应答者42人(81.0%)，无应答者10人(19.0%)；无应答者与HLA-B39具有显著相关性，RR＝17.5，χ2＝5.22，P<0.05，而与HLA-B62呈负相关，χ2＝6.41，P<0.05。结论：在湖北汉族人群中，HLA-B39表型阳性个体对乙肝疫苗免疫应答水平明显低于其他个体，而HLA-B62表型阳性个体明显高于其他个体。
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Association between the feature of the immune response to hepatitis B vaccine and HLA class I polymorphism in a Hubei population of the Han nationality
TU Zheng-Kun ，WU Xiong-Wen， LIU Min et al.
Department of Immunology,Tongji Medical University,Wuhan 430030
Abstract Objective:To study association between the feature of the immune response to hepatitis B vaccine and HLA genetic polymorphism on human.Methods:52 healthy volunteers of the Han nationality from Hubei province were subjected to a standard course of immunization with HBV plasma vaccine at month 0,1 and 6 successively. 8 weeks after the last immunization,serum level of anti-HBs antibody were assayed with EIA.Individuals with S/N≥2.1 are responders,and S/N<2.1 are nonresponders. Results:42(81.0%) of the 52 subjects were responders,10(19.0%) individuals were nonresponders.Unresponsiveness of the 10 individuals to hepatitis B vaccine were found to be positively associated with HLA-B39(RR＝17.5,χ2=5.22,P<0.05) and negatively associated with HLA-B62(χ2=6.41,P<0.05),as demonstrated by HLA-I antigen polymorphism analysis.Conclusion:The level of immune response to hepatitis B vaccine of individuals bearing HLA-B39 antigen was significantly lower than others,individuals bearing HLA-B62 antigen was significantly higher than others.
, 百拇医药
Key words HLA Hepatitis B vaccine Immune response
乙肝疫苗是取自慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者血液、通过灭活并纯化的乙肝表面抗原(HBsAg)，它的问世为乙型肝炎的预防提供了有力的武器，使乙型肝炎及其续发症(慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌等)得到了有效的控制。但并非所有接种乙肝疫苗者均能免遭HBV感染，人群对乙肝疫苗的免疫应答存在明显的个体差异，据此可将接种人群分为应答者和无应答者。影响个体对乙肝疫苗应答能力的因素包括年龄、性别、疫苗的品牌、是否吸烟、HLA型别等，其中HLA在人类对乙肝疫苗的免疫应答中起重要作用。研究无应答人群的免疫遗传学背景，将有助于进一步完善无应答人群的HBV预防对策，也有助于进一步阐明人类免疫应答基因(Ir gene)的生物学意义。本课题选择湖北汉族人群进行乙肝疫苗标准全程接种，观察其应答水平，并分析该组人群HLA-I类表型频率，以探讨无应答人群与HLA-I类抗原多态性的关联情况。
, 百拇医药 1 材料与方法
1.1 主要材料 HLA-I类分型血清板(澳大利亚皇家佩思医院临床免疫科Dawkins教授惠赠)可检出HLA-A抗原特异性11种，HLA-B抗原特异性25种；血源型加热灭活乙肝疫苗(卫生部武汉生物制品研究所)；抗-HBs(EIA)酶免疫法试剂盒(上海实业科华生物技术有限公司)；RPMI 1640(Gibco公司)。
1.2 实验对象及接种程序 选择湖北省鄂州市汀祖镇王边村52名健康自愿者进行乙肝疫苗标准全程接种(第0、1、6月肌肉注射)，受试者年龄在10～40岁之间，其中男性28名、女性24名。在全程接种后8 w采集外周静脉血标本。
1.3 方法
1.3.1 外周血单个核细胞的分离 取2.5 ml全血与等量RPMI 1640培养液混匀，小心加在5 ml淋巴细胞分离液上，1 600 r/min离心30 min，收集单个核细胞层，用RPMI 1640培养液洗2次，离心去上清，重新用20%FCS RPMI 1640培养液悬浮，调整细胞浓度为1×106个/mm3。
, 百拇医药
1.3.2 HLA-I类抗原分型 采用国际通用的微量淋巴细胞毒试验。简言之，在含有已知HLA-I类抗血清的反应板中加入外周血淋巴细胞，然后加入兔补体，充分作用后加入染料，在倒置相差显微镜下判断结果。阳性细胞着色且体积增大，表示待检淋巴细胞表面具有已知抗血清所针对的抗原；存活细胞不着色，透明而较小。
1.3.3 抗HBs抗体测定 取受试者血清，借助酶免疫法(EIA)检测抗HBs抗体水平。简言之，加入待测标本于包被HBsAg的反应板中，设抗HBs抗体阴性对照和阳性对照各2孔，空白对照1孔，然后加酶结合物，充分混匀，孵育37℃ 1 h，洗涤后加底物液，置37℃孵育15 min，然后加终止液。用酶联检测仪测定OD492nm值，按下列公式计算并判断结果S/N：
。由于多种因素可能影响EIA检测结果，为避免实验操作而致的误差，对每份样本连续检测3次，取平均OD值判断结果。S/N≥2.1为应答者，S/N<2.1为无应答者。
, 百拇医药
1.4 统计处理 相对危险性(Relative risk,RR)按Woolf公式：RR=ad/bc。a为携带特定HLA型别的无应答者人数；d为不携带特定HLA型别的应答者人数；b为不携带特定HLA型别的无应答者人数；c为携带特定HLA型别的应答者人数。四格表卡方检验按公式：
。 如12 结果
52名受试者HLA-I类分型结果和抗HBs抗体水平见表1。52例中无应答者为10名(19.0%)，应答者为42名(81.0%)。HLA-I类抗原型别与乙肝疫苗无应答的相关性见表2。10名无应答者中携带HLA-B39表型者为3人，其比例明显高于应答者(42人)中携带HLA-B39表型者(1人，χ2=5.22，P<0.05，RR=17.5)。42名应答者中携带HLA-B62表型者为14人，而10名无应答者中无一人携带HLA-B62(χ2=6.41，P<0.05)。此外，HLA-A2、A24、B16、B17、B40、B46等表型与乙肝疫苗免疫应答无明显关联。其他HLA型别由于在本实验中检出的频率较低，无统计学意义。
, 百拇医药
表1 湖北汉族人群52名个体HLA-I类分子多态性和抗HBs抗体水平
Tab.1 HLA class I phenotype and level of anti-HBs antibody in 52 individuals tested in this study Specimen ID
HLA-I phenotype
Level of anti-HbsAb
Specimen ID
HLA-I phenotype
Level of anti-HbsAb
A
, 百拇医药
B
OD
S/N
A
B
OD
S/N
D409
A1 A2
B5 B62
0.49
5.76
D4371)
, 百拇医药
A2 A10
B39
0.16
1.88
D4101)
A2
B12 B39
0.13
1.52
D438
A2
—
2.69
, http://www.100md.com
31.64
D411
A2
—
3.00
35.29
D439
A10
B35
3.32
39.05
D412
A25
, 百拇医药
B53
1.60
18.82
D4411)
A10
B40B17
0.13
1.52
D4131)
A2A24
B16B46
0.14
, 百拇医药
1.64
D442
A2A10
B40
1.37
16.11
D414
A2A10
B40B62
2.21
26.00
D443
A2A10
, 百拇医药
B46
0.19
2.23
D417
A2
B46B17
0.18
2.11
D444
A2A11
B62
0.28
3.29
, 百拇医药
D4181)
A2
B16B13
0.09
1.05
D446
A11A2
B12B5
2.47
29.05
00D419
A10A24
, http://www.100md.com B62
2.73
32.11
D447
A2A11
B5B46
1.78
20.94
D420
A2
—
2.36
27.76
, 百拇医药
D548
A2
B5
2.84
33.41
D421
—
B5
3.32
39.05
D549
A2
B62
, 百拇医药
1.07
12.58
D4221)
A33
B17
0.15
1.76
D550
A2
B16B27
0.78
9.17
D423
, http://www.100md.com
A10
—
0.44
5.17
D551
A2
B16B13
3.19
37.52
D424
A25
B7B14
1.21
, 百拇医药
14.23
D5521)
A9
B39B27
0.15
1.76
D425
A2
B46
0.19
2.23
D553
A2
, 百拇医药
B13B46
2.43
28.58
D426
A2A25
B62
0.33
3.88
D554
A2
B46
0.54
6.35
, 百拇医药
D427
A33A25
B46B17
1.22
14.35
D555
A2
B62
2.79
32.87
D428
A1A2
B46B62
, http://www.100md.com
0.42
4.94
D556
A2
B46
0.29
3.41
D429
A1A2
B7B62
0.78
9.17
D5571)
, http://www.100md.com
A11
B5B40
0.15
1.76
D430
A10
B40
1.46
17.17
D558
A24
B40B46
3.04
, http://www.100md.com
35.76
D431
A28
B35
3.32
39.05
D5591)
A2
B5
0.15
1.76
D4321)
, http://www.100md.com A24A25
B46
0.11
1.29
D560
A9
B40
0.20
2.35
D433
A2
B46
3.32
, 百拇医药
39.05
D561
A9A10
B62B40
0.32
3.76
D434
A2
B5B15
3.20
37.64
D561
A9A10
, 百拇医药
B62B40
0.32
3.76
D435
—
B35B12
2.19
25.76
D563
A2A33
B62
1.08
12.70
, 百拇医药
D436
A2
B62
2.58
30.35
D564
A2A33
B62
2.53
29.76
Note:1)Nonresponder,ie anti-HBs S/N<2.1.The reaction to the used HLA anti-sera is negative表2 乙肝疫苗应答者与无应答者HLA-I类表型频率的比较
, http://www.100md.com
Tab.2 Comparison of HLA class I phenotype frequencies in responders and nonresponders to hepatitis B vaccine HLA-phenotype
Nonresponders
Responders
P
B39
3
1
<0.05
B62
0
, http://www.100md.com
14
<0.05
B16
2
2
N.s
B46
2
11
N.s
B17
2
2
N.s
, 百拇医药
B40
2
6
N.s
A2
5
25
N.s
A24
2
2
N.s
Note:N.s:not significant
, http://www.100md.com
3 讨论
HLA复合体是位于人类第6号染色体短臂上的一组紧密连锁的基因群，其编码产物在抗原提呈和免疫调节中发挥重要作用；并且，HLA基因还控制人类对各种抗原的应答能力和对疾病的易感性。已证实，小鼠对HBsAg的免疫应答与H-2相关；H-2f和H-2s单体型表现为无应答；H-2b和H-2k为中度应答；而H-2d和H-2a为高应答[1，2]。HBsAg是最早发现的一种在人和小鼠的免疫应答中与MHC相关的抗原，虽然人和小鼠MHC的结构与功能有许多共同特点，然而与人类免疫应答相关的特异性MHC基因的定位，迄今尚无直接证据。其原因在于，人群为随机婚配群体，且HLA基因系统具有高度多态性。尽管如此，已有许多研究者报道，人类对乙肝疫苗的免疫应答与HLA相关。由于所研究的人群不同，各家所获得的结果不尽相同。
本课题对52名健康个体进行血源型乙肝疫苗标准全程接种，结果发现应答者为42人(81.0%)，无应答者为10人(19.0%)，无应答率介于白种人群(7.0%～15.0%)和日本人群(22.4%)之间[3，4]。此外，通过HLA多态性分析证实，无应答者与HLA-B39表型显著相关(RR＝17.5，P<0.05)；无应答与HLA-B62表型呈负相关(P<0.05)。本课题未观察到其他HLA-I类表型与乙肝疫苗免疫应答关联。在本实验中，人群对乙肝疫苗的免疫应答与年龄、性别无关。
, 百拇医药
在日本人群中，乙肝疫苗无应答者与HLA-Bw54、DR4、DRw53表型具有极强相关性，RR值分别为5.47、2.57和15.93[4]，但未发现HLA与HBsAg高应答存在关联[5]。在白种人群中，携带HLA-DR3、-DR7表型或携带扩展单体型HLA-B8-SC91-DR3、HLA-B44-Fe31-DR7的个体无应答率极高[6，7]；而HLA-DR1与HBsAg高应答相关[8]。上述结果与本课题所获结果不同，其原因可能是由于不同人群遗传背景存在差异，从而与HBsAg无应答关联的HLA表型亦不同。
涂正坤 现在广州市妇婴医院医学遗传研究所，广州510180
作者简介：涂正坤，男，33岁，免疫遗传学专业硕士生；
指导教师，龚非力，男，教授，博士生导师，主要从事分子免疫和免疫遗传学研究
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4 参考文献
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〔收稿1997-04-13 二次修回1998-05-28〕, 百拇医药