全血细胞分析中不同浓度的EDTA-K3对红细胞体积的影响
作者：廖国林 刘宗玉 高国望
单位：廖国林(中国一冶医院检验科 武汉430081)；刘宗玉(中国一冶医院检验科 武汉430081)；高国望(中国一冶医院检验科 武汉430081)
关键词：全血细胞分析；EDTA-K3；红细胞体积
数理医药学杂志000350
摘 要 为研究全血细胞分析中不同浓度的乙二胺四乙酸三钾(EDTA-K3)对红细胞体积的影响，抽取健康受检者静脉血分别注入不同浓度的EDTA-K3溶液6组各组小管中，每小管100ul，使各小管中EDTA-K3的浓度分别为1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、2.6mg/ml。测定未凝血组小管中的平均红细胞体积(MCV)和红细胞压积(Hct)，并对其数据进行t检验。结果显示，1.8～2.0mg/ml的EDTA-K3用于全血细胞分析对红细胞体积影响最小。
, 百拇医药
MCV Hct
中图分类号：R 446.11+3 文献标识码：A
文章编号：1004-4337(2000)03-0270-01
全血细胞分析中，最好使用EDTA的钾盐作抗凝剂[1]。因为EDTA是医学检验中最常用和最重要的抗凝剂之一，其对血细胞形态影响很小，适用于全血细胞分析。EDTA盐抗凝血液的机制是通过与血液中的Ca2+形成稳定的螯合物，而阻止血液凝固。国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年文件建议，血细胞分析应用EDTA-K3或EDTA-K2为抗凝剂。而EDTA-K3比EDTA-K2的螯合性好，故我院用EDTA-K3作抗凝剂。为了探讨EDTA-K3的最佳抗凝浓度，我们用MS-9全自动数字血细胞分析仪观察了不同浓度的EDTA-K3对红细胞体积的影响，现报道如下。
, 百拇医药
1 资料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 1999年3月至1999年7月来我院的健康受检者100名，男女各半，年龄18～50岁。
1.1.2 仪器及试剂 MS-9全自动数字血细胞分析仪(以下简称MS-9)及其配套试剂。
1.2 研究方法
1.2.1 试验前用四川通广制剂公司提供的全血质控物对MS-9进行调试，结果显示，质控物均值、标准差、变异系数均在质控物范围内。
1.2.2 用分析天平准确称取4.00g EDTA-K3，用蒸馏水溶解，加入100ml容量瓶中，再加蒸馏水
至100ml刻度处混匀，配制成40g/L的EDTA-K3溶液。用微量加样器分别取其4ul、4.5ul、5ul、5.5ul、6ul、6.5ul加入子弹头塑料管中，每份各100管，使之成为6组不同体积的EDTA-K3溶液，经60℃烘干备用。
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1.2.3 抽取健康受检者的静脉血1ml，分别加入各组EDTA-K3的子弹头塑料管中，每管100ul，立即充分混匀1～2分钟，则各管血中EDTA-K3浓度分别为1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、2.6mg/ml，将未凝血组标本用MS-9进行检测，并记录MCV和Hct结果。
1.2.4 统计学处理采用t检验。
2 结果
2.1 1.6mg/ml组100个标本有8个轻微凝血，该组未进行检测。其它组无1例凝血。
2.2 未凝血各组MCV、Hct结果见表1。
表1 未凝血各组MCV、Hct结果(
±S) 组别(mg/ml)
, 百拇医药
例数
MCV(fl)
Hct
1.8(1)
100
85.4±6.4
0.408±0.057
2.0(2)
100
85.8±6.2
0.410±0.056
2.2(3)
, 百拇医药
100
87.6±6.2
0.427±0.056
2.4(4)
100
88.4±6.3
0.430±0.056
2.6(5)
100
88.1±6.4
0.429±0.057
(1)与(2)比较无显著性差异(P>0.05);(1)、(2)组与(3)、(4)、(5)组间比较有显著性差异(P<0.05)；(3)、(4)、(5)三组间比较无显著性差异(P>0.05)。3 讨论
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3.1 1.6mg/ml组有8个轻微凝血，而1.8～2.6mg/ml各组无1例凝血，说明1.8mg/ml这个抗凝比例已达到抗凝效果，且随着抗凝剂浓度增加，所测MCV、Hct有递增的趋势，而后变化趋于平稳。
3.2 MCV随着EDTA-K3的浓度增加而发生改变，主要是由于EDTA-K3的浓度增加造成抗凝血标本的渗透压相应升高，致使抗凝血红细胞停留在一个高渗环境中，细胞内水分子与细胞外溶质相互交换，使红细胞内渗透压随之升高。用MS-9分析测定时，稀释液水份渗入细胞内，使之体积增大[2]。细胞内渗 透压越高，细胞体积增长越大。
3.3 全血细胞分析所用抗凝剂的浓度，既要达到抗凝效果，又不能对血细胞内渗透压造成很大影响。1.8～2.6mg/ml的EDTA-K3虽然都具有抗凝效果，但1.8～2.0mg/ml的EDTA-K3比2.2～2.6mg/ml的EDTA-K3的渗透压低，故1.8～2.0mg/ml的EDTA-K3对红细胞体积影响最小。
3.4 MS-9属电阻型分析仪，其所测Hct是由MCV计算所得。因此，随MCV升高，Hct呈相关性升高。
参考文献
1，俞善丁主编.临床基础检验学.北京：人民卫生出版社，1997，24.
2，丁颖，王正芳，丛玉隆.血液保存温度和时间对激光法检测红细胞系统参数的影响.临床检验杂志，1996，14(3)：150.
收稿日期：1999-10-30, http://www.100md.com
单位：廖国林(中国一冶医院检验科 武汉430081)；刘宗玉(中国一冶医院检验科 武汉430081)；高国望(中国一冶医院检验科 武汉430081)
关键词：全血细胞分析；EDTA-K3；红细胞体积
数理医药学杂志000350
摘 要 为研究全血细胞分析中不同浓度的乙二胺四乙酸三钾(EDTA-K3)对红细胞体积的影响，抽取健康受检者静脉血分别注入不同浓度的EDTA-K3溶液6组各组小管中，每小管100ul，使各小管中EDTA-K3的浓度分别为1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、2.6mg/ml。测定未凝血组小管中的平均红细胞体积(MCV)和红细胞压积(Hct)，并对其数据进行t检验。结果显示，1.8～2.0mg/ml的EDTA-K3用于全血细胞分析对红细胞体积影响最小。
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MCV Hct
中图分类号：R 446.11+3 文献标识码：A
文章编号：1004-4337(2000)03-0270-01
全血细胞分析中，最好使用EDTA的钾盐作抗凝剂[1]。因为EDTA是医学检验中最常用和最重要的抗凝剂之一，其对血细胞形态影响很小，适用于全血细胞分析。EDTA盐抗凝血液的机制是通过与血液中的Ca2+形成稳定的螯合物，而阻止血液凝固。国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年文件建议，血细胞分析应用EDTA-K3或EDTA-K2为抗凝剂。而EDTA-K3比EDTA-K2的螯合性好，故我院用EDTA-K3作抗凝剂。为了探讨EDTA-K3的最佳抗凝浓度，我们用MS-9全自动数字血细胞分析仪观察了不同浓度的EDTA-K3对红细胞体积的影响，现报道如下。
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1 资料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 1999年3月至1999年7月来我院的健康受检者100名，男女各半，年龄18～50岁。
1.1.2 仪器及试剂 MS-9全自动数字血细胞分析仪(以下简称MS-9)及其配套试剂。
1.2 研究方法
1.2.1 试验前用四川通广制剂公司提供的全血质控物对MS-9进行调试，结果显示，质控物均值、标准差、变异系数均在质控物范围内。
1.2.2 用分析天平准确称取4.00g EDTA-K3，用蒸馏水溶解，加入100ml容量瓶中，再加蒸馏水
至100ml刻度处混匀，配制成40g/L的EDTA-K3溶液。用微量加样器分别取其4ul、4.5ul、5ul、5.5ul、6ul、6.5ul加入子弹头塑料管中，每份各100管，使之成为6组不同体积的EDTA-K3溶液，经60℃烘干备用。
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1.2.3 抽取健康受检者的静脉血1ml，分别加入各组EDTA-K3的子弹头塑料管中，每管100ul，立即充分混匀1～2分钟，则各管血中EDTA-K3浓度分别为1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、2.6mg/ml，将未凝血组标本用MS-9进行检测，并记录MCV和Hct结果。
1.2.4 统计学处理采用t检验。
2 结果
2.1 1.6mg/ml组100个标本有8个轻微凝血，该组未进行检测。其它组无1例凝血。
2.2 未凝血各组MCV、Hct结果见表1。
表1 未凝血各组MCV、Hct结果(
±S) 组别(mg/ml), 百拇医药
例数
MCV(fl)
Hct
1.8(1)
100
85.4±6.4
0.408±0.057
2.0(2)
100
85.8±6.2
0.410±0.056
2.2(3)
, 百拇医药
100
87.6±6.2
0.427±0.056
2.4(4)
100
88.4±6.3
0.430±0.056
2.6(5)
100
88.1±6.4
0.429±0.057
(1)与(2)比较无显著性差异(P>0.05);(1)、(2)组与(3)、(4)、(5)组间比较有显著性差异(P<0.05)；(3)、(4)、(5)三组间比较无显著性差异(P>0.05)。3 讨论
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3.1 1.6mg/ml组有8个轻微凝血，而1.8～2.6mg/ml各组无1例凝血，说明1.8mg/ml这个抗凝比例已达到抗凝效果，且随着抗凝剂浓度增加，所测MCV、Hct有递增的趋势，而后变化趋于平稳。
3.2 MCV随着EDTA-K3的浓度增加而发生改变，主要是由于EDTA-K3的浓度增加造成抗凝血标本的渗透压相应升高，致使抗凝血红细胞停留在一个高渗环境中，细胞内水分子与细胞外溶质相互交换，使红细胞内渗透压随之升高。用MS-9分析测定时，稀释液水份渗入细胞内，使之体积增大[2]。细胞内渗 透压越高，细胞体积增长越大。
3.3 全血细胞分析所用抗凝剂的浓度，既要达到抗凝效果，又不能对血细胞内渗透压造成很大影响。1.8～2.6mg/ml的EDTA-K3虽然都具有抗凝效果，但1.8～2.0mg/ml的EDTA-K3比2.2～2.6mg/ml的EDTA-K3的渗透压低，故1.8～2.0mg/ml的EDTA-K3对红细胞体积影响最小。
3.4 MS-9属电阻型分析仪，其所测Hct是由MCV计算所得。因此，随MCV升高，Hct呈相关性升高。
参考文献
1，俞善丁主编.临床基础检验学.北京：人民卫生出版社，1997，24.
2，丁颖，王正芳，丛玉隆.血液保存温度和时间对激光法检测红细胞系统参数的影响.临床检验杂志，1996，14(3)：150.
收稿日期：1999-10-30, http://www.100md.com