NO、cAMP在哮喘豚鼠发病机理中的作用
作者：楼兰花 别晓东 王健民
单位：浙江中医学院分子医学研究所，杭州310009
关键词：
中国免疫学杂志990306 中国图书分类号 R969.4 一氧化氮(NO)可通过环核苷酸水平变化而产生多种生理效应[1]，同时NO又可作为一种免疫调节因子影响机体免疫功能[2]，免疫活性细胞的激活及其释放炎性介质与哮喘密切相关[3]。本文通过对过敏性哮喘豚鼠肺泡灌洗液(BALF)中NO，嗜酸性粒细胞(EC)及肺组织cAMP，过氧化脂质(LPO)等测定，以说明NO，cAMP在哮喘豚鼠发病中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料 DHP雄性豚鼠，体重250±27 g。
, 百拇医药
1.2 方法 过敏性哮喘豚鼠模型建立参照文献[3]。实验过程及观察指标,哮喘豚鼠用20%乌拉担(1 g/kg)腹腔注射麻醉，抽取肺泡灌洗液，经离心后置-30℃保存待测NO；沉淀的细胞用含5%胎牛血清生理盐水定量悬浮细胞，计算细胞数及涂片，HE染色作嗜酸性细胞分类计数；取相同部位肺组织切片，肺组织cAMP提取测定，提取方法采用本所建立的提取细胞内环核苷酸方法(专利号870106203.8),用放射免疫分析法测定；用硫代巴比妥酸(TBA)显色方法测定肺组织LPO，在532 nm处测OD值，以四乙氧基丙烷为标准计算每克组织LPO含量;用亚硝酸盐测定法，测定肺泡灌洗液中NO。
2 结果
2.1 过敏性哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中EC数及NO含量的变化 结果表明哮喘豚鼠BALF中细胞总数与对照组比较无显著差异，但EC百分率，EC数及NO含量较对照组含量显著升高，见表1。哮喘豚鼠肺组织cAMP水平较对照组显著降低，而LPO含量较对照组显著升高，见表2。
, 百拇医药
2.2 过敏性哮喘豚鼠肺组织血管，气管周围炎症细胞浸润及其形态的变化 哮喘豚鼠肺组织切片显示血管，支气管周围炎症细胞浸润较对照组显著增多，支气管粘膜下层有大量EC浸润脱颗粒现象，同时见到肺泡壁变薄、壁断裂、肺泡腔扩大等现象较对照组有明显改变。
表1 过敏性哮喘豚鼠BALFKNO含量和EC数的变化(n=8)
Tab.1 The change of NO and EC in BALF in allergic asthmatic guinea pigs (n=8) Groups
Total
Ratio
EC
NO
, 百拇医药 ×106ml-1
%
×106ml-1
μmol/L
Control
1.08±0.44
8.23±2.05
0.094±0.054
1.86±1.39
Model
1.18±0.64
, http://www.100md.com
42.80±13.001)
0.518±0.3592)
4.80±3.103)
Note:compared with control group.1)P<0.01,2)P<0.01,3)P<0.05表2 过敏性哮喘豚鼠肺组织cAMP水平和LPO含量变化(n=8)
Tab.2 The change of cAMP and LPO in allergic asthmatic guinea pigs lung tissue (n=8) Groups
cAMP
Lung tissue LPO
, 百拇医药
pmol/mg
nmol/g
Control
1.85±1.2
38.0±5.9
Model
0.80±0.471)
58.9±17.02)
Note:compared with control group 1)P<0.05,2)P<0.01
3 讨论
, 百拇医药
NO具有炎症作用和细胞毒作用。NO也可通过激活鸟苷酸环化酶，导致细胞内cGMP增加[1]。cAMP与cGMP是细胞内信息传递过程中一对作用相反而又相互制约的物质，其作用结果与二者比值有关。肺组织cAMP降低，结合NO升高则会促进免疫细胞活化及其释放多种活性介质，cAMP、cGMP除了与免疫功能有关外，与交感，副交感神经关系密切，其作用通过神经末梢释放递质，例如5-羟色胺，NO等，这些物质会使腺体分泌增加，平滑肌收缩，引起气道高反应。以上说明NO与cAMP是参与气道炎症引起气道高反应的重要机制之一。
NO、cAMP在哮喘豚鼠发病机理中的作用 本文为浙江省教委课题(95-8)
别晓东 浙江医科大学第二附院，杭州310009
作者简介：楼兰花，女，53岁，副主任技师，从事变态反应方面的研究
4 参考文献
1 陈 修.心血管药理学.第2版.北京：人民卫生出版社，1996：124-128
2 Geller D A， Nussler A K, Di Silvio M et al. Pro Natl Acad Sci USA,1993;90(2):522
3 刘朝晖，徐 军，钟南山.内皮素肿瘤坏死因子在哮喘发病中的作用.中华结核和呼吸杂志，1995：18(6)：366
〔收稿1997-11-30 修回1998-05-20〕, 百拇医药
单位：浙江中医学院分子医学研究所，杭州310009
关键词：
中国免疫学杂志990306 中国图书分类号 R969.4 一氧化氮(NO)可通过环核苷酸水平变化而产生多种生理效应[1]，同时NO又可作为一种免疫调节因子影响机体免疫功能[2]，免疫活性细胞的激活及其释放炎性介质与哮喘密切相关[3]。本文通过对过敏性哮喘豚鼠肺泡灌洗液(BALF)中NO，嗜酸性粒细胞(EC)及肺组织cAMP，过氧化脂质(LPO)等测定，以说明NO，cAMP在哮喘豚鼠发病中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料 DHP雄性豚鼠，体重250±27 g。
, 百拇医药
1.2 方法 过敏性哮喘豚鼠模型建立参照文献[3]。实验过程及观察指标,哮喘豚鼠用20%乌拉担(1 g/kg)腹腔注射麻醉，抽取肺泡灌洗液，经离心后置-30℃保存待测NO；沉淀的细胞用含5%胎牛血清生理盐水定量悬浮细胞，计算细胞数及涂片，HE染色作嗜酸性细胞分类计数；取相同部位肺组织切片，肺组织cAMP提取测定，提取方法采用本所建立的提取细胞内环核苷酸方法(专利号870106203.8),用放射免疫分析法测定；用硫代巴比妥酸(TBA)显色方法测定肺组织LPO，在532 nm处测OD值，以四乙氧基丙烷为标准计算每克组织LPO含量;用亚硝酸盐测定法，测定肺泡灌洗液中NO。
2 结果
2.1 过敏性哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中EC数及NO含量的变化 结果表明哮喘豚鼠BALF中细胞总数与对照组比较无显著差异，但EC百分率，EC数及NO含量较对照组含量显著升高，见表1。哮喘豚鼠肺组织cAMP水平较对照组显著降低，而LPO含量较对照组显著升高，见表2。
, 百拇医药
2.2 过敏性哮喘豚鼠肺组织血管，气管周围炎症细胞浸润及其形态的变化 哮喘豚鼠肺组织切片显示血管，支气管周围炎症细胞浸润较对照组显著增多，支气管粘膜下层有大量EC浸润脱颗粒现象，同时见到肺泡壁变薄、壁断裂、肺泡腔扩大等现象较对照组有明显改变。
表1 过敏性哮喘豚鼠BALFKNO含量和EC数的变化(n=8)
Tab.1 The change of NO and EC in BALF in allergic asthmatic guinea pigs (n=8) Groups
Total
Ratio
EC
NO
, 百拇医药 ×106ml-1
%
×106ml-1
μmol/L
Control
1.08±0.44
8.23±2.05
0.094±0.054
1.86±1.39
Model
1.18±0.64
, http://www.100md.com
42.80±13.001)
0.518±0.3592)
4.80±3.103)
Note:compared with control group.1)P<0.01,2)P<0.01,3)P<0.05表2 过敏性哮喘豚鼠肺组织cAMP水平和LPO含量变化(n=8)
Tab.2 The change of cAMP and LPO in allergic asthmatic guinea pigs lung tissue (n=8) Groups
cAMP
Lung tissue LPO
, 百拇医药
pmol/mg
nmol/g
Control
1.85±1.2
38.0±5.9
Model
0.80±0.471)
58.9±17.02)
Note:compared with control group 1)P<0.05,2)P<0.01
3 讨论
, 百拇医药
NO具有炎症作用和细胞毒作用。NO也可通过激活鸟苷酸环化酶，导致细胞内cGMP增加[1]。cAMP与cGMP是细胞内信息传递过程中一对作用相反而又相互制约的物质，其作用结果与二者比值有关。肺组织cAMP降低，结合NO升高则会促进免疫细胞活化及其释放多种活性介质，cAMP、cGMP除了与免疫功能有关外，与交感，副交感神经关系密切，其作用通过神经末梢释放递质，例如5-羟色胺，NO等，这些物质会使腺体分泌增加，平滑肌收缩，引起气道高反应。以上说明NO与cAMP是参与气道炎症引起气道高反应的重要机制之一。
NO、cAMP在哮喘豚鼠发病机理中的作用 本文为浙江省教委课题(95-8)
别晓东 浙江医科大学第二附院，杭州310009
作者简介：楼兰花，女，53岁，副主任技师，从事变态反应方面的研究
4 参考文献
1 陈 修.心血管药理学.第2版.北京：人民卫生出版社，1996：124-128
2 Geller D A， Nussler A K, Di Silvio M et al. Pro Natl Acad Sci USA,1993;90(2):522
3 刘朝晖，徐 军，钟南山.内皮素肿瘤坏死因子在哮喘发病中的作用.中华结核和呼吸杂志，1995：18(6)：366
〔收稿1997-11-30 修回1998-05-20〕, 百拇医药