新生儿脐血细胞的免疫状态
作者：马金栋 李世荣 王焕信 张云香
单位：261041 山东省潍坊市人民医院检验科(马金栋，李世荣，张云香)；潍坊市坊子区人民医院检验科(王焕信)
关键词：
中华妇产科杂志981116
胎儿在母体胎血屏障保护下发育，基本与外界抗原隔绝，同时要避免母体的同种免疫排斥，其免疫调节机理十分复杂。近年来，随着脐血移植的成功[1]，发现胎儿发生移植物抗宿主疾病(GVHD)十分轻微，其免疫机理如何？本研究检测了76例脐血的T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能，并与成年健康未妊娠妇女外周血进行对比，以探讨脐血的细胞免疫学特征。
一、资料与方法
1.资料：研究组：本院足月正常分娩的76例健康孕妇，年龄24～32岁。按常规方法采集脐血，肝素抗凝。对照组：选择30例健康成年未妊娠妇女，年龄19～34岁。常规方法采集静脉血。实验试剂：单克隆抗体试剂盒(军事医学科学院基础所提供)、冻干酵母多糖和癌试剂(上海长海医院免疫室提供)。
, http://www.100md.com
2.方法：T淋巴细胞亚群检测(桥联酶免法)：常规方法分离单个核细胞悬液，制备细胞涂片。加抗T淋巴细胞单克隆抗体反应后，加抗鼠IgG二抗反应，再加碱性磷酸酶桥联酶标复合物，然后加入碱性磷酸酶底物显色，最后用苏木素复染，高倍镜下计数200个单核细胞，计算阳性细胞百分率。红细胞C3b受体花环(RBCC3bR)、红细胞免疫复合物花环(RBCICR)、红细胞免疫粘附促进因子(RFER)、红细胞免疫粘附抑制因子(RFIR)及协同肿瘤红细胞花环(ATER)测定法参照文献[2]。
二、结果
1.脐血T淋巴细胞亚群结果：研究组CD3、CD4和CD4/CD8显著低于对照组(P<0.01)，CD8显著高于对照组，(P<0.01)。 CD4与CD8细胞数之和明显高于CD3细胞数，见表1。
, 百拇医药
2.脐血红细胞免疫粘附活性结果：研究组RBCC3bR、RBCICR、RFIR显著高于对照组(P<0.01),而RFER、ATER则显著低于对照组(P<0.01)，见表2。
三、讨论
1.脐血T淋巴细胞的免疫特征：本资料显示，脐血CD3细胞数较少，CD4和CD8细胞数之和明显高于CD3细胞数。说明脐血T细胞表型上是不成熟的，抑制作用占优势，表现为抗感染能力低下，另一方面又不易引起排斥反应。在妊娠期间，如母体淋巴细胞透过胎盘进入胎儿体内，胎儿淋巴细胞能抑制母体淋巴细胞分裂[3] ，保护胎儿免遭排斥，如胎儿细胞进入母体循环，在母体抗原刺激下，可引起增殖。但由于胎儿淋巴细胞的封闭抑制作用，可防止GVHD发生。脐血抑制性占优势的CD4细胞，是胎儿预防母体淋巴细胞性GVHD的生理性防御机理，以及新生儿易患感染的细胞免疫学基础。
, 百拇医药
一般认为，供体周围血中CD4/CD8大于1.3，很容易发生移植排斥反应[4]。本研究脐血CD4/CD8小于1.3，这也是脐血移植时GVHD表现轻微的一个重要原因。
2.脐血红细胞的免疫特征：本研究表明，脐血红细胞免疫功能显著增强(RBCC3BbR、RBCICR明显升高)。推测在胚胎期，由于胎儿与母体免疫相互作用，可能在胎儿体内形成抗原-抗体复合物，此时胎儿的吞噬系统尚未发育成熟，红细胞免疫功能增强，有利于清除这些复合物。在新生儿期，尚未发育成熟的吞噬系统仍需红细胞免疫系统的辅助。
脐血ATER率降低，红细胞免疫粘附促进率明显降低，抑制率则明显升高，这与胎儿时期机体免疫功能以抑制状态为主相一致。
表1 两组T淋巴细胞亚群比较(%，
±s) 组别
, 百拇医药
例数
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
CD4+CD8
研究组
76
46.1±7.4
34.4±6.9
28.2±3.8
, http://www.100md.com
1.22±0.23
61.2±8.2
对照组
30
64.3±7.1
39.8±6.7
24.2±4.4
1.64±0.28
62.8±9.4
P值
<0.01
<0.01
, http://www.100md.com
<0.01
<0.01
>0.05
表2 两组红细胞免疫粘附活性比较(%，±s) 组别
例数
RBCC3bR
RBCICR
RFER
RFIR
ATER
研究组
, 百拇医药
76
26.1±5.6
7.8±5.4
74.6±14.5
46.8±8.6
34.6±4.3
对照组
30
19.9±5.8
5.4±1.7
98.6±12.4
34.4±5.6
, http://www.100md.com
59.7±6.1
P值
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
参考文献
1 沈柏均，张洪泉，侯怀水，等.脐血造血干细胞移植一例报告.中华器官移植杂志，1991，12:138-138.
2 郭峰.红细胞免疫及调节功能测定方法.中国免疫学杂志，1990，6:60-61.
3 沈柏均主编.人类脐血：基础*临床.天津：天津科学技术出版社，1995.72-73.
4 王梦昌，韩丽、邵文斌，等.脐血免疫学特征研究.中国免疫学杂志，1995，11(增刊):254-255.
(收稿：1997-10-30 修回：1998-07-16), http://www.100md.com
单位：261041 山东省潍坊市人民医院检验科(马金栋，李世荣，张云香)；潍坊市坊子区人民医院检验科(王焕信)
关键词：
中华妇产科杂志981116
胎儿在母体胎血屏障保护下发育，基本与外界抗原隔绝，同时要避免母体的同种免疫排斥，其免疫调节机理十分复杂。近年来，随着脐血移植的成功[1]，发现胎儿发生移植物抗宿主疾病(GVHD)十分轻微，其免疫机理如何？本研究检测了76例脐血的T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能，并与成年健康未妊娠妇女外周血进行对比，以探讨脐血的细胞免疫学特征。
一、资料与方法
1.资料：研究组：本院足月正常分娩的76例健康孕妇，年龄24～32岁。按常规方法采集脐血，肝素抗凝。对照组：选择30例健康成年未妊娠妇女，年龄19～34岁。常规方法采集静脉血。实验试剂：单克隆抗体试剂盒(军事医学科学院基础所提供)、冻干酵母多糖和癌试剂(上海长海医院免疫室提供)。
, http://www.100md.com
2.方法：T淋巴细胞亚群检测(桥联酶免法)：常规方法分离单个核细胞悬液，制备细胞涂片。加抗T淋巴细胞单克隆抗体反应后，加抗鼠IgG二抗反应，再加碱性磷酸酶桥联酶标复合物，然后加入碱性磷酸酶底物显色，最后用苏木素复染，高倍镜下计数200个单核细胞，计算阳性细胞百分率。红细胞C3b受体花环(RBCC3bR)、红细胞免疫复合物花环(RBCICR)、红细胞免疫粘附促进因子(RFER)、红细胞免疫粘附抑制因子(RFIR)及协同肿瘤红细胞花环(ATER)测定法参照文献[2]。
二、结果
1.脐血T淋巴细胞亚群结果：研究组CD3、CD4和CD4/CD8显著低于对照组(P<0.01)，CD8显著高于对照组，(P<0.01)。 CD4与CD8细胞数之和明显高于CD3细胞数，见表1。
, 百拇医药
2.脐血红细胞免疫粘附活性结果：研究组RBCC3bR、RBCICR、RFIR显著高于对照组(P<0.01),而RFER、ATER则显著低于对照组(P<0.01)，见表2。
三、讨论
1.脐血T淋巴细胞的免疫特征：本资料显示，脐血CD3细胞数较少，CD4和CD8细胞数之和明显高于CD3细胞数。说明脐血T细胞表型上是不成熟的，抑制作用占优势，表现为抗感染能力低下，另一方面又不易引起排斥反应。在妊娠期间，如母体淋巴细胞透过胎盘进入胎儿体内，胎儿淋巴细胞能抑制母体淋巴细胞分裂[3] ，保护胎儿免遭排斥，如胎儿细胞进入母体循环，在母体抗原刺激下，可引起增殖。但由于胎儿淋巴细胞的封闭抑制作用，可防止GVHD发生。脐血抑制性占优势的CD4细胞，是胎儿预防母体淋巴细胞性GVHD的生理性防御机理，以及新生儿易患感染的细胞免疫学基础。
, 百拇医药
一般认为，供体周围血中CD4/CD8大于1.3，很容易发生移植排斥反应[4]。本研究脐血CD4/CD8小于1.3，这也是脐血移植时GVHD表现轻微的一个重要原因。
2.脐血红细胞的免疫特征：本研究表明，脐血红细胞免疫功能显著增强(RBCC3BbR、RBCICR明显升高)。推测在胚胎期，由于胎儿与母体免疫相互作用，可能在胎儿体内形成抗原-抗体复合物，此时胎儿的吞噬系统尚未发育成熟，红细胞免疫功能增强，有利于清除这些复合物。在新生儿期，尚未发育成熟的吞噬系统仍需红细胞免疫系统的辅助。
脐血ATER率降低，红细胞免疫粘附促进率明显降低，抑制率则明显升高，这与胎儿时期机体免疫功能以抑制状态为主相一致。
表1 两组T淋巴细胞亚群比较(%，
±s) 组别, 百拇医药
例数
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
CD4+CD8
研究组
76
46.1±7.4
34.4±6.9
28.2±3.8
, http://www.100md.com
1.22±0.23
61.2±8.2
对照组
30
64.3±7.1
39.8±6.7
24.2±4.4
1.64±0.28
62.8±9.4
P值
<0.01
<0.01
, http://www.100md.com
<0.01
<0.01
>0.05
表2 两组红细胞免疫粘附活性比较(%，
±s) 组别例数
RBCC3bR
RBCICR
RFER
RFIR
ATER
研究组
, 百拇医药
76
26.1±5.6
7.8±5.4
74.6±14.5
46.8±8.6
34.6±4.3
对照组
30
19.9±5.8
5.4±1.7
98.6±12.4
34.4±5.6
, http://www.100md.com
59.7±6.1
P值
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
参考文献
1 沈柏均，张洪泉，侯怀水，等.脐血造血干细胞移植一例报告.中华器官移植杂志，1991，12:138-138.
2 郭峰.红细胞免疫及调节功能测定方法.中国免疫学杂志，1990，6:60-61.
3 沈柏均主编.人类脐血：基础*临床.天津：天津科学技术出版社，1995.72-73.
4 王梦昌，韩丽、邵文斌，等.脐血免疫学特征研究.中国免疫学杂志，1995，11(增刊):254-255.
(收稿：1997-10-30 修回：1998-07-16), http://www.100md.com