尿轻链散射比浊法测定及其在肾损伤疾病中的应用
作者：陈钦宏 张文辉 王春香
单位：(温州医学院附属第一医院 输血科，浙江 温州 325000)
关键词：轻链；肾功能衰竭；糖尿，肾性
温州医学院学报000233 [摘 要] 目的:研究尿轻链的临床意义。 方法:用速率散射比浊法对54例肾脏疾病患者尿中免疫球蛋白自由轻链进行测定。 结果:肾功能不全患者的尿轻链阳性率(92.8%)和糖尿病肾病的阳性率(69.2%)均明显高于正常对照(P<0.001)。提示尿液中轻链的升高与肾小管功能受损有关。结论:尿轻链测定可能有助于肾功能不全及糖尿病肾病的早期诊断。
[中图分类号] R446.62 [文献标识码] B [文章编号] 1000-2138(2000)02-0158-02
正常人的免疫球蛋白(immunoglubin,Ig)系由两条重链和两条轻链经二硫键联结而成的完整分子，其中轻链共有两型，即Kappa(κ)和Lambda(λ)，在一个Ig分子中两条轻链的比值接近2:1，此比例主要来自IgG。轻链为能自由通过肾小球基底膜的小分子蛋白，在肾小管被重吸收，回到血循环中。因此正常人尿中只有少量轻链存在。曾有人报道，狼疮性肾炎活动时，病人尿中自由轻链阳性率明显升高，达76%，明显高于非活动组和正常对照组[1]。为了进一步研究尿轻链定量测定在肾脏疾病中的意义，我们采用QM300特定蛋白分析仪以速率散射比浊法测定尿中轻链的含量，现报告如下。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 对象 所用标本共97例，其中肾功能不全28例，其血尿素氮、肌酐均已超过参考范围，常规尿蛋白定性为阳性。糖尿病 26例，其尿素氮、肌酐尚未升高，血清中β2-微球蛋白显著升高。多发性骨髓瘤(MM)15例，正常对照28例，采自体检正常的健康人群。
1.2 试剂和仪器 本实验所有试剂和仪器均由法国Sanofi公司提供。
1.3 方法 以速率散射比浊法测定轻链κ、λ，所有操作步骤均按仪器规定进行。统计学处理采用卡方检验。
2 结果及处理
2.1 最低检测浓度 κ轻链为5.10mg/dl，λ轻链为2.20mg/dl。
2.2 重复性试验 取高、中、低三份标本，每份重复测定10次，批内变异系数(CV)：κ轻链为2.8%、4.0%、5.6%，λ轻链为3.0%、3.8 %、4.3%。三份标本在不同检测日测定5次，批间CV：κ轻链为3.2%、5.7%、9.6%，λ轻链为3.5%、6.8%、10.1%。2.3 参考范围 正常人尿轻链(n=28)测定结果均在最低检测浓度以下，故定尿轻链的界值为κ<5.18mg/dl，λ<2.20mg/dl。
, 百拇医药
2.4 结果 以κ>5.18mg/dl或λ>2.20mg/dl为阳性，经卡方检验统计各类疾病患者尿轻链结果与正常对照差异均存在显著性，结果见附表。
附表 各类疾病尿轻链测定结果 病种
例数
κ链单阳性数(%)
λ链单阳
性数(%)
κ,λ二链
均阳性数
总阳性
数(%)
糖尿病肾病
, 百拇医药
26
15(57.7)***
0(0)
3(11.5)
18(69.2)***
肾功能不全
28
7(25.0)*
0(0)
19(67.9)***
26(92.8)***
, http://www.100md.com
MM
15
7(46.7)
8(53.3)
0(0)
15(100.0)
正常对照
28
0(0)
0(0)
0(0)
0(0)
与对照组比较：*P<0.05，***P<0.001
, 百拇医药
3 讨论
以往检查尿中轻链(本周氏蛋白)可作为判定多发性骨髓瘤或巨球蛋白血症，其尿轻链的升高一般只有单一型轻链升高。免疫检验技术的发展，发现某些病理情况下，血中可有非特异性的良性免疫球蛋白增高，尿中亦有轻链排出[2,3]。病人尿中轻链的增多至少有两种情况：一是属于恶性增殖，这种增殖表现为单克隆性质，尿中只出现单一型轻链，另一属于多克隆增殖，这种轻链各正常人的比例相同，亦即κ：λ=2：1，属良性免疫球蛋白增殖[2]。MM患者尿中轻链升高一般为单阳性，其主要原因是由于产生轻链的单克隆浆细胞高度增生，使轻链合成增加，产生单一类型的异常Ig或Ig片段，超过肾小管重吸收功能所致[7]。本文所有MM病人，均无肾功能损害，血尿素氮和肌酐检查均在正常范围内，因而可排除肾功能对尿轻链的影响。
本文中肾功能不全患者血尿素氮、肌酐已超过参考范围，常规尿蛋白定性为阳性，肾功能不全患者尿轻链升高可能是肾小管受损使得重吸收减少所致。而糖尿病患者的血尿素氮、肌酐尚未升高，血清中β2-微球蛋白(β2-M)显著升高，常规尿蛋白定性为阳性，根据这些糖尿病肾脏损害的早期指标可以确定患者为糖尿病肾病患者。患者尿轻链升高据认为是糖尿病发展到糖尿病肾病时肾小管受损、肾小管重吸收功能下降，或是轻链糖基化后不易被肾小管重吸收的结果[4]。据文献报道[6]，肾病、糖尿病患者尿轻链含量升高均属κ、λ双阳性，可能系肾小管重吸收减少所致。本实验结果显示，肾功能不全患者尿轻链升高大部分属于κ、λ双阳性；二者均无λ单阳性。这可能是由于两种轻链在血中的含量不同，κ几乎是λ的两倍。所以当肾小管受损时，首先出现κ升高，随着病情加重，继而出现λ升高，实验结果显示为κ、λ双阳性，这是可以理解的，但其机理尚有待进一步研究。
, http://www.100md.com
以往实验室多采用热凝溶法，但检出率低，假阳性率高。醋酸纤维膜电泳法的特异性和灵敏度均差。免疫电泳法特异性虽高，但抗血清用量大，灵敏度亦不理想，ELISA法操作较为繁杂，且有一定局限性[5,6]。而本实验采用QM300全自动特定蛋白分析仪来测定，其主要原理就是：任何一种蛋白与其相应抗体反应，反应所产生的不溶性抗原抗体复合物易引起光的散射，QM300特定蛋白分析仪能够根据散射光的强度将其转变为特定蛋白的含量。因此速率散射比浊法具有高敏感性、高特异性及快速的特点，采用速率散射比浊法定量测定尿轻链有助于肾功能不全及糖尿病患者肾脏损害的诊断。
作者简介：陈钦宏(1971-)，男，浙江平阳人，检验师。
参考文献
[1] 凌衫洪，叶任高，李幼姬，等.狼疮性肾炎患者尿内白细胞介素-2受体和免疫蛋白自由轻链的观察[J].中华医学杂志，1993，73(12)：756.
, http://www.100md.com
[2] 田湘青，孔宪涛，谢映华，等.非特异性高γ球蛋白血症与尿中轻链关系的探讨[J].上海免疫学杂志，1988，8(2)：116.
[3] 何凤云，张正侯，卢艳萍，等.肝硬化的免疫球蛋白、循环免疫复合物与血、尿轻链关系户的探讨[J].中国实用内科杂志，1994，14(11)：666.
[4] 陈仁涉，潘四春，肖平，等.酶联免疫法定量测定尿轻链及其临床应用[J].中华医学检验杂志，1993，16(6)：343.
[5] 周方满，高峰，孔宪涛，等.尿轻链酶联免疫测定在M蛋白病中的应用[J].中华血液学杂志，1995，16(5)：269.
[6] 高峰，孔宪涛，刘炎，等.尿轻链酶联免疫测定在M蛋白病中的应用[J].上海医学，1997，20(2)：71.
[7] Walter KV, Ward KM,Mahan JD，et al. Current concepts in proteinuria[J].Clin Chem.1989,35:755.
收稿日期：1999-04-23
修回日期：2000-03-01, http://www.100md.com
单位：(温州医学院附属第一医院 输血科，浙江 温州 325000)
关键词：轻链；肾功能衰竭；糖尿，肾性
温州医学院学报000233 [摘 要] 目的:研究尿轻链的临床意义。 方法:用速率散射比浊法对54例肾脏疾病患者尿中免疫球蛋白自由轻链进行测定。 结果:肾功能不全患者的尿轻链阳性率(92.8%)和糖尿病肾病的阳性率(69.2%)均明显高于正常对照(P<0.001)。提示尿液中轻链的升高与肾小管功能受损有关。结论:尿轻链测定可能有助于肾功能不全及糖尿病肾病的早期诊断。
[中图分类号] R446.62 [文献标识码] B [文章编号] 1000-2138(2000)02-0158-02
正常人的免疫球蛋白(immunoglubin,Ig)系由两条重链和两条轻链经二硫键联结而成的完整分子，其中轻链共有两型，即Kappa(κ)和Lambda(λ)，在一个Ig分子中两条轻链的比值接近2:1，此比例主要来自IgG。轻链为能自由通过肾小球基底膜的小分子蛋白，在肾小管被重吸收，回到血循环中。因此正常人尿中只有少量轻链存在。曾有人报道，狼疮性肾炎活动时，病人尿中自由轻链阳性率明显升高，达76%，明显高于非活动组和正常对照组[1]。为了进一步研究尿轻链定量测定在肾脏疾病中的意义，我们采用QM300特定蛋白分析仪以速率散射比浊法测定尿中轻链的含量，现报告如下。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 对象 所用标本共97例，其中肾功能不全28例，其血尿素氮、肌酐均已超过参考范围，常规尿蛋白定性为阳性。糖尿病 26例，其尿素氮、肌酐尚未升高，血清中β2-微球蛋白显著升高。多发性骨髓瘤(MM)15例，正常对照28例，采自体检正常的健康人群。
1.2 试剂和仪器 本实验所有试剂和仪器均由法国Sanofi公司提供。
1.3 方法 以速率散射比浊法测定轻链κ、λ，所有操作步骤均按仪器规定进行。统计学处理采用卡方检验。
2 结果及处理
2.1 最低检测浓度 κ轻链为5.10mg/dl，λ轻链为2.20mg/dl。
2.2 重复性试验 取高、中、低三份标本，每份重复测定10次，批内变异系数(CV)：κ轻链为2.8%、4.0%、5.6%，λ轻链为3.0%、3.8 %、4.3%。三份标本在不同检测日测定5次，批间CV：κ轻链为3.2%、5.7%、9.6%，λ轻链为3.5%、6.8%、10.1%。2.3 参考范围 正常人尿轻链(n=28)测定结果均在最低检测浓度以下，故定尿轻链的界值为κ<5.18mg/dl，λ<2.20mg/dl。
, 百拇医药
2.4 结果 以κ>5.18mg/dl或λ>2.20mg/dl为阳性，经卡方检验统计各类疾病患者尿轻链结果与正常对照差异均存在显著性，结果见附表。
附表 各类疾病尿轻链测定结果 病种
例数
κ链单阳性数(%)
λ链单阳
性数(%)
κ,λ二链
均阳性数
总阳性
数(%)
糖尿病肾病
, 百拇医药
26
15(57.7)***
0(0)
3(11.5)
18(69.2)***
肾功能不全
28
7(25.0)*
0(0)
19(67.9)***
26(92.8)***
, http://www.100md.com
MM
15
7(46.7)
8(53.3)
0(0)
15(100.0)
正常对照
28
0(0)
0(0)
0(0)
0(0)
与对照组比较：*P<0.05，***P<0.001
, 百拇医药
3 讨论
以往检查尿中轻链(本周氏蛋白)可作为判定多发性骨髓瘤或巨球蛋白血症，其尿轻链的升高一般只有单一型轻链升高。免疫检验技术的发展，发现某些病理情况下，血中可有非特异性的良性免疫球蛋白增高，尿中亦有轻链排出[2,3]。病人尿中轻链的增多至少有两种情况：一是属于恶性增殖，这种增殖表现为单克隆性质，尿中只出现单一型轻链，另一属于多克隆增殖，这种轻链各正常人的比例相同，亦即κ：λ=2：1，属良性免疫球蛋白增殖[2]。MM患者尿中轻链升高一般为单阳性，其主要原因是由于产生轻链的单克隆浆细胞高度增生，使轻链合成增加，产生单一类型的异常Ig或Ig片段，超过肾小管重吸收功能所致[7]。本文所有MM病人，均无肾功能损害，血尿素氮和肌酐检查均在正常范围内，因而可排除肾功能对尿轻链的影响。
本文中肾功能不全患者血尿素氮、肌酐已超过参考范围，常规尿蛋白定性为阳性，肾功能不全患者尿轻链升高可能是肾小管受损使得重吸收减少所致。而糖尿病患者的血尿素氮、肌酐尚未升高，血清中β2-微球蛋白(β2-M)显著升高，常规尿蛋白定性为阳性，根据这些糖尿病肾脏损害的早期指标可以确定患者为糖尿病肾病患者。患者尿轻链升高据认为是糖尿病发展到糖尿病肾病时肾小管受损、肾小管重吸收功能下降，或是轻链糖基化后不易被肾小管重吸收的结果[4]。据文献报道[6]，肾病、糖尿病患者尿轻链含量升高均属κ、λ双阳性，可能系肾小管重吸收减少所致。本实验结果显示，肾功能不全患者尿轻链升高大部分属于κ、λ双阳性；二者均无λ单阳性。这可能是由于两种轻链在血中的含量不同，κ几乎是λ的两倍。所以当肾小管受损时，首先出现κ升高，随着病情加重，继而出现λ升高，实验结果显示为κ、λ双阳性，这是可以理解的，但其机理尚有待进一步研究。
, http://www.100md.com
以往实验室多采用热凝溶法，但检出率低，假阳性率高。醋酸纤维膜电泳法的特异性和灵敏度均差。免疫电泳法特异性虽高，但抗血清用量大，灵敏度亦不理想，ELISA法操作较为繁杂，且有一定局限性[5,6]。而本实验采用QM300全自动特定蛋白分析仪来测定，其主要原理就是：任何一种蛋白与其相应抗体反应，反应所产生的不溶性抗原抗体复合物易引起光的散射，QM300特定蛋白分析仪能够根据散射光的强度将其转变为特定蛋白的含量。因此速率散射比浊法具有高敏感性、高特异性及快速的特点，采用速率散射比浊法定量测定尿轻链有助于肾功能不全及糖尿病患者肾脏损害的诊断。
作者简介：陈钦宏(1971-)，男，浙江平阳人，检验师。
参考文献
[1] 凌衫洪，叶任高，李幼姬，等.狼疮性肾炎患者尿内白细胞介素-2受体和免疫蛋白自由轻链的观察[J].中华医学杂志，1993，73(12)：756.
, http://www.100md.com
[2] 田湘青，孔宪涛，谢映华，等.非特异性高γ球蛋白血症与尿中轻链关系的探讨[J].上海免疫学杂志，1988，8(2)：116.
[3] 何凤云，张正侯，卢艳萍，等.肝硬化的免疫球蛋白、循环免疫复合物与血、尿轻链关系户的探讨[J].中国实用内科杂志，1994，14(11)：666.
[4] 陈仁涉，潘四春，肖平，等.酶联免疫法定量测定尿轻链及其临床应用[J].中华医学检验杂志，1993，16(6)：343.
[5] 周方满，高峰，孔宪涛，等.尿轻链酶联免疫测定在M蛋白病中的应用[J].中华血液学杂志，1995，16(5)：269.
[6] 高峰，孔宪涛，刘炎，等.尿轻链酶联免疫测定在M蛋白病中的应用[J].上海医学，1997，20(2)：71.
[7] Walter KV, Ward KM,Mahan JD，et al. Current concepts in proteinuria[J].Clin Chem.1989,35:755.
收稿日期：1999-04-23
修回日期：2000-03-01, http://www.100md.com
参见：首页 > 医疗版 > 疾病专题 > 泌尿外科 > 肾脏 > 肾损伤