中国七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌污染状况调查*
作者：付 萍 冉 陆 李志刚 姚景慧 赵 熙
单位：卫生部食品卫生监督检验所，北京 100021
关键词：单核细胞增生李斯特氏菌；食品；污染调查
中国七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌污染状况调查摘要 于1996～1997年组织了全国12个省，对国内七类食品3746份样品进行单核细胞增生性李斯特氏菌(Listeria monocytogenes简称LM)的污染调查，结果表明：七类样品中除蔬菜外均检出了致病单核细胞增生性李斯特氏菌。其分离率为：冷饮1.39%、生肉1.53%、乳制品0.52%、熟肉制品0.47%、乳0.72%及水产品0.19%。表明LM在我国食品中存在污染，有食物中毒的潜在危险。
中图分类号 R155.5
Investigation on the contamination of Listeria
, 百拇医药
monocytogenes in seven kinds of foods
Fu Ping, Ran Lu, Li Zhigang, Yao Jinghui et al.
Institute of Food Safety Control and Inspection, Ministry of Public Health, Beijing 100021 China
An examination on 3746 samples of 7 kinds of foods from 12 provinces of China for the detection of Listeria monocytogenes(LM) was carried out in 1996～1997. The detected rates of LM in commercial cold drinks, raw meat, sterilized milk products, cooked meat products, raw milk and aquatic products were 1.39%,1.53%，0.52%，0.47%，0.72%and 0.19% respectively. The result showed that LM present in the contaminated foods is a potential hazardous factor of foodborne disease.
, 百拇医药
Key words:Listeria monocytogenes, food contamination
单核细胞增生性李斯特氏菌(LM)在自然界分布广泛，可造成各种食品的外源性污染，该菌致病性强，不易被寒冷日晒等强烈因素所杀灭。近年来，世界各地，特别是北美和西欧由食品感染的单核细胞增生性李斯特氏菌病患者数呈上升趋势，因死亡率高，国外对该菌高度重视，WHO将其列为90年代食品中四大致病菌之一[1]。我国由LM引起的临床感染有60余例，感染途径、方式不明，死亡率约22%[2]。本文通过此次调查及分离菌株的毒力分析，获得了该菌在七类主要食品中的污染状况资料。
1 材料与方法
生肉、熟肉制品、乳(生奶和消毒奶)、乳制品(酸奶和果奶)、蔬菜、水产品及冷饮(冰淇淋和含乳冰棍)，除生牛奶外均为市售样品。
, 百拇医药
单核细胞增生性李斯特氏菌CMCC 54004、CMCC 54007(购自中国药品生物制品检定所)。
16～18g昆明小鼠，中国医学科学院动物中心提供。
样品的分离及菌株鉴定按GB4789.30—94方法进行[3]。其中，在三糖铁上产酸不产气、SIM半固体上呈伞状、尿素酶、甘露醇、木糖、硝酸盐还原为阴性，过氧化氢、鼠李糖、七叶苷、甲基红、VP、小鼠毒力试验为阳性的菌株，判定为单核细胞增生性李斯特氏菌。
2 结果
全国12省七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染调查结果见表1。总污染率为0.72%，除蔬菜外其它各类食品均检出单核细胞增生性李斯特氏菌，污染程度最严重的是生肉污染率1.53%，其次是冷饮污染率1.39%。
2.1 各类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况
, 百拇医药
七类食品共包括23个品种，单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况见表2，生肉中阳性率最高的是生鸡肉和生猪肉，分别为2.7%、1.90%；熟肉制品中以熟猪肉肠的污染阳性率最高(1.4%)，冷饮中冰淇淋的污染率最高为2.0%；水产品中仅虾类检出了李斯特氏菌，其分离率为0.8%。
表1 七类食品样品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染调查
样品种类
数量(份)
阳性数(份)
污染率(%)
生 肉
784
12
, 百拇医药
1.53
熟肉制品
639
3
0.47
乳
692
5
0.72
乳制品
192
1
0.52
, 百拇医药 水产品
532
1
0.19
冷 饮
359
5
1.39
蔬 菜
548
0
0.00
总 计
3746
, 百拇医药
27
0.72
2.2 各省食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况
12省七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的平均污染状况，新疆、江苏的分离率最高为1.67%，其次是福建、辽宁和江西，分别为0.76%，0.82%和0.67%，分离率最低是山东、黑龙江和湖北，未检出单核细胞增生性李斯特氏菌，见表3。
表2 23种食品样品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况
样品名称
数量(份)
阳性数(份)
阳性率(%)
, 百拇医药
生猪肉
315
6
1.9
生猪肉馅
91
1
1.1
生鸡肉
75
2
2.7
生牛肉
, 百拇医药 111
1
0.9
生羊肉
119
1
0.8
熟猪肉
205
1
0.5
熟猪肉肠
144
2
, http://www.100md.com
1.4
熟鸡肉
94
0
0.0
熟牛肉
125
0
0.0
生牛奶
692
5
0.7
, 百拇医药 消毒牛奶
248
0
0.0
冰淇淋
299
6
2.0
酸 奶
87
1
1.2
果 奶
68
, 百拇医药
0
0.0
虾
131
1
0.8
鱼
238
0
0.0
蟹
11
0
0.0
, 百拇医药
鱿 鱼
68
0
0.0
黄 瓜
127
0
0.0
香 菜
99
0
0.0
菠 菜
88
, http://www.100md.com
0
0.0
菜 花
93
0
0.0
藕
62
0
0.0
表3 12省七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌污染状况
省名称
样 品 数
, 百拇医药
阳 性 数
污染率(%)
广 西
210
3
1.43
福 建
265
2
0.76
广 东
309
2
, 百拇医药
0.65
辽 宁
485
5
1.03
新 疆
300
5
1.67
江 苏
300
5
1.67
, http://www.100md.com
北 京
70
1
1.43
江 西
300
2
0.67
河 南
584
2
0.34
山 东
, 百拇医药 312
0
0.00
黑龙江
300
0
0.00
湖 北
311
0
0.00
总 计
3746
, 百拇医药 27
0.72
本次调查采用国标法中的一次增菌法(EB)和二次增菌法(LB)2种方法，由表4可见，七类食品中除乳外，其余6类，LB法的检出率明显高于EB法，(P<0.05)(3)。 表4 EB和LB法检测单核细胞增生性李斯特氏菌的结果
样品种类
EB方法
LB方法
阳性数/总数
阳性率(%)
阳性数/总数
阳性率(%)
, http://www.100md.com
生 肉
1/728
0.14
10/728
0.96
熟肉制品
0/600
0.00
3/600
0.50
乳
3/642
0.47
, 百拇医药
2/642
0.16
乳制品
0/163
0.00
1/163
0.61
蔬 菜
0/495
0.00
0/495
0.00
水产品
, 百拇医药
0/478
0.00
1/478
0.21
冷 饮
2/329
0.61
4/329
1.22
合 计
6/3435
0.18
21/3435
, 百拇医药
0.61
此次调查，共分离到27株LM，其中协同溶血试验13株阳性，14株阴性，但小鼠毒力试验均为阳性。 表5 27株LM的协同溶血试验(cAMP)与小鼠毒力试验结果(1)
菌 株 号
协同溶血(cAMP)
小 鼠 毒 力
β溶血金黄色
葡萄球菌
马红球菌
X1
-
-
, 百拇医药
+(2)
X2
-
-
+
X3
+
-
+
X4
+
-
+
X5
, 百拇医药
-
-
+
G1
+
-
+
G2
+
-
+
G3
+
-
, 百拇医药
+
G4
+
-
+
G5
+
-
+
L1
-
-
+
L2
, http://www.100md.com
+
-
+
L3
+
-
+
L4
+
-
+
L5
-
-
, http://www.100md.com
+
H1
-
-
+
H2
-
-
+
F1
-
-
+
F2
, 百拇医药
-
-
+
f1
-
-
+
f2
-
-
+
B1
+
-
, 百拇医药
+
11
-
-
+
12
-
-
+
13
-
-
+
g1
, http://www.100md.com
+
-
+
g2
+
-
+
注：(1)-：不产生协同溶血现象 +：产生协同溶血现象 (2)实验小鼠死亡
3 讨论
本次调查从12省七大类食品3746份样品中分离到单核细胞增生性李斯特氏菌27株。尤其从熟肉制品、冰淇淋、酸奶等直接入口食品中检出致病性单核细胞增生性李斯特氏菌。说明存在发生食源性单核细胞增生性李斯特氏菌感染的危险性。美国曾发生过由巴氏消毒牛奶引起的食物中毒，我们此次调查消毒牛奶中未检出LM。另外从本次调查的六类食品样品看，其LM的分离率均比国内、外文献报道的低，结果与我国商检的检测结果基本一致。目前美国已将单核细胞增生性李斯特氏菌做为进口食品必检项目之一[4，5]。我国食品卫生监督检验部门也应高度重视。
, 百拇医药
(参加实验工作的有：封幼玲，李春玲，钟平华，王为黎，陈伟伟，何洛平，金振滔，高丽云，陈玉真，张秀丽，余淑冰，廖兴广，陈洪，谢茂慧等一并致谢。)
* 中国预防医学科学院基金资助课题
作者简介：付萍，女，大学，助理研究员
参考文献
[1] Ryser T, Elmer H,M.Listeriosis and Food Safety. Marcel Dekke Inc, 1991,6(2):214—216
[2] 柳增善.动物性食品中单核细胞增多症李氏菌的检测.兽医大学学报，1991，11(3)：275—279
[3] GB 4789.30-94单核细胞增生李斯特氏菌检验
[4] 刘爱平，陈淑敏，阎可庭，等.市售鲜冻畜、禽肉中李斯特氏菌的分离和鉴定.肉类研究，1991，3：27—30
[5] Peggy S. HAYES, Isolation of Listeria monocytogenes from Raw Milk. Applied Environ Microbiol, 1986， 51(2): 438—440
(1998-09-27收稿), 百拇医药
单位：卫生部食品卫生监督检验所，北京 100021
关键词：单核细胞增生李斯特氏菌；食品；污染调查
中国七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌污染状况调查摘要 于1996～1997年组织了全国12个省，对国内七类食品3746份样品进行单核细胞增生性李斯特氏菌(Listeria monocytogenes简称LM)的污染调查，结果表明：七类样品中除蔬菜外均检出了致病单核细胞增生性李斯特氏菌。其分离率为：冷饮1.39%、生肉1.53%、乳制品0.52%、熟肉制品0.47%、乳0.72%及水产品0.19%。表明LM在我国食品中存在污染，有食物中毒的潜在危险。
中图分类号 R155.5
Investigation on the contamination of Listeria
, 百拇医药
monocytogenes in seven kinds of foods
Fu Ping, Ran Lu, Li Zhigang, Yao Jinghui et al.
Institute of Food Safety Control and Inspection, Ministry of Public Health, Beijing 100021 China
An examination on 3746 samples of 7 kinds of foods from 12 provinces of China for the detection of Listeria monocytogenes(LM) was carried out in 1996～1997. The detected rates of LM in commercial cold drinks, raw meat, sterilized milk products, cooked meat products, raw milk and aquatic products were 1.39%,1.53%，0.52%，0.47%，0.72%and 0.19% respectively. The result showed that LM present in the contaminated foods is a potential hazardous factor of foodborne disease.
, 百拇医药
Key words:Listeria monocytogenes, food contamination
单核细胞增生性李斯特氏菌(LM)在自然界分布广泛，可造成各种食品的外源性污染，该菌致病性强，不易被寒冷日晒等强烈因素所杀灭。近年来，世界各地，特别是北美和西欧由食品感染的单核细胞增生性李斯特氏菌病患者数呈上升趋势，因死亡率高，国外对该菌高度重视，WHO将其列为90年代食品中四大致病菌之一[1]。我国由LM引起的临床感染有60余例，感染途径、方式不明，死亡率约22%[2]。本文通过此次调查及分离菌株的毒力分析，获得了该菌在七类主要食品中的污染状况资料。
1 材料与方法
生肉、熟肉制品、乳(生奶和消毒奶)、乳制品(酸奶和果奶)、蔬菜、水产品及冷饮(冰淇淋和含乳冰棍)，除生牛奶外均为市售样品。
, 百拇医药
单核细胞增生性李斯特氏菌CMCC 54004、CMCC 54007(购自中国药品生物制品检定所)。
16～18g昆明小鼠，中国医学科学院动物中心提供。
样品的分离及菌株鉴定按GB4789.30—94方法进行[3]。其中，在三糖铁上产酸不产气、SIM半固体上呈伞状、尿素酶、甘露醇、木糖、硝酸盐还原为阴性，过氧化氢、鼠李糖、七叶苷、甲基红、VP、小鼠毒力试验为阳性的菌株，判定为单核细胞增生性李斯特氏菌。
2 结果
全国12省七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染调查结果见表1。总污染率为0.72%，除蔬菜外其它各类食品均检出单核细胞增生性李斯特氏菌，污染程度最严重的是生肉污染率1.53%，其次是冷饮污染率1.39%。
2.1 各类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况
, 百拇医药
七类食品共包括23个品种，单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况见表2，生肉中阳性率最高的是生鸡肉和生猪肉，分别为2.7%、1.90%；熟肉制品中以熟猪肉肠的污染阳性率最高(1.4%)，冷饮中冰淇淋的污染率最高为2.0%；水产品中仅虾类检出了李斯特氏菌，其分离率为0.8%。
表1 七类食品样品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染调查
样品种类
数量(份)
阳性数(份)
污染率(%)
生 肉
784
12
, 百拇医药
1.53
熟肉制品
639
3
0.47
乳
692
5
0.72
乳制品
192
1
0.52
, 百拇医药 水产品
532
1
0.19
冷 饮
359
5
1.39
蔬 菜
548
0
0.00
总 计
3746
, 百拇医药
27
0.72
2.2 各省食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况
12省七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的平均污染状况，新疆、江苏的分离率最高为1.67%，其次是福建、辽宁和江西，分别为0.76%，0.82%和0.67%，分离率最低是山东、黑龙江和湖北，未检出单核细胞增生性李斯特氏菌，见表3。
表2 23种食品样品中单核细胞增生性李斯特氏菌的污染状况
样品名称
数量(份)
阳性数(份)
阳性率(%)
, 百拇医药
生猪肉
315
6
1.9
生猪肉馅
91
1
1.1
生鸡肉
75
2
2.7
生牛肉
, 百拇医药 111
1
0.9
生羊肉
119
1
0.8
熟猪肉
205
1
0.5
熟猪肉肠
144
2
, http://www.100md.com
1.4
熟鸡肉
94
0
0.0
熟牛肉
125
0
0.0
生牛奶
692
5
0.7
, 百拇医药 消毒牛奶
248
0
0.0
冰淇淋
299
6
2.0
酸 奶
87
1
1.2
果 奶
68
, 百拇医药
0
0.0
虾
131
1
0.8
鱼
238
0
0.0
蟹
11
0
0.0
, 百拇医药
鱿 鱼
68
0
0.0
黄 瓜
127
0
0.0
香 菜
99
0
0.0
菠 菜
88
, http://www.100md.com
0
0.0
菜 花
93
0
0.0
藕
62
0
0.0
表3 12省七类食品中单核细胞增生性李斯特氏菌污染状况
省名称
样 品 数
, 百拇医药
阳 性 数
污染率(%)
广 西
210
3
1.43
福 建
265
2
0.76
广 东
309
2
, 百拇医药
0.65
辽 宁
485
5
1.03
新 疆
300
5
1.67
江 苏
300
5
1.67
, http://www.100md.com
北 京
70
1
1.43
江 西
300
2
0.67
河 南
584
2
0.34
山 东
, 百拇医药 312
0
0.00
黑龙江
300
0
0.00
湖 北
311
0
0.00
总 计
3746
, 百拇医药 27
0.72
本次调查采用国标法中的一次增菌法(EB)和二次增菌法(LB)2种方法，由表4可见，七类食品中除乳外，其余6类，LB法的检出率明显高于EB法，(P<0.05)(3)。 表4 EB和LB法检测单核细胞增生性李斯特氏菌的结果
样品种类
EB方法
LB方法
阳性数/总数
阳性率(%)
阳性数/总数
阳性率(%)
, http://www.100md.com
生 肉
1/728
0.14
10/728
0.96
熟肉制品
0/600
0.00
3/600
0.50
乳
3/642
0.47
, 百拇医药
2/642
0.16
乳制品
0/163
0.00
1/163
0.61
蔬 菜
0/495
0.00
0/495
0.00
水产品
, 百拇医药
0/478
0.00
1/478
0.21
冷 饮
2/329
0.61
4/329
1.22
合 计
6/3435
0.18
21/3435
, 百拇医药
0.61
此次调查，共分离到27株LM，其中协同溶血试验13株阳性，14株阴性，但小鼠毒力试验均为阳性。 表5 27株LM的协同溶血试验(cAMP)与小鼠毒力试验结果(1)
菌 株 号
协同溶血(cAMP)
小 鼠 毒 力
β溶血金黄色
葡萄球菌
马红球菌
X1
-
-
, 百拇医药
+(2)
X2
-
-
+
X3
+
-
+
X4
+
-
+
X5
, 百拇医药
-
-
+
G1
+
-
+
G2
+
-
+
G3
+
-
, 百拇医药
+
G4
+
-
+
G5
+
-
+
L1
-
-
+
L2
, http://www.100md.com
+
-
+
L3
+
-
+
L4
+
-
+
L5
-
-
, http://www.100md.com
+
H1
-
-
+
H2
-
-
+
F1
-
-
+
F2
, 百拇医药
-
-
+
f1
-
-
+
f2
-
-
+
B1
+
-
, 百拇医药
+
11
-
-
+
12
-
-
+
13
-
-
+
g1
, http://www.100md.com
+
-
+
g2
+
-
+
注：(1)-：不产生协同溶血现象 +：产生协同溶血现象 (2)实验小鼠死亡
3 讨论
本次调查从12省七大类食品3746份样品中分离到单核细胞增生性李斯特氏菌27株。尤其从熟肉制品、冰淇淋、酸奶等直接入口食品中检出致病性单核细胞增生性李斯特氏菌。说明存在发生食源性单核细胞增生性李斯特氏菌感染的危险性。美国曾发生过由巴氏消毒牛奶引起的食物中毒，我们此次调查消毒牛奶中未检出LM。另外从本次调查的六类食品样品看，其LM的分离率均比国内、外文献报道的低，结果与我国商检的检测结果基本一致。目前美国已将单核细胞增生性李斯特氏菌做为进口食品必检项目之一[4，5]。我国食品卫生监督检验部门也应高度重视。
, 百拇医药
(参加实验工作的有：封幼玲，李春玲，钟平华，王为黎，陈伟伟，何洛平，金振滔，高丽云，陈玉真，张秀丽，余淑冰，廖兴广，陈洪，谢茂慧等一并致谢。)
* 中国预防医学科学院基金资助课题
作者简介：付萍，女，大学，助理研究员
参考文献
[1] Ryser T, Elmer H,M.Listeriosis and Food Safety. Marcel Dekke Inc, 1991,6(2):214—216
[2] 柳增善.动物性食品中单核细胞增多症李氏菌的检测.兽医大学学报，1991，11(3)：275—279
[3] GB 4789.30-94单核细胞增生李斯特氏菌检验
[4] 刘爱平，陈淑敏，阎可庭，等.市售鲜冻畜、禽肉中李斯特氏菌的分离和鉴定.肉类研究，1991，3：27—30
[5] Peggy S. HAYES, Isolation of Listeria monocytogenes from Raw Milk. Applied Environ Microbiol, 1986， 51(2): 438—440
(1998-09-27收稿), 百拇医药