系统性红斑狼疮中的凝血纤溶分子标志物的观察
作者：刘钢 王兰兰 谢其冰 李立新 王忠明 林懋贤
单位：刘钢(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；谢其冰(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；王忠明(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；林懋贤(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；王兰兰(临床免疫实验室) 李立新(临床免疫实验室)
关键词：
中华风湿病学杂志000619 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种自身免疫性的炎性疾病，影 响皮肤、关节、肾脏等器官。免疫复合物引起的血管炎是主要的病理变化[1]。复 合物的沉积直接或间接导致血管内皮细胞损坏[2]，并可引起凝血-纤溶及血小板 激活的异常[3]。
, http://www.100md.com
近年出现的分子标志物，如抗凝血酶Ⅲ(antithrombin Ⅲ，AT-Ⅲ)，D-二聚体(D-dimer, DD)和血小板α-颗粒膜蛋白(platelet α-granula membranin，GMP-140)为研究病人凝 血-纤溶系统的变化提供了新的手段。我们在SLE病人中检测上述分子标志物，并将其与临 床的关系作初步分析。
1 资料与方法
1.1 病例选择：1997年10月至1998年3月华西医科大学第一附属医院临床免疫科门诊及住 院的50例SLE女性患者，年龄(33±8)岁，符合1982年美国风湿病学会的SLE分类标准。正常 对照：40例女性正常人，年龄(32±4)岁。病人排除标准：口服避孕药、糖尿病、高脂血症( 血清胆固醇>2 300 mg/L)，肾功能不全(肌酐清除率<50 ml/min)，正在使用肝素或华 法令。
1.2 检测方法：采用速率散射比浊法测定血清AT-Ⅲ(仪 器：美国Beckman公司Array protein system。试剂：美国Beckman公司提供)。采用酶联免 疫吸附法测定血浆DD和GMP-140(仪器：日本Microptate Manager 4.0 Bio-Rad Laborato ries Benchmark，试剂：福建太阳生物技术公司提供)。
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1.3 统计学处理：采用SPSS 9.0统计软件，两组比较应用t检验分析均数组间差异， 用Spearson相关系数分析两种变量间相关性。显著性水平α为0.05。
2 结 果
2.1 按Out等[4]法进行患者病情活动性判定：Out积分1分者3例，2分者9例，3分 者10例，4分者4例，5分者6例，6分者2例，8分者8例，9分者4例，10分者4例。
2.2 正常对照与患者的血清AT-Ⅲ、血浆DD、血浆GMP-140测定值：见表1。SLE的血清AT -Ⅲ较正常对照显著升高，而血浆DD和GMP-140的均数与正常对照差别无显著性，将
±2s作正常上下限。SLE中血清AT-Ⅲ升高有25例(50%)，正常22例(44%)，降低3 例(6%)。DD无升高及降低。GMP-140升高有16例(32%)，降低30例(60%)，正常4例(8%)。
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表1 SLE与正常对照的AT-Ⅲ DD
GMP-140测定值(±s) 组别
例数
AT-Ⅲmg/L
DDmg/L
GMP-140ng/L
SLE组
50
315±51
0.26±0.99
14.1±8.1
, http://www.100md.com
对照组
40
286±18
0.26±0.12
15.2±2.8
P值
0.02
0.1
90.21
2.3 SLE抗心磷脂抗体(ACL)阳性与阴性组组间AT-Ⅲ、DD和GMP-140测定值：结果见表2 。表2 SLE患者按ACL分组的比较(x±s) 组别
AT-Ⅲ
, 百拇医药
mg/L
DD
mg/L
GMP-140
ng/L
ACL阳性
307±54
294±97
13±7
ACL阴性
309±52
218±45
17±13
, http://www.100md.com
P值
0.937
0.109
0.412
2.4 将患者病程、糖皮质激素用量、血清C3、C4、抗核抗体滴度、抗双链DNA 滴度、SLE活动积分(Out法)[4]分别与AT-Ⅲ、DD和GMP-140测定值作相关分析： 其结果见表3。表3 各实验室及临床指标与分子凝血标志物的相关系数 组别
AT-Ⅲmg/L
DDmg/L
GMP-140ng/L
r值
, http://www.100md.com P值
r值
P值
r值
P值
病程
-0.26
0.18
0.07
0.76
0.16
0.46
Out积分
, 百拇医药
-0.34
0.11
0.40
0.07
-0.01
0.9 7
ANA滴度
-0.06
0.82
0.01
0.99
-0.49
0.0 6
, 百拇医药
抗dsDNA
0.39
0.13
-0.06
0.85
-0.01
0.8 0
强的松用量
0.03
0.92
0.46
0.09
-0.08
, 百拇医药
0 .75
C3
-0.15
0.57
-0.30
0.30
0.21
0.46
C4
-0.13
0.62
-0.26
0.37
, http://www.100md.com
0.18
0.52
3 讨 论
AT-Ⅲ是体内最重要的抗凝物，占人体生理性抗凝活性的80%。它灭活活化的Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、 Ⅹ凝血因子，与肝素结合后，其抗凝活性增加约1 000倍。对于SLE的AT-Ⅲ血清浓度变化， 文献有不同结果。Tomas等[5]报道50例SLE患者的AT-Ⅲ均在正常范围内。本组S LE的AT-Ⅲ血清浓度均数比正常对照增高。增高、正常和降低的例数分别为25例(50%)，22 例(44%)和3例(6%)。本组资料表明SLE患者的AT-Ⅲ有变化，增高的比例较多，可能代表血 管内皮细胞受损后机体的一种代偿反应。但它与其他临床指标相关关系无显著性意义。
纤溶酶溶解纤维蛋白时产生DD，DD的量代表继发纤溶活性。文献[6]报道，SLE中DD的浓度 高于正常，而它与临床其他指标的相关性有不同的结果[6，7]。本组患者与正常对 照的均数比较差异无显著性，未见DD增高的病例。SLE的DD不增高，至少说明其纤溶活性未 明显地代偿性升高，我们认为这与临床易发血栓倾向有一定的作用。
, http://www.100md.com
GMP-140是血小板聚集并活化后释放出的一种血小板α颗粒膜蛋白，代表体内血小板活化， 其在SLE的变化，未见报道。本组升高率达18%，降低率60%。表明部分SLE中血小板活化有增 加的现象；但更多的病例GMP-140降低，表明SLE患者体内血小板激活并不是主要的趋势， 其变化与临床的关系需进一步研究。
参 考 文 献
1，Steinberg AD,Gourley MF,Klinman DM,et al.Systemic lupus erythematosus. Ann Intern Med,1991,115:548-559.
2，Philips MR,Abramson SB,Weissmann G.Neutrophil adhesion and autoimmune vascular injury.Clin Aspects Autoimmun,1989,3:6-15.
, 百拇医药
3，Shinichi O,Shogo T,Nobuo A.Plasma thrombomodulin as a marker of vascul ar injuries in collagen vascular disease.Am J Clin Pathol,1994,101:109-113.
4，Out HJ,Groot PGD,Hasselaar P.Fluctuation of anticardiolipin antibody l evels in patients with systemic lupus erythematosus:a prospective study.Ann Rheu m Dis,1989,48:1023-1028.
5，Tomas JF,Alberca I,Tabernero MD,et al.Natural anticoagulant proteins a nd antiphospholipid antibodies in systemic lupus erythematosus.J Rheumatol,1998, 25:57-62.
, 百拇医药
6，Ichikawa Y,Yamada C,Horiki T,et al.Serum matrix metalloproteinase-3 a nd fibrin degradation product levels correlate with clinical disease activity in rheumatoid arthritis.Clin Exp Rheumatol,1998,16:533-540.
7，Inoh M,Tokuda M,Kiuchi H,et al.Evaluating systemic lupus erythematosus disease activity using molecular markers of hemostasis.Arthritis Rheum,1996,39: 287-291.
收稿日期：2000-02-29, http://www.100md.com
单位：刘钢(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；谢其冰(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；王忠明(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；林懋贤(成都，华西医科大学第一附属医院临床免疫科 610041)；王兰兰(临床免疫实验室) 李立新(临床免疫实验室)
关键词：
中华风湿病学杂志000619 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种自身免疫性的炎性疾病，影 响皮肤、关节、肾脏等器官。免疫复合物引起的血管炎是主要的病理变化[1]。复 合物的沉积直接或间接导致血管内皮细胞损坏[2]，并可引起凝血-纤溶及血小板 激活的异常[3]。
, http://www.100md.com
近年出现的分子标志物，如抗凝血酶Ⅲ(antithrombin Ⅲ，AT-Ⅲ)，D-二聚体(D-dimer, DD)和血小板α-颗粒膜蛋白(platelet α-granula membranin，GMP-140)为研究病人凝 血-纤溶系统的变化提供了新的手段。我们在SLE病人中检测上述分子标志物，并将其与临 床的关系作初步分析。
1 资料与方法
1.1 病例选择：1997年10月至1998年3月华西医科大学第一附属医院临床免疫科门诊及住 院的50例SLE女性患者，年龄(33±8)岁，符合1982年美国风湿病学会的SLE分类标准。正常 对照：40例女性正常人，年龄(32±4)岁。病人排除标准：口服避孕药、糖尿病、高脂血症( 血清胆固醇>2 300 mg/L)，肾功能不全(肌酐清除率<50 ml/min)，正在使用肝素或华 法令。
1.2 检测方法：采用速率散射比浊法测定血清AT-Ⅲ(仪 器：美国Beckman公司Array protein system。试剂：美国Beckman公司提供)。采用酶联免 疫吸附法测定血浆DD和GMP-140(仪器：日本Microptate Manager 4.0 Bio-Rad Laborato ries Benchmark，试剂：福建太阳生物技术公司提供)。
, http://www.100md.com
1.3 统计学处理：采用SPSS 9.0统计软件，两组比较应用t检验分析均数组间差异， 用Spearson相关系数分析两种变量间相关性。显著性水平α为0.05。
2 结 果
2.1 按Out等[4]法进行患者病情活动性判定：Out积分1分者3例，2分者9例，3分 者10例，4分者4例，5分者6例，6分者2例，8分者8例，9分者4例，10分者4例。
2.2 正常对照与患者的血清AT-Ⅲ、血浆DD、血浆GMP-140测定值：见表1。SLE的血清AT -Ⅲ较正常对照显著升高，而血浆DD和GMP-140的均数与正常对照差别无显著性，将
±2s作正常上下限。SLE中血清AT-Ⅲ升高有25例(50%)，正常22例(44%)，降低3 例(6%)。DD无升高及降低。GMP-140升高有16例(32%)，降低30例(60%)，正常4例(8%)。, http://www.100md.com
表1 SLE与正常对照的AT-Ⅲ DD
GMP-140测定值(
±s) 组别例数
AT-Ⅲmg/L
DDmg/L
GMP-140ng/L
SLE组
50
315±51
0.26±0.99
14.1±8.1
, http://www.100md.com
对照组
40
286±18
0.26±0.12
15.2±2.8
P值
0.02
0.1
90.21
2.3 SLE抗心磷脂抗体(ACL)阳性与阴性组组间AT-Ⅲ、DD和GMP-140测定值：结果见表2 。表2 SLE患者按ACL分组的比较(x±s) 组别
AT-Ⅲ
, 百拇医药
mg/L
DD
mg/L
GMP-140
ng/L
ACL阳性
307±54
294±97
13±7
ACL阴性
309±52
218±45
17±13
, http://www.100md.com
P值
0.937
0.109
0.412
2.4 将患者病程、糖皮质激素用量、血清C3、C4、抗核抗体滴度、抗双链DNA 滴度、SLE活动积分(Out法)[4]分别与AT-Ⅲ、DD和GMP-140测定值作相关分析： 其结果见表3。表3 各实验室及临床指标与分子凝血标志物的相关系数 组别
AT-Ⅲmg/L
DDmg/L
GMP-140ng/L
r值
, http://www.100md.com P值
r值
P值
r值
P值
病程
-0.26
0.18
0.07
0.76
0.16
0.46
Out积分
, 百拇医药
-0.34
0.11
0.40
0.07
-0.01
0.9 7
ANA滴度
-0.06
0.82
0.01
0.99
-0.49
0.0 6
, 百拇医药
抗dsDNA
0.39
0.13
-0.06
0.85
-0.01
0.8 0
强的松用量
0.03
0.92
0.46
0.09
-0.08
, 百拇医药
0 .75
C3
-0.15
0.57
-0.30
0.30
0.21
0.46
C4
-0.13
0.62
-0.26
0.37
, http://www.100md.com
0.18
0.52
3 讨 论
AT-Ⅲ是体内最重要的抗凝物，占人体生理性抗凝活性的80%。它灭活活化的Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、 Ⅹ凝血因子，与肝素结合后，其抗凝活性增加约1 000倍。对于SLE的AT-Ⅲ血清浓度变化， 文献有不同结果。Tomas等[5]报道50例SLE患者的AT-Ⅲ均在正常范围内。本组S LE的AT-Ⅲ血清浓度均数比正常对照增高。增高、正常和降低的例数分别为25例(50%)，22 例(44%)和3例(6%)。本组资料表明SLE患者的AT-Ⅲ有变化，增高的比例较多，可能代表血 管内皮细胞受损后机体的一种代偿反应。但它与其他临床指标相关关系无显著性意义。
纤溶酶溶解纤维蛋白时产生DD，DD的量代表继发纤溶活性。文献[6]报道，SLE中DD的浓度 高于正常，而它与临床其他指标的相关性有不同的结果[6，7]。本组患者与正常对 照的均数比较差异无显著性，未见DD增高的病例。SLE的DD不增高，至少说明其纤溶活性未 明显地代偿性升高，我们认为这与临床易发血栓倾向有一定的作用。
, http://www.100md.com
GMP-140是血小板聚集并活化后释放出的一种血小板α颗粒膜蛋白，代表体内血小板活化， 其在SLE的变化，未见报道。本组升高率达18%，降低率60%。表明部分SLE中血小板活化有增 加的现象；但更多的病例GMP-140降低，表明SLE患者体内血小板激活并不是主要的趋势， 其变化与临床的关系需进一步研究。
参 考 文 献
1，Steinberg AD,Gourley MF,Klinman DM,et al.Systemic lupus erythematosus. Ann Intern Med,1991,115:548-559.
2，Philips MR,Abramson SB,Weissmann G.Neutrophil adhesion and autoimmune vascular injury.Clin Aspects Autoimmun,1989,3:6-15.
, 百拇医药
3，Shinichi O,Shogo T,Nobuo A.Plasma thrombomodulin as a marker of vascul ar injuries in collagen vascular disease.Am J Clin Pathol,1994,101:109-113.
4，Out HJ,Groot PGD,Hasselaar P.Fluctuation of anticardiolipin antibody l evels in patients with systemic lupus erythematosus:a prospective study.Ann Rheu m Dis,1989,48:1023-1028.
5，Tomas JF,Alberca I,Tabernero MD,et al.Natural anticoagulant proteins a nd antiphospholipid antibodies in systemic lupus erythematosus.J Rheumatol,1998, 25:57-62.
, 百拇医药
6，Ichikawa Y,Yamada C,Horiki T,et al.Serum matrix metalloproteinase-3 a nd fibrin degradation product levels correlate with clinical disease activity in rheumatoid arthritis.Clin Exp Rheumatol,1998,16:533-540.
7，Inoh M,Tokuda M,Kiuchi H,et al.Evaluating systemic lupus erythematosus disease activity using molecular markers of hemostasis.Arthritis Rheum,1996,39: 287-291.
收稿日期：2000-02-29, http://www.100md.com