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编号:10266044
多塞平凝胶抗过敏抗炎作用
http://www.100md.com 《安徽医科大学学报》 2000年第3期
     作者:杨耀芳 杨翊雯 纪文 方学明 金辉

    单位:上海医科大学附属上海第五人民医院临床药理研究室,上海 200240

    关键词:多塞平;药理学;疾病模型;动物;小鼠

    安徽医科大学学报000309

    摘要 目的 研究多塞平凝胶的抗过敏抗炎作用。方法 用4-氨基吡啶诱发小鼠舔体反应;组胺致家兔皮肤血管通透性增高;二甲苯及蛋清分别制成小鼠耳片肿胀和足跖肿胀模型;2,4-二硝基氯苯致小鼠变应性接触性皮炎动物模型。结果 与凝胶基质对照组比较,多塞平凝胶组能明显抑制舔体反应次数,两者分别为26.7±4.83和1.0±0.43,差异有显著性(P<0.01)。多塞平凝胶也能对抗组胺引起的皮肤血管通透性增高。对小鼠二甲苯致耳部水肿、小鼠蛋清引起的足跖肿胀的炎性模型亦呈现明显的抗炎作用,并能抑制2,4-二硝基氯苯诱发的炎症反应。结论 多塞平凝胶具有抗过敏抗炎作用。
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    中图分类号 R971.43

    文献标识码 A 文章编号 1000-1492(2000)03-0188-03

    Antiallergic and anti-inflammatory effects of doxepin gel

    Yang Yaofang, Yang Yiwen, Ji Wen et al

    (Shanghai The Fifth Affiliated Hospital, Shanghai Medical University, Shanghai 200240)

    Abstract Objective To study the antiallergic and anti-inflammatory effects of doxepin gel. Methods 4-Aminopyridine(4-Ap)induced a licking response in mice,histamine induced the increased capillary permeability of rabbits,the mice ear swelling and paw edema were caused by dimethyl benzene and egg white,2,4-dinitrochlorobenz(DNCB)allergic contact dematitis was used as an animal model. Results The number of licking responses in the model control group and doxepin gel adminstered group was 26.7±4.83 and 1.0±0.43 respectively,the difference between the two groups was very significant(P<0.01),doxepin gel also antagonised histamine induced capillary permeability increase of rabbits.Experimental data indicated that doxepin gel had significant inhibitory effects on edema in the ears of mice induced by xylene and swollen feet induced by albumen injection,also inhibitory inflammation animal by DNCB.Conclusion Doxepin gel has antiallergic and anti-inflammatory effects.
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    MeSH doxepin/pharmacology; disease models, animal; mice

    多塞平(Doxepin)又称多虑平,系三环类抗抑郁药,近年来发现具有较强的H1、H2受体拮抗作用。国内外口服用于治疗慢性荨麻疹及老年性瘙痒症。我们将其制成外用凝胶剂,进行了抗过敏抗炎作用的实验研究。

    1 材料

    1.1 药品与试剂 多塞平原料由上海青浦赵屯制药厂出品,批号:970120;10 g.L-1多塞平凝胶由本院制剂中心制备,2,4-二硝基氯苯(DNCB),上海试剂一厂出品,批号960801; 4-氨基吡啶(4-AP),用生理盐水配成5 g.L-1溶液,实验前用生理盐水稀释成0.1 g.L-1溶液。
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    1.2 动物 ICR小鼠,♀♂兼有,由上海西普尔—必凯实验动物有限公司提供(沪动实准02-49-1号)。家兔, ♀♂兼有,陈行实验用兔繁育饲养场提供(沪动实准02-53-1号)。

    1.3 仪器 KEYSES全自动特定蛋白仪,德国产品;电子数显卡尺,上海量具刃具厂产品。

    2 方法

    2.1 4-氨基吡啶诱发小鼠皮肤瘙痒模型的影响〔1〕 ICR小鼠,♀♂兼有,体重18~22 g,每组10只,分为10 g.L-1多塞平凝胶组、凝胶基质对照组、正常对照组。用药前一天背部脱毛,前2组外涂药30~40 min后皮下注射4-氨基吡啶1 mg.kg-1于脱毛处。正常对照组仅注射4-氨基吡啶。分别记录各组舔体反应在10 min内的次数(以连续舔体至出现短暂停顿,作舔体1次计算)。
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    2.2 家兔毛细血管通透性模型 家兔体重3.0 kg,在其背部两侧各脱毛一块(6×4 cm)于脱毛处涂10 g.L-1多塞平凝胶,另一组涂凝胶基质。1 h后,耳缘静脉注射5 g.L-1依文思蓝溶液1 mg.kg-1,随即在各兔背部两侧脱毛区中央皮内注射1 g.L-1磷酸组胺溶液0.1 ml,以形成皮丘,观察皮丘蓝染出现时间、30 min及60 min蓝染区面积及蓝染程度。 2.3 DNCB致小鼠迟发型超敏反应 ICR小鼠,随机分成10 g.L-1多塞平凝胶组及对照组,50 g.L-1 DNCB丙酮液0.1 ml背部皮下注射致敏,次日再致敏一次 ,第3天开始给药,连续腹部涂药7天,在末次给药后,用10 g.L-1 DNCB丙酮液0.02 ml涂右耳,20 h后,处死小鼠,用打孔器取下直径8 mm左右耳片,在分析天平称重,以两耳片重量差为肿胀度作为迟发型超敏反应指标。处死鼠,剖取胸腺、脾脏称重。
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    2.4 二甲苯致小鼠耳肿胀模型〔2〕 取(22±2)g ICR小鼠20只,♀♂均有,随机分组,背部涂药10天,末次给药后1 h,右耳涂二甲苯,30 min后处死,用8 mm打孔器打下双耳,称其重量,以两耳重量差值为炎症肿胀度,计算用药组的肿胀抑制率。

    2.5 蛋清致小鼠足跖肿模型 ICR小鼠,每组10只,连续涂10 g.L-1多塞平凝胶7天,对照组涂基质,末次给药后1 h,于每只小鼠左足跖用10%(体积分数)蛋清,每鼠0.1 ml sc,致炎前和致炎后1 h、2 h、3 h、4 h分别用电子数显卡尺测足爪厚度,以致炎前后厚度之差作为肿胀度。

    2.6 DNCB致敏小鼠皮内色素渗出及血清免疫球蛋白水平〔3,4〕 ICR小鼠20只,♀♂均有,随机分为2组,10 g.L-1多塞平凝胶组和基质对照组,50 g.L-1 DNCB丙酮液0.1 ml背部皮下注射致敏,次日再致敏一次,第3天开始给药,给药3周,涂于腹部,末次给药后30 min,于腹部脱毛处皮下注射5 g.L-1组胺生理盐水液每鼠0.1 ml,同时尾静脉注射5 g.L-1伊文思蓝生理盐水液(每10 g体重给0.1ml)。30 min后放血离心,用全自动特定蛋白仪测定血清免疫球蛋白IgG水平;剖取胸腺和脾脏称重,计算每10 g体重的胸腺、脾脏重(mg)。用10 mm直径打孔器取下蓝染皮肤剪碎,放进盛有丙酮—生理盐水(7∶3)混合液5ml的有塞试管中浸泡24 h,离心取上清液,用755-B型分光光度计测610 nm处吸光度(A610mn)。
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    3 结果

    3.1 多塞平凝胶对4-氨基吡啶诱导小鼠皮肤瘙痒模型的影响 表1显示10 g.L-1多塞平凝胶组舔体反应总次数较凝胶基质对照组明显减少,差异有显著性。其舔体反应抑制率为96.2%。

    表1 对4-氨基吡啶诱发小鼠舔体反应的影响(n=10,±s) 组别

    10 min内舔体反应次数

    抑制率(%)

    凝胶基质对照组

    26.7±4.83

    多塞平凝胶组
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    1.0±0.43**

    96.2

    正常对照组

    30.7±4.88

    与凝胶基质对照组比较:**P<0.01

    3.2 多塞平凝胶对家兔毛细血管通透性的影响 表2可见,10 g.L-1多塞平凝胶与凝胶对照组比较,丘疹蓝染出现时间推迟,蓝染区面积缩小72.9%(30 min)、71.3%(60 min),蓝色也无凝胶基质对照组深。表明多塞平凝胶能明显对抗家兔皮肤毛细血管通透性增高。

    表2 对家兔毛细血管通透性的影响(n=6) 组别

, 百拇医药     注射磷酸组胺后

    丘疹蓝染初

    现时间

    (min)

    30 min

    60 min

    蓝染区

    平均面积

    蓝染

    深度

    蓝染区

    平均面积

    蓝染
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    深度

    多塞平凝胶

    10

    78.54 mm2

    (72.9)

    浅

    137.04 mm2

    (71.3)

    浅

    凝胶基质

    5

    289.81 mm2
, 百拇医药
    深

    478.29 mm2

    明显加深

    ( )内数字为蓝染区面积缩小百分率

    3.3 多塞平凝胶对DNCB所致小鼠迟发型超敏反应的影响 表3所示,10 g.L-1多塞平凝胶与对照组比较能明显抑制小鼠迟发型超敏反应,但对小鼠胸腺、脾脏器官重量无明显影响。

    3.4 多塞平凝胶对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 多塞平对二甲苯诱导小鼠耳肿胀明显低于凝胶基质对照组分别为11.43±2.07 mg、16.7±2.88 mg(P<0.01),耳肿胀抑制率为31.64%。

    3.5 多塞平凝胶对蛋清致小鼠足跖肿胀的影响 由表4可见,多塞平凝胶能明显抑制蛋清致小鼠足跖肿。
, 百拇医药
    表3 对DNCB诱发小鼠迟发型超敏反应

    及免疫器官重量的影响(n=10,±s) 组别

    两耳片重

    量差(mg)

    抑制率

    (%)

    胸腺指数

    (mg.g-1)

    脾脏指数

    (mg.g-1)
, 百拇医药
    对照组

    5.04±1.12

    1.72±0.279

    6.630±2.063

    多塞平凝胶组

    2.95±0.97**

    41.5

    1.86±0.579

    6.174±1.525

    与对照组比较:**P<0.01

    3.6 多塞平凝胶对小鼠皮内色素渗出及免疫球蛋白的影响 由表5、6可见,10 g.L-1多塞平凝胶能明显抑制DNCB致敏小鼠皮内色素渗出,增加脾脏重量及升高血清IgG水平。
, 百拇医药
    表4 对蛋清致小鼠足跖肿胀的影响(n=10,±s) 组别

    致炎后不同时间的足肿胀度(mm)

    1 h

    2 h

    3 h

    4 h

    凝胶基质

    0.270±0.085**

    0.237

    ±0.044**
, 百拇医药
    0.264

    ±0.055**

    0.231

    ±0.050

    多塞平

    凝胶

    0.114

    ±0.049**

    (57.7)

    0.166

    ±0.034**

    (29.9)
, 百拇医药
    0.185

    ±0.043**

    (29.9)

    0.184

    ±0.056

    (20.3)

    ( )内数字为抑制百分率;与凝胶基质组比较:**P<0.01表5 对DNCB小鼠皮内色素渗出的影响(n=10, ±s) 组 别

    皮肤浸出液的A610 nm

    抑制率(%)
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    凝胶基质

    0.3194±0.103

    多塞平凝胶

    0.1716±0.073**

    46.27

    与凝胶基质组比较:**P<0.01表6 对DNCB致敏小鼠免疫器官重量及血清IgG水平的影响

    (n=10,±s) 组别

    体重

    (g)

    血清IgG水平
, 百拇医药
    (mg.L-1)

    胸腺指数

    (mg.g-1)

    脾脏指数

    (mg.g-1)

    凝胶基质

    31.29±

    4.02

    0.6978±

    0.2179

    1.424±
, 百拇医药
    0.421

    4.020±

    0.659

    多塞平凝胶

    28.46±

    3.26

    1.1138±

    0.5138**

    1.589±

    0.453

    5.893±

    1.468**
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    与凝胶基质组比较:**P<0.014 讨论

    为了证明外用多塞平制剂的作用,而将其用卡波姆制成凝胶剂,进行了抗过敏抗炎的实验研究。卡波姆又名聚羧乙烯(Carbomer,Carbopol或Carboxypolymethylene),是一种高分子丙烯酸交联聚合物,在国外已广泛用于化妆品和药品的研究生产中,并已被英、美等国的药典收载,但在国内尚属一种较新的材料。根据聚合时使用的材料不同和聚合度的不同,形成了多种规格的产品〔5〕。我们选用卡波姆940为基质制成的局部用晶状澄明凝胶剂,与皮肤耦合性好。

    以上研究可见,多塞平凝胶能明显抑制4-氨基吡啶诱发的小鼠舔体反应。已知4-氨基吡啶诱发小鼠舔体反应与皮肤肥大细胞释放组胺有关,本实验表明,多塞平的止痒作用可能与抑制皮肤肥大细胞释放组胺有关外,还能明显对抗组胺引起的家兔皮肤毛细血管通透性增高及明显抑制小鼠迟发型超敏反应,显示对细胞免疫功能的抑制,但能提高血清IgG水平及脾脏重量。并具有明显的抗炎作用。可作为一种局部瘙痒治疗药开发应用。
, 百拇医药
    作者简介:杨耀芳,女,46岁,副教授,副主任药师

    参考文献

    1,徐建华,何亦溪,舒淑婷等.一种筛选抗过敏药与止痒药的动物模型.药学学报,1996;31(6):420~424

    2,杨耀芳,王钦茂,张伟媚等.牛黄解毒颗粒剂的解热镇痛和抗炎作用的研究.安徽医科大学学报,1996;31(2):87~90

    3,涂彩霞,林熙然,古 玲.四种中药复方对小鼠实验性皮炎作用的研究.中华皮肤科杂志,1998;31(4):244~246

    4,邹亚群,李锐.3Y红花油稳定性与药理实验研究.中国医院药学杂志,1998;18(6):268~271

    5,傅崇东,徐惠南.卡波姆在药剂中的应用研究进展.国外医药-合成药、生化药制剂分册,1999;20(2):121~125

    2000-02-21收稿,2000-05-26修回, http://www.100md.com