微波消解—原子荧光光谱法测定尿硒
作者：贺宝芝 蒋欣 孙维 郭英兰
单位：青岛市卫生防疫站，青岛 26603
关键词：
卫生研究000625
文章编号：1000-8020(2000)06-0408-01
硒是人体不可缺少的微量元素，又是有害元素，在工作场所接触过量，可损害健康。尿硒已被认为是较好的生物监测指标，尿硒的测定方法有2，3-二氨基萘荧光光度法和氢化物发生原子吸收分光光度法，前者操作较繁复，后者灵敏度较低。我们对微波消解—原子荧光光谱法测定尿硒作了规范化研究，现报道如下。
l 实验部分
1.1 仪器和试剂
, http://www.100md.com
XGY-1011A型多功能原子荧光分析仪，MK-1型压力自控微波熔样炉，100g/L铁氰化钾溶液，8g/L硼氢化钠溶液(由2g/L氢氧化钾溶液配制)，2.5μg/ml硒标准溶液(由光谱纯硒配制)。盐酸、硝酸和高氯酸为优级纯。
1.2 样品处理
在聚四氟乙烯内胆中加入2.0ml尿样，加2ml l+4高氯酸—硝酸消解液，置微波炉中，压力控制设定为3MPa，微波功率选择5档；加热5min，自控消解。消解结束后，用6mol/L盐酸溶液4ml将样品转移入具塞刻度试管中，于沸水浴中加热30min，将六价硒还原为四价硒，用去离子水定容至10ml;加入1ml铁氰化钾溶液，摇匀,供测定。
1.3 工作曲线
分别取0.0、0.2、0.4、0.6和0.8ml标准溶液加入到2ml正常人混合尿样中，同样品处理操作，尿硒浓度分别为0、50、100、150和200μg/L。
, 百拇医药
1.4 测定
取2.0ml消解好的标准和样品溶液，置氢化物发生器中，仪器自动加入4ml硼氢化钠溶液；荧光分析仪的测量条件为负高压340V，灯电流80mA，炉温200℃，原子化器高度7cm，载气流速800ml/min，加液时间6s。
2 结果与讨论
2.1 微波消解的回收率和方法精密度
硒是一个易挥发的元素，在消解过程中，容易损失，造成回收率较低。微波消解则可避免挥发。我们取数份正常人尿样，混匀后分为3组，分别加入不同量的硒标准溶液，配制成高、中、低3种浓度的样品，进行6次测定，结果见表1。结果表明：当硒的加入量为50～200μg/L时，其相应的回收率为95.6%～103.1%，得到了满意的回收率。相对标准偏差为1.5%～7.3%。
表1 微波消解回收率和方法的精密度 本底值
, http://www.100md.com
(μg/L)
加硒量
(μg/L)
荧光强度
测得量
(μg/L)
相对标准
偏差(%)
回收率
(%)
98.5
50
532±8
, 百拇医药
141.9± 2.9
1.5
95.6
98.5
100
768±13
204.5±4.3
1.7
103.1
98.5
200
1110±81
295.2±22.4
, 百拇医药
7.3
98.9
2.2 方法的线性范围及最低检出浓度
不同浓度的标准溶液，按标准工作曲线绘制(1.3)，进行6次测定。以荧光强度的均值与对应浓度作直线回归处理，当测定范围在0～400μg/L，回归方程Y=3.77X-2.89，相关系数r＝0.9995。取1μg/L的硒标准溶液，按上法测定12次，计算标准差，以3倍标准差作为检测限，最低检出浓度为0.3μg/L。
2.3 去干扰实验
Cu、Pd、As、Ag、Bi等元素或可被氢还原成氢化物，或相互作用生成硒化物，都会影响硒的测定。为了消除这些元素的干扰，我们试验了在1～6mol/L盐酸溶液介质中，加入1～20mg铁氰化钾，观察消除干扰的作用。结果表明：盐酸浓度为1～6mol/L，铁氰化钾为1～20mg时，都不影响硒的荧光强度。盐酸浓度在7mol/L以上，硒的荧光强度略有降低。本实验选择盐酸浓度为2.4mol/L，铁氰化钾加入量为20mg，在此条件下，Cu<400 μg、Bi<50μg、As<100μg、Sn<500μg、Te<500μg几乎无干扰。盐酸浓度5mol/L、加入铁氰化钾100mg时，可抑制3μg Pd2+的干扰。
, 百拇医药
2.4 样品的保存实验
取接触硒工人混合尿，按100+1比例加入硝酸混匀，置于塑料瓶中，在4℃下保存，于当天、第3、5、7、14天各测定6次，结果见表2。实验表明：尿样酸化后，置于4℃，可保存7天。
表2 样品的保存实验 (n=6) 保存时间
测定值
(μg/L)
回收率
(%)
当天
102.1±3.1
100.0
, 百拇医药
第3天
104.0±2.5
101.9
第5天
100.1±2.4
98.0
第7天
97.9±1.9
95.9
第14天
90.2±2.3
88.3
2.5 应用本法测定了30份人尿样，含硒浓度范围0.065～0.091mg/L。
3 参考文献
1，陈国珍，黄贤智，许金钩，等.荧光分析法 北京：科学出版社，1990，432
2，陈亚华，刘一真.氢化物发生荧光光度法测定微量硒.分析化学，1993，21(1)：102—104
3，线引林.生物材料中有毒物质分析方法手册.北京：人民卫生出版社，1993，108—187
(2000-01-05收稿), 百拇医药
单位：青岛市卫生防疫站，青岛 26603
关键词：
卫生研究000625
文章编号：1000-8020(2000)06-0408-01
硒是人体不可缺少的微量元素，又是有害元素，在工作场所接触过量，可损害健康。尿硒已被认为是较好的生物监测指标，尿硒的测定方法有2，3-二氨基萘荧光光度法和氢化物发生原子吸收分光光度法，前者操作较繁复，后者灵敏度较低。我们对微波消解—原子荧光光谱法测定尿硒作了规范化研究，现报道如下。
l 实验部分
1.1 仪器和试剂
, http://www.100md.com
XGY-1011A型多功能原子荧光分析仪，MK-1型压力自控微波熔样炉，100g/L铁氰化钾溶液，8g/L硼氢化钠溶液(由2g/L氢氧化钾溶液配制)，2.5μg/ml硒标准溶液(由光谱纯硒配制)。盐酸、硝酸和高氯酸为优级纯。
1.2 样品处理
在聚四氟乙烯内胆中加入2.0ml尿样，加2ml l+4高氯酸—硝酸消解液，置微波炉中，压力控制设定为3MPa，微波功率选择5档；加热5min，自控消解。消解结束后，用6mol/L盐酸溶液4ml将样品转移入具塞刻度试管中，于沸水浴中加热30min，将六价硒还原为四价硒，用去离子水定容至10ml;加入1ml铁氰化钾溶液，摇匀,供测定。
1.3 工作曲线
分别取0.0、0.2、0.4、0.6和0.8ml标准溶液加入到2ml正常人混合尿样中，同样品处理操作，尿硒浓度分别为0、50、100、150和200μg/L。
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1.4 测定
取2.0ml消解好的标准和样品溶液，置氢化物发生器中，仪器自动加入4ml硼氢化钠溶液；荧光分析仪的测量条件为负高压340V，灯电流80mA，炉温200℃，原子化器高度7cm，载气流速800ml/min，加液时间6s。
2 结果与讨论
2.1 微波消解的回收率和方法精密度
硒是一个易挥发的元素，在消解过程中，容易损失，造成回收率较低。微波消解则可避免挥发。我们取数份正常人尿样，混匀后分为3组，分别加入不同量的硒标准溶液，配制成高、中、低3种浓度的样品，进行6次测定，结果见表1。结果表明：当硒的加入量为50～200μg/L时，其相应的回收率为95.6%～103.1%，得到了满意的回收率。相对标准偏差为1.5%～7.3%。
表1 微波消解回收率和方法的精密度 本底值
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(μg/L)
加硒量
(μg/L)
荧光强度
测得量
(μg/L)
相对标准
偏差(%)
回收率
(%)
98.5
50
532±8
, 百拇医药
141.9± 2.9
1.5
95.6
98.5
100
768±13
204.5±4.3
1.7
103.1
98.5
200
1110±81
295.2±22.4
, 百拇医药
7.3
98.9
2.2 方法的线性范围及最低检出浓度
不同浓度的标准溶液，按标准工作曲线绘制(1.3)，进行6次测定。以荧光强度的均值与对应浓度作直线回归处理，当测定范围在0～400μg/L，回归方程Y=3.77X-2.89，相关系数r＝0.9995。取1μg/L的硒标准溶液，按上法测定12次，计算标准差，以3倍标准差作为检测限，最低检出浓度为0.3μg/L。
2.3 去干扰实验
Cu、Pd、As、Ag、Bi等元素或可被氢还原成氢化物，或相互作用生成硒化物，都会影响硒的测定。为了消除这些元素的干扰，我们试验了在1～6mol/L盐酸溶液介质中，加入1～20mg铁氰化钾，观察消除干扰的作用。结果表明：盐酸浓度为1～6mol/L，铁氰化钾为1～20mg时，都不影响硒的荧光强度。盐酸浓度在7mol/L以上，硒的荧光强度略有降低。本实验选择盐酸浓度为2.4mol/L，铁氰化钾加入量为20mg，在此条件下，Cu<400 μg、Bi<50μg、As<100μg、Sn<500μg、Te<500μg几乎无干扰。盐酸浓度5mol/L、加入铁氰化钾100mg时，可抑制3μg Pd2+的干扰。
, 百拇医药
2.4 样品的保存实验
取接触硒工人混合尿，按100+1比例加入硝酸混匀，置于塑料瓶中，在4℃下保存，于当天、第3、5、7、14天各测定6次，结果见表2。实验表明：尿样酸化后，置于4℃，可保存7天。
表2 样品的保存实验 (n=6) 保存时间
测定值
(μg/L)
回收率
(%)
当天
102.1±3.1
100.0
, 百拇医药
第3天
104.0±2.5
101.9
第5天
100.1±2.4
98.0
第7天
97.9±1.9
95.9
第14天
90.2±2.3
88.3
2.5 应用本法测定了30份人尿样，含硒浓度范围0.065～0.091mg/L。
3 参考文献
1，陈国珍，黄贤智，许金钩，等.荧光分析法 北京：科学出版社，1990，432
2，陈亚华，刘一真.氢化物发生荧光光度法测定微量硒.分析化学，1993，21(1)：102—104
3，线引林.生物材料中有毒物质分析方法手册.北京：人民卫生出版社，1993，108—187
(2000-01-05收稿), 百拇医药