低浓度CS2接触对血清硒含量的影响的多因素分析△
作者：毕勇毅 孔丹莉 文冠华 阎俊 王红 谭晓东 汪春红 王福元
单位：湖北医科大学卫生学教研室 武汉430071
关键词：二硫化碳；血清硒
数理医药学杂志990423 摘 要 选择工龄在10年以上、年龄在45岁以下的76名CS2作业工人作为接触组；在同一工厂棉浆车间内选择相同年龄和工龄范围、曾经接触过CS2但现在已停止CS2接触5年以上的33名工人作为干预组；从未接触过CS2的23名工人作为对照组。对以上对象进行了流行病学横断面调查表明，接触组SSe含量高于对照组(P=0.0001)。用多元逐步回归分析控制了一些混杂因素后进一步显示，SSe的含量与CS2接触有一定的关系(偏相关系数为-0.2814),且CS2对SSe含量起负贡献(偏回归系数β为-15.5098)，提示低浓度CS2接触可能是SSe含量降低的独立危险因素；干预组SSe含量高于对照组(P=0.008)，提示低浓度CS2接触引起SSe含量的改变可能是不可逆的。
, 百拇医药
微量元素包含在酶和蛋白质之中，构成体内载体及电子传递系统，参与多种酶的合成与激活，或以辅酶的形式存在，调节激素和维生素的代谢，具有重要的生物效应。硒作为人体必需的微量元素之一，与冠心病等心血管疾病之间存在密切联系，已有文献进行了综述[1]。但低浓度CS2接触与血清硒之间关系的研究，国内外尚未见报道。本文主要研究目的是探讨低浓度CS2接触与血清微量元素硒之间的关系，为CS2接触导致心血管疾病的毒作用机理提供依据。
1 材料和方法
1.1 调查对象
以年龄和工龄作为配比因素，采用流行病学频数配比的方法，在湖北省某化纤厂纺丝车间内，选择工龄在10年以上、年龄在45岁以下的CS2作业工人作为接触组，排除2名主要测定指标记录不全者，共76人，年龄37.88±3.14，工龄为18.38±5.88，CS2接触时间为10～25年(17.11±6.11)，其中男性55人，女性21人；在同一工厂棉浆车间内选择相同年龄和工龄范围、从未接触过CS2的工人作为对照组，排除3名主要测定指标记录不全者，共23人，年龄为42.22±2.73，工龄为22.65±5.85，其中男性16人，女性7人；在同一工厂棉浆车间内选择相同年龄和工龄范围、曾经接触过CS2但现在已停止CS2接触5年以上的工人作为干预组，排除1名主要测定指标记录不全者，共33人，年龄为42.06±2.04，工龄为10～28年(22.33±4.86)，CS2接触时间为3～23年(14.55±8.01)，脱离CS2接触时间为5～15年(10.91±6.83)，其中男性22人，女性11人。
, 百拇医药
1.2 微量元素的测定
将血清充分混匀，取0.5ml于三角烧瓶中，加1.0ml混合酸轻轻混匀，将烧瓶置180±10℃电热板上加热消解，待消解样为无色透明且冒白烟时立即取下放冷，再加0.6ml浓盐酸，1ml去离子水，充分混匀放置电热板上继续加热5分钟，取下放冷，将残液转移至10ml比色管中定容至刻度，混匀后用SpectrAA-40原子吸收光谱仪(美国Varian公司)测定硒。
1.3 统计学处理
全部数据资料使用Foxpro2.5建库录入，用SAS 6.12 for wincows进行统计处理。所用统计方法有方差分析、χ2检验、分割χ2检验、Fisher确切概率法、Kruskal-wallis秩和检验、多元协方差分析、两两比较的q检验及多元逐步回归分析。
2 结果
, http://www.100md.com
2.1 三组基线资料的比较
表1显示，三组间除了“年龄”和“工龄”两个因素差别有统计学意义(P<0.05)外，其他因素差别均无统计学意义，提示三组间“年龄”和“工龄”两个因素不均衡，可能是混杂因素。
表1 接触组、干预组与对照组基线资料的比较
接触组(n=76)
干预组(n=33)
对照组(n=23)
统计量值
P值
年龄(岁)
37.88±3.14
, 百拇医药
42.06±2.04
42.22±2.73
9.85(F)
0.0001
性别(男/女)
55/21
22/11
16/7
0.37(χ2)
0.8310
工龄(年)
18.38±5.88
, 百拇医药
22.33±4.86
24.25±5.85
14.26(F)
0.0001
身高(cm)
166.08±7.03
166.09±8.78
164.65±8.23
0.33(F)
0.7217
体重(kg)
62.25±10.57
, http://www.100md.com
62.48±9.81
62.30±9.52
0.01(F)
0.9939
体重指数(kg/m2)
22.51±3.11
22.56±2.38
22.96±2.98
0.22(F)
0.8060
婚姻状况(已婚/未)
, http://www.100md.com 73/3
33/0
23/0
-*
0.7490
文化程度(小/中/大)*
7/64/5
3/28/2
7/15/1
-*
0.1330
吸烟(是/否)
, http://www.100md.com
43/33
15/18
10/13
1.86(χ2)
0.3940
吸烟量(支/周)
58.17±74.26
48.18±61.72
53.48±62.20
0.68(χ2)**
0.7131
, 百拇医药
饮酒(是/否)
52/24
25/8
17/6
0.70(χ2)
0.7040
饮酒量(克/天)
22.89±21.70
22.27±19.89
29.35±26.94
0.95(χ2)**
, http://www.100md.com
0.6234
轮班(是/否)
47/29
19/14
14/9
1.61(χ2)
0.8080
注：* Fisher确切概率法 ** Kruskal-wallis Test(卡方近似法)
2.2 三组间血清硒(SSe)的比较
考虑到三组间“年龄”和“工龄”两个因素不均衡，可能是混杂作用。故拟用“年龄”和“工龄”作为协变量，对SSe进行多元协方差分析，结果见表2。
, 百拇医药
表2显示，三组间血清硒含量差别有统计学意义。进一步用两两比较的q检验发现，接触组、干预组和对照组两两间差别均有统计学意义，对照组血清SSe含量最高，干预组次之，接触组最低。
表2 接触组、干预组与对照组SCu、SZn、SSe、Zn/Cu的比较
接触组(n=76)
干预组(n=33)
对照组(n=23)
F
P
±s
调整±s±s
, 百拇医药
调整±s±s
调整±s
SSe(μg/L)
41.391±23.499
41.846±21.786
56.645±18.005
55.874±21.709
75.669±13.951
, http://www.100md.com
75.272±21.265
25.38
0.0001*
2.3 血清硒的多元逐步回归分析
多元协方差分析虽然不同程度上消除了三组间因“年龄”和“工龄”两种因素不均衡可能引起的混杂偏倚，但并未考虑各种因素间相互作用的影响，无法了解CS2接触对血清硒的单独作用，因此拟在sle=0.15,sls=0.15水平上进行多元逐步回归分析，以进一步明确CS2接触与血清硒之间的关系。结果见表3。表3 血清硒(SSe)含量的多元逐步分析
参数估计值
偏相关系数
, 百拇医药 C(p)
F
P
截距
181.6662
-
-
21.21
0.0001
CS2接触
-1.5098
-0.2814
9.1030
, 百拇医药
24.51
0.0001
文化程度
-10.1168
0.3080
6.0146
5.94
0.0162
体重指数
0.5379
0.3363
2.6205
5.45
, 百拇医药
0.0211
回归方程式为：SSe=181.6662-15.5098 CS2接触-10.1168文化程度+0.5379体重指数
由表3可见，在控制了其它混杂因素的影响后，SSe与CS2接触有一定的关系，偏相关系数为-0.2814，且CS2接触对SSe起负贡献(偏回归系数β为-15.5098)，提示低浓度CS2接触可能是SSe含量降低的独立危险因素。3 讨论
3.1 硒是一种与人体健康密切相关的微量元素，世界卫生组织已将它列为与冠心病有关的微量元素之一加以推荐研究。它是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的重要组成部分，多以硒代半胱氨酸形式存在。GSH-Px是有效的抗氧化酶，能阻断或减轻脂自由基(L00.)所致的脂质过氧化连锁反应。血清硒含量减少时，GSH-Px含量和活性就会降低，从而造成机体细胞抗氧化能力降低，细胞发生氧化性损伤[4]，导致心脏和血管等组织的损害。本研究表明，CS2接触组血清硒含量较对照组低，提示低浓度CS2接触能降低血清硒含量，进而可能造成心血管系统的损害。但CS2引起血清硒含量降低的作用机理尚不清楚，有待进一步探讨。
, 百拇医药
3.2 本研究还发现，接触组、干预组和对照组血清硒含量依次升高，且差别有统计学意义，一方面提示干预措施(脱离CS2接触5年以上)起到了一定的效果，改善劳动卫生工作条件是预防低浓度CS2慢性中毒的有力措施之一。
△ 本课题由比利时ABOS基金(ABOS-13v1346)和湖北省卫生厅科研基金(W98012)资助
参考文献
1 张爱元，杨国钧.硒与冠心病的研究进展.微量元素与健康研究，1995，12(1)：54～55.
2 Salonen JT. Interaction of serum copper, selenium and low density lipoprotein cholesterolin atherogenesis. Br Med, 1991,302:756～761.
3 王菁.CS2作业工人血浆LCAT的测定.职业医学，1996，23(1)：24～26.
4 蒋与刚.微量元素与脂质过氧化的关系.微量元素与健康研究，1996，13(3)：54～56.
收稿日期：1999-03-10, http://www.100md.com
单位：湖北医科大学卫生学教研室 武汉430071
关键词：二硫化碳；血清硒
数理医药学杂志990423 摘 要 选择工龄在10年以上、年龄在45岁以下的76名CS2作业工人作为接触组；在同一工厂棉浆车间内选择相同年龄和工龄范围、曾经接触过CS2但现在已停止CS2接触5年以上的33名工人作为干预组；从未接触过CS2的23名工人作为对照组。对以上对象进行了流行病学横断面调查表明，接触组SSe含量高于对照组(P=0.0001)。用多元逐步回归分析控制了一些混杂因素后进一步显示，SSe的含量与CS2接触有一定的关系(偏相关系数为-0.2814),且CS2对SSe含量起负贡献(偏回归系数β为-15.5098)，提示低浓度CS2接触可能是SSe含量降低的独立危险因素；干预组SSe含量高于对照组(P=0.008)，提示低浓度CS2接触引起SSe含量的改变可能是不可逆的。
, 百拇医药
微量元素包含在酶和蛋白质之中，构成体内载体及电子传递系统，参与多种酶的合成与激活，或以辅酶的形式存在，调节激素和维生素的代谢，具有重要的生物效应。硒作为人体必需的微量元素之一，与冠心病等心血管疾病之间存在密切联系，已有文献进行了综述[1]。但低浓度CS2接触与血清硒之间关系的研究，国内外尚未见报道。本文主要研究目的是探讨低浓度CS2接触与血清微量元素硒之间的关系，为CS2接触导致心血管疾病的毒作用机理提供依据。
1 材料和方法
1.1 调查对象
以年龄和工龄作为配比因素，采用流行病学频数配比的方法，在湖北省某化纤厂纺丝车间内，选择工龄在10年以上、年龄在45岁以下的CS2作业工人作为接触组，排除2名主要测定指标记录不全者，共76人，年龄37.88±3.14，工龄为18.38±5.88，CS2接触时间为10～25年(17.11±6.11)，其中男性55人，女性21人；在同一工厂棉浆车间内选择相同年龄和工龄范围、从未接触过CS2的工人作为对照组，排除3名主要测定指标记录不全者，共23人，年龄为42.22±2.73，工龄为22.65±5.85，其中男性16人，女性7人；在同一工厂棉浆车间内选择相同年龄和工龄范围、曾经接触过CS2但现在已停止CS2接触5年以上的工人作为干预组，排除1名主要测定指标记录不全者，共33人，年龄为42.06±2.04，工龄为10～28年(22.33±4.86)，CS2接触时间为3～23年(14.55±8.01)，脱离CS2接触时间为5～15年(10.91±6.83)，其中男性22人，女性11人。
, 百拇医药
1.2 微量元素的测定
将血清充分混匀，取0.5ml于三角烧瓶中，加1.0ml混合酸轻轻混匀，将烧瓶置180±10℃电热板上加热消解，待消解样为无色透明且冒白烟时立即取下放冷，再加0.6ml浓盐酸，1ml去离子水，充分混匀放置电热板上继续加热5分钟，取下放冷，将残液转移至10ml比色管中定容至刻度，混匀后用SpectrAA-40原子吸收光谱仪(美国Varian公司)测定硒。
1.3 统计学处理
全部数据资料使用Foxpro2.5建库录入，用SAS 6.12 for wincows进行统计处理。所用统计方法有方差分析、χ2检验、分割χ2检验、Fisher确切概率法、Kruskal-wallis秩和检验、多元协方差分析、两两比较的q检验及多元逐步回归分析。
2 结果
, http://www.100md.com
2.1 三组基线资料的比较
表1显示，三组间除了“年龄”和“工龄”两个因素差别有统计学意义(P<0.05)外，其他因素差别均无统计学意义，提示三组间“年龄”和“工龄”两个因素不均衡，可能是混杂因素。
表1 接触组、干预组与对照组基线资料的比较
接触组(n=76)
干预组(n=33)
对照组(n=23)
统计量值
P值
年龄(岁)
37.88±3.14
, 百拇医药
42.06±2.04
42.22±2.73
9.85(F)
0.0001
性别(男/女)
55/21
22/11
16/7
0.37(χ2)
0.8310
工龄(年)
18.38±5.88
, 百拇医药
22.33±4.86
24.25±5.85
14.26(F)
0.0001
身高(cm)
166.08±7.03
166.09±8.78
164.65±8.23
0.33(F)
0.7217
体重(kg)
62.25±10.57
, http://www.100md.com
62.48±9.81
62.30±9.52
0.01(F)
0.9939
体重指数(kg/m2)
22.51±3.11
22.56±2.38
22.96±2.98
0.22(F)
0.8060
婚姻状况(已婚/未)
, http://www.100md.com 73/3
33/0
23/0
-*
0.7490
文化程度(小/中/大)*
7/64/5
3/28/2
7/15/1
-*
0.1330
吸烟(是/否)
, http://www.100md.com
43/33
15/18
10/13
1.86(χ2)
0.3940
吸烟量(支/周)
58.17±74.26
48.18±61.72
53.48±62.20
0.68(χ2)**
0.7131
, 百拇医药
饮酒(是/否)
52/24
25/8
17/6
0.70(χ2)
0.7040
饮酒量(克/天)
22.89±21.70
22.27±19.89
29.35±26.94
0.95(χ2)**
, http://www.100md.com
0.6234
轮班(是/否)
47/29
19/14
14/9
1.61(χ2)
0.8080
注：* Fisher确切概率法 ** Kruskal-wallis Test(卡方近似法)
2.2 三组间血清硒(SSe)的比较
考虑到三组间“年龄”和“工龄”两个因素不均衡，可能是混杂作用。故拟用“年龄”和“工龄”作为协变量，对SSe进行多元协方差分析，结果见表2。
, 百拇医药
表2显示，三组间血清硒含量差别有统计学意义。进一步用两两比较的q检验发现，接触组、干预组和对照组两两间差别均有统计学意义，对照组血清SSe含量最高，干预组次之，接触组最低。
表2 接触组、干预组与对照组SCu、SZn、SSe、Zn/Cu的比较
接触组(n=76)
干预组(n=33)
对照组(n=23)
F
P
±s调整
±s±s, 百拇医药
调整
±s±s调整
±sSSe(μg/L)
41.391±23.499
41.846±21.786
56.645±18.005
55.874±21.709
75.669±13.951
, http://www.100md.com
75.272±21.265
25.38
0.0001*
2.3 血清硒的多元逐步回归分析
多元协方差分析虽然不同程度上消除了三组间因“年龄”和“工龄”两种因素不均衡可能引起的混杂偏倚，但并未考虑各种因素间相互作用的影响，无法了解CS2接触对血清硒的单独作用，因此拟在sle=0.15,sls=0.15水平上进行多元逐步回归分析，以进一步明确CS2接触与血清硒之间的关系。结果见表3。表3 血清硒(SSe)含量的多元逐步分析
参数估计值
偏相关系数
, 百拇医药 C(p)
F
P
截距
181.6662
-
-
21.21
0.0001
CS2接触
-1.5098
-0.2814
9.1030
, 百拇医药
24.51
0.0001
文化程度
-10.1168
0.3080
6.0146
5.94
0.0162
体重指数
0.5379
0.3363
2.6205
5.45
, 百拇医药
0.0211
回归方程式为：SSe=181.6662-15.5098 CS2接触-10.1168文化程度+0.5379体重指数
由表3可见，在控制了其它混杂因素的影响后，SSe与CS2接触有一定的关系，偏相关系数为-0.2814，且CS2接触对SSe起负贡献(偏回归系数β为-15.5098)，提示低浓度CS2接触可能是SSe含量降低的独立危险因素。3 讨论
3.1 硒是一种与人体健康密切相关的微量元素，世界卫生组织已将它列为与冠心病有关的微量元素之一加以推荐研究。它是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的重要组成部分，多以硒代半胱氨酸形式存在。GSH-Px是有效的抗氧化酶，能阻断或减轻脂自由基(L00.)所致的脂质过氧化连锁反应。血清硒含量减少时，GSH-Px含量和活性就会降低，从而造成机体细胞抗氧化能力降低，细胞发生氧化性损伤[4]，导致心脏和血管等组织的损害。本研究表明，CS2接触组血清硒含量较对照组低，提示低浓度CS2接触能降低血清硒含量，进而可能造成心血管系统的损害。但CS2引起血清硒含量降低的作用机理尚不清楚，有待进一步探讨。
, 百拇医药
3.2 本研究还发现，接触组、干预组和对照组血清硒含量依次升高，且差别有统计学意义，一方面提示干预措施(脱离CS2接触5年以上)起到了一定的效果，改善劳动卫生工作条件是预防低浓度CS2慢性中毒的有力措施之一。
△ 本课题由比利时ABOS基金(ABOS-13v1346)和湖北省卫生厅科研基金(W98012)资助
参考文献
1 张爱元，杨国钧.硒与冠心病的研究进展.微量元素与健康研究，1995，12(1)：54～55.
2 Salonen JT. Interaction of serum copper, selenium and low density lipoprotein cholesterolin atherogenesis. Br Med, 1991,302:756～761.
3 王菁.CS2作业工人血浆LCAT的测定.职业医学，1996，23(1)：24～26.
4 蒋与刚.微量元素与脂质过氧化的关系.微量元素与健康研究，1996，13(3)：54～56.
收稿日期：1999-03-10, http://www.100md.com