预处置对急性缺血再灌注肝脏保护机制的初步探讨
作者：王万铁 林丽娜 徐正 李东 方舟奚 王宗敏
单位：王万铁(温州医学院病理生理学教研室)；林丽娜(附属一院麻醉科)；徐正(温州医学院病理生理学教研室)；李东(检验系分析中心)；方舟奚(电镜室)；王宗敏(附属二院病理科；浙江 温州 325003)
关键词：肝；再灌注损伤；一氧化氮；氧；自由基
中国病理生理杂志000304
[摘 要] 目的：探讨预处置对缺血再灌注损伤肝脏的防护及其机制。方法：随机将家兔分为对照组、缺血再灌注组和预处置组，复制肝缺血再灌注损伤(HIRI)模型，观察反复3次缺血5 min再灌注5 min(预处置)后再缺血45 min再灌注45 min，对血浆、肝组织一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平、谷丙转氨酶(ALT)值及肝细胞形态学改变的影响。结果：肝缺血再灌注期间，预处置组血浆及肝组织NO水平明显高于缺血再灌注组(P<0.05)；而MDA水平和血浆ALT均显著低于缺血再灌注组(P<0.05和P<0.01)；且与仅行游离、不阻断肝血流的对照组比较均无明显差异；肝细胞形态学异常改变也明显减轻。结论：预处置可通过提高体内NO水平及降低体内氧自由基水平而减轻HIRI。
, http://www.100md.com
[中图分类号] R 575.5 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-4718(2000)03-0203-04
The protective effect of preconditioning on rabbit liver during ischemia and reperfusion and its potential mechanism
WANG Wan-tie, LIN Li-na, XU Zheng-jie, LI Dong, FAN Zhou-xi, WANG Zhong-min
(Department of Pathophysiology, Wenzhou Medical College, Wenzhou 325003, China)
, 百拇医药
[Abstract] AIM：To investigate the protective effect of preconditioning on rabbit liver during total ischemia and reperfusion and its mechanism. METHODS: Using hepatic ischemia and reperfusion injury (HIRI) model in rabbits, animals were randomly divided into three groups: control group (A), non-preconditioning group(B) and preconditioning group(C), different effects of preconditioning on several parameters including alanine aminotransferase (ALT) activity and levels of nitric oxide (NO) and malondialdehyde (MDA) in plasma or liver tissue as well as hepatocellular morphological changes were measured and observed during HIRI. RESULTS:In C group NO levels of plasma and liver tissue were higher than those in B group (P<0.05);While MDA levels and ALT value in plasma were lower than those in B group (P<0.05 and P<0.01); and there were not significant differences between C and A group (P>0.05); abnormal morphological chages of liver cells in A group were ameliorated remarkably too during HIRI. CONCLUSION:Preconditioning can attenuate HIRI by improving NO level and reducing oxygen free radicals level.
, 百拇医药
[MeSH] Liver; Reperfusion injury; Nitric oxide; Oxygen; Free radicals
预处置(preconditioning)即反复短期缺血再灌注，基本不引起肝脏损伤，但对其后的长时间缺血、再灌注却增强了耐受性[1]，其机制尚不清楚，尤其与一氧化氮(nitric oxide, NO)及氧自由基(oxygen free radicals, OFR)水平的关系少有报道。本研究观察预处置对家兔肝缺血再灌注过程中生化、组织方面的影响变化，初步探讨了预处置对较长时间肝缺血再灌注所致肝损伤(hepatic ischemia and reperfusion injury, HIRI)的作用机制，为临床保护肝脏提供理论基础和实验依据。
材 料 和 方 法
一、模型复制
, 百拇医药
健康日本大耳白兔(家兔)30只，雌雄兼有，体重1.6～2.8 kg，氨基甲酸乙酯(1.0 g/kg iv)麻醉，分离一侧颈外静脉以备采血。消毒开腹，暴露肝门，于尾状叶上方游离肝左叶、中叶、右中叶及方形叶的血管、胆管，用无损伤钳夹闭血管，造成该4叶完全性缺血，45 min后松夹重新灌注45 min形成HIRI[2]。
二、动物分组
随机将家兔分为3组：对照组(A组)，10只，仅行游离肝脏但不阻断其血流；缺血再灌注组(B组)，10只，缺血45 min后再灌注45 min；预处置组(C组)，10只，反复3次缺血5 min再灌注5 min后再缺血45 min再灌注45 min。
三、标品采集
3组分别在肝缺血前、缺血45 min、再灌注45 min自颈外静脉取血以测定血浆一氧化氮代谢产物(NO-2/NO-3，NOx)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)值，并在实验毕立即处死动物，取左中叶肝组织制成10%匀浆，以测定NOx及MDA水平。同时取少许左中叶肝组织以备光镜、电镜观察。
, 百拇医药
四、检测方法
硝酸还原酶法测定NO-2/NO-3含量，硫代巴比妥酸法测定MDA含量，赖氏法检测ALT值，前2种试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。HE染色光镜观察，LKB-V型超薄切片机切片，H-500型透射电镜观察。
五、统计分析
所有数据均以
±s表示，采用组间、组内t检验判断均数差异显著性。
结 果
一、3组动物HIRI时血浆NOx、MDA含量及ALT值的变化，见表1。
二、3组动物HIRI时肝组织NOx及MDA含量的测定值，见表2。
, 百拇医药
表1 3组动物HIRI时血浆NOx、MDA含量及ALT值的变化及比较
Tab 1 The change and comparison of NOx，MDA contents and ALT value in plasma during HIRI among three groups (±s,n=10) Group
NO-2/NO-3(μmol/L)
MDA(μmol/L)
ALT(U)
A
Pre-Is
, http://www.100md.com
30.35±8.27
5.60±0.21
38.90±5.00
Is45min
30.30±8.80
5.70±0.74
39.50±5.04
Rp45min
29.88±8.61
5.57±0.71
38.30±4.28
B
, http://www.100md.com
Pre-Is
29.16±12.88
5.70±0.50
38.10±2.85
Is45min
26.09±9.32
5.98±0.55☆
47.30±4.63☆☆
Rp45min
19.66±9.24☆☆★★Δ
7.70±0.66☆☆★★ΔΔ
, 百拇医药
61.70±8.28☆☆★★ΔΔ
C
Pre-Is
29.84±8.94
5.63±0.75
39.00±6.58
Is45min
28.17±8.53
5.78±0.75
41.20±5.74☆▲
Rp45min
, http://www.100md.com
27.94±7.80▲
6.81±0.75☆☆★★ΔΔ
46.90±7.54☆☆★ΔΔ▲▲
☆P<0.05，☆☆P<0.01，vs Pre-Is; ★P<0.05, ★★P<0.01,vs Is 45 min; ΔP<0.05，ΔΔP<0.01，vs A group;
▲P<0.05, ▲▲P<0.01, vs B group; IS=ischemia; RP=reperfusin表2 3组动物HIRI时肝组织NOx、MDA含量的变化及比较
Tab 2 The change and comparison of NOx, MDA contents in
, 百拇医药
hepatic tissue during HIRI among three groups (±s，n=10) Group
NO-2/NO-3
(μmol/mg.pro)
MDA
(μmol/mg.pro)
A
23.56±5.04
1.21±0.16
B
, 百拇医药
14.74±5.09ΔΔ
1.92±0.25ΔΔ
C
19.80±4.36▲
1.51±0.32Δ▲▲
ΔP<0.05，ΔΔP<0.01，vs A group; ▲P<0.05，▲▲P<0.01，vs B group
三、肝细胞形态学改变
光镜下，A组肝细胞形态基本正常；B组肝细胞肿胀、空泡变性及点状坏死；C组则表现为散在肝细胞肿胀、变性，其程度、范围均明显轻于B组。电镜下，A组肝细胞形态正常，细胞连接完好，线粒体、粗面内质网及毛细胆管未见扩张(图1)。B组肝细胞明显肿胀，其表面微绒毛减少，狄氏间隙明显扩大，细胞连接疏松，肝细胞内可见大量粗面内质网扩张，线粒体显著肿胀甚至空泡化，毛细胆管明显扩张，腔内微绒毛稀少，个别见胆汁淤积现象(图2)。C组局部肝细胞肿胀，其表面微绒毛较多，狄氏间隙轻度扩大，粗面内质网略扩张，线粒体轻度肿胀，个别呈空泡化，毛细胆管稍扩张，腔内微绒毛未见显著减少(图3)。
, 百拇医药
Fig 1 Group A, TEM×15 000
Mitochondria, endoplasmic reticulum and bile capillaries were normal
图1 对照组肝细胞线粒体、内质网及毛细胆管
讨 论
近年研究发现，NO水平下降和OFR水平升高及其引发的脂质过氧化反应是HIRI的主要发生机制[3～5]。Stuehr等证实，NOx为指示NO水平的较好指标。而测定脂质过氧化反应的代谢产物MDA含量，可间接反映OFR的生成及其所致组织细胞损伤的程度。本研究发现，肝缺血、再灌注时，血浆NOx含量显著降低，MDA含量及反映肝细胞功能损伤程度的敏感指标-ALT值明显升高，尤以再灌注后为著，而且NOx、MDA与ALT分别呈显著的正相关关系(r=0.376, P<0.05; r=0.730, P<0.01)；肝组织NOx明显低于对照组，MDA显著高于对照组；肝细胞形态学改变显著异常。可见，NO减少和OFR过多及其引发的脂质过氧化反应是HIRI的主要因素之一。另外，血浆NOx与MDA水平的相反变化又呈高度相关关系(r=0.572, P<0.01)，说明机体NO水平下降和OFR水平升高可能互为因果，共同促使HIRI的发生发展。
, 百拇医药
Fig 2 Group B, TEM×15 000
Mitochondria was swelling significantly, endoplasmic reticulum and bile capillaries became dilating remarkably
图2 缺血再灌注组肝细胞线粒体、内质网和毛细胆管的变化
Fig 3 Group C, TEM×10 000
Mitochondria became swelling lightly, endoplasmic reticulum and bile capillaries became dilating lightly
, 百拇医药
图3 预处置组肝细胞线粒体、内质网和毛细胆管的变化
本实验结果亦显示，C组动物缺血45 min、再灌注45 min时，ALT值明显低于B组(P<0.05和P<0.01)，肝细胞形态学异常变化明显减轻。表明预处置对缺血再灌注肝脏有明显的保护作用。
从表可知，C组动物血、肝NOx均明显高于B组，MDA则显著低于B组，且两者与A组亦无明显差异。揭示预处置一方面能提高体内NO水平而抑制内皮素合成[6]及调节局部灌流，抑制低血流量下的血小板聚集，并与超氧化物结合形成无毒代谢产物NO-3，从而使肝细胞避免反应性氧中间物所致损害[7]；另一方面可降低体内OFR水平，减轻组织脂质过氧化反应程度[8]，从而有效地保护急性缺血再灌注肝脏。孙经建等[9]亦证实，预处置可明显减轻线粒体电子传递链活性的损害，增加肝细胞内ATP的产生，延缓ATP的衰竭，有效地保护线粒体的功能，进而减轻HIRI。当然，预处置亦能防止膜通透性的增强，减轻线粒体及细胞的肿胀，从而抑制不可逆损伤的发生[10]；也可以诱导细胞内蛋白激酶C激活，进而引起底物蛋白磷酸化而实现肝细胞的保护作用[1]；而且亦可能通过对枯否细胞代谢和功能的调节而减轻HIRI，这仍有待进一步研究。另外，预处置由于反复血流再灌注(3次)，肝组织的糖原及腺苷酸类分解产物如乳酸、氢离子、非离子型氨、无机磷酸盐等被冲走，从而减轻了肝细胞的酸化程度及水肿，一定程度上达到了防治HIRI的目的。
, 百拇医药
[基金项目] 浙江省卫生厅科研基金资助(No.98A087)
[参 考 文 献]
[1] 刘秀华. 预处理保护作用的普遍性及其机理探讨[J]. 生理科学进展，1998，29(1)：39～41.
[2] Hasselgren PO, Bilber B, Fornander J. Improved blood flow and protein synthesis in the postischemic liver following infusion of dopamine[J]. J Surg Res, 1983, 34(1):44～52.
[3] Kirschemer RE. Role of iron and oxygen-derived free radicals in ischemic-reperfusion injury [J]. J Am Coll Surg, 1994, 179:103～117.
, 百拇医药
[4] Saito A, Matsuno N, Kozaki K, et al. Change in plasma nitrite nitrate level after orthotopic liver transplantation on pigs [J]. Transplant Proc, 1996, 28(3):1761～1762.
[5] 王万铁，徐正，林丽娜，等. 脂质过氧化反应在家兔肝缺血再灌注损伤中的作用[J]. 中国应用生理学杂志，1998，14(3)：214～216.
[6] Perata, C, Closa D, Hotter G, et al. Liver ischemic preconditioning is mediated by the inhibitory action of nitric oxide on endothelin[J]. Biophys Res Comm, 1996, 229:264～270.
, 百拇医药
[7] Billiar TR, Curran RD, Harbrecht BG, et al. Modulation of nitrogen oxide synthesis in vivo:NG-monomethyl-L-arginine inhibits endotoxin-induced nitrite/nitrate biosynthesis while promoting hepatic damage [J]. J Leukoc Biol, 1990, 48(6):565～569.
[8] Metzger J, Dore SP, Luaterburg BH. Oxidant stress during reperfusion of ischemic liver:no evidence for a role of xanthine oxidase [J]. Hepatology, 1988,8:580～584.
[9] 孙经建，吴孟超，张伯和，等. 间断和持续肝缺血再灌注后线粒体功能的改变[J]. 肝胆外科杂志，1996，4(1)：59～61.
[10] Liang Hua-Mao, Jia Yu-Zhi, Wang Xiao-Ming. Study of preconditioning effect on myocardial ischemia/reperfusion injury by lanthaum tracer[J]. J Harbin Medical Univercity, 1993, 27(2):96～100.
[收稿日期]1999-01-06 [修回日期]1999-06-18, http://www.100md.com
单位：王万铁(温州医学院病理生理学教研室)；林丽娜(附属一院麻醉科)；徐正(温州医学院病理生理学教研室)；李东(检验系分析中心)；方舟奚(电镜室)；王宗敏(附属二院病理科；浙江 温州 325003)
关键词：肝；再灌注损伤；一氧化氮；氧；自由基
中国病理生理杂志000304
[摘 要] 目的：探讨预处置对缺血再灌注损伤肝脏的防护及其机制。方法：随机将家兔分为对照组、缺血再灌注组和预处置组，复制肝缺血再灌注损伤(HIRI)模型，观察反复3次缺血5 min再灌注5 min(预处置)后再缺血45 min再灌注45 min，对血浆、肝组织一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平、谷丙转氨酶(ALT)值及肝细胞形态学改变的影响。结果：肝缺血再灌注期间，预处置组血浆及肝组织NO水平明显高于缺血再灌注组(P<0.05)；而MDA水平和血浆ALT均显著低于缺血再灌注组(P<0.05和P<0.01)；且与仅行游离、不阻断肝血流的对照组比较均无明显差异；肝细胞形态学异常改变也明显减轻。结论：预处置可通过提高体内NO水平及降低体内氧自由基水平而减轻HIRI。
, http://www.100md.com
[中图分类号] R 575.5 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-4718(2000)03-0203-04
The protective effect of preconditioning on rabbit liver during ischemia and reperfusion and its potential mechanism
WANG Wan-tie, LIN Li-na, XU Zheng-jie, LI Dong, FAN Zhou-xi, WANG Zhong-min
(Department of Pathophysiology, Wenzhou Medical College, Wenzhou 325003, China)
, 百拇医药
[Abstract] AIM：To investigate the protective effect of preconditioning on rabbit liver during total ischemia and reperfusion and its mechanism. METHODS: Using hepatic ischemia and reperfusion injury (HIRI) model in rabbits, animals were randomly divided into three groups: control group (A), non-preconditioning group(B) and preconditioning group(C), different effects of preconditioning on several parameters including alanine aminotransferase (ALT) activity and levels of nitric oxide (NO) and malondialdehyde (MDA) in plasma or liver tissue as well as hepatocellular morphological changes were measured and observed during HIRI. RESULTS:In C group NO levels of plasma and liver tissue were higher than those in B group (P<0.05);While MDA levels and ALT value in plasma were lower than those in B group (P<0.05 and P<0.01); and there were not significant differences between C and A group (P>0.05); abnormal morphological chages of liver cells in A group were ameliorated remarkably too during HIRI. CONCLUSION:Preconditioning can attenuate HIRI by improving NO level and reducing oxygen free radicals level.
, 百拇医药
[MeSH] Liver; Reperfusion injury; Nitric oxide; Oxygen; Free radicals
预处置(preconditioning)即反复短期缺血再灌注，基本不引起肝脏损伤，但对其后的长时间缺血、再灌注却增强了耐受性[1]，其机制尚不清楚，尤其与一氧化氮(nitric oxide, NO)及氧自由基(oxygen free radicals, OFR)水平的关系少有报道。本研究观察预处置对家兔肝缺血再灌注过程中生化、组织方面的影响变化，初步探讨了预处置对较长时间肝缺血再灌注所致肝损伤(hepatic ischemia and reperfusion injury, HIRI)的作用机制，为临床保护肝脏提供理论基础和实验依据。
材 料 和 方 法
一、模型复制
, 百拇医药
健康日本大耳白兔(家兔)30只，雌雄兼有，体重1.6～2.8 kg，氨基甲酸乙酯(1.0 g/kg iv)麻醉，分离一侧颈外静脉以备采血。消毒开腹，暴露肝门，于尾状叶上方游离肝左叶、中叶、右中叶及方形叶的血管、胆管，用无损伤钳夹闭血管，造成该4叶完全性缺血，45 min后松夹重新灌注45 min形成HIRI[2]。
二、动物分组
随机将家兔分为3组：对照组(A组)，10只，仅行游离肝脏但不阻断其血流；缺血再灌注组(B组)，10只，缺血45 min后再灌注45 min；预处置组(C组)，10只，反复3次缺血5 min再灌注5 min后再缺血45 min再灌注45 min。
三、标品采集
3组分别在肝缺血前、缺血45 min、再灌注45 min自颈外静脉取血以测定血浆一氧化氮代谢产物(NO-2/NO-3，NOx)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)值，并在实验毕立即处死动物，取左中叶肝组织制成10%匀浆，以测定NOx及MDA水平。同时取少许左中叶肝组织以备光镜、电镜观察。
, 百拇医药
四、检测方法
硝酸还原酶法测定NO-2/NO-3含量，硫代巴比妥酸法测定MDA含量，赖氏法检测ALT值，前2种试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。HE染色光镜观察，LKB-V型超薄切片机切片，H-500型透射电镜观察。
五、统计分析
所有数据均以
±s表示，采用组间、组内t检验判断均数差异显著性。结 果
一、3组动物HIRI时血浆NOx、MDA含量及ALT值的变化，见表1。
二、3组动物HIRI时肝组织NOx及MDA含量的测定值，见表2。
, 百拇医药
表1 3组动物HIRI时血浆NOx、MDA含量及ALT值的变化及比较
Tab 1 The change and comparison of NOx，MDA contents and ALT value in plasma during HIRI among three groups (
±s,n=10) GroupNO-2/NO-3(μmol/L)
MDA(μmol/L)
ALT(U)
A
Pre-Is
, http://www.100md.com
30.35±8.27
5.60±0.21
38.90±5.00
Is45min
30.30±8.80
5.70±0.74
39.50±5.04
Rp45min
29.88±8.61
5.57±0.71
38.30±4.28
B
, http://www.100md.com
Pre-Is
29.16±12.88
5.70±0.50
38.10±2.85
Is45min
26.09±9.32
5.98±0.55☆
47.30±4.63☆☆
Rp45min
19.66±9.24☆☆★★Δ
7.70±0.66☆☆★★ΔΔ
, 百拇医药
61.70±8.28☆☆★★ΔΔ
C
Pre-Is
29.84±8.94
5.63±0.75
39.00±6.58
Is45min
28.17±8.53
5.78±0.75
41.20±5.74☆▲
Rp45min
, http://www.100md.com
27.94±7.80▲
6.81±0.75☆☆★★ΔΔ
46.90±7.54☆☆★ΔΔ▲▲
☆P<0.05，☆☆P<0.01，vs Pre-Is; ★P<0.05, ★★P<0.01,vs Is 45 min; ΔP<0.05，ΔΔP<0.01，vs A group;
▲P<0.05, ▲▲P<0.01, vs B group; IS=ischemia; RP=reperfusin表2 3组动物HIRI时肝组织NOx、MDA含量的变化及比较
Tab 2 The change and comparison of NOx, MDA contents in
, 百拇医药
hepatic tissue during HIRI among three groups (
±s，n=10) GroupNO-2/NO-3
(μmol/mg.pro)
MDA
(μmol/mg.pro)
A
23.56±5.04
1.21±0.16
B
, 百拇医药
14.74±5.09ΔΔ
1.92±0.25ΔΔ
C
19.80±4.36▲
1.51±0.32Δ▲▲
ΔP<0.05，ΔΔP<0.01，vs A group; ▲P<0.05，▲▲P<0.01，vs B group
三、肝细胞形态学改变
光镜下，A组肝细胞形态基本正常；B组肝细胞肿胀、空泡变性及点状坏死；C组则表现为散在肝细胞肿胀、变性，其程度、范围均明显轻于B组。电镜下，A组肝细胞形态正常，细胞连接完好，线粒体、粗面内质网及毛细胆管未见扩张(图1)。B组肝细胞明显肿胀，其表面微绒毛减少，狄氏间隙明显扩大，细胞连接疏松，肝细胞内可见大量粗面内质网扩张，线粒体显著肿胀甚至空泡化，毛细胆管明显扩张，腔内微绒毛稀少，个别见胆汁淤积现象(图2)。C组局部肝细胞肿胀，其表面微绒毛较多，狄氏间隙轻度扩大，粗面内质网略扩张，线粒体轻度肿胀，个别呈空泡化，毛细胆管稍扩张，腔内微绒毛未见显著减少(图3)。
, 百拇医药
Fig 1 Group A, TEM×15 000
Mitochondria, endoplasmic reticulum and bile capillaries were normal
图1 对照组肝细胞线粒体、内质网及毛细胆管
讨 论
近年研究发现，NO水平下降和OFR水平升高及其引发的脂质过氧化反应是HIRI的主要发生机制[3～5]。Stuehr等证实，NOx为指示NO水平的较好指标。而测定脂质过氧化反应的代谢产物MDA含量，可间接反映OFR的生成及其所致组织细胞损伤的程度。本研究发现，肝缺血、再灌注时，血浆NOx含量显著降低，MDA含量及反映肝细胞功能损伤程度的敏感指标-ALT值明显升高，尤以再灌注后为著，而且NOx、MDA与ALT分别呈显著的正相关关系(r=0.376, P<0.05; r=0.730, P<0.01)；肝组织NOx明显低于对照组，MDA显著高于对照组；肝细胞形态学改变显著异常。可见，NO减少和OFR过多及其引发的脂质过氧化反应是HIRI的主要因素之一。另外，血浆NOx与MDA水平的相反变化又呈高度相关关系(r=0.572, P<0.01)，说明机体NO水平下降和OFR水平升高可能互为因果，共同促使HIRI的发生发展。
, 百拇医药
Fig 2 Group B, TEM×15 000
Mitochondria was swelling significantly, endoplasmic reticulum and bile capillaries became dilating remarkably
图2 缺血再灌注组肝细胞线粒体、内质网和毛细胆管的变化
Fig 3 Group C, TEM×10 000
Mitochondria became swelling lightly, endoplasmic reticulum and bile capillaries became dilating lightly
, 百拇医药
图3 预处置组肝细胞线粒体、内质网和毛细胆管的变化
本实验结果亦显示，C组动物缺血45 min、再灌注45 min时，ALT值明显低于B组(P<0.05和P<0.01)，肝细胞形态学异常变化明显减轻。表明预处置对缺血再灌注肝脏有明显的保护作用。
从表可知，C组动物血、肝NOx均明显高于B组，MDA则显著低于B组，且两者与A组亦无明显差异。揭示预处置一方面能提高体内NO水平而抑制内皮素合成[6]及调节局部灌流，抑制低血流量下的血小板聚集，并与超氧化物结合形成无毒代谢产物NO-3，从而使肝细胞避免反应性氧中间物所致损害[7]；另一方面可降低体内OFR水平，减轻组织脂质过氧化反应程度[8]，从而有效地保护急性缺血再灌注肝脏。孙经建等[9]亦证实，预处置可明显减轻线粒体电子传递链活性的损害，增加肝细胞内ATP的产生，延缓ATP的衰竭，有效地保护线粒体的功能，进而减轻HIRI。当然，预处置亦能防止膜通透性的增强，减轻线粒体及细胞的肿胀，从而抑制不可逆损伤的发生[10]；也可以诱导细胞内蛋白激酶C激活，进而引起底物蛋白磷酸化而实现肝细胞的保护作用[1]；而且亦可能通过对枯否细胞代谢和功能的调节而减轻HIRI，这仍有待进一步研究。另外，预处置由于反复血流再灌注(3次)，肝组织的糖原及腺苷酸类分解产物如乳酸、氢离子、非离子型氨、无机磷酸盐等被冲走，从而减轻了肝细胞的酸化程度及水肿，一定程度上达到了防治HIRI的目的。
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[基金项目] 浙江省卫生厅科研基金资助(No.98A087)
[参 考 文 献]
[1] 刘秀华. 预处理保护作用的普遍性及其机理探讨[J]. 生理科学进展，1998，29(1)：39～41.
[2] Hasselgren PO, Bilber B, Fornander J. Improved blood flow and protein synthesis in the postischemic liver following infusion of dopamine[J]. J Surg Res, 1983, 34(1):44～52.
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[收稿日期]1999-01-06 [修回日期]1999-06-18, http://www.100md.com