HMGI高表达促进单核细胞PDGF-B链基因转录
作者：王小明 邱劲 李素敏 李健 沈传陆 斯勤 郭恒怡 吴其夏
单位：中国医学科学院基础医学研究所 中国协和医科大学基础医学院 病理生理室，北京 100005
关键词：
中国病理生理杂志001051
血管内皮细胞与循环血细胞，如单核细胞之间的相互作用，在动脉粥样硬化等重要心血管疾病发生和发展过程中具有极其重要的意义。众多的动脉粥样硬化相关因素也同时作用于这些细胞。我们曾发现高迁移率蛋白Ⅰ(HMGⅠ)能促进ECV304细胞核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合。目的：观察在整体细胞水平，HMGI对单核细胞系U937细胞PDGF-B链基因转录的影响及蛋白激酶C磷酸化的调节作用。方法：(1)利用PCR技术和DNA重组技术构建正义和反义HMGI表达载体；(2)脂质体法将正义和反义HMGI表达载体转染U937单核细胞株；(3)反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测PDGF-B链mRNA的转录。结果：在转染正义HMGI表达载体的细胞，TNFα诱导的PDGF-B链基因转录较转染反义HMGI表达载体的细胞明显增强。在HMGI高表达的细胞中加入佛波酯(PMA)后，PDGF-B链基因的转录进一步增强，但HMGI高表达或同时加入PMA后的转录增强作用几乎可被PKC抑制剂H-7完全抑制；HMGI的竞争性抑制剂Distamycin对PDGF-B链基因的转录也有明显的抑制作用。结论：HMGI可增强TNFα诱导的U937细胞PDGF-B链基因的转录，这一效应需要PKC的活化。PKC曾被认为可通过激活丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)途径，引起核转录因子NF-κB转位入核。本研究提示PKC也可能作用于HMGI，增强NF-κB与PDGF-B链基因上游元件的相互作用而影响基因转录。, http://www.100md.com
单位：中国医学科学院基础医学研究所 中国协和医科大学基础医学院 病理生理室，北京 100005
关键词：
中国病理生理杂志001051
血管内皮细胞与循环血细胞，如单核细胞之间的相互作用，在动脉粥样硬化等重要心血管疾病发生和发展过程中具有极其重要的意义。众多的动脉粥样硬化相关因素也同时作用于这些细胞。我们曾发现高迁移率蛋白Ⅰ(HMGⅠ)能促进ECV304细胞核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合。目的：观察在整体细胞水平，HMGI对单核细胞系U937细胞PDGF-B链基因转录的影响及蛋白激酶C磷酸化的调节作用。方法：(1)利用PCR技术和DNA重组技术构建正义和反义HMGI表达载体；(2)脂质体法将正义和反义HMGI表达载体转染U937单核细胞株；(3)反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测PDGF-B链mRNA的转录。结果：在转染正义HMGI表达载体的细胞，TNFα诱导的PDGF-B链基因转录较转染反义HMGI表达载体的细胞明显增强。在HMGI高表达的细胞中加入佛波酯(PMA)后，PDGF-B链基因的转录进一步增强，但HMGI高表达或同时加入PMA后的转录增强作用几乎可被PKC抑制剂H-7完全抑制；HMGI的竞争性抑制剂Distamycin对PDGF-B链基因的转录也有明显的抑制作用。结论：HMGI可增强TNFα诱导的U937细胞PDGF-B链基因的转录，这一效应需要PKC的活化。PKC曾被认为可通过激活丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)途径，引起核转录因子NF-κB转位入核。本研究提示PKC也可能作用于HMGI，增强NF-κB与PDGF-B链基因上游元件的相互作用而影响基因转录。, http://www.100md.com