抑制一氧化氮合酶对大鼠主动脉血管紧张素Ⅱ受体的影响
作者：张英 李载权 许松 许玉凤 庞永正 唐朝枢
单位：(北京医科大学第一医院中心实验室，北京 100034)
关键词：精氨酸；酶类；受体，血管紧张素；大鼠
中国病理生理杂志000503
[摘 要] 目的：本文应用NO合酶(NOS)竞争性抑制剂左旋硝基精氨酸(L-NNA)诱导大鼠高血压，观察对主动脉血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和AngⅡ受体的影响。方法：采用腹腔注射L-NNA复制大鼠高血压模型，分别用放射免疫法测定主动脉AngⅡ、放射配基结合法测定主动脉组织AngⅡ受体和Griess法测定血浆NOx含量。结果：L-NNA使大鼠血压明显高于对照组(+142%，P<0.01)，4周组心系数高128%(P<0.01)，血浆NOx水平低于对照组48%，血浆AngⅡ水平无明显差异；血管组织AngⅡ含量4周组显著高612%(P<0.01)，且4周组[125I]-AngⅡ最大结合能力(Bmax)高6倍(P<0.01)，亲和力(Kd)高1倍(P<0.01)。结论：抑制NOS诱导高血压主要是通过局部组织肾素-血管紧张素系统(RAS)发挥作用的，长期慢性抑制NOS可使血管组织AngⅡ水平升高并导致血管AngⅡ受体上调，此结果为“NOS抑制诱发AngⅡ依赖型高血压”假说提供新的依据。
, http://www.100md.com
[中图分类号] 544.13 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-4718(2000)05-0393-04
The inhibition of nitric oxide synthase for long time up-regulates vascular angiotensin Ⅱ receptor
ZHANG Ying, LI Zai-quan, XU Song, XU Yu-feng, PANG Yong-zheng, TANG Chao-shu
(First Affiliated Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100034, China)
[Abstract] AIM:To observe the effects of aortal angiotensin Ⅱ(AngⅡ)levels and AngⅡ receptor in the hypertensive rat models. METHODS: Intraperinoneal injection of L-Nω-nitro-arginine(L-NNA) into rats induced hypertensive model, the binding of aortal AngⅡ receptor and the contents of aortal tissue AngⅡ and plasma NO-2+NO-3(NOx) were determined.RESULTS:Compared with the control group, the blood pressure of the rats treated with L-NNA was significantly increased by 142%(P<0.01)，the plasma NOx levels were decreased by 48%. However, in the rats treated for 4 weeks the ratio of cardial index was increased by 128%(P<0.01)，the plasma AngⅡ levels weren't significantly changed, the contents of vascular tissue AngⅡ were increased by 612%(P<0.01) and the Bmax of [125I]-AngⅡ was increased by six times (P<0.01),the affinity was doubled respectively.CONCLUSIONS:Nitric oxide synthase (NOS) inhibition mostly influes the reninangiotensin system in regional tissue. The inhibition for long time up-regulates vascular AngⅡ and AngⅡ receptor, which can support the hypothesis “NOS inhibition can induce AngⅡ-depended hypertension”.
, 百拇医药
[MeSH] Arginine; Enzymes; Receptors, angiotensin; Rats
血管内皮功能损伤是高血压发病的重要环节[1]。高血压病人常伴有不同程度血管内皮功能的障碍，抑制内皮舒张因子(endothelium derived relaxing factor/nitric oxide, EDRF/NO)生成即可成功复制动物高血压模型[2]。但是抑制NO如何诱导高血压发病的细胞分子机制迄今尚未完全阐明。体内血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)与NO间呈交互调节的关系[3、4]，AngⅡ收缩血管并刺激血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)增殖，是参与高血压发病的重要因素之一[1]。本工作应用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)竞争性抑制剂左旋硝基精氨酸(L-Nω-nitro-arginine,L-NNA)诱导大鼠高血压，观察对主动脉血管AngⅡ水平和AngⅡ受体的影响，以探讨EDRF/NO在高血压发病中的作用。
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材 料 和 方 法
选用200～250 g健康雄性Wistar大鼠，应用L-NNA复制大鼠高血压模型[2]。将大鼠随机分为3组，每组n=6。对照组大鼠常规饲养，不作特殊处理，其余两组按每日15 mg/kg量腹腔注射L-NNA，分别连续注射2周(L-NNA 2周组)或4周(L-NNA 4周组)。末次给药后次日测定鼠尾血压，实验结束时颈椎脱臼法处死动物，心脏称重计算心系数(心重mg/体重g)，加EDTA分离血浆，迅即摘取主动脉置-20℃保存。
一、主动脉AngⅡ受体结合测定
纵行剪开大鼠主动脉，去除血管周围脂肪组织和擦除血管内皮后剪碎组织，加入匀浆液(mmol/L: Tris/HCl 20, pH8.0, DTT 1.0, EDTA 1.0, PMSF 5.0, NaN3 5.0, benzamidine 3.0)于Polytron匀浆器上匀浆(30 s,3次)，经4层纱布过滤，2300 r/min离心5 min，分离细胞核，上清液30000 r/min超速离心1 h，分离细胞膜。应用放射配基结合实验[5]：取匀浆液蛋白量为100 μg/管，分别加反应液(终浓度mmol/L：Tris/HCl 50, pH 7.4,NaCl 120, MgCl2 10，PMSF 1.0, 8-hydroxyquinine 1.0),牛血清白蛋白1 mg/mL，[125I]-AngⅡ 0.1～2.0 nmol/L,反应终体积200 μL。室温25℃震荡孵育1 h后，加入4℃预冷的PBS终止反应。在Millipore上经0.45 μm微孔滤膜抽滤，用冷PBS冲洗3次。于γ-计数仪上测定滤膜上的[125I]放射强度，以fmol/mg蛋白表示AngⅡ受体结合量。非特异结合管反应液中含有AngⅡ受体拮抗剂(Sar1,Ala8)-AngⅡ，终浓度为1 μmol/L，总结合与非特异结合之差为AngⅡ受体的特异结合量。
, 百拇医药
二、血浆和主动脉组织AngⅡ含量的测定
用放射免疫试剂盒测定血浆和主动脉组织匀浆中AngⅡ含量，按试剂盒操作方法进行[6]。
三、其他指标测定
用考马斯亮兰法测定主动脉组织匀浆液中蛋白含量；血浆样品经硝酸盐还原处理为亚硝酸盐后，用Griess法测定NOx(即NO-2+NO-3)含量。
四、材料与试剂
Wistar大鼠系本校动物中心提供，L-NNA、(Sar1,Ala8)-AngⅡ和其他主要生化试剂购自Sigma公司，[125I]-Tyr4-AngⅡ(81.4 kBq/mmol)购自NEW Life Sci公司，AngⅡ放射测定试剂盒购自福瑞生物公司。
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五、统计
结果数据以
±s表示，组间差异用One Way ANOVA方差分析和Student Newman-Keuls检验进行分析。
结 果
一、L-NNA对大鼠血压、心系数和血浆NOx含量的影响
L-NNA 2周组大鼠血压明显高于对照组(+142%，P<0.01)，血浆NOx水平低于对照组(-48%)，心系数与对照组相比，差异无显著。L-NNA 4周组动物不但发生高血压，低NOx血症，而且明显心脏肥大，心系数明显高于对照组(+128%，P<0.01)，结果见表1所示。
表1 L-NNA对大鼠血压、心系数和血浆NOx含量的影响
, http://www.100md.com
Tab 1 Effect of L-NNA on rat blood pressure, ratio of heart
to BW and NOx in experimental rats (±s,n=6) Group
BP
(kPa)
BW
(g)
HW
(mg)
HW/BW
, 百拇医药 (mg/g)
NOx
(μmol/L)
Control
13.5±0.4
264±21
827±87
3.1±0.2
31±5
2Weeks 1
19.0±1.1
285±41
, 百拇医药
980±130
3.4±0.4
25±8
4Weeks 1
18.8±0.8
250±50
1010±120
4.0±0.1
9±2
P<0.01，vs control group; BP: Blood pressure BW:Body weight,HW:heart weight;NOx:NO-2+NO-3
, 百拇医药
二、L-NNA对血浆和主动脉组织AngⅡ含量的影响
L-NNA处理后不论2周还是4周，血浆AngⅡ水平与对照组差异不明显(P>0.05)，主动脉组织AngⅡ含量，4周组显著高于对照组(+612%，P<0.01),而2周组与对照组无明显差异(P>0.05)(表2)。
三、L-NNA对主动脉AngⅡ受体结合的影响
Scatchard分析发现大鼠主动脉组织对[125I]-AngⅡ结合呈高亲和特征。L-NNA 2周组大鼠主动脉对[125I]-AngⅡ最大结合能力(Bmax)和亲和能力(以Kd值反映)与对照组都无明显差异(P>0.05)，但4周组Bmax高达6倍(P<0.01)，Kd值高1倍(P<0.01)，结果见图1，2和表2。
表2 L-NNA致高血压大鼠模型血管
, 百拇医药
紧张素Ⅱ及其受体水平的变化
Tab 2 The changes of plasma and aortic Ang Ⅱ,and aortic Ang Ⅱ receptor in L-NNA treated rats (±s，n=6) Group
AngⅡ
AngⅡ receptor
Plasma
(fmol/L)
Aorta
(fmol/mg pr)
, http://www.100md.com Bmax
(fmol/L)
Kd
(nmol/L)
Control
12.4±2.1
20.4±7.0
285±43
0.55±0.24
2 Weeks
14.7±2.4
22.6±4.3
, 百拇医药
297±27
0.40±0.14
4 Weeks
11.6±1.8
38.9±6.2*
1743±82*
1.25±0.15*
*P<0.01，vs control group
Fig 1 Saturation plots of Ang Ⅱ binding in L-NNA rat aortic tissue (n=6,±s,**P<0.01， vs control group)
, 百拇医药
图1 L-NNA诱导大鼠主动脉AngⅡ结合饱和曲线
Fig 2 Scatchard curves for AngⅡ binding in rat aortic tissue (n=6)
图2 L-NNA诱导大鼠主动脉AngⅡ受体结合Scatchard曲线
讨 论
血管组织能产生多种血管活性因子，这些因子彼此之间相互作用形成调节网络[7]，这种调节平衡发生紊乱是高血压、动脉硬化等血管损伤性疾病的重要发病学基础。机体EDRF/NO具有舒张血管，抑制VSMC增殖和抗血小板聚积等广泛的生物学效应，EDRF/NO生成障碍被认为是高血压的一种重要发病因素。近年在长期抑制NOS而缺乏EDRF/NO诱导的高血压模型上发现，动物对AngⅡ缩血管与促细胞增殖反应增强，血管组织AngⅡ转换酶(ACE)表达增加[8]，而另一方面使用AngⅡ受体阻断剂和ACE抑制剂会有效地抑制高血压发生[9]，因而提出长期抑制内源性NO生成是形成AngⅡ依赖型高血压重要原因的假说。
, 百拇医药
本工作应用NOS抑制剂L-NNA，2周后动物仅发生高血压，但无明显心肌肥大和血管AngⅡ及AngⅡ受体结合的变化。长期(4周)应用L-NNA的动物不仅血压升高，心肌肥大，而且血管AngⅡ含量和AngⅡ受体结合能力都分别成倍高于对照组(P<0.01)。体内存在相对独立的两套肾素-血管紧张素系统(RAS)，即全身循环RAS和心血管组织局部RAS，血浆AngⅡ水平由前者决定，而后者与高血压发生的关系更密切[10]。本实验各组动物血浆AngⅡ水平相近，提示抑制NOS后主要是影响组织局部RAS系统。Takemoto等亦报告短期抑制NOS不发生ACE表达增加和血管重塑(remodeling),而长期抑制则发生ACE表达增加和血管重塑[8]。本实验发现长期慢性抑制NOS的生成可导致血管AngⅡ水平和AngⅡ受体上调，为“NOS抑制诱发AngⅡ-依赖型高血压”假说提供新的依据。
[基金项目] 国家自然科学基金(No.39730220)资助
, 百拇医药
[参 考 文 献]
[1] 王军，徐洪涛，姚兴海，等.高血压病人血小板L-精氨酸/一氧化氮系统的改变[J].高血压杂志，1998，6(1)：22～24.
[2] Morton JJ, Beattie EC, Speirs A, et al. Persisten hypertension following inhibition of nitric oxide formation in the young Wistar rat:role of renin on vascular hypertrophy[J]. J Hypertens, 1993, 11:1083～1088.
[3] Anderson IK, Drew GM. Investigation of the inhibitory effect of NG-nitro-L-arginine methyl ester on the antihypertensive effect of the angiotensin AT1 receptor antagonist, GR 138950[J]. Br J Pharmacol, 1997,122(15):1385～1394.
, 百拇医药
[4] Takizawa T, Gu M, Chobanian AV, et al. Role of endothelial kinins in control of coronary nitric oxide production effect of nitric oxide on DNA replication induced by angiotensin Ⅱ in rat cardia fibroblasts[J]. Hypertension, 1997, 1035～1040.
[5] 李昭波，高云秋，崔志诚，等.运动性肥大心脏心肌血管紧张素Ⅱ受体特征变化[J].中国运动医学杂志，1998，17(4)：291～292.
[6] Dunn CW, Walker PB. Renin and angiotensin Ⅱ levels in neonatal endotoxin shock[J]. Circ Shock, 1988, 24(4):233～239.
, 百拇医药
[7] Kato H, Hau J, Chobanian AV, et al. Effects of angiotensin Ⅱ infusion and inhibition of nitric oxide synthase on the rat aorta[J]. Hypertension, 1996, 28:153～158.
[8] Takemoto M, Egashira K, Usui M, et al. Important role of tissue angiotensin-converting enzyme activity in the pathogenesis of coronary vascular and myocardial structural changes induced by long term blockade of nitric oxide synthesis in rats[J]. J Clin Invest, 1997, 9:278～287.
, 百拇医药
[9] Akuzawa N, Nakamura T, Kurashina T, et al. Antihypertensive agents prevent nephrosclerosis and left ventricular hypertrophy induced in rats by prolonged inhibition of nitric oxide synthesis[J]. Am J Hypertens, 1998, 11(37):697～707.
[10] Navarro-Cid J, Maeso R, Rodrigo E, et al. Renal and vascular consequences of the chronic nitric oxide synthase inhibition[J]. Am J Hypertens, 1996,9:1077～1083.
[收稿日期]1999-03-19 [修回日期]1999-08-30, 百拇医药
单位：(北京医科大学第一医院中心实验室，北京 100034)
关键词：精氨酸；酶类；受体，血管紧张素；大鼠
中国病理生理杂志000503
[摘 要] 目的：本文应用NO合酶(NOS)竞争性抑制剂左旋硝基精氨酸(L-NNA)诱导大鼠高血压，观察对主动脉血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和AngⅡ受体的影响。方法：采用腹腔注射L-NNA复制大鼠高血压模型，分别用放射免疫法测定主动脉AngⅡ、放射配基结合法测定主动脉组织AngⅡ受体和Griess法测定血浆NOx含量。结果：L-NNA使大鼠血压明显高于对照组(+142%，P<0.01)，4周组心系数高128%(P<0.01)，血浆NOx水平低于对照组48%，血浆AngⅡ水平无明显差异；血管组织AngⅡ含量4周组显著高612%(P<0.01)，且4周组[125I]-AngⅡ最大结合能力(Bmax)高6倍(P<0.01)，亲和力(Kd)高1倍(P<0.01)。结论：抑制NOS诱导高血压主要是通过局部组织肾素-血管紧张素系统(RAS)发挥作用的，长期慢性抑制NOS可使血管组织AngⅡ水平升高并导致血管AngⅡ受体上调，此结果为“NOS抑制诱发AngⅡ依赖型高血压”假说提供新的依据。
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[中图分类号] 544.13 [文献标识码] A
[文章编号] 1000-4718(2000)05-0393-04
The inhibition of nitric oxide synthase for long time up-regulates vascular angiotensin Ⅱ receptor
ZHANG Ying, LI Zai-quan, XU Song, XU Yu-feng, PANG Yong-zheng, TANG Chao-shu
(First Affiliated Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100034, China)
[Abstract] AIM:To observe the effects of aortal angiotensin Ⅱ(AngⅡ)levels and AngⅡ receptor in the hypertensive rat models. METHODS: Intraperinoneal injection of L-Nω-nitro-arginine(L-NNA) into rats induced hypertensive model, the binding of aortal AngⅡ receptor and the contents of aortal tissue AngⅡ and plasma NO-2+NO-3(NOx) were determined.RESULTS:Compared with the control group, the blood pressure of the rats treated with L-NNA was significantly increased by 142%(P<0.01)，the plasma NOx levels were decreased by 48%. However, in the rats treated for 4 weeks the ratio of cardial index was increased by 128%(P<0.01)，the plasma AngⅡ levels weren't significantly changed, the contents of vascular tissue AngⅡ were increased by 612%(P<0.01) and the Bmax of [125I]-AngⅡ was increased by six times (P<0.01),the affinity was doubled respectively.CONCLUSIONS:Nitric oxide synthase (NOS) inhibition mostly influes the reninangiotensin system in regional tissue. The inhibition for long time up-regulates vascular AngⅡ and AngⅡ receptor, which can support the hypothesis “NOS inhibition can induce AngⅡ-depended hypertension”.
, 百拇医药
[MeSH] Arginine; Enzymes; Receptors, angiotensin; Rats
血管内皮功能损伤是高血压发病的重要环节[1]。高血压病人常伴有不同程度血管内皮功能的障碍，抑制内皮舒张因子(endothelium derived relaxing factor/nitric oxide, EDRF/NO)生成即可成功复制动物高血压模型[2]。但是抑制NO如何诱导高血压发病的细胞分子机制迄今尚未完全阐明。体内血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)与NO间呈交互调节的关系[3、4]，AngⅡ收缩血管并刺激血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)增殖，是参与高血压发病的重要因素之一[1]。本工作应用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)竞争性抑制剂左旋硝基精氨酸(L-Nω-nitro-arginine,L-NNA)诱导大鼠高血压，观察对主动脉血管AngⅡ水平和AngⅡ受体的影响，以探讨EDRF/NO在高血压发病中的作用。
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材 料 和 方 法
选用200～250 g健康雄性Wistar大鼠，应用L-NNA复制大鼠高血压模型[2]。将大鼠随机分为3组，每组n=6。对照组大鼠常规饲养，不作特殊处理，其余两组按每日15 mg/kg量腹腔注射L-NNA，分别连续注射2周(L-NNA 2周组)或4周(L-NNA 4周组)。末次给药后次日测定鼠尾血压，实验结束时颈椎脱臼法处死动物，心脏称重计算心系数(心重mg/体重g)，加EDTA分离血浆，迅即摘取主动脉置-20℃保存。
一、主动脉AngⅡ受体结合测定
纵行剪开大鼠主动脉，去除血管周围脂肪组织和擦除血管内皮后剪碎组织，加入匀浆液(mmol/L: Tris/HCl 20, pH8.0, DTT 1.0, EDTA 1.0, PMSF 5.0, NaN3 5.0, benzamidine 3.0)于Polytron匀浆器上匀浆(30 s,3次)，经4层纱布过滤，2300 r/min离心5 min，分离细胞核，上清液30000 r/min超速离心1 h，分离细胞膜。应用放射配基结合实验[5]：取匀浆液蛋白量为100 μg/管，分别加反应液(终浓度mmol/L：Tris/HCl 50, pH 7.4,NaCl 120, MgCl2 10，PMSF 1.0, 8-hydroxyquinine 1.0),牛血清白蛋白1 mg/mL，[125I]-AngⅡ 0.1～2.0 nmol/L,反应终体积200 μL。室温25℃震荡孵育1 h后，加入4℃预冷的PBS终止反应。在Millipore上经0.45 μm微孔滤膜抽滤，用冷PBS冲洗3次。于γ-计数仪上测定滤膜上的[125I]放射强度，以fmol/mg蛋白表示AngⅡ受体结合量。非特异结合管反应液中含有AngⅡ受体拮抗剂(Sar1,Ala8)-AngⅡ，终浓度为1 μmol/L，总结合与非特异结合之差为AngⅡ受体的特异结合量。
, 百拇医药
二、血浆和主动脉组织AngⅡ含量的测定
用放射免疫试剂盒测定血浆和主动脉组织匀浆中AngⅡ含量，按试剂盒操作方法进行[6]。
三、其他指标测定
用考马斯亮兰法测定主动脉组织匀浆液中蛋白含量；血浆样品经硝酸盐还原处理为亚硝酸盐后，用Griess法测定NOx(即NO-2+NO-3)含量。
四、材料与试剂
Wistar大鼠系本校动物中心提供，L-NNA、(Sar1,Ala8)-AngⅡ和其他主要生化试剂购自Sigma公司，[125I]-Tyr4-AngⅡ(81.4 kBq/mmol)购自NEW Life Sci公司，AngⅡ放射测定试剂盒购自福瑞生物公司。
, http://www.100md.com
五、统计
结果数据以
±s表示，组间差异用One Way ANOVA方差分析和Student Newman-Keuls检验进行分析。结 果
一、L-NNA对大鼠血压、心系数和血浆NOx含量的影响
L-NNA 2周组大鼠血压明显高于对照组(+142%，P<0.01)，血浆NOx水平低于对照组(-48%)，心系数与对照组相比，差异无显著。L-NNA 4周组动物不但发生高血压，低NOx血症，而且明显心脏肥大，心系数明显高于对照组(+128%，P<0.01)，结果见表1所示。
表1 L-NNA对大鼠血压、心系数和血浆NOx含量的影响
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Tab 1 Effect of L-NNA on rat blood pressure, ratio of heart
to BW and NOx in experimental rats (
±s,n=6) GroupBP
(kPa)
BW
(g)
HW
(mg)
HW/BW
, 百拇医药 (mg/g)
NOx
(μmol/L)
Control
13.5±0.4
264±21
827±87
3.1±0.2
31±5
2Weeks 1
19.0±1.1
285±41
, 百拇医药
980±130
3.4±0.4
25±8
4Weeks 1
18.8±0.8
250±50
1010±120
4.0±0.1
9±2
P<0.01，vs control group; BP: Blood pressure BW:Body weight,HW:heart weight;NOx:NO-2+NO-3
, 百拇医药
二、L-NNA对血浆和主动脉组织AngⅡ含量的影响
L-NNA处理后不论2周还是4周，血浆AngⅡ水平与对照组差异不明显(P>0.05)，主动脉组织AngⅡ含量，4周组显著高于对照组(+612%，P<0.01),而2周组与对照组无明显差异(P>0.05)(表2)。
三、L-NNA对主动脉AngⅡ受体结合的影响
Scatchard分析发现大鼠主动脉组织对[125I]-AngⅡ结合呈高亲和特征。L-NNA 2周组大鼠主动脉对[125I]-AngⅡ最大结合能力(Bmax)和亲和能力(以Kd值反映)与对照组都无明显差异(P>0.05)，但4周组Bmax高达6倍(P<0.01)，Kd值高1倍(P<0.01)，结果见图1，2和表2。
表2 L-NNA致高血压大鼠模型血管
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紧张素Ⅱ及其受体水平的变化
Tab 2 The changes of plasma and aortic Ang Ⅱ,and aortic Ang Ⅱ receptor in L-NNA treated rats (
±s，n=6) GroupAngⅡ
AngⅡ receptor
Plasma
(fmol/L)
Aorta
(fmol/mg pr)
, http://www.100md.com Bmax
(fmol/L)
Kd
(nmol/L)
Control
12.4±2.1
20.4±7.0
285±43
0.55±0.24
2 Weeks
14.7±2.4
22.6±4.3
, 百拇医药
297±27
0.40±0.14
4 Weeks
11.6±1.8
38.9±6.2*
1743±82*
1.25±0.15*
*P<0.01，vs control group
Fig 1 Saturation plots of Ang Ⅱ binding in L-NNA rat aortic tissue (n=6,
±s,**P<0.01， vs control group), 百拇医药
图1 L-NNA诱导大鼠主动脉AngⅡ结合饱和曲线
Fig 2 Scatchard curves for AngⅡ binding in rat aortic tissue (n=6)
图2 L-NNA诱导大鼠主动脉AngⅡ受体结合Scatchard曲线
讨 论
血管组织能产生多种血管活性因子，这些因子彼此之间相互作用形成调节网络[7]，这种调节平衡发生紊乱是高血压、动脉硬化等血管损伤性疾病的重要发病学基础。机体EDRF/NO具有舒张血管，抑制VSMC增殖和抗血小板聚积等广泛的生物学效应，EDRF/NO生成障碍被认为是高血压的一种重要发病因素。近年在长期抑制NOS而缺乏EDRF/NO诱导的高血压模型上发现，动物对AngⅡ缩血管与促细胞增殖反应增强，血管组织AngⅡ转换酶(ACE)表达增加[8]，而另一方面使用AngⅡ受体阻断剂和ACE抑制剂会有效地抑制高血压发生[9]，因而提出长期抑制内源性NO生成是形成AngⅡ依赖型高血压重要原因的假说。
, 百拇医药
本工作应用NOS抑制剂L-NNA，2周后动物仅发生高血压，但无明显心肌肥大和血管AngⅡ及AngⅡ受体结合的变化。长期(4周)应用L-NNA的动物不仅血压升高，心肌肥大，而且血管AngⅡ含量和AngⅡ受体结合能力都分别成倍高于对照组(P<0.01)。体内存在相对独立的两套肾素-血管紧张素系统(RAS)，即全身循环RAS和心血管组织局部RAS，血浆AngⅡ水平由前者决定，而后者与高血压发生的关系更密切[10]。本实验各组动物血浆AngⅡ水平相近，提示抑制NOS后主要是影响组织局部RAS系统。Takemoto等亦报告短期抑制NOS不发生ACE表达增加和血管重塑(remodeling),而长期抑制则发生ACE表达增加和血管重塑[8]。本实验发现长期慢性抑制NOS的生成可导致血管AngⅡ水平和AngⅡ受体上调，为“NOS抑制诱发AngⅡ-依赖型高血压”假说提供新的依据。
[基金项目] 国家自然科学基金(No.39730220)资助
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[参 考 文 献]
[1] 王军，徐洪涛，姚兴海，等.高血压病人血小板L-精氨酸/一氧化氮系统的改变[J].高血压杂志，1998，6(1)：22～24.
[2] Morton JJ, Beattie EC, Speirs A, et al. Persisten hypertension following inhibition of nitric oxide formation in the young Wistar rat:role of renin on vascular hypertrophy[J]. J Hypertens, 1993, 11:1083～1088.
[3] Anderson IK, Drew GM. Investigation of the inhibitory effect of NG-nitro-L-arginine methyl ester on the antihypertensive effect of the angiotensin AT1 receptor antagonist, GR 138950[J]. Br J Pharmacol, 1997,122(15):1385～1394.
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[收稿日期]1999-03-19 [修回日期]1999-08-30, 百拇医药