32P的无闪烁液测量法研究
作者：刘秀琴 徐学群
单位：中山医科大学实验核医学教研室； 广东 广州 510089
关键词：磷放射性同位素；闪烁计数；方法
中山医科大学学报000119
摘要：目的 探索一种快速，准确且无污染废液的32P放射性测量的方法。方法根据契伦科夫辐射(Cerenkov Radiation)的原理，对各种有闪烁液和无闪烁液测量介质和测量条件进行对比实验研究。结果 ① 无闪烁液的测量效率包括水溶液、空气和滤膜，分别是闪烁液测量的80%、67%和60%；② 经闪烁液处理的塑料杯测量32P的效率最高，一般的塑料杯和玻璃塑料杯分别是闪烁塑料杯的69%和50%，③ 水溶液样品的体积(从30 uL～10 mL)对测量结果没有明显的影响(P>0.05)。结论 闪烁塑料杯的“干式”测量32P，可得最高的探测效率，并能重复使用。
, 百拇医药
分类号： R 817.1 文献标识码：A
文章编号：1000-257X(2000)01-0063-03
The Investigation of Non-scintillation Liquid Counting on 32P
LIU Xiu-qin(Department of Experimental Nuclear Medicine, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou, 510089, China)
XU Xue-qun(Department of Experimental Nuclear Medicine, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou, 510089, China)
, 百拇医药
Abstract：Objective Investigate a rapid、accurate method of scintillation and non-scintillation liquid on counting the radioactivity of 32 P. Methods According to the theory of Cerenkov radiation, different counting medium and condition on 32 P were studied. Results ① In different counting medium, the counting efficiency of non-scintillation liquid in water, air and filter paper were 84%,67% and 60% of the scintillation liquid efficiency respectively.② Different vials: The plastic vials dealed with scintillation liquid had the highest counting efficiency, while the ordinary plastic and glass vials were 69% and 50% respectly. ③ The volume of samples (from 30 uL to 10 mL): the counting results of the samples of defferent volume were not significant change (P>0.05).Conclusion The “dry” counting of 32 P by plastic vials dealed with scintillation liquid can obtain the highest counting efficiency, and can be used repeatly.
, 百拇医药
Key words：phosphorus radioisotopes; scintillation counting/methos▲
在生命科学，特别是在分子生物学的研究中， 32 P是最常用的放射性示踪核素。 32 P的测量，常规的方法是放射自显影法和液体闪烁计数法，前者较为直观，不但能了解32P的分布，且能定量，但比较费时，显像和定量都比较麻烦；后者的定量比较容易，效率很高，速度也很快，其准确性，灵敏度，重复性均令人满意，但闪烁液的费用较高，尤其是测量完后的含 32 P的闪烁液的处理，至今仍是一个难题。本研究根据契伦科夫辐射的原理[1，2]，在不用闪烁液的情况下，对各种测量条件进行了研究，并和一般的闪烁测定结果进行了对比。
1 材料和方法
1.1 试 剂
, 百拇医药
闪烁液配方：PPO∶5 g，POPOP∶25 g，溶于1 000 mL二甲苯。
1.2 闪烁塑料杯
塑料杯装满闪烁液，放置48 h后倒出，室温干燥。
1.3 测量仪器
液体闪烁计数器，FJ-2107G，西安二六二厂。按厂家调试条件进行积分测量。
1.4 闪烁液测量法与无闪烁液测量法结果的比较
样品：32P-ATP。 30 μL(以下同)。容器：玻璃闪烁杯。测量的介质：①闪烁液5 mL，无水乙醇2 mL，完全均相；②H2O 5 mL；③空气；④9999型纤维滤膜(两层)。分别测量样品的每分钟计数(cpm)。
, http://www.100md.com
1.5 不同容器对测量结果的影响
30 μL样品加入滤膜上，用红外线灯烘干。分别置于玻璃闪烁杯，塑料闪烁杯，闪烁塑料杯，测量各样品的每分钟计数(cpm)。
1.6 不同放射性浓度的 32P对测量结果的影响
取一定量的32P-ATP，分别加水稀释成1、2、10、20、100倍，各取30 μL，加于滤膜上，用红外线灯烘干，置于塑料闪烁杯中。相同条件下，取样30 μL， 加闪烁液5 mL，乙醇2 ml，置于玻璃闪烁杯中，测量样品的每分钟计数(cpm)。
1.7 不同的样品体积对测量结果的影响
30 μL样品分别加到含有0.03、2、4、6、8和10 ml H2O的玻璃闪烁杯中，测量各杯的每分钟计数(cpm)。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 闪烁液测量法与无闪烁液测量法对结果的影响
无闪烁液测量法所用的介质有多种，本实验采用水，空气和滤膜作介质，它们的测量效率依次是：闪烁液>水>空气>滤膜(表1)。
表1 不同介质对结果的影响
Fig.1 The effect of different medium on counting results
(
±s，n=3) Medium
Scintillation
iiquid
, 百拇医药
Water
Air
Filter paper
Cpm
4 229±46
3 553±52
2 818±182
2 554±90
2.2 不同的容器对测量结果的影响
无闪烁液测量条件下，选择的容器不同，对测量的结果影响也较大，本实验中，塑料杯的测量效率大于玻璃杯，而经闪烁液处理过的塑料杯也大于塑料杯(表2)。表2 不同容器对测量结果的影响
, 百拇医药
Table 2 The effect of different vials on counting results
(±s，n=3) Vials
Glasses
Plastics
Dealed plastics
Cpm
2 818±182
3 905±170
5 649±94
, http://www.100md.com 2.3 不同放射性浓度的 32P对测量结果的影响
不同稀释倍数的 32P对测量结果的影响见表3，并将结果进行LogD-Logcpm直线回归，得到32P的稀释倍数与测量结果的关系，如图1所示。
图1 不同浓度的32P对测量结果的影响
Fig.1 The effect of different radioactive concentration of 32P on counting results
▲ YA：Relative curve of non-scintillation liquid counting on 32P
, http://www.100md.com
YB:Relative curve of scintillation liquid counting on 32P
表3 不同稀释倍数的32P的测量结果
Table 3 The counting results of defferent radioactive concentration of 32P The diluted times of 32 P
1
2
10
20
100
, 百拇医药
Non-scintillation liquid counting(A)
1 8785±1 349
9 224±83
1 842±17
1 011±64
227±7
Scintillation liquid countig(B)
2 6360±985
11 120±120
2 660±23
1 339±56
, 百拇医药
398±27
2.4 样品体积对测量结果的影响
对相同放射性强度的 32 P，进行不同样品体积的水溶液测量，其测量结果见表4。
表4 不同样品体积对测量结果的影响
Table 4 The effect of different sample volume on counting results
(n=3) Volume(mL)
0.03
2
4
, 百拇医药 6
8
10
Cpm
3 518±182
3 616±46
3 537±59
3 651±210
3 569±31
3 689±53
从表4可以看出，不同体积的样品(10 mL以下)，测量结果没有显著性差异(U检验，P>0.05)。3 讨 论
, 百拇医药 象 32P这种发射高能β射线的放射性核素，若用液体闪烁测量，其测量效率接近100%[3]，但由于可测的水溶液样品量极少，且有化学淬灭，特别是闪烁液的处理困难，一般都不采用液闪方法测量，姜金岭等人提出电离室法经过改进后用于测定 32P的放射性活度[4]，是利用高能的β粒子受原子核库仑电场的作用产生的轫致辐射的原理，但此方法不适合于实验室 32P示踪样品的测量，所以契仑科夫计数测定 32P的放射性强度备受推崇，契仑科夫辐射基本原理是高能电子在经过折射率较大介质时，在粒子经过之处发射出接近紫外波长的可见光，并用液闪计数器接受和记录下来。本实验结果表明，契仑科夫辐射直接测量 32P的水溶液样品是液闪法测量的84%(约为3 553/4 229=84%表1)，但是，由于水样测量的容量大，样品制备简单，又无化学淬灭，且实验数据显示(表4)，在10 mL以内也不会影响测量结果，所以实验上测量的灵敏度要高很多，而本实验所介绍的“干”法测量，由于在闪烁塑料瓶的内壁上渗透吸附有闪烁剂分子，因而其探测效率要比一般的玻璃瓶和塑料瓶都高(表2)，尤其是无需闪烁液，解决了含放射性闪烁液处理的难题，又可以重复使用，非常方便，是 32P的理想测量方法之一，值得推广。■
, http://www.100md.com
作者简介：刘秀琴(1954-)，女，广东惠州人，主管技师.
参考文献：
[1]夏宗勤，主编. 实验核医学与核药学[M]. 武汉：同济大学出版社，1989.76～77.
[2]卢正福，郑钧正. 核医学辞典[M]. 上海：上海科学技术出版社，1995，102～103.
[3]王浩丹，周 申，主编. 生物医学标记示踪技术[M]. 北京：人民卫生出版社，1995.27～28.
[4]姜金岭，李 健，常铭希，等. 整型电离室测定32P放射性活度[J]. 中华核医学杂志，1992，(3)：185.收稿日期：1999-06-30, http://www.100md.com
单位：中山医科大学实验核医学教研室； 广东 广州 510089
关键词：磷放射性同位素；闪烁计数；方法
中山医科大学学报000119
摘要：目的 探索一种快速，准确且无污染废液的32P放射性测量的方法。方法根据契伦科夫辐射(Cerenkov Radiation)的原理，对各种有闪烁液和无闪烁液测量介质和测量条件进行对比实验研究。结果 ① 无闪烁液的测量效率包括水溶液、空气和滤膜，分别是闪烁液测量的80%、67%和60%；② 经闪烁液处理的塑料杯测量32P的效率最高，一般的塑料杯和玻璃塑料杯分别是闪烁塑料杯的69%和50%，③ 水溶液样品的体积(从30 uL～10 mL)对测量结果没有明显的影响(P>0.05)。结论 闪烁塑料杯的“干式”测量32P，可得最高的探测效率，并能重复使用。
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分类号： R 817.1 文献标识码：A
文章编号：1000-257X(2000)01-0063-03
The Investigation of Non-scintillation Liquid Counting on 32P
LIU Xiu-qin(Department of Experimental Nuclear Medicine, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou, 510089, China)
XU Xue-qun(Department of Experimental Nuclear Medicine, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou, 510089, China)
, 百拇医药
Abstract：Objective Investigate a rapid、accurate method of scintillation and non-scintillation liquid on counting the radioactivity of 32 P. Methods According to the theory of Cerenkov radiation, different counting medium and condition on 32 P were studied. Results ① In different counting medium, the counting efficiency of non-scintillation liquid in water, air and filter paper were 84%,67% and 60% of the scintillation liquid efficiency respectively.② Different vials: The plastic vials dealed with scintillation liquid had the highest counting efficiency, while the ordinary plastic and glass vials were 69% and 50% respectly. ③ The volume of samples (from 30 uL to 10 mL): the counting results of the samples of defferent volume were not significant change (P>0.05).Conclusion The “dry” counting of 32 P by plastic vials dealed with scintillation liquid can obtain the highest counting efficiency, and can be used repeatly.
, 百拇医药
Key words：phosphorus radioisotopes; scintillation counting/methos▲
在生命科学，特别是在分子生物学的研究中， 32 P是最常用的放射性示踪核素。 32 P的测量，常规的方法是放射自显影法和液体闪烁计数法，前者较为直观，不但能了解32P的分布，且能定量，但比较费时，显像和定量都比较麻烦；后者的定量比较容易，效率很高，速度也很快，其准确性，灵敏度，重复性均令人满意，但闪烁液的费用较高，尤其是测量完后的含 32 P的闪烁液的处理，至今仍是一个难题。本研究根据契伦科夫辐射的原理[1，2]，在不用闪烁液的情况下，对各种测量条件进行了研究，并和一般的闪烁测定结果进行了对比。
1 材料和方法
1.1 试 剂
, 百拇医药
闪烁液配方：PPO∶5 g，POPOP∶25 g，溶于1 000 mL二甲苯。
1.2 闪烁塑料杯
塑料杯装满闪烁液，放置48 h后倒出，室温干燥。
1.3 测量仪器
液体闪烁计数器，FJ-2107G，西安二六二厂。按厂家调试条件进行积分测量。
1.4 闪烁液测量法与无闪烁液测量法结果的比较
样品：32P-ATP。 30 μL(以下同)。容器：玻璃闪烁杯。测量的介质：①闪烁液5 mL，无水乙醇2 mL，完全均相；②H2O 5 mL；③空气；④9999型纤维滤膜(两层)。分别测量样品的每分钟计数(cpm)。
, http://www.100md.com
1.5 不同容器对测量结果的影响
30 μL样品加入滤膜上，用红外线灯烘干。分别置于玻璃闪烁杯，塑料闪烁杯，闪烁塑料杯，测量各样品的每分钟计数(cpm)。
1.6 不同放射性浓度的 32P对测量结果的影响
取一定量的32P-ATP，分别加水稀释成1、2、10、20、100倍，各取30 μL，加于滤膜上，用红外线灯烘干，置于塑料闪烁杯中。相同条件下，取样30 μL， 加闪烁液5 mL，乙醇2 ml，置于玻璃闪烁杯中，测量样品的每分钟计数(cpm)。
1.7 不同的样品体积对测量结果的影响
30 μL样品分别加到含有0.03、2、4、6、8和10 ml H2O的玻璃闪烁杯中，测量各杯的每分钟计数(cpm)。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 闪烁液测量法与无闪烁液测量法对结果的影响
无闪烁液测量法所用的介质有多种，本实验采用水，空气和滤膜作介质，它们的测量效率依次是：闪烁液>水>空气>滤膜(表1)。
表1 不同介质对结果的影响
Fig.1 The effect of different medium on counting results
(
±s，n=3) MediumScintillation
iiquid
, 百拇医药
Water
Air
Filter paper
Cpm
4 229±46
3 553±52
2 818±182
2 554±90
2.2 不同的容器对测量结果的影响
无闪烁液测量条件下，选择的容器不同，对测量的结果影响也较大，本实验中，塑料杯的测量效率大于玻璃杯，而经闪烁液处理过的塑料杯也大于塑料杯(表2)。表2 不同容器对测量结果的影响
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Table 2 The effect of different vials on counting results
(
±s，n=3) VialsGlasses
Plastics
Dealed plastics
Cpm
2 818±182
3 905±170
5 649±94
, http://www.100md.com 2.3 不同放射性浓度的 32P对测量结果的影响
不同稀释倍数的 32P对测量结果的影响见表3，并将结果进行LogD-Logcpm直线回归，得到32P的稀释倍数与测量结果的关系，如图1所示。
图1 不同浓度的32P对测量结果的影响
Fig.1 The effect of different radioactive concentration of 32P on counting results
▲ YA：Relative curve of non-scintillation liquid counting on 32P
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YB:Relative curve of scintillation liquid counting on 32P
表3 不同稀释倍数的32P的测量结果
Table 3 The counting results of defferent radioactive concentration of 32P The diluted times of 32 P
1
2
10
20
100
, 百拇医药
Non-scintillation liquid counting(A)
1 8785±1 349
9 224±83
1 842±17
1 011±64
227±7
Scintillation liquid countig(B)
2 6360±985
11 120±120
2 660±23
1 339±56
, 百拇医药
398±27
2.4 样品体积对测量结果的影响
对相同放射性强度的 32 P，进行不同样品体积的水溶液测量，其测量结果见表4。
表4 不同样品体积对测量结果的影响
Table 4 The effect of different sample volume on counting results
(n=3) Volume(mL)
0.03
2
4
, 百拇医药 6
8
10
Cpm
3 518±182
3 616±46
3 537±59
3 651±210
3 569±31
3 689±53
从表4可以看出，不同体积的样品(10 mL以下)，测量结果没有显著性差异(U检验，P>0.05)。3 讨 论
, 百拇医药 象 32P这种发射高能β射线的放射性核素，若用液体闪烁测量，其测量效率接近100%[3]，但由于可测的水溶液样品量极少，且有化学淬灭，特别是闪烁液的处理困难，一般都不采用液闪方法测量，姜金岭等人提出电离室法经过改进后用于测定 32P的放射性活度[4]，是利用高能的β粒子受原子核库仑电场的作用产生的轫致辐射的原理，但此方法不适合于实验室 32P示踪样品的测量，所以契仑科夫计数测定 32P的放射性强度备受推崇，契仑科夫辐射基本原理是高能电子在经过折射率较大介质时，在粒子经过之处发射出接近紫外波长的可见光，并用液闪计数器接受和记录下来。本实验结果表明，契仑科夫辐射直接测量 32P的水溶液样品是液闪法测量的84%(约为3 553/4 229=84%表1)，但是，由于水样测量的容量大，样品制备简单，又无化学淬灭，且实验数据显示(表4)，在10 mL以内也不会影响测量结果，所以实验上测量的灵敏度要高很多，而本实验所介绍的“干”法测量，由于在闪烁塑料瓶的内壁上渗透吸附有闪烁剂分子，因而其探测效率要比一般的玻璃瓶和塑料瓶都高(表2)，尤其是无需闪烁液，解决了含放射性闪烁液处理的难题，又可以重复使用，非常方便，是 32P的理想测量方法之一，值得推广。■
, http://www.100md.com
作者简介：刘秀琴(1954-)，女，广东惠州人，主管技师.
参考文献：
[1]夏宗勤，主编. 实验核医学与核药学[M]. 武汉：同济大学出版社，1989.76～77.
[2]卢正福，郑钧正. 核医学辞典[M]. 上海：上海科学技术出版社，1995，102～103.
[3]王浩丹，周 申，主编. 生物医学标记示踪技术[M]. 北京：人民卫生出版社，1995.27～28.
[4]姜金岭，李 健，常铭希，等. 整型电离室测定32P放射性活度[J]. 中华核医学杂志，1992，(3)：185.收稿日期：1999-06-30, http://www.100md.com