气相色谱-质谱法同时测定氟乙酰胺及毒鼠强方法研究
作者：马永建 冯芳 陈蓓
单位：江苏省卫生防疫站，南京 210009
关键词：气相色谱-质谱法；氟乙酰胺；毒鼠强
卫生研究000608 摘要：运用气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定氟乙酰胺及毒鼠强，对其分离条件、提取方法、定性定量方式进行了研究。氟乙酰胺及毒鼠强的线性范围分别为5～40和0.5～20.0μg/ml，2种化合物在不同的样品中(固体、液体、油样)的回收率分别为52.25%～94.30%和61.85%～92.50%。该法快速、灵敏、准确。
中图分类号：R994.6 X839.2 文献标识码：B
文章编号：1000-8020(2000)06-0369-02
Simultaneous determination of fluoroacetamide and
, 百拇医药
tetramethylendisulfotetramin with gas chromatography-
mass spectrography
Ma Yongjian Feng Fang Chen Bei
(Jiangsu Province Health and Anti-epidemic Station, Nanjing 210009, China)
Abstract：Simultaneous determination of fluoroacetamide and tetramethylendisulfotetramin with gas chromatography-mass spectrography was established.The condition of separation, ways of extraction, the qualitative and quantitative determination of two compounds were discussed. The linear ranges of fluoroacetamide and tetramethylendisulfotetramin were 5-40μg/ml and 0.5-20.0μg/ml,respectively. The recoveries of these two compounds in different sample were 52.25%-94.30% and 61.85%-92.50%, respectively. The method was fast, sensitive and accurate.
, http://www.100md.com
Key words:gas chromatography-mass spectrography, fluoroacetamide, tetramethylendisulfotetramin
氟乙酰胺(fluoroacetamide)LD50为15mg/kg(大鼠经口)；毒鼠强(tetramethylendisulfotetramin，简称424)LD50为0.2mg/kg(大鼠经口)[1]。这2种化学物均为剧毒速效的灭鼠药，且无色、无味，拌于大麦、小米、玉米等粮食配成毒饵，在我国不少地方使用，因此，常因投毒或误食这些鼠药毒饵而造成中毒事故。中国农业部、卫生部曾于1982年联合发文严禁使用这些化合物作为杀鼠药，但仍有人使用而造成中毒事件。1998年，江苏省曾有多起投毒案件，经检测均为鼠药，因此为给中毒病人的诊断治疗提供及时可靠的依据，有必要建立一种即时快速的测定这两种化合物的方法。
氟乙酰胺测定方法有化学法、气相色谱(GC)法，化学法因特异性差，常不能准确定性，GC法因需衍生化而耗时较长。毒鼠强的测定方法有GC法[2]和气相色谱-质谱法(GC-MS)法[3]，本文确定了用GC-MS法同时测定这2种化合物，该法具有方便、快速、准确、灵敏等优点，已多次应用于日常样品的检测。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 试剂
毒鼠强标准品为南京市公安局提供(纯度99.97%)，氟乙酰胺标准品为国家公安部提供(纯度99.93%)，三氯甲烷、乙腈均为上海分析仪器厂生产，AR。
1.2 仪器及仪器条件
GC-MS(6890-5973)美国HP公司生产。柱：HP-5MS 5% Phengl Methyl Siloxane 柱长30.0m，内径250μm，膜厚0.25μm。氦气为载气，恒流方式，流速0.5ml/min。程序升温，初始温度45℃，以10℃/min升温到80℃，以25℃/min升温到270℃，维持10min。进样口温度：270℃。进样方式：不分流进样，0.5min后分流。毛细管柱与质谱的接口温度为280℃。进样量1μl。MS四极杆温度150℃。MS离子源温度230℃。质谱延时时间2.5min。EM电压1670.6V。从10～550质量扫描，数据分析采用提取离子方式。My library、NBS、Willery库谱图检索。
, 百拇医药
1.3 标准溶液的配制
准确称取氟乙酰胺及毒鼠强标准品10.0mg，置于10ml容量瓶中，用乙腈配成1.0mg/ml的标准贮备液。
1.4 样品处理
1.4.1 固体样品 取样品(鼠药毒饵)0.05g，置于25ml小烧杯中，分别用丙酮提取3次，每次用6ml丙酮，浸泡10min左右，并不断搅拌，合并丙酮液，过滤，旋转蒸发仪上挥去丙酮，提取物溶于100μl乙腈中，作为供试品。
1.4.2 液体样品 取样品(呕吐物或剩余饭菜)5g，加NaCl固体使之饱和，用乙酸乙酯提取3次，每次用乙酸乙酯20ml，浸泡10min左右，合并乙酸乙酯液，在滤纸上加药棉和无水硫酸钠去水，过滤，旋转蒸发器上挥去乙酸乙酯，提取物溶于100μl乙腈中。
1.4.3 油样 取样品(中毒食油)5g，用甲醇提取3次，每次用甲醇20ml，合并甲醇层，在滤纸上加药棉和无水硫酸钠，过滤，旋转蒸发器上挥去甲醇，用100μl乙腈溶解提取物。
, 百拇医药
2 结果与讨论
2.1 定性
取1μl标准品混合液，进样，tR=3.12为氟乙酰胺，tR＝10.30为毒鼠强。在一般情况下，这2种化合物不会同时出现在同一种试样中，因为一些中毒样品(如呕吐物、剩余饭菜汤等)，往往是样品量少，含量较低。通常仅能为1次测试量。本文的研究意义在于1次实验即能判定为何种化合物。对于中毒样品，如杂质样较多，采用GC-MS/Scan方式后，在m/z 77，44，240，212处运用Extraction ion方式检索，这样根据保留时间和特征离子可排除杂质峰，定性结果准确可靠。m/z 77为氟乙酰胺的分子离子峰，m/z 44为分子离子峰脱去FCH2后的离子碎片峰，这2种m/z为氟乙酰胺的特征离子峰。240为毒鼠强的分子离子峰，212为分子离子峰脱去N-CH2后的离子碎片峰。这2种m/z为毒鼠强分子的特征离子峰。
, 百拇医药
2.2 定量
分别精密吸取氟乙酰胺和毒鼠强标准贮备液，用乙腈配制成氟乙酰胺浓度为5、10、20、30、40μg/ml及毒鼠强0.5、1.0、5.0、10.0、20.0μg/ml的标准系列，以标准浓度为横坐标(X)，氟乙酰胺的以m/z 44的丰度为纵坐标(
)，毒鼠强的以m/z 212 为纵坐标()，进行线性回归。氟乙酰胺和毒鼠强的线性方程及相关系数分别为＝2.745×105X+3.494×104(r=0.9988)，＝4.743×105X-2.36 4×104(r＝0.9974)。
, 百拇医药
2.3 灵敏度
根据3倍的信噪比，氟乙酰胺的最低检出浓度为2μg/ml，进样量1μl，最小检出量为2ng。毒鼠强的最低检出浓度为0.3μg/ml，进样量1μl，最小检出量为0.3ng，运用本法已远远满足中毒样品的测定。
2.4 回收率
按1.4项下的样品量及操作执行，其中分别加入标准氟乙酰胺为10、30μg及标准毒鼠强1.0、10μg，在1.4.3项下加入标准氟乙酰胺为20、40μg及标准毒鼠强2.0、20μg，各回收率如附表所示。
附表 回收率测定 样品
氟乙酰胺
毒鼠强
加入量
, 百拇医药
(μg)
测定量
(μg)
回收率
(%)
加入量
(μg)
测定量
(μg)
回收率
(%)
固体
10
, 百拇医药
9.43
94.30
1.0
0.914
91.40
(毒饵)
30
27.96
93.20
10.0
9.250
92.50
液体
, http://www.100md.com
10
8.43
84.26
1.0
0.852
85.20
(菜汤)
30
24.78
82.60
10.0
8.650
86.50
, 百拇医药
油样
20
10.45
52.25
2.0
1.272
63.60
(植物油)
40
21.36
53.40
20.0
12.37
, 百拇医药
61.85
作者简介：马永建，男，硕士，副主任技师
3 参考文献
1，温玉麟.药物与化学物质毒性数据.天津：天津科技出版社，1989，2 11，416
2，关福玉，刘荫堂，罗毅，等.中毒样品中灭鼠药的分析鉴定与人工炭肾治疗效 果浅评.分析化学，1993，21(4)：452-454
3，关福玉，张亚超，黄绍清，等.血样和尿样中毒鼠强气相色谱测定方法的研究 及其应用.色谱，1993，11(6):333-335
(2000-03-28收稿), 百拇医药
单位：江苏省卫生防疫站，南京 210009
关键词：气相色谱-质谱法；氟乙酰胺；毒鼠强
卫生研究000608 摘要：运用气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定氟乙酰胺及毒鼠强，对其分离条件、提取方法、定性定量方式进行了研究。氟乙酰胺及毒鼠强的线性范围分别为5～40和0.5～20.0μg/ml，2种化合物在不同的样品中(固体、液体、油样)的回收率分别为52.25%～94.30%和61.85%～92.50%。该法快速、灵敏、准确。
中图分类号：R994.6 X839.2 文献标识码：B
文章编号：1000-8020(2000)06-0369-02
Simultaneous determination of fluoroacetamide and
, 百拇医药
tetramethylendisulfotetramin with gas chromatography-
mass spectrography
Ma Yongjian Feng Fang Chen Bei
(Jiangsu Province Health and Anti-epidemic Station, Nanjing 210009, China)
Abstract：Simultaneous determination of fluoroacetamide and tetramethylendisulfotetramin with gas chromatography-mass spectrography was established.The condition of separation, ways of extraction, the qualitative and quantitative determination of two compounds were discussed. The linear ranges of fluoroacetamide and tetramethylendisulfotetramin were 5-40μg/ml and 0.5-20.0μg/ml,respectively. The recoveries of these two compounds in different sample were 52.25%-94.30% and 61.85%-92.50%, respectively. The method was fast, sensitive and accurate.
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Key words:gas chromatography-mass spectrography, fluoroacetamide, tetramethylendisulfotetramin
氟乙酰胺(fluoroacetamide)LD50为15mg/kg(大鼠经口)；毒鼠强(tetramethylendisulfotetramin，简称424)LD50为0.2mg/kg(大鼠经口)[1]。这2种化学物均为剧毒速效的灭鼠药，且无色、无味，拌于大麦、小米、玉米等粮食配成毒饵，在我国不少地方使用，因此，常因投毒或误食这些鼠药毒饵而造成中毒事故。中国农业部、卫生部曾于1982年联合发文严禁使用这些化合物作为杀鼠药，但仍有人使用而造成中毒事件。1998年，江苏省曾有多起投毒案件，经检测均为鼠药，因此为给中毒病人的诊断治疗提供及时可靠的依据，有必要建立一种即时快速的测定这两种化合物的方法。
氟乙酰胺测定方法有化学法、气相色谱(GC)法，化学法因特异性差，常不能准确定性，GC法因需衍生化而耗时较长。毒鼠强的测定方法有GC法[2]和气相色谱-质谱法(GC-MS)法[3]，本文确定了用GC-MS法同时测定这2种化合物，该法具有方便、快速、准确、灵敏等优点，已多次应用于日常样品的检测。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 试剂
毒鼠强标准品为南京市公安局提供(纯度99.97%)，氟乙酰胺标准品为国家公安部提供(纯度99.93%)，三氯甲烷、乙腈均为上海分析仪器厂生产，AR。
1.2 仪器及仪器条件
GC-MS(6890-5973)美国HP公司生产。柱：HP-5MS 5% Phengl Methyl Siloxane 柱长30.0m，内径250μm，膜厚0.25μm。氦气为载气，恒流方式，流速0.5ml/min。程序升温，初始温度45℃，以10℃/min升温到80℃，以25℃/min升温到270℃，维持10min。进样口温度：270℃。进样方式：不分流进样，0.5min后分流。毛细管柱与质谱的接口温度为280℃。进样量1μl。MS四极杆温度150℃。MS离子源温度230℃。质谱延时时间2.5min。EM电压1670.6V。从10～550质量扫描，数据分析采用提取离子方式。My library、NBS、Willery库谱图检索。
, 百拇医药
1.3 标准溶液的配制
准确称取氟乙酰胺及毒鼠强标准品10.0mg，置于10ml容量瓶中，用乙腈配成1.0mg/ml的标准贮备液。
1.4 样品处理
1.4.1 固体样品 取样品(鼠药毒饵)0.05g，置于25ml小烧杯中，分别用丙酮提取3次，每次用6ml丙酮，浸泡10min左右，并不断搅拌，合并丙酮液，过滤，旋转蒸发仪上挥去丙酮，提取物溶于100μl乙腈中，作为供试品。
1.4.2 液体样品 取样品(呕吐物或剩余饭菜)5g，加NaCl固体使之饱和，用乙酸乙酯提取3次，每次用乙酸乙酯20ml，浸泡10min左右，合并乙酸乙酯液，在滤纸上加药棉和无水硫酸钠去水，过滤，旋转蒸发器上挥去乙酸乙酯，提取物溶于100μl乙腈中。
1.4.3 油样 取样品(中毒食油)5g，用甲醇提取3次，每次用甲醇20ml，合并甲醇层，在滤纸上加药棉和无水硫酸钠，过滤，旋转蒸发器上挥去甲醇，用100μl乙腈溶解提取物。
, 百拇医药
2 结果与讨论
2.1 定性
取1μl标准品混合液，进样，tR=3.12为氟乙酰胺，tR＝10.30为毒鼠强。在一般情况下，这2种化合物不会同时出现在同一种试样中，因为一些中毒样品(如呕吐物、剩余饭菜汤等)，往往是样品量少，含量较低。通常仅能为1次测试量。本文的研究意义在于1次实验即能判定为何种化合物。对于中毒样品，如杂质样较多，采用GC-MS/Scan方式后，在m/z 77，44，240，212处运用Extraction ion方式检索，这样根据保留时间和特征离子可排除杂质峰，定性结果准确可靠。m/z 77为氟乙酰胺的分子离子峰，m/z 44为分子离子峰脱去FCH2后的离子碎片峰，这2种m/z为氟乙酰胺的特征离子峰。240为毒鼠强的分子离子峰，212为分子离子峰脱去N-CH2后的离子碎片峰。这2种m/z为毒鼠强分子的特征离子峰。
, 百拇医药
2.2 定量
分别精密吸取氟乙酰胺和毒鼠强标准贮备液，用乙腈配制成氟乙酰胺浓度为5、10、20、30、40μg/ml及毒鼠强0.5、1.0、5.0、10.0、20.0μg/ml的标准系列，以标准浓度为横坐标(X)，氟乙酰胺的以m/z 44的丰度为纵坐标(
)，毒鼠强的以m/z 212 为纵坐标()，进行线性回归。氟乙酰胺和毒鼠强的线性方程及相关系数分别为＝2.745×105X+3.494×104(r=0.9988)，＝4.743×105X-2.36 4×104(r＝0.9974)。, 百拇医药
2.3 灵敏度
根据3倍的信噪比，氟乙酰胺的最低检出浓度为2μg/ml，进样量1μl，最小检出量为2ng。毒鼠强的最低检出浓度为0.3μg/ml，进样量1μl，最小检出量为0.3ng，运用本法已远远满足中毒样品的测定。
2.4 回收率
按1.4项下的样品量及操作执行，其中分别加入标准氟乙酰胺为10、30μg及标准毒鼠强1.0、10μg，在1.4.3项下加入标准氟乙酰胺为20、40μg及标准毒鼠强2.0、20μg，各回收率如附表所示。
附表 回收率测定 样品
氟乙酰胺
毒鼠强
加入量
, 百拇医药
(μg)
测定量
(μg)
回收率
(%)
加入量
(μg)
测定量
(μg)
回收率
(%)
固体
10
, 百拇医药
9.43
94.30
1.0
0.914
91.40
(毒饵)
30
27.96
93.20
10.0
9.250
92.50
液体
, http://www.100md.com
10
8.43
84.26
1.0
0.852
85.20
(菜汤)
30
24.78
82.60
10.0
8.650
86.50
, 百拇医药
油样
20
10.45
52.25
2.0
1.272
63.60
(植物油)
40
21.36
53.40
20.0
12.37
, 百拇医药
61.85
作者简介：马永建，男，硕士，副主任技师
3 参考文献
1，温玉麟.药物与化学物质毒性数据.天津：天津科技出版社，1989，2 11，416
2，关福玉，刘荫堂，罗毅，等.中毒样品中灭鼠药的分析鉴定与人工炭肾治疗效 果浅评.分析化学，1993，21(4)：452-454
3，关福玉，张亚超，黄绍清，等.血样和尿样中毒鼠强气相色谱测定方法的研究 及其应用.色谱，1993，11(6):333-335
(2000-03-28收稿), 百拇医药