山莨菪碱减轻TNF-α所致内皮细胞凋亡
作者：钟林尢 家騄 肖献忠
单位：湖南医科大学病理生理学教研室，湖南 长沙 410078
关键词：
中国病理生理杂志001064
目的：从转录因子水平观察山莨菪碱能否减轻TNF-α所致内皮细胞的凋亡，并探讨其机制是否与其抑制NF-κB活化有关。方法：培养小牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)，将山莨菪碱(0.2 mg/mL)加入细胞培养基中，30 min后再加入TNF-α(2500 U/mL)损伤24 h，采用Hoechst 33258染色，荧光显微镜观察细胞凋亡情况，并进行显微照相。采用Sellin法抽提细胞上清片段DNA及琼脂糖电泳，观察是否出现DNA梯状条带，用二苯胺法测定上清液及沉淀物中DNA含量，计算细胞DNA断裂百分率。BPAEC表达I-κBα及iNOS的Western blot印迹分析及用凝胶滞留法EMSA检测NF-κB活性。结果：山莨菪碱能明显减轻TNF-α所致的BPAEC凋亡，表现为荧光显微镜下凋亡细胞减少，未见明显梯状条带，DNA断裂百分率也明显减少。山莨菪碱抑制TNF-α所致的I-κBα的含量下降及NF-κB的活化，并抑制TNF-α所致的NF-κB从胞浆向胞核的移位。另外山莨菪碱能减少因TNF-α刺激所引起的BPAEC表达iNOS的增加。结论：山莨菪碱减轻TNF-α所致的内皮细胞凋亡，可能与山莨菪碱抑制NF-κB激活，从而抑制iNOS合成有关。, 百拇医药
单位：湖南医科大学病理生理学教研室，湖南 长沙 410078
关键词：
中国病理生理杂志001064
目的：从转录因子水平观察山莨菪碱能否减轻TNF-α所致内皮细胞的凋亡，并探讨其机制是否与其抑制NF-κB活化有关。方法：培养小牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)，将山莨菪碱(0.2 mg/mL)加入细胞培养基中，30 min后再加入TNF-α(2500 U/mL)损伤24 h，采用Hoechst 33258染色，荧光显微镜观察细胞凋亡情况，并进行显微照相。采用Sellin法抽提细胞上清片段DNA及琼脂糖电泳，观察是否出现DNA梯状条带，用二苯胺法测定上清液及沉淀物中DNA含量，计算细胞DNA断裂百分率。BPAEC表达I-κBα及iNOS的Western blot印迹分析及用凝胶滞留法EMSA检测NF-κB活性。结果：山莨菪碱能明显减轻TNF-α所致的BPAEC凋亡，表现为荧光显微镜下凋亡细胞减少，未见明显梯状条带，DNA断裂百分率也明显减少。山莨菪碱抑制TNF-α所致的I-κBα的含量下降及NF-κB的活化，并抑制TNF-α所致的NF-κB从胞浆向胞核的移位。另外山莨菪碱能减少因TNF-α刺激所引起的BPAEC表达iNOS的增加。结论：山莨菪碱减轻TNF-α所致的内皮细胞凋亡，可能与山莨菪碱抑制NF-κB激活，从而抑制iNOS合成有关。, 百拇医药