子宫内膜异位症合并不育患者腹腔液内皮素含量的测定
作者：何春妮 张令浩 宋岩峰
单位：350025 南京军区福州总医院妇产科(何春妮， 宋岩峰)；第二军医大学长征医院妇产科(张令浩)
关键词：
中华妇产科杂志990321 内皮素(ET)是1988年Yanagisawa等[1]从猪主动脉内皮细胞分离出来的一种由21个氨基酸组成的强收缩血管肽。机体内存在3种异构体，即ET-1、ET-2和ET-3，其中生物活性以ET-1最强。近年来已证明，ET-1存在于卵泡液及颗粒细胞培养液中，可通过抑制卵巢颗粒细胞孕酮的基础分泌，抑制卵泡发育[2]。本研究通过确定ET-1存在于腹腔液中，探讨ET-1与子宫内膜异位症(内异症)合并不育的关系。
一、资料与方法
1.研究对象：1995年5月至1996年5月因不孕症就诊于第二军医大学长征医院妇产科的患者45例，其中原发性不孕26例，继发性不孕19例。患者年龄24～40岁，平均年龄33.8岁。于月经周期第12～16天行腹腔镜检查术。并行输卵管通液术。按腹腔镜下观察有无内异症分为两组：(1)内异症组：33例，内异症患者，按美国生育协会修改标准分期，Ⅰ期13例，Ⅱ期8例，Ⅲ期7例，Ⅳ期5例；(2)对照组：12例，无内异症，为输卵管因素不孕，其中并发排卵障碍5例。
, 百拇医药
2.样本收集：受检者术前取前臂肘静脉血，术中抽取腹腔液各3 ml置于含 60 μl的乙二胺四乙酸二钠(100 g/L)和1 000 IU抑肽酶的试管中混匀，在4℃条件下以3 000 r/min 离心10分钟，取上清液置-30℃冰箱待测。
3.检测方法：ET-1水平测定采用直接测定法。测定药盒购自解放军总医院放射免疫研究所。雌二醇(E2)、孕酮(P)测定采用放射免疫法，药盒购自天津九鼎生物工程有限公司，结果E2以pmol/L 表示，P以nmol/L 表示。
4.统计学方法：采用 t 检验及直线相关分析法。
二、结果
1.血浆ET-1、E2和P水平：内异症组血浆ET-1、E2和P浓度与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。见表1。
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表1 两组患者血浆ET-1、E2和P浓度(
±s) 组 别
总例数
ET-1(ng/L)
E2(pmol/L)
P(nmol/L)
内异症组
33
62±22
264±268
15±15
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对照组
12
58±17
283±294
16±16
2.腹腔液中ET-1、E2和P水平：内异症组腹腔液ET-1浓度与对照组相比，明显升高(P<0.05)，腹腔液中E2和P水平在二组间差异无显著性(P>0.05)。见表2。 表2 两组患者腹腔液中ET-1、E2和P浓度(±s) 组别
总例数
ET-1(ng/L)
, 百拇医药
E2(pmol/L)
P(nmol/L)
内异症组
33
84±24
521±517
70±84
对照组
12
60±18
539±562
81±92
, 百拇医药
3.腹腔液中ET-1水平与内异症临床分期：两者无相关性(P>0.05)。两组血浆中ET-1浓度与腹腔液浓度间均无相关性(P>0.05)。
三、讨论
近年来发现，局部激素如前列腺素、ET-1及血小板活化因子等与内异症引起的不育关系密切。局部激素广泛分布于人的组织和体液中，含量低但效应高[3]。ET-1是一种由内皮细胞产生的强血管收缩肽。高亲和力ET-1受体不仅存在于血管平滑肌细胞和内皮细胞，还存在于女性生殖道、巨噬细胞等组织中[3]。ET与靶细胞受体结合后，促进平滑肌和血管的收缩。以往研究发现，内异症患者腹腔巨噬细胞数量增多，活性增强，巨噬细胞能分泌ET-1；且巨噬细胞分泌的细胞因子如白细胞介素1、白细胞介素6及肿瘤坏死因子浓度在内异症患者腹腔液中升高[4]，这些细胞因子均能刺激动脉内皮细胞分泌ET-1。因此推测，他们也可通过刺激子宫内膜血管内皮细胞分泌ET-1而导致腹腔液ET-1水平升高。此外，内异症不孕患者卵泡液免疫性ET-1水平明显升高，排卵后卵泡液流入腹腔也是腹腔液ET-1水平升高的原因之一[5]。本研究发现，ET-1存在于不育患者的腹腔液中，但未发现其产生和E2、P有关。内异症患者腹腔液ET-1浓度明显高于无内异症者，而两组患者血浆ET-1却无显著差异，这些也进一步证明了ET-1是由腹腔局部环境产生的。
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腹腔液浸绕着盆腔内生殖器官，又与异位内膜病灶相接触，内异症合并不育患者ET-1水平升高可能通过以下机理干扰受孕过程：子宫平滑肌上ET-1受体在排卵时影响子宫收缩, 阻止精子上行；增强子宫动脉阻力，使子宫供血不足，导致妊娠率下降。此外，由卵巢组织生成的ET-1可显著抑制卵巢颗粒细胞P的基础分泌和黄体生成素(LH)诱导的分泌[2]，而内异症患者卵泡生长率和颗粒细胞中LH受体偏低。因此，ET-1浓度升高不利于卵泡的发育。 参考文献
1 Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S, et al. A novel potent vasoconstrictior peptide produced by vascular endothelial cell. Nature,1988,332:411-415.
2 Iwai M,Hasegawa M,Taii S,et al.Endothelins inhibit luteinization of cultured porcine granulosa cells. Endocrinology,1991,129:1909-1914.
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3 何春妮，张令浩.局部激素与子宫内膜异位症. 国外医学妇产科学分册，1996，23：284-287.
4 Kanse M, Takahasi K, Lam HC, et al. Cytokine stimulated endothelin release from endothelial cells. Life Sci,1991,48:1379-1384.
5 Abae M, Yoshida H, Classberg M, et al. Immunoreative endothelin-1 concentrations in follicular fluid of women with and without endometriosis undergoing in vitro fertilization-embryo transfer. Fertil Steril,1994,61:1083-1087.
(收稿：1998-04-02 修回：1998-11-09), http://www.100md.com
单位：350025 南京军区福州总医院妇产科(何春妮， 宋岩峰)；第二军医大学长征医院妇产科(张令浩)
关键词：
中华妇产科杂志990321 内皮素(ET)是1988年Yanagisawa等[1]从猪主动脉内皮细胞分离出来的一种由21个氨基酸组成的强收缩血管肽。机体内存在3种异构体，即ET-1、ET-2和ET-3，其中生物活性以ET-1最强。近年来已证明，ET-1存在于卵泡液及颗粒细胞培养液中，可通过抑制卵巢颗粒细胞孕酮的基础分泌，抑制卵泡发育[2]。本研究通过确定ET-1存在于腹腔液中，探讨ET-1与子宫内膜异位症(内异症)合并不育的关系。
一、资料与方法
1.研究对象：1995年5月至1996年5月因不孕症就诊于第二军医大学长征医院妇产科的患者45例，其中原发性不孕26例，继发性不孕19例。患者年龄24～40岁，平均年龄33.8岁。于月经周期第12～16天行腹腔镜检查术。并行输卵管通液术。按腹腔镜下观察有无内异症分为两组：(1)内异症组：33例，内异症患者，按美国生育协会修改标准分期，Ⅰ期13例，Ⅱ期8例，Ⅲ期7例，Ⅳ期5例；(2)对照组：12例，无内异症，为输卵管因素不孕，其中并发排卵障碍5例。
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2.样本收集：受检者术前取前臂肘静脉血，术中抽取腹腔液各3 ml置于含 60 μl的乙二胺四乙酸二钠(100 g/L)和1 000 IU抑肽酶的试管中混匀，在4℃条件下以3 000 r/min 离心10分钟，取上清液置-30℃冰箱待测。
3.检测方法：ET-1水平测定采用直接测定法。测定药盒购自解放军总医院放射免疫研究所。雌二醇(E2)、孕酮(P)测定采用放射免疫法，药盒购自天津九鼎生物工程有限公司，结果E2以pmol/L 表示，P以nmol/L 表示。
4.统计学方法：采用 t 检验及直线相关分析法。
二、结果
1.血浆ET-1、E2和P水平：内异症组血浆ET-1、E2和P浓度与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。见表1。
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表1 两组患者血浆ET-1、E2和P浓度(
±s) 组 别总例数
ET-1(ng/L)
E2(pmol/L)
P(nmol/L)
内异症组
33
62±22
264±268
15±15
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对照组
12
58±17
283±294
16±16
2.腹腔液中ET-1、E2和P水平：内异症组腹腔液ET-1浓度与对照组相比，明显升高(P<0.05)，腹腔液中E2和P水平在二组间差异无显著性(P>0.05)。见表2。 表2 两组患者腹腔液中ET-1、E2和P浓度(
±s) 组别总例数
ET-1(ng/L)
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E2(pmol/L)
P(nmol/L)
内异症组
33
84±24
521±517
70±84
对照组
12
60±18
539±562
81±92
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3.腹腔液中ET-1水平与内异症临床分期：两者无相关性(P>0.05)。两组血浆中ET-1浓度与腹腔液浓度间均无相关性(P>0.05)。
三、讨论
近年来发现，局部激素如前列腺素、ET-1及血小板活化因子等与内异症引起的不育关系密切。局部激素广泛分布于人的组织和体液中，含量低但效应高[3]。ET-1是一种由内皮细胞产生的强血管收缩肽。高亲和力ET-1受体不仅存在于血管平滑肌细胞和内皮细胞，还存在于女性生殖道、巨噬细胞等组织中[3]。ET与靶细胞受体结合后，促进平滑肌和血管的收缩。以往研究发现，内异症患者腹腔巨噬细胞数量增多，活性增强，巨噬细胞能分泌ET-1；且巨噬细胞分泌的细胞因子如白细胞介素1、白细胞介素6及肿瘤坏死因子浓度在内异症患者腹腔液中升高[4]，这些细胞因子均能刺激动脉内皮细胞分泌ET-1。因此推测，他们也可通过刺激子宫内膜血管内皮细胞分泌ET-1而导致腹腔液ET-1水平升高。此外，内异症不孕患者卵泡液免疫性ET-1水平明显升高，排卵后卵泡液流入腹腔也是腹腔液ET-1水平升高的原因之一[5]。本研究发现，ET-1存在于不育患者的腹腔液中，但未发现其产生和E2、P有关。内异症患者腹腔液ET-1浓度明显高于无内异症者，而两组患者血浆ET-1却无显著差异，这些也进一步证明了ET-1是由腹腔局部环境产生的。
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腹腔液浸绕着盆腔内生殖器官，又与异位内膜病灶相接触，内异症合并不育患者ET-1水平升高可能通过以下机理干扰受孕过程：子宫平滑肌上ET-1受体在排卵时影响子宫收缩, 阻止精子上行；增强子宫动脉阻力，使子宫供血不足，导致妊娠率下降。此外，由卵巢组织生成的ET-1可显著抑制卵巢颗粒细胞P的基础分泌和黄体生成素(LH)诱导的分泌[2]，而内异症患者卵泡生长率和颗粒细胞中LH受体偏低。因此，ET-1浓度升高不利于卵泡的发育。 参考文献
1 Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S, et al. A novel potent vasoconstrictior peptide produced by vascular endothelial cell. Nature,1988,332:411-415.
2 Iwai M,Hasegawa M,Taii S,et al.Endothelins inhibit luteinization of cultured porcine granulosa cells. Endocrinology,1991,129:1909-1914.
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3 何春妮，张令浩.局部激素与子宫内膜异位症. 国外医学妇产科学分册，1996，23：284-287.
4 Kanse M, Takahasi K, Lam HC, et al. Cytokine stimulated endothelin release from endothelial cells. Life Sci,1991,48:1379-1384.
5 Abae M, Yoshida H, Classberg M, et al. Immunoreative endothelin-1 concentrations in follicular fluid of women with and without endometriosis undergoing in vitro fertilization-embryo transfer. Fertil Steril,1994,61:1083-1087.
(收稿：1998-04-02 修回：1998-11-09), http://www.100md.com