胃癌中PCNA、P53、C-erbB-2的表达与预后关系
作者：王宗敏 谢丽微
单位：温州医学院附属第二医院病理科(325027)
关键词：胃癌；PCNA；P53；C-erbB-2；免疫组化
温州医学院学报/990407 摘 要 目的 探讨胃癌PCNA、P53、C-erbB-2表达及其与病理类型、浸润转移的关系。方法 应用S-P免疫组化方法，观察72例胃癌中PCNA、P53、C-erbB-2的表达情况。结果 PCNA指数在高分化组为20.00±3.33与低分化组34.18±3.46两者比较差异有显著性意义(P<0.001)，P53和C-erbB-2在胃癌中表达率分别为44.40%
和60.0%，其表达与病理类型无关。在浸润深度与淋巴结转移方面，PCNA、P53、C-erbB-2均显示了正相关。结论 PCNA表达指数和P53、C-erbB-2表达率越增加越容易致胃癌浸润和淋巴结扩散，可作为判断胃癌预后的预测指标。
, 百拇医药
本研究应用免疫组化SP法，探讨原癌基因C-erbB-2、抗癌基因P53和细胞增殖核抗原(PCNA)在胃癌中的表达特征及其联系，并对其临床意义进行分析。
1 材料和方法
1.1 材料 胃癌手术切除标本72例，均为腺癌，除4例为早期腺癌外，余68例为进展期腺癌，组织学类型为高分化腺癌19例，中分化腺癌16例，低分化腺癌25例，粘液癌7例，未分化癌5例。有淋巴结转移者38例。
1.2 方法 所有标本均以福尔马林固定，石蜡切片，HE染色及免疫组化SP法染色。抗PCNA抗体与抗P53单克隆抗体、抗C-erbB-2多克隆抗体及SP试剂盒均为福州迈新生物技术公司提供的即用型试剂。操作按说明书规范进行，设有阴性及阳性对照。
经免疫组化PCNA染色后，阳性细胞核呈棕黄色，每例观察10个高倍视野，每个视野数100个细胞，计数其中阳性细胞数为PCNA标记指数，最后算出平均值，经t检验进行分析。
, 百拇医药
2 结果
2.1 PCNA、P53、C-erbB-2在不同组织类型中的表达，见附表 结果显示胃癌细胞分化越差其PCNA指数越高。PCNA指数在高分化组为20.00±3.33，与低分化组34.18±3.46比较t=13.68(P<0.001)，两者差异有显著性意义。粘液癌包括粘液腺癌及印戒细胞癌，其PCNA指数为22.00±5.10，居高分化组与中分化组之间。P53阳性细胞核呈棕黄色，癌旁组织未见阳性反应，癌组织总表达率为44.40%。C-erbB-2阳性表达在细胞膜上，有时见于浆内，本组总表达率60.00%，P53与C-erbB-2在各分化组之间表达未见明显不同。
2.2 PCNA、P53、C-erbB-2表达与浸润深度及淋巴结转移的关系 在胃癌浸润肌层组，PCNA指数为22.03±2.75与浸润全层组织31.50±2.00相比较P<0.001差异有显著性意义。P53和C-erbB-2表达差异亦显示有显著性。
, 百拇医药
淋巴结转移组与非转移组比较，显示了PCNA高表达指数和P53、C-erbB-2高表达率与胃癌的淋巴结转移有明显的相关性。
附表 PCNA、P53、C-erbB-2表达及其与病理类型、浸润扩散等关系 组 别
例数
PCNALi
P53(+)(%)
C-erbB-2(+)
(%)
高分化腺癌
19
20.00±3.33***
, http://www.100md.com
9
12
中分化腺癌
16
25.06±2.36
7
9
低分化腺癌
25
34.18±3.46
11
15
未分化腺癌
, 百拇医药
5
40.00±3.16
3
3
粘液癌
7
22.00±5.10
2
4
浸润肌层
19
22.03±2.75***
9(47.00)
, 百拇医药
12(63.00)
浸润全层
49
31.45±2.3
21(42.7)
29(59.00)
淋巴结+
38
32.00±2.50***
23(60.00)
27(71.00)
淋巴结-
, http://www.100md.com
34
21.6±2.84
9(26.4)
16(47.00)
与低分化组比：***P<0.001；浸润肌层与浸润全层比：***P<0.001；淋巴结+与淋巴结-比：***P<0.001
3 讨论
PCNA又称周期素或细胞增殖核抗原，是真核细胞DNA合成所必需的一种36kb核蛋白，合成于晚G1期和S期，在DNA复制过程中有调节作用，因仅在增殖细胞中合成和表达，故被视为评估肿瘤细胞的生物学活性及所处的生长状态的一个重要指标。有人认为，胃癌细胞核的PCNA表达与肿瘤的组织类型有密切关系。PCNA表达指数越高，表明肿瘤分化越低，生长越快；表达指数越低，组织分化越好[1]。本组实验显示同样结果。但是，胃的粘液癌显示PCNA的指数，介于高分化组与中分化组之间。
, 百拇医药
实验还显示，PCNA表达与胃癌的浸润深度及淋巴结转移有关，有全层浸润及淋巴结转移的原发灶，PCNA表达高于肌层浸润及无淋巴结转移组(P<0.001)。PCNA高表达组，因细胞活性高，增殖生长快，可易致浸润性生长与淋巴结扩散。Lin认为胃癌中PCNA的测定估计预后比形态学分级更加客观可靠。
P53基因编码产物的分子量为53KD，执行P53基因的调控功能。突变型P53蛋白由于构象发生改变，对DNA亲和力下降，抑制细胞增殖能力减弱，促进癌细胞浸润及转移，本组P53阳性表达率为44.40%，阳性表达只见于癌细胞核内，提示P53表达对鉴别良恶性病变有意义。有研究认为P53表达与淋巴转移等有关，为无淋巴结转移者表达率为34.00%，有淋巴结转移者其表达率达57.10%[2]，本组观察结果亦显示胃癌伴淋巴结转移者的P53表达率明显增加。
C-erbB-2是一种细胞来源的癌基因，在细胞生长分化的调节中可能起膜受体作用，是胃癌中常见的变化基因，阳性表达见于癌细胞膜及胞浆内。阳性表达与组织学类型无明显相关，同样在浸润深度和淋巴转移方面，显示有显著性意义，说明C-erbB-2的活化在癌细胞浸润扩散及转移至淋巴过程中可能起重要作用，与龚志军等[3]结果一致。
, 百拇医药
关于PCNA表达与P53蛋白关系的研究，表明PCNA合成表达在G1晚期，调节细胞由G1期进入S期。两者在细胞周期中表达具有同步性。因此对恶性肿瘤同时进行PCNA与P53检测，对进一步认识肿瘤的发生发展有重要意义。我们发现胃癌浸润全层及淋巴结转移者，PCNA指数明显增高和P53及C-erbB-2表达率也增高。提示细胞增殖旺盛过程中，可能伴随着P53突变型蛋白的激活和C-erbB-2癌基因的激活扩散，提示预后不良。因此早期预测其淋巴结转移趋势，制定合理治疗方案，有利于患者预后的改善。本实验也提示了多基因改变在胃癌发生发展中的促进作用及其复杂过程[4]。
参考文献
1 Porkolopulou P,Chritodoulou P,Lekkakatsouli I,et al.Prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen(PCNA) expression inglimas.Histopathology,1994,25∶349～355
2 李宁，祝庆服，王一平.胃癌P53蛋白表达及其与生物学行为的关系.诊断病理学杂志，1995，2(1)∶103
3 龚志军，罗思钊，陆琪等.胃癌组织C-erbB-2蛋白表达的临床意义.中华肿瘤学杂志，1996，18(4)∶299
4 朱日林，张一楚，王瑞华等.胃癌多基因表达的同步检测.中华肿瘤学杂志，1996，18(3)∶199
(收稿：1999-04-02，修回：1999-05-21), 百拇医药
单位：温州医学院附属第二医院病理科(325027)
关键词：胃癌；PCNA；P53；C-erbB-2；免疫组化
温州医学院学报/990407 摘 要 目的 探讨胃癌PCNA、P53、C-erbB-2表达及其与病理类型、浸润转移的关系。方法 应用S-P免疫组化方法，观察72例胃癌中PCNA、P53、C-erbB-2的表达情况。结果 PCNA指数在高分化组为20.00±3.33与低分化组34.18±3.46两者比较差异有显著性意义(P<0.001)，P53和C-erbB-2在胃癌中表达率分别为44.40%
和60.0%，其表达与病理类型无关。在浸润深度与淋巴结转移方面，PCNA、P53、C-erbB-2均显示了正相关。结论 PCNA表达指数和P53、C-erbB-2表达率越增加越容易致胃癌浸润和淋巴结扩散，可作为判断胃癌预后的预测指标。
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本研究应用免疫组化SP法，探讨原癌基因C-erbB-2、抗癌基因P53和细胞增殖核抗原(PCNA)在胃癌中的表达特征及其联系，并对其临床意义进行分析。
1 材料和方法
1.1 材料 胃癌手术切除标本72例，均为腺癌，除4例为早期腺癌外，余68例为进展期腺癌，组织学类型为高分化腺癌19例，中分化腺癌16例，低分化腺癌25例，粘液癌7例，未分化癌5例。有淋巴结转移者38例。
1.2 方法 所有标本均以福尔马林固定，石蜡切片，HE染色及免疫组化SP法染色。抗PCNA抗体与抗P53单克隆抗体、抗C-erbB-2多克隆抗体及SP试剂盒均为福州迈新生物技术公司提供的即用型试剂。操作按说明书规范进行，设有阴性及阳性对照。
经免疫组化PCNA染色后，阳性细胞核呈棕黄色，每例观察10个高倍视野，每个视野数100个细胞，计数其中阳性细胞数为PCNA标记指数，最后算出平均值，经t检验进行分析。
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2 结果
2.1 PCNA、P53、C-erbB-2在不同组织类型中的表达，见附表 结果显示胃癌细胞分化越差其PCNA指数越高。PCNA指数在高分化组为20.00±3.33，与低分化组34.18±3.46比较t=13.68(P<0.001)，两者差异有显著性意义。粘液癌包括粘液腺癌及印戒细胞癌，其PCNA指数为22.00±5.10，居高分化组与中分化组之间。P53阳性细胞核呈棕黄色，癌旁组织未见阳性反应，癌组织总表达率为44.40%。C-erbB-2阳性表达在细胞膜上，有时见于浆内，本组总表达率60.00%，P53与C-erbB-2在各分化组之间表达未见明显不同。
2.2 PCNA、P53、C-erbB-2表达与浸润深度及淋巴结转移的关系 在胃癌浸润肌层组，PCNA指数为22.03±2.75与浸润全层组织31.50±2.00相比较P<0.001差异有显著性意义。P53和C-erbB-2表达差异亦显示有显著性。
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淋巴结转移组与非转移组比较，显示了PCNA高表达指数和P53、C-erbB-2高表达率与胃癌的淋巴结转移有明显的相关性。
附表 PCNA、P53、C-erbB-2表达及其与病理类型、浸润扩散等关系 组 别
例数
PCNALi
P53(+)(%)
C-erbB-2(+)
(%)
高分化腺癌
19
20.00±3.33***
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9
12
中分化腺癌
16
25.06±2.36
7
9
低分化腺癌
25
34.18±3.46
11
15
未分化腺癌
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5
40.00±3.16
3
3
粘液癌
7
22.00±5.10
2
4
浸润肌层
19
22.03±2.75***
9(47.00)
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12(63.00)
浸润全层
49
31.45±2.3
21(42.7)
29(59.00)
淋巴结+
38
32.00±2.50***
23(60.00)
27(71.00)
淋巴结-
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34
21.6±2.84
9(26.4)
16(47.00)
与低分化组比：***P<0.001；浸润肌层与浸润全层比：***P<0.001；淋巴结+与淋巴结-比：***P<0.001
3 讨论
PCNA又称周期素或细胞增殖核抗原，是真核细胞DNA合成所必需的一种36kb核蛋白，合成于晚G1期和S期，在DNA复制过程中有调节作用，因仅在增殖细胞中合成和表达，故被视为评估肿瘤细胞的生物学活性及所处的生长状态的一个重要指标。有人认为，胃癌细胞核的PCNA表达与肿瘤的组织类型有密切关系。PCNA表达指数越高，表明肿瘤分化越低，生长越快；表达指数越低，组织分化越好[1]。本组实验显示同样结果。但是，胃的粘液癌显示PCNA的指数，介于高分化组与中分化组之间。
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实验还显示，PCNA表达与胃癌的浸润深度及淋巴结转移有关，有全层浸润及淋巴结转移的原发灶，PCNA表达高于肌层浸润及无淋巴结转移组(P<0.001)。PCNA高表达组，因细胞活性高，增殖生长快，可易致浸润性生长与淋巴结扩散。Lin认为胃癌中PCNA的测定估计预后比形态学分级更加客观可靠。
P53基因编码产物的分子量为53KD，执行P53基因的调控功能。突变型P53蛋白由于构象发生改变，对DNA亲和力下降，抑制细胞增殖能力减弱，促进癌细胞浸润及转移，本组P53阳性表达率为44.40%，阳性表达只见于癌细胞核内，提示P53表达对鉴别良恶性病变有意义。有研究认为P53表达与淋巴转移等有关，为无淋巴结转移者表达率为34.00%，有淋巴结转移者其表达率达57.10%[2]，本组观察结果亦显示胃癌伴淋巴结转移者的P53表达率明显增加。
C-erbB-2是一种细胞来源的癌基因，在细胞生长分化的调节中可能起膜受体作用，是胃癌中常见的变化基因，阳性表达见于癌细胞膜及胞浆内。阳性表达与组织学类型无明显相关，同样在浸润深度和淋巴转移方面，显示有显著性意义，说明C-erbB-2的活化在癌细胞浸润扩散及转移至淋巴过程中可能起重要作用，与龚志军等[3]结果一致。
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关于PCNA表达与P53蛋白关系的研究，表明PCNA合成表达在G1晚期，调节细胞由G1期进入S期。两者在细胞周期中表达具有同步性。因此对恶性肿瘤同时进行PCNA与P53检测，对进一步认识肿瘤的发生发展有重要意义。我们发现胃癌浸润全层及淋巴结转移者，PCNA指数明显增高和P53及C-erbB-2表达率也增高。提示细胞增殖旺盛过程中，可能伴随着P53突变型蛋白的激活和C-erbB-2癌基因的激活扩散，提示预后不良。因此早期预测其淋巴结转移趋势，制定合理治疗方案，有利于患者预后的改善。本实验也提示了多基因改变在胃癌发生发展中的促进作用及其复杂过程[4]。
参考文献
1 Porkolopulou P,Chritodoulou P,Lekkakatsouli I,et al.Prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen(PCNA) expression inglimas.Histopathology,1994,25∶349～355
2 李宁，祝庆服，王一平.胃癌P53蛋白表达及其与生物学行为的关系.诊断病理学杂志，1995，2(1)∶103
3 龚志军，罗思钊，陆琪等.胃癌组织C-erbB-2蛋白表达的临床意义.中华肿瘤学杂志，1996，18(4)∶299
4 朱日林，张一楚，王瑞华等.胃癌多基因表达的同步检测.中华肿瘤学杂志，1996，18(3)∶199
(收稿：1999-04-02，修回：1999-05-21), 百拇医药