凝聚胺法交叉配血978例观察
作者：莫少珠 袁汉尧 戴湘春 易伟莲
单位：广东医学院附属医院 检验科，湛江524001
关键词：血型鉴定和交叉配血；血型；凝聚胺
广东医学院学报990336 临床输血必须作交叉试验，目的是防止误输不同血型抗原抗体的血液引起的输血反应。传统的交叉配血法有盐水介质法、酶法(包括木瓜酶和菠萝酶法)、抗人球蛋白(C oombs试验)法。盐水介质法虽然简便快速，但不能发现不完全(免疫性)抗体，单用该法配血有危险性，需要增加酶法或抗人球蛋白法，才能避免不完全抗体引起的配血不合，达到安全输血。但酶法或抗人球蛋白法的实验步骤繁琐、试验反应时间长，一般需要20min至1h，往往会耽误抢救治疗工作。因此寻找一种简便、快速、可靠的交叉配血方法是非常必要的。我们选用一种新的低离子凝聚胺(polybrene)法并和盐水介质法、Coombs法、酶法进行比较，现报道如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 试剂 polybrene试剂(包括低离子介质缓冲液、凝聚胺溶液和 重新悬浮液)为台湾东耀企业有限公司产品；盐水介质和木瓜酶试剂为自配试剂；不完全抗D和抗人球蛋白试剂由中国医学科学院输血研究所提供。
1.2 受检对象 本院1998年8月至10月间临床各科申请输血送检的标本共978例。
1.3 方法
1.3.1 凝聚胺法 (1)在主侧管内加受检血清2滴和献血员2%红细胞悬液2滴，次侧管加入献血员血清2滴和受检者2%红细胞悬液2滴；(2)各管分别 加入低离子介质0.6mL，混匀，于室温下静置1min；(3)各管加入凝聚胺2滴，混匀，3500r/min离心15s，移去上清液，观察管底红 细胞有无凝块(如无凝块必须重做)；(4)加重新悬浮液2滴，轻轻摇动观察凝块是否散开，若为凝聚胺引起的非免疫性凝集在1min内即自然散开，若是特异性抗原抗体引起的凝集即不会散开，必要时可在显微镜下观察。
, 百拇医药
1.3.2 其它方法 按传统的实验步骤进行。
2 结果与讨论
978例凝聚胺法与传统的交叉配血法比较见表1。
表1 978例凝聚胺交叉配血法和传统方法试验结果比较
方法
例数
阴性(%)
阳性(%)
凝聚胺法
978
976(99.8)
, http://www.100md.com 2(0.2)
盐水法
978
977(99.9)
1(0.1)
木瓜酶法
978
976(99.8)
2(0.2)
Coombs法
978
976(99.8)
2(0.2)
, http://www.100md.com
978例交叉配血中，试验出现凝集阳性结果的盐水法有1例，而凝聚胺法、木瓜酶法和抗人球蛋法结果相同均为2例，此2例经追踪检查发现，其中1例是第2次怀孕，母体血型Rh阴性(CcddEE型)，因怀孕Rh阳性(CcDEe型)的婴儿，母体产生了免疫性抗体；而另1例血型则是经过多次输用O型血的A型病人，患者体内产生了免疫性抗A。此2例患者体内产生了免疫性抗体，在盐水介质 配血均不出现凝集。盐水介质配血出现凝集的1例，经追踪临床查证是自身免疫性溶血性贫血病。此例不仅在盐水介质中出现凝集，而且在抗人球蛋白法和酶法交叉配血中均出现不同程度的凝集，但在凝聚胺交叉配血法却不出现凝集。自身免疫性溶血贫血病者交叉配血，在盐水法中出现凝集，可能是由于病人血液中出现自身抗体，自身抗体是一种免疫球蛋白，此种自身抗体球蛋白增多，致使红细胞zeta电位降低，红细胞与红细胞之间易于粘连成缗钱状，出现假凝集，干扰了传统交叉配血试验。由于此凝集并非免疫细胞聚合，凝聚胺试剂中的重新悬浮液(Reuspe ning)起到中和作用，使非免疫细胞聚合重新散开。另外，凝聚胺法是利用一种低离子(LIM)以加促红细胞和血清(浆)中的抗体反应，不需通过加温来促进反应，整个试验仅需6 min左右即可完成，较传统的方法大大地缩短时间。
综上所述，凝聚胺交叉配血法具有简便、快速和排除非免疫细胞聚合引起的假阳性等优点，是目前交叉配血最理想的方法。
收稿日期：1999-04-02, 百拇医药
单位：广东医学院附属医院 检验科，湛江524001
关键词：血型鉴定和交叉配血；血型；凝聚胺
广东医学院学报990336 临床输血必须作交叉试验，目的是防止误输不同血型抗原抗体的血液引起的输血反应。传统的交叉配血法有盐水介质法、酶法(包括木瓜酶和菠萝酶法)、抗人球蛋白(C oombs试验)法。盐水介质法虽然简便快速，但不能发现不完全(免疫性)抗体，单用该法配血有危险性，需要增加酶法或抗人球蛋白法，才能避免不完全抗体引起的配血不合，达到安全输血。但酶法或抗人球蛋白法的实验步骤繁琐、试验反应时间长，一般需要20min至1h，往往会耽误抢救治疗工作。因此寻找一种简便、快速、可靠的交叉配血方法是非常必要的。我们选用一种新的低离子凝聚胺(polybrene)法并和盐水介质法、Coombs法、酶法进行比较，现报道如下。
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1 材料与方法
1.1 试剂 polybrene试剂(包括低离子介质缓冲液、凝聚胺溶液和 重新悬浮液)为台湾东耀企业有限公司产品；盐水介质和木瓜酶试剂为自配试剂；不完全抗D和抗人球蛋白试剂由中国医学科学院输血研究所提供。
1.2 受检对象 本院1998年8月至10月间临床各科申请输血送检的标本共978例。
1.3 方法
1.3.1 凝聚胺法 (1)在主侧管内加受检血清2滴和献血员2%红细胞悬液2滴，次侧管加入献血员血清2滴和受检者2%红细胞悬液2滴；(2)各管分别 加入低离子介质0.6mL，混匀，于室温下静置1min；(3)各管加入凝聚胺2滴，混匀，3500r/min离心15s，移去上清液，观察管底红 细胞有无凝块(如无凝块必须重做)；(4)加重新悬浮液2滴，轻轻摇动观察凝块是否散开，若为凝聚胺引起的非免疫性凝集在1min内即自然散开，若是特异性抗原抗体引起的凝集即不会散开，必要时可在显微镜下观察。
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1.3.2 其它方法 按传统的实验步骤进行。
2 结果与讨论
978例凝聚胺法与传统的交叉配血法比较见表1。
表1 978例凝聚胺交叉配血法和传统方法试验结果比较
方法
例数
阴性(%)
阳性(%)
凝聚胺法
978
976(99.8)
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盐水法
978
977(99.9)
1(0.1)
木瓜酶法
978
976(99.8)
2(0.2)
Coombs法
978
976(99.8)
2(0.2)
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978例交叉配血中，试验出现凝集阳性结果的盐水法有1例，而凝聚胺法、木瓜酶法和抗人球蛋法结果相同均为2例，此2例经追踪检查发现，其中1例是第2次怀孕，母体血型Rh阴性(CcddEE型)，因怀孕Rh阳性(CcDEe型)的婴儿，母体产生了免疫性抗体；而另1例血型则是经过多次输用O型血的A型病人，患者体内产生了免疫性抗A。此2例患者体内产生了免疫性抗体，在盐水介质 配血均不出现凝集。盐水介质配血出现凝集的1例，经追踪临床查证是自身免疫性溶血性贫血病。此例不仅在盐水介质中出现凝集，而且在抗人球蛋白法和酶法交叉配血中均出现不同程度的凝集，但在凝聚胺交叉配血法却不出现凝集。自身免疫性溶血贫血病者交叉配血，在盐水法中出现凝集，可能是由于病人血液中出现自身抗体，自身抗体是一种免疫球蛋白，此种自身抗体球蛋白增多，致使红细胞zeta电位降低，红细胞与红细胞之间易于粘连成缗钱状，出现假凝集，干扰了传统交叉配血试验。由于此凝集并非免疫细胞聚合，凝聚胺试剂中的重新悬浮液(Reuspe ning)起到中和作用，使非免疫细胞聚合重新散开。另外，凝聚胺法是利用一种低离子(LIM)以加促红细胞和血清(浆)中的抗体反应，不需通过加温来促进反应，整个试验仅需6 min左右即可完成，较传统的方法大大地缩短时间。
综上所述，凝聚胺交叉配血法具有简便、快速和排除非免疫细胞聚合引起的假阳性等优点，是目前交叉配血最理想的方法。
收稿日期：1999-04-02, 百拇医药