喉鳞癌p21和p53蛋白表达及临床意义
作者：邹桂华 李静 熊华淇 吴绮明 温寿青 杨惠娴
单位：邹桂华(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；李静(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；温寿青(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；杨惠娴(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；熊华淇(江西医学院病理教研室)；吴绮明(江西医学院病理教研室)
关键词：
临床耳鼻咽喉科杂志000313 本研究采用免疫组化法, 观察p21和p53癌基因产物在不同部位、不同临床分期和不同细胞分化及有随访资料的喉鳞癌(LSC)中的表达情况, 以探讨LSC发生过程中癌基因的表达规律及与预后的关系。
1 材料和方法
1.1 材料来源
, http://www.100md.com
全部组织选自本院病理科1987～1996年有完整随访资料的手术标本组织蜡块。LSC患者59例, 男53例, 女6例；年龄35～82岁,平均59岁。按UICC (1987)标准, 声门上型3例, 声门型54例,声门下型2例; Ⅰ期 16例, Ⅱ期14例,Ⅲ期12例, Ⅳ期17例。按组织学中所见肿瘤的分化程度将其分为三级：Ⅰ级为高分化20例,Ⅱ级为中度分化30例,Ⅲ级为低分化9例, 均为鳞状细胞癌, 其中有淋巴结转移者21例, 术后随访3年内死亡19例。另取6例喉正常组织作对照。
1.2 检测方法
所有标本经石蜡包埋, 厚4μm切片除作HE染色外,采用LSAB染色，显示p53及ras癌基因蛋白产物p21。上述试剂购自DAKO公司, 染色时用已知p53、p21阳性的乳腺癌病例作阳性对照, 用PBS替代一抗作阴性对照。阳性细胞判断标准: 根据p21、p53基因表达的定位, 细胞膜和(或)细胞浆与细胞核中呈现棕黄色颗粒为阳性标记。参考 Shimizu方法, 按染色范围及强度判断染色结果。先在高倍镜下对细胞内反应作如下评分:第1次按着色深浅评分：未着色为0, 浅着色为1, 深着色为2;第2次按着色范围评分：未着色为0, 着色范围小于1/3为1, 着色范围大于1/3为2, 弥漫着色为3; 两次相加大于3为阳性。结果行统计学χ2检验。
, 百拇医药
2 结果
6例正常喉组织中p21和p53蛋白的表达均为阴性，59例LSC组织中p21和p53的阳性率分别为61.0%和67.8%。p21的阳性物质主要存在于肿瘤细胞的胞膜上和胞浆中, 而p53蛋白的阳性产物主要见于细胞核内, 正常喉组织中两种蛋白表达均为阴性。
p21和p53蛋白阳性表达与LSC的临床和病理的关系见表1。
表1 p21、p53蛋白阳性表达与LSC的临床和病理的关系 项目
例数
p21阳性表达
p53阳性表达
例数
%
, http://www.100md.com
例数
%
年龄
≤50
21
16
76.2
17
81.0
>50
38
20
52.6
, 百拇医药 23
60.5
性别
男
53
33
62.3
35
66.0
女
6
3
50.0
5
, 百拇医药
83.3
部位
声门上型
3
2
66.7
2
66.7
声门型
54
32
59.3
36
, http://www.100md.com 66.7
声门下型
2
2
100.0
2
100.0
临床分期
Ⅰ+Ⅱ
30
14
46.7
16
, http://www.100md.com 53.3
Ⅲ+Ⅳ
29
22
75.9
24
82.8
细胞分化
Ⅰ级
20
8
40.0
10
50.0
, http://www.100md.com
Ⅱ级
30
20
66.7
21
70.0
Ⅲ级
9
8
88.9
9
100.0
淋巴结转移
, http://www.100md.com 无
38
22
57.9
22
57.9
有
21
14
66.7
18
85.7
术后生存
>3年
, http://www.100md.com
40
22
55.0
22
55.0
≤3年
19
14
73.7
18
94.7
表中可见，p21和p53蛋白的表达在低分化LSC中明显强于高分化者(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ期癌细胞中的表达显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05)。p21、p53的表达与年龄、性别和部位均无关。
, 百拇医药
p53蛋白在有颈部淋巴结转移的LSC中阳性率显著高于无颈部转移者(P<0.05), 且p53蛋白表达的高低与术后生存时间有关, 术后生存时间≤3年组其p53 蛋白表达显著高于>3年的患者(P<0.01), 而p21 的表达与颈部淋巴结转移和临床预后无关(P>0.05)。
3 讨论
p21蛋白为ras癌基因的编码产物, 位于细胞膜的内面, 是细胞浆内参与跨膜信号传递的重要物质, 对细胞的生长剌激起调节作用。当ras基因发生扩增和突变时细胞就持续生长, 从而导致细胞癌变。本研究的结果显示p21蛋白在LSC中的表达与肿瘤细胞的分化程度和临床分期有关,其结果与文献报道一致。但与有无颈部淋巴结转移和术后3年生存率之间无关, 提示p21 蛋白可作为LSC分化程度和临床分期的参考指标。
p53是肿瘤抑制基因的产物, 参与细胞生长的负调节，一般免疫组化难以检测到半衰期很短的野生型的p53蛋白, 检出者多为半衰期较长的突变型p53。本研究结果显示, p53蛋白的表达不仅随LSC分级的增加而增强, 且与临床的分期有关；其表达与颈部淋巴结转移和临床预后有关。其结果与文献报道的结果相一致。表明p53不仅与LSC的生物学行为关系密切, 还可以作为判断患者临床预后的一个重要的标志物。
收稿日期：1999-03-22, 百拇医药
单位：邹桂华(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；李静(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；温寿青(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；杨惠娴(深圳市宝安人民医院病理科 广东深圳，518101)；熊华淇(江西医学院病理教研室)；吴绮明(江西医学院病理教研室)
关键词：
临床耳鼻咽喉科杂志000313 本研究采用免疫组化法, 观察p21和p53癌基因产物在不同部位、不同临床分期和不同细胞分化及有随访资料的喉鳞癌(LSC)中的表达情况, 以探讨LSC发生过程中癌基因的表达规律及与预后的关系。
1 材料和方法
1.1 材料来源
, http://www.100md.com
全部组织选自本院病理科1987～1996年有完整随访资料的手术标本组织蜡块。LSC患者59例, 男53例, 女6例；年龄35～82岁,平均59岁。按UICC (1987)标准, 声门上型3例, 声门型54例,声门下型2例; Ⅰ期 16例, Ⅱ期14例,Ⅲ期12例, Ⅳ期17例。按组织学中所见肿瘤的分化程度将其分为三级：Ⅰ级为高分化20例,Ⅱ级为中度分化30例,Ⅲ级为低分化9例, 均为鳞状细胞癌, 其中有淋巴结转移者21例, 术后随访3年内死亡19例。另取6例喉正常组织作对照。
1.2 检测方法
所有标本经石蜡包埋, 厚4μm切片除作HE染色外,采用LSAB染色，显示p53及ras癌基因蛋白产物p21。上述试剂购自DAKO公司, 染色时用已知p53、p21阳性的乳腺癌病例作阳性对照, 用PBS替代一抗作阴性对照。阳性细胞判断标准: 根据p21、p53基因表达的定位, 细胞膜和(或)细胞浆与细胞核中呈现棕黄色颗粒为阳性标记。参考 Shimizu方法, 按染色范围及强度判断染色结果。先在高倍镜下对细胞内反应作如下评分:第1次按着色深浅评分：未着色为0, 浅着色为1, 深着色为2;第2次按着色范围评分：未着色为0, 着色范围小于1/3为1, 着色范围大于1/3为2, 弥漫着色为3; 两次相加大于3为阳性。结果行统计学χ2检验。
, 百拇医药
2 结果
6例正常喉组织中p21和p53蛋白的表达均为阴性，59例LSC组织中p21和p53的阳性率分别为61.0%和67.8%。p21的阳性物质主要存在于肿瘤细胞的胞膜上和胞浆中, 而p53蛋白的阳性产物主要见于细胞核内, 正常喉组织中两种蛋白表达均为阴性。
p21和p53蛋白阳性表达与LSC的临床和病理的关系见表1。
表1 p21、p53蛋白阳性表达与LSC的临床和病理的关系 项目
例数
p21阳性表达
p53阳性表达
例数
%
, http://www.100md.com
例数
%
年龄
≤50
21
16
76.2
17
81.0
>50
38
20
52.6
, 百拇医药 23
60.5
性别
男
53
33
62.3
35
66.0
女
6
3
50.0
5
, 百拇医药
83.3
部位
声门上型
3
2
66.7
2
66.7
声门型
54
32
59.3
36
, http://www.100md.com 66.7
声门下型
2
2
100.0
2
100.0
临床分期
Ⅰ+Ⅱ
30
14
46.7
16
, http://www.100md.com 53.3
Ⅲ+Ⅳ
29
22
75.9
24
82.8
细胞分化
Ⅰ级
20
8
40.0
10
50.0
, http://www.100md.com
Ⅱ级
30
20
66.7
21
70.0
Ⅲ级
9
8
88.9
9
100.0
淋巴结转移
, http://www.100md.com 无
38
22
57.9
22
57.9
有
21
14
66.7
18
85.7
术后生存
>3年
, http://www.100md.com
40
22
55.0
22
55.0
≤3年
19
14
73.7
18
94.7
表中可见，p21和p53蛋白的表达在低分化LSC中明显强于高分化者(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ期癌细胞中的表达显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05)。p21、p53的表达与年龄、性别和部位均无关。
, 百拇医药
p53蛋白在有颈部淋巴结转移的LSC中阳性率显著高于无颈部转移者(P<0.05), 且p53蛋白表达的高低与术后生存时间有关, 术后生存时间≤3年组其p53 蛋白表达显著高于>3年的患者(P<0.01), 而p21 的表达与颈部淋巴结转移和临床预后无关(P>0.05)。
3 讨论
p21蛋白为ras癌基因的编码产物, 位于细胞膜的内面, 是细胞浆内参与跨膜信号传递的重要物质, 对细胞的生长剌激起调节作用。当ras基因发生扩增和突变时细胞就持续生长, 从而导致细胞癌变。本研究的结果显示p21蛋白在LSC中的表达与肿瘤细胞的分化程度和临床分期有关,其结果与文献报道一致。但与有无颈部淋巴结转移和术后3年生存率之间无关, 提示p21 蛋白可作为LSC分化程度和临床分期的参考指标。
p53是肿瘤抑制基因的产物, 参与细胞生长的负调节，一般免疫组化难以检测到半衰期很短的野生型的p53蛋白, 检出者多为半衰期较长的突变型p53。本研究结果显示, p53蛋白的表达不仅随LSC分级的增加而增强, 且与临床的分期有关；其表达与颈部淋巴结转移和临床预后有关。其结果与文献报道的结果相一致。表明p53不仅与LSC的生物学行为关系密切, 还可以作为判断患者临床预后的一个重要的标志物。
收稿日期：1999-03-22, 百拇医药