子宫内膜癌的微卫星不稳定性与临床病理和雌、孕激素受体水平的关系
作者：宋英娜 郎景和
单位：宋英娜(100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科)；郎景和(100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科)
关键词：子宫内膜肿瘤；DNA卫星；受体，雌激素；受体，孕酮
中华妇产科杂志000505 【摘要】 目的 探讨子宫内膜癌微卫星不稳定性(microsatellite instability,MI)的发生率及其与各临床病理参数和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平的关系。方法 采用聚合酶链反应(PCR)、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳等技术，在8个位点上对40例散发性子宫内膜癌病人进行MI测定。以免疫组织化学法检测了27例病人的ER、PR水平，并比较MI与临床病理参数和ER、PR水平的关系。结果9例(23%)在两个或两个以上的位点显示为MI阳性，称为复制错误(replication error,RER)阳性，余31例(77%)为RER阴性，即表现为仅1个位点有MI或8个位点均无MI。9例RER阳性者均为子宫内膜样癌，非子宫内膜样癌中无MI阳性者；36例子宫内膜样癌中，中、低分化者RER阳性率为50%(5/10)，明显高于高分化者的15%(4/26)，差异有显著性(P<0.05)；MI与临床分期和子宫肌层浸润深度无关(P>0.05)。27例检测ER、PR水平的病人中，19例(70%)表现为ER、PR均阳性；子宫内膜样癌中RER阳性者ER、PR均阳性率为6例中3例(3/6)，明显低于RER阴性者的84%(16/19)，差异有显著性(P<0.05)。结论 MI是子宫内膜癌发生、发展的机理之一，与病理分化程度、组织学类型及ER、PR水平有关。
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Microsatellite Instability in Endometrial Neoplasms Correlation with Clinicopathologic Parameters and Estrogen Receptor or Progesterone Receptor Status
SONG Yingna，LANG Jinghe
(Department of Obstetrics and Gynecology, Peking Union Medical College, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Science, Beijing 100730, China)
【Abstract】 Objective To assess the prevalence of microsatellite instability in a series of endometrial carcinomas as well as to define the clinicopathologic features and estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) status associated with microsatellite instability (MI). Methods We examined 40 cases for replication error (RER) using polymerase chain reaction, polyacrylamide gel electrophoresis and silver stain at 8 microsatellite loci. Immunohistochemical staining of 27 paraffin sections was performed using antibodies to ER and PR. Finally, MI was compared with the clinicopathologic characteristics as well as ER and PR status. Results MI was observed in 9 (23%) at two or more loci, which is defined as RER positive phenotype. The 9 RER positive cases were all endometrioid type. Four non- endometrioid tumors failed to show MI in any locus. RER positive phenotype was more frequent in poorly differentiated (50%) than in well differentiated tumors (15%). We found no significant correlation of RER with stage and depth of invasion. Of 27 carcinomas, 19 (70%) showed homogeneous positive staining for ER and PR. ER and PR positive staining occured more frequently in RER negtive endometrioid cancers than in RER positive cases. Conclusions MI is one of the molecular mechanisms of a subset of endometrial carcinomas. Its frequency is associated with tumor grade, histological type and ER or PR status.
, 百拇医药
【Key words】 Endometrial neoplasms；DNA, satellite;Receptors, estrogen;Receptors, progesterone
微卫星不稳定性(microsatellite instability, MI)是指由于复制错误(replication error, RER)引起的微卫星DNA长度的改变，它是近年发现的新的参与肿瘤发生的机理之一。MI最早发现于遗传性非息肉性结直肠癌，子宫内膜癌是遗传性非息肉性结直肠癌综合征中第2常见的肿瘤，遗传性非息肉性结直肠癌家族中75%的子宫内膜癌患者有MI[1]。为探明MI在散发性子宫内膜癌中的临床和生物学意义，本研究检测了40例散发性子宫内膜癌病人在8个微卫星位点上的MI发生率，并分析了MI与某些临床病理参数和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平的关系。
资料与方法
, 百拇医药 一、资料来源
选择我院1996～1998年间住院并手术治疗的子宫内膜癌病人40例，年龄在32～76岁之间，均无遗传性非息肉性结直肠癌家族史，术前均未接受过放射治疗、化学治疗或激素治疗。其中子宫内膜样癌36例，浆液性乳头状癌(浆乳癌)3例，透明细胞癌1例。根据国际妇产科联盟(1988年)标准进行临床分期，Ⅰ期35例，Ⅱ期2例，Ⅲ期3例。子宫内膜样癌中有26例为高分化腺癌，5例为中分化腺癌，5例为低分化腺癌。刮宫或手术切除的标本经常规甲醛固定，石蜡包埋。每例病人选取2个石蜡组织块，1个为子宫内膜癌组织，另1个为正常组织(非肿瘤、非子宫内膜组织，即无癌细胞浸润的淋巴结、卵巢或宫颈组织)。
二、方法
1.DNA的提取：常规石蜡包埋组织块，对原片观察后，标出所需部位。用一次性紫外消毒刀片，10 μm 厚连续切片，脱蜡后采用酚氯仿法抽提基因组DNA，-20℃贮存。
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2.微卫星位点的选择：选取D2S123、HUMCA 1126、D5S107、D11S904、D13S175、D17S1323、D10S89、TP53共8个位点，引物由上海生物工程公司合成。
3.微卫星的扩增与电泳：聚合酶链反应(PCR)的反应条件参照文献[2]。PCR产物经甲酰胺变性后，在8%聚丙烯酰胺凝胶(含8 mol/L尿素)中电泳(350 V)3 h，凝胶采用银染法显色，照相保存。
4.判断标准：癌组织和同一病人的正常组织DNA在同一条件下进行PCR扩增、电泳，若出现完全一致的电泳条带，则MI阴性；如果癌组织与正常组织比较出现条带的移动、缺失或获得额外的条带即可判断为MI阳性。在两个或两个以上位点发生MI阳性者称为RER阳性。
5.ER和PR水平的测定:采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法对27例病人(25例子宫内膜样癌，1例浆乳癌，1例透明细胞癌)进行了ER、PR检测。结果判定参照卢小梅等[3]的标准。
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三、统计学分析
采用χ2检验。
结果
一、发生MI的频率
RER阳性者占23%(9/40)；RER阴性者占77%(31/40)，其中4例仅1个位点有MI，27例在任一位点均无MI。本研究中，所有RER阳性病例均重复1遍PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳以避免因聚合错误引起MI假阳性。典型的MI阳性和MI阴性病例的电泳结果见图1，2。
图1 3个位点MI阳性的电泳结果
图2 3个位点MI阴性的电泳结果
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二、各微卫星位点出现MI的频率
8个微卫星位点出现不稳定性的频率有所不同，见图3。其中，出现MI频率最多的位点为D5S107，13例MI阳性病人中有6例(46%)在此位点发生改变；出现MI频率最低的位点为D11S904，仅1例(8%)。
图3 8个微卫星位点出现MI的频率
三、各临床病理参数中出现MI的频率
将病人按病理分化程度、临床分期、子宫肌层浸润深度、组织学类型分为若干组(表1)。结果发现，中、低分化子宫内膜样癌RER阳性率(50%,5/10)明显高于高分化癌(15%,4/26) (P<0.05， χ2=4.615)。RER阳性率与子宫肌层的浸润深度(P>0.05， χ2=0.402)、临床分期(P>0.05, χ2=1.004)无关。13例MI阳性者均为子宫内膜样癌，浆乳癌和透明细胞癌中无一例阳性。
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表1 40例 病人各种临床病理参数出现MI的频率(例数) 类别
总例数
RER阴性
RER阳性
任一位点
均无MI
仅1个位
点有MI
病理分化程度
36
(子宫内膜样癌)
高分化
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20
2
4
中分化
2
1
2*
低分化
1
1
3*
临床分期
40
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Ⅰ期
26
2
7
Ⅱ期
0
1
1
Ⅲ期
1
1
1
子宫肌层浸润深度
40
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内膜内
5
1
2
肌层内1/2
18
2
5
肌层外1/2
4
1
2
组织学类型
40
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子宫内膜样癌
23
4
9
浆乳癌
3
0
0
透明细胞癌
1
0
0
* 中、低分化与高分化子宫内膜样癌RER阳性率比较，差异有显著性(P<0.05，χ2=4.615) 四、ER、PR水平及其与MI
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27例检测ER、PR水平的病人中，7例(26%)为ER和PR均阴性，其中2例为非子宫内膜样癌；19例(70%)为ER、PR均阳性；1例(4%)为ER阴性、PR阳性。27例病人中，RER阳性者6例，其中ER和PR均阳性的百分率为6例中3例(3/6)，低于RER阴性者的80% (16/20)，但两者比较，差异无显著性(P>0.05, χ2=2.111)，见表2。而在25例子宫内膜样癌病人中，ER和PR均阳性的百分率，在RER阳性者中为6例中3例 (3/6)，明显低于RER阴性者的84% (16/19)，差异有显著性(P<0.05, χ2=4.126)。中、低分化子宫内膜样癌的ER和PR均阳性的百分率为5例中2例(2/5)，明显低于高分化癌的89%(17/19)，两者比较，差异有显著性(P<0.05，χ2=5.874)，见表3。
表2 RER阳性和阴性病人中ER和
PR的表达情况(例数) 类 别
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ER和PR均阴性
ER和PR均阳性
合 计
子宫内膜
样癌
其他*
子宫内膜
样癌
其他*
RER阳性
3
0
3
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0
6
RER阴性
2
2
16
0
20
* 指浆乳癌和透明细胞癌表3 不同病理分化程度病人中ER和
PR的表达情况(例数) 类 别
ER和PR均阴性
ER和PR均阳性
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合 计
高分化
2
17
19
中分化
1
1*
2
低分化
2
1*
3
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* 中、低分化与高分化子宫内膜样癌比较，差异有显著性(P<0.05，χ2=5.874)讨论
一、MI与肿瘤发生的关系
MI最早见于遗传性非息肉性结直肠癌患者，在其他一些散发性(非遗传性)肿瘤中也相继发现了MI现象，如胃癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌等，提示MI可能是肿瘤细胞的另一标志[4]。MI与DNA错配修复有关，它反映了错配修复系统的异常，错配修复系统异常使得基因复制错误不能被纠正，细胞突变率上升，累积到一定程度，将导致细胞的恶性转化。尽管RER阳性对肿瘤发生的确切机理尚未阐明，但MI影响基因组稳定性和有关基因的功能，可能是产生肿瘤或肿瘤易感性的重要原因。
二、MI发生率及检测差异
据文献报道，散发性子宫内膜癌RER阳性率为9%～28%[5-7]，本研究检测的结果为23%。上述各研究小组报道的子宫内膜癌RER阳性率的差异可能有以下几种原因：(1)采用的PCR产物的显色方法不同。(2)选用的微卫星位点不同，各个位点不稳定性的频率和程度有所差异。(3)测定位点的数目不同，随着被测位点数目的增多，MI现象也增多。但由于各研究小组采用的RER阳性标准多为“两个或两个以上微卫星位点出现MI”，这就有可能使所测位点数目多的研究小组得出RER阳性率高的结论。可见当进行多个微卫星位点的分析时，不稳定位点所占的百分比，较其绝对数目在判定时更有决定性意义。德国的遗传性非息肉性结直肠癌研究小组建议，当选取的微卫星标记中>20%的位点出现条带的改变时，可诊断为RER阳性[7]。本研究选取了8个位点，以两个或两个以上位点出现电泳条带的改变为RER阳性，符合上述标准。
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三、MI与肿瘤特异性的关系
本研究所测的8个微卫星位点出现MI的频率有一定的差异。D5S107出现不稳定性的频率最高，D11S904频率最低。其他肿瘤中也发现了这种出现MI频率的差异。结直肠癌中APC位点受累频率最高，而胃癌和乳腺癌中染色体2p上的3个位点MI频率较高[8]。由此提示，出现MI的位点可能具有肿瘤特异性，即不同类型的肿瘤易受累的位点也不同。
四、MI与临床病理参数的关系
子宫内膜癌MI与病理分化程度和预后的关系尚未有一致性的结论。Caduff等[5]发现，分化差的子宫内膜癌RER阳性率明显高于分化良好的肿瘤。Catasus等[6]的结果则表明，MI与肿瘤分级和预后无关。本研究发现，中、低分化癌RER阳性率明显高于高分化癌，两者差异有显著性。提示，MI在一定程度上反映了子宫内膜癌的分化程度。
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本研究中，临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期子宫内膜癌的RER阳性率比较，差异无显著性，其他报道也未发现MI与子宫内膜癌的临床分期有关[5,6]。提示，MI很可能发生于子宫内膜癌的早期，随着肿瘤的进展，MI由早期稳定地遗传到晚期。有研究表明，RER阳性子宫内膜癌组织周围的不典型增生病变也为RER阳性，并且两者来源于同一克隆，属于同一谱系[9]，由此提示，RER阳性的获得在子宫内膜癌的发展中是1个早期改变。
子宫内膜癌可以分成两类：一类为子宫内膜样癌；另一类为非子宫内膜样癌，包括腺鳞癌、浆乳癌和透明细胞癌等。不论是免疫组织化学还是基因突变的分析均表明，这两类子宫内膜癌发生、发展的机理各不相同。本研究发现了另1个子宫内膜样癌与非子宫内膜样癌不同的分子异常即MI。我们检测的9例RER阳性均为子宫内膜样癌，4例非子宫内膜样癌无MI。Tashiro等[10]的结果显示，子宫内膜样癌RER阳性率为20%，而34例浆乳癌无一例符合MI标准。可见，不同的机理参与了这两类子宫内膜癌的发生，MI主要参与了子宫内膜样癌的发生、发展。
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五、MI与ER、PR水平的关系
子宫内膜癌的发病与雌激素的长期刺激有关，多数子宫内膜癌有ER、PR表达。本研究检测的ER和PR阳性率略高于Nanbu等[11]的报道。ER和PR水平与病理分化程度有密切关系，分化良好者ER、PR阳性率高，提示ER和PR水平在一定程度上反映了肿瘤的分化程度。MI与ER和PR的关系似乎与肿瘤类型有关。子宫内膜样癌中，RER阳性者ER和PR阳性率低于RER阴性者，两者差异有显著性。已有研究表明，子宫内膜癌的ER和PR水平与某些癌基因及热休克蛋白的表达有关，ER和PR阳性者预后良好[11]。提示，子宫内膜样癌的MI可能也与上述基因的异常表达及病人的预后有关，但需要进一步的证实。
参考文献
1，Sirchia SM, Pariani S, Rossella F, et al. Cytogenetic abnormalities and microsatellite instability in endometrial adenocarcinoma. Cancer Genet Cytogenet, 1997, 94: 113-119.
, 百拇医药
2，Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T, 主编. 分子克隆实验指南.金冬雁，黎孟枫，译. 第2版.北京：科学出版社，1996.681-683.
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5，Caduff RF, Johnston CM, Svoboda-Newman SM, et al. Clinical and pathological significance of microsatellite instability in sporadic endometrial carcinoma. Am J Pathol, 1996, 148: 1671-1678.
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, 百拇医药
10，Tashiro H, Lax SF, Gaudin PB, et al. Microsatellite instability is uncommon in uterine serous carcinoma. Am J Pathol, 1997, 150:75-79.
11，Nanbu K, Konishi I, Komatsu T, et al. Expression of heat shock protrin HSP70 and HSP90 in endometrial carcinomas， correlation with clinicopathology, sex steroid receptor status, and p53 protein expression. Cancer, 1996, 77: 330-338.
(收稿日期：1999-08-24), 百拇医药
单位：宋英娜(100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科)；郎景和(100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科)
关键词：子宫内膜肿瘤；DNA卫星；受体，雌激素；受体，孕酮
中华妇产科杂志000505 【摘要】 目的 探讨子宫内膜癌微卫星不稳定性(microsatellite instability,MI)的发生率及其与各临床病理参数和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平的关系。方法 采用聚合酶链反应(PCR)、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳等技术，在8个位点上对40例散发性子宫内膜癌病人进行MI测定。以免疫组织化学法检测了27例病人的ER、PR水平，并比较MI与临床病理参数和ER、PR水平的关系。结果9例(23%)在两个或两个以上的位点显示为MI阳性，称为复制错误(replication error,RER)阳性，余31例(77%)为RER阴性，即表现为仅1个位点有MI或8个位点均无MI。9例RER阳性者均为子宫内膜样癌，非子宫内膜样癌中无MI阳性者；36例子宫内膜样癌中，中、低分化者RER阳性率为50%(5/10)，明显高于高分化者的15%(4/26)，差异有显著性(P<0.05)；MI与临床分期和子宫肌层浸润深度无关(P>0.05)。27例检测ER、PR水平的病人中，19例(70%)表现为ER、PR均阳性；子宫内膜样癌中RER阳性者ER、PR均阳性率为6例中3例(3/6)，明显低于RER阴性者的84%(16/19)，差异有显著性(P<0.05)。结论 MI是子宫内膜癌发生、发展的机理之一，与病理分化程度、组织学类型及ER、PR水平有关。
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Microsatellite Instability in Endometrial Neoplasms Correlation with Clinicopathologic Parameters and Estrogen Receptor or Progesterone Receptor Status
SONG Yingna，LANG Jinghe
(Department of Obstetrics and Gynecology, Peking Union Medical College, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Science, Beijing 100730, China)
【Abstract】 Objective To assess the prevalence of microsatellite instability in a series of endometrial carcinomas as well as to define the clinicopathologic features and estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) status associated with microsatellite instability (MI). Methods We examined 40 cases for replication error (RER) using polymerase chain reaction, polyacrylamide gel electrophoresis and silver stain at 8 microsatellite loci. Immunohistochemical staining of 27 paraffin sections was performed using antibodies to ER and PR. Finally, MI was compared with the clinicopathologic characteristics as well as ER and PR status. Results MI was observed in 9 (23%) at two or more loci, which is defined as RER positive phenotype. The 9 RER positive cases were all endometrioid type. Four non- endometrioid tumors failed to show MI in any locus. RER positive phenotype was more frequent in poorly differentiated (50%) than in well differentiated tumors (15%). We found no significant correlation of RER with stage and depth of invasion. Of 27 carcinomas, 19 (70%) showed homogeneous positive staining for ER and PR. ER and PR positive staining occured more frequently in RER negtive endometrioid cancers than in RER positive cases. Conclusions MI is one of the molecular mechanisms of a subset of endometrial carcinomas. Its frequency is associated with tumor grade, histological type and ER or PR status.
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【Key words】 Endometrial neoplasms；DNA, satellite;Receptors, estrogen;Receptors, progesterone
微卫星不稳定性(microsatellite instability, MI)是指由于复制错误(replication error, RER)引起的微卫星DNA长度的改变，它是近年发现的新的参与肿瘤发生的机理之一。MI最早发现于遗传性非息肉性结直肠癌，子宫内膜癌是遗传性非息肉性结直肠癌综合征中第2常见的肿瘤，遗传性非息肉性结直肠癌家族中75%的子宫内膜癌患者有MI[1]。为探明MI在散发性子宫内膜癌中的临床和生物学意义，本研究检测了40例散发性子宫内膜癌病人在8个微卫星位点上的MI发生率，并分析了MI与某些临床病理参数和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平的关系。
资料与方法
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选择我院1996～1998年间住院并手术治疗的子宫内膜癌病人40例，年龄在32～76岁之间，均无遗传性非息肉性结直肠癌家族史，术前均未接受过放射治疗、化学治疗或激素治疗。其中子宫内膜样癌36例，浆液性乳头状癌(浆乳癌)3例，透明细胞癌1例。根据国际妇产科联盟(1988年)标准进行临床分期，Ⅰ期35例，Ⅱ期2例，Ⅲ期3例。子宫内膜样癌中有26例为高分化腺癌，5例为中分化腺癌，5例为低分化腺癌。刮宫或手术切除的标本经常规甲醛固定，石蜡包埋。每例病人选取2个石蜡组织块，1个为子宫内膜癌组织，另1个为正常组织(非肿瘤、非子宫内膜组织，即无癌细胞浸润的淋巴结、卵巢或宫颈组织)。
二、方法
1.DNA的提取：常规石蜡包埋组织块，对原片观察后，标出所需部位。用一次性紫外消毒刀片，10 μm 厚连续切片，脱蜡后采用酚氯仿法抽提基因组DNA，-20℃贮存。
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2.微卫星位点的选择：选取D2S123、HUMCA 1126、D5S107、D11S904、D13S175、D17S1323、D10S89、TP53共8个位点，引物由上海生物工程公司合成。
3.微卫星的扩增与电泳：聚合酶链反应(PCR)的反应条件参照文献[2]。PCR产物经甲酰胺变性后，在8%聚丙烯酰胺凝胶(含8 mol/L尿素)中电泳(350 V)3 h，凝胶采用银染法显色，照相保存。
4.判断标准：癌组织和同一病人的正常组织DNA在同一条件下进行PCR扩增、电泳，若出现完全一致的电泳条带，则MI阴性；如果癌组织与正常组织比较出现条带的移动、缺失或获得额外的条带即可判断为MI阳性。在两个或两个以上位点发生MI阳性者称为RER阳性。
5.ER和PR水平的测定:采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法对27例病人(25例子宫内膜样癌，1例浆乳癌，1例透明细胞癌)进行了ER、PR检测。结果判定参照卢小梅等[3]的标准。
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三、统计学分析
采用χ2检验。
结果
一、发生MI的频率
RER阳性者占23%(9/40)；RER阴性者占77%(31/40)，其中4例仅1个位点有MI，27例在任一位点均无MI。本研究中，所有RER阳性病例均重复1遍PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳以避免因聚合错误引起MI假阳性。典型的MI阳性和MI阴性病例的电泳结果见图1，2。
图1 3个位点MI阳性的电泳结果
图2 3个位点MI阴性的电泳结果
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二、各微卫星位点出现MI的频率
8个微卫星位点出现不稳定性的频率有所不同，见图3。其中，出现MI频率最多的位点为D5S107，13例MI阳性病人中有6例(46%)在此位点发生改变；出现MI频率最低的位点为D11S904，仅1例(8%)。
图3 8个微卫星位点出现MI的频率
三、各临床病理参数中出现MI的频率
将病人按病理分化程度、临床分期、子宫肌层浸润深度、组织学类型分为若干组(表1)。结果发现，中、低分化子宫内膜样癌RER阳性率(50%,5/10)明显高于高分化癌(15%,4/26) (P<0.05， χ2=4.615)。RER阳性率与子宫肌层的浸润深度(P>0.05， χ2=0.402)、临床分期(P>0.05, χ2=1.004)无关。13例MI阳性者均为子宫内膜样癌，浆乳癌和透明细胞癌中无一例阳性。
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表1 40例 病人各种临床病理参数出现MI的频率(例数) 类别
总例数
RER阴性
RER阳性
任一位点
均无MI
仅1个位
点有MI
病理分化程度
36
(子宫内膜样癌)
高分化
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20
2
4
中分化
2
1
2*
低分化
1
1
3*
临床分期
40
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Ⅰ期
26
2
7
Ⅱ期
0
1
1
Ⅲ期
1
1
1
子宫肌层浸润深度
40
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内膜内
5
1
2
肌层内1/2
18
2
5
肌层外1/2
4
1
2
组织学类型
40
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子宫内膜样癌
23
4
9
浆乳癌
3
0
0
透明细胞癌
1
0
0
* 中、低分化与高分化子宫内膜样癌RER阳性率比较，差异有显著性(P<0.05，χ2=4.615) 四、ER、PR水平及其与MI
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27例检测ER、PR水平的病人中，7例(26%)为ER和PR均阴性，其中2例为非子宫内膜样癌；19例(70%)为ER、PR均阳性；1例(4%)为ER阴性、PR阳性。27例病人中，RER阳性者6例，其中ER和PR均阳性的百分率为6例中3例(3/6)，低于RER阴性者的80% (16/20)，但两者比较，差异无显著性(P>0.05, χ2=2.111)，见表2。而在25例子宫内膜样癌病人中，ER和PR均阳性的百分率，在RER阳性者中为6例中3例 (3/6)，明显低于RER阴性者的84% (16/19)，差异有显著性(P<0.05, χ2=4.126)。中、低分化子宫内膜样癌的ER和PR均阳性的百分率为5例中2例(2/5)，明显低于高分化癌的89%(17/19)，两者比较，差异有显著性(P<0.05，χ2=5.874)，见表3。
表2 RER阳性和阴性病人中ER和
PR的表达情况(例数) 类 别
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ER和PR均阴性
ER和PR均阳性
合 计
子宫内膜
样癌
其他*
子宫内膜
样癌
其他*
RER阳性
3
0
3
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0
6
RER阴性
2
2
16
0
20
* 指浆乳癌和透明细胞癌表3 不同病理分化程度病人中ER和
PR的表达情况(例数) 类 别
ER和PR均阴性
ER和PR均阳性
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合 计
高分化
2
17
19
中分化
1
1*
2
低分化
2
1*
3
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* 中、低分化与高分化子宫内膜样癌比较，差异有显著性(P<0.05，χ2=5.874)讨论
一、MI与肿瘤发生的关系
MI最早见于遗传性非息肉性结直肠癌患者，在其他一些散发性(非遗传性)肿瘤中也相继发现了MI现象，如胃癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌等，提示MI可能是肿瘤细胞的另一标志[4]。MI与DNA错配修复有关，它反映了错配修复系统的异常，错配修复系统异常使得基因复制错误不能被纠正，细胞突变率上升，累积到一定程度，将导致细胞的恶性转化。尽管RER阳性对肿瘤发生的确切机理尚未阐明，但MI影响基因组稳定性和有关基因的功能，可能是产生肿瘤或肿瘤易感性的重要原因。
二、MI发生率及检测差异
据文献报道，散发性子宫内膜癌RER阳性率为9%～28%[5-7]，本研究检测的结果为23%。上述各研究小组报道的子宫内膜癌RER阳性率的差异可能有以下几种原因：(1)采用的PCR产物的显色方法不同。(2)选用的微卫星位点不同，各个位点不稳定性的频率和程度有所差异。(3)测定位点的数目不同，随着被测位点数目的增多，MI现象也增多。但由于各研究小组采用的RER阳性标准多为“两个或两个以上微卫星位点出现MI”，这就有可能使所测位点数目多的研究小组得出RER阳性率高的结论。可见当进行多个微卫星位点的分析时，不稳定位点所占的百分比，较其绝对数目在判定时更有决定性意义。德国的遗传性非息肉性结直肠癌研究小组建议，当选取的微卫星标记中>20%的位点出现条带的改变时，可诊断为RER阳性[7]。本研究选取了8个位点，以两个或两个以上位点出现电泳条带的改变为RER阳性，符合上述标准。
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三、MI与肿瘤特异性的关系
本研究所测的8个微卫星位点出现MI的频率有一定的差异。D5S107出现不稳定性的频率最高，D11S904频率最低。其他肿瘤中也发现了这种出现MI频率的差异。结直肠癌中APC位点受累频率最高，而胃癌和乳腺癌中染色体2p上的3个位点MI频率较高[8]。由此提示，出现MI的位点可能具有肿瘤特异性，即不同类型的肿瘤易受累的位点也不同。
四、MI与临床病理参数的关系
子宫内膜癌MI与病理分化程度和预后的关系尚未有一致性的结论。Caduff等[5]发现，分化差的子宫内膜癌RER阳性率明显高于分化良好的肿瘤。Catasus等[6]的结果则表明，MI与肿瘤分级和预后无关。本研究发现，中、低分化癌RER阳性率明显高于高分化癌，两者差异有显著性。提示，MI在一定程度上反映了子宫内膜癌的分化程度。
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本研究中，临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期子宫内膜癌的RER阳性率比较，差异无显著性，其他报道也未发现MI与子宫内膜癌的临床分期有关[5,6]。提示，MI很可能发生于子宫内膜癌的早期，随着肿瘤的进展，MI由早期稳定地遗传到晚期。有研究表明，RER阳性子宫内膜癌组织周围的不典型增生病变也为RER阳性，并且两者来源于同一克隆，属于同一谱系[9]，由此提示，RER阳性的获得在子宫内膜癌的发展中是1个早期改变。
子宫内膜癌可以分成两类：一类为子宫内膜样癌；另一类为非子宫内膜样癌，包括腺鳞癌、浆乳癌和透明细胞癌等。不论是免疫组织化学还是基因突变的分析均表明，这两类子宫内膜癌发生、发展的机理各不相同。本研究发现了另1个子宫内膜样癌与非子宫内膜样癌不同的分子异常即MI。我们检测的9例RER阳性均为子宫内膜样癌，4例非子宫内膜样癌无MI。Tashiro等[10]的结果显示，子宫内膜样癌RER阳性率为20%，而34例浆乳癌无一例符合MI标准。可见，不同的机理参与了这两类子宫内膜癌的发生，MI主要参与了子宫内膜样癌的发生、发展。
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五、MI与ER、PR水平的关系
子宫内膜癌的发病与雌激素的长期刺激有关，多数子宫内膜癌有ER、PR表达。本研究检测的ER和PR阳性率略高于Nanbu等[11]的报道。ER和PR水平与病理分化程度有密切关系，分化良好者ER、PR阳性率高，提示ER和PR水平在一定程度上反映了肿瘤的分化程度。MI与ER和PR的关系似乎与肿瘤类型有关。子宫内膜样癌中，RER阳性者ER和PR阳性率低于RER阴性者，两者差异有显著性。已有研究表明，子宫内膜癌的ER和PR水平与某些癌基因及热休克蛋白的表达有关，ER和PR阳性者预后良好[11]。提示，子宫内膜样癌的MI可能也与上述基因的异常表达及病人的预后有关，但需要进一步的证实。
参考文献
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(收稿日期：1999-08-24), 百拇医药