体外超声助溶兔股动脉血栓对纤维蛋白降解产物的影响
作者:柏 瑾 沈学东 蔡乃绳 姚瑞明 陈灏珠
单位:200032 上海医科大学中山医院暨上海市心血管病研究所
关键词:体外超声;重组链激酶;纤维蛋白降解产物;血浆D二聚体
中国超声医学杂志990102 摘 要 目的:探讨体外超声(ETUS)助溶血栓的机理。方法:我们对18只新西兰兔双侧股动 脉血栓模型进行研究,实验对象被随机分为三组:不治疗对照组;重组链激酶(rSK)30000U/kg联用和不联用ETUS组。ETUS的频率和强度分别为0.8MHz和1.2W/cm2。治疗前和治疗后动脉采血测定血清纤维蛋白降解产物(FDP)和血浆D二聚体(D-Dimer)水平。结果:对照组、rSK组和rSK联用ETUS组治疗前血清FDP的平均值分别为0.15±0.01mg/L,0.23±0.07mg/L和0.27±0.17mg/L;血浆D-Dimer的平均值分别为1.82±0.85mg/L,1.53±0.80mg/L和1.50±0.40mg/L,各组治疗前血清FDP和血浆D-Dimer水平无差异(p>0.05)。上述三组治疗后血清FDP的平均值分别为0.15±0.02mg/L,2.23±1.30mg/L和4.22±1.88mg/L;血浆D-Dimer的平均值分别为2.45±0.72mg/L,5.58±2.56mg/L和6.00±1.83mg/L。结论:除对照组外,各组治疗后FDP和血浆D-Dimer水平均高于治疗前,差别有显著意义(p<0.05),但单用rSK组和rSK联用ETUS组之间FDP和血浆D-Dimer水平的差别无显著意义(p>0.05)。
, 百拇医药
Evaluation of Fibrin Degradation Products in External Therapeutic
Ultrasound Accelerating Thrombolysis in Rabbit Femoral Aterial Thrombosis
Bai Jin,Shen Xuedong,Cai Naisheng,et al
Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases,Zhong Shan Hospital,Shanghai Medical University,Shanghai 200032
ABSTRACT Objective:To explore the mechanism of external therapeutic ultrasound(ETUS)accelerating thrombolysis.Method:Bilateral femoral arterial thrombosis models were established in 18 New Zealand rabbits.Rabbits were randomized into three groups:rabbits without any treatment;streptokinase combined(rSK)at 30000U/kg with and without ETUS groups.The fibrin degradation products(FDP) and D-Dimer were measured before and after thrombolytic therany.Results:Before the treatment,the levels of FDP in the control group,rSK alone group and rSK plus ETUS group were 0.15±0.01mg/L,0.23±0.07mg/L and 0.27±0.17mg/L respectively;D-Dimer were 1.82±0.85mg/L,1.53±0.80mg/L and 1.50±0.40 mg/L respectively.The levels of FDP and D-Dimer before treatment have no significant difference among three groups(p>0.05).After the treatment,the levels of FDP in above three groups were 0.15±0.02mg/L,2.23±1.30mg/L and 4.22±1.88mg/L respectively;D-Dimer were 2.45±0.72mg/L,5.58±2.56mg/L and 6.00±1.83mg/L respectively.Conclusion:Except the confrot group,the levels after treatment were significantly higher than those before treatment (p<0.05).However,there were no differences between the rSK alone group and rSK plus ETUS group both in FDP and D-Dimer levels after treatment(p>0.05).Our study showed that ETUS might not increase the fibrin degradation products during the course of accelerating thrombolysis.
, 百拇医药
KEY WORDS External therapeutic ultrasound FDP D-Dimer
我们以往的研究证实,体外治疗性超声(ETUS)与经静脉药物溶栓同时运用可促进溶栓效果〔1〕,但机理不甚明了。本研究通过测定溶栓后纤维蛋白的降解产物(FDP)和血浆D二聚体(D-Dimer)的水平,探讨ETUS与纤维蛋白溶解的关系。
资料与方法
股动脉血栓模型的建立和分组 纯种新西兰白兔18只,平均体重2.73±0.23kg(购自上海申旺实验动物养殖场)。以戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉,采用我们以往介绍的方法建立18对双侧股动脉血栓模型〔2〕。随机分为三组,每组6只:不治疗对照组,静脉注射0.9%生理盐水;单用rSK治疗组,rSK剂量30000U/kg;rSK(30,000U/kg)联用ETUS治疗组。
, 百拇医药
仪器和试剂盒 采用上海亚医实业有限公司生产的UTU-3000型心血管超声治疗仪。该仪有4个直径1.5cm换能器轮流发射,每个工作2秒,停6秒。频率0.8kMz,功率输出强度1.0~1.7W/cm2。rSK由上海实业医大生物医学有限公司提供(批号971022)。采用上海捷门生物技术公司提供的FDP定量酶联免疫快速检测试剂盒(批号9803)。金标法D-Dimer检测试剂盒(NycoCard-D-Dimer,NYOCOMED PHARMA AS,NORWAY,批号801095)。酶标仪采用Elx800(BIO-TEK INSTRUMENT.INC)。
超声助溶 ETUS换能器置于股动脉血栓之上,中间用水囊隔开,使两者之间保持0.5cm的距离。超声强度1.2W/cm2,与rSK同时进行,处理时间和药物静脉摘注时间同样为60分钟。
标本血样的收集和检测 分离兔右侧颈总动脉作为采血通道。分别于血栓模型建立前和开始治疗后120分钟采血。FDP标本离心后留取血清,D-Dimer标本以3.8%枸橼酸钠抗凝留取血浆。血清和血浆于-30℃冰箱保存。酶联免疫快速检测法测定FDP。用金标法测定D-Dimer。
, 百拇医药
结 果
FDP测定 治疗前对照组、rSK组和rSK联用ETUS组治疗前血清FDP的平均值分别为0.15±0.01mg/L,0.23±0.07mg/L和0.27±0.17mg/L。各组治疗前血清FDP水平无差异(p>0.05)。治疗后血清FDP的平均值分别为0.15±0.02mg/L,2.23±1.30mg/L和4.22±1.88mg/L。除对照组外,单用rSK组和rSk联用ETUS组治疗后FDP水平均高于治疗前,差别有显著意义(p<0.05),但单用rSK组和rSK联用ETUS组之间FDP水平的差别无显著意义(p>0.05)(图1)。
*与不治疗组相比差别有意义(p<0.05)
#与rSK组相比差别无意义(p>0.05)
, http://www.100md.com 图1 各组治疗前后血清FDP比较
D-Dimer测定 治疗前血浆D-Dimer的平均值分别为1.82±0.85mg/L,1.53±0.80mg/L和1.50±0.40mg/L。各组治疗前血浆D-Dimer水平无差异(p>0.05)。治疗后血浆D-Dimer的平均值分别为2.45±0.72mg/L,5.58±2.56mg/L和6.00±1.83mg/L。除对照组外,单用rSK组和rSK联用ETUS组治疗后血浆D-Dimer水平均高于治疗前,差别有显著意义(p<0.05),但单用rSK组和rSK联用ETUS组之间血浆D-Dimer水平的差别无显著意义(p>0.05)(图2)。
*与不治疗组相比差别有意义(p<0.05)
#与rSK组相比差别无意义(p>0.05)
, 百拇医药
图2 各组治疗前后血浆D-Dimer的比较
讨 论
ETUS的助溶作用 体外超声助溶血栓的效果已被多项研究证实。我们曾对12对犬股动脉血栓模型进行超声助溶研究,发现超声助溶组和单用药组股动脉血栓的再通率分别为100%(12/12根)和67%(8/12根),差别有显著意义(p<0.05)。超声助溶组和单用药组犬股动脉再通时间分别为
31.25±6.41min和56.25±18.47min(p<0.01),。以后我们〔3〕又对一组26例急性心肌梗塞患者进行研究,超声助溶后,10/13例(77%)与梗塞相关的冠状动脉均达到再通标准。4例梗塞时间超过10小时的患者治疗后全部再通,其中1例梗塞超过15小时的患者,仅用了半量的链激酶也获得冠脉再通。单用药物组治疗后有7/13例(53%)冠脉再通。5例梗塞时间超过10小时的患者,治疗后仅1例再通。但是有关体外超声助溶血栓的机理方面国内研究甚少。
, 百拇医药
ETUS助溶的机理 据信ETUS输助溶栓的机理主要与超声空化作用能加速溶栓药物向血栓内渗透有关。超声空化是指液态物质在超声作用下,其中的微小气泡随超声频发生迅速、重复地生长-闭合-破灭运动,由此产生一系列物理效应〔4〕。为证实超声空化在ETUS促溶血栓中的作用,Tachibana等〔5〕用超声诊断用的造影剂-白蛋白微泡与ETUS及尿激酶联合溶栓,发现溶栓效果比单用尿激酶和尿激酶加ETUS两组都强。白蛋白微泡可降低空化产生的阈值。因而证明ETUS促进血栓溶解的机制是超声空化。Francis等〔6〕的离体实验结果显示,1MKz,4.0W/cm2的ETUS可提高血浆血块对1251标记的rt-PA的摄取率,促进tr-PA向血块内渗透。但Kornowski等〔7〕又发现如超声功率增大,空化作用加强,溶栓效果反而下降,提示超声助溶还有其他机制参与。前苏联学者研究证实治疗性超声可抑制凝血系统活性,防止血栓形成。这与治疗性超声治疗时,血浆对肝素的耐受性降低,凝血酶原和纤维蛋白原消耗增多,纤溶活性和血中的肝素增加有关。从而认为,超声除能促进药物渗入血栓外,还可能引起体内凝血和纤溶系统的变化,从而促进血栓溶解。
, 百拇医药
纤溶系统是机体防止血管内血栓形成的主要的内源性机制,FDP和D-Dimer是纤维蛋白降解的最终产物,本研究通过建立兔股动脉血栓模型,分析了各实验组纤维蛋白降解产物FDP和D-Dimer的水平,结果显示,0.8MKz、1.2W/cm2的ETUS联用rSK组溶栓后FDP和D-Dimer水平与单用rSK组的相比并无有意义的差别,说明在常规超声强度下ETUS并未促进纤维蛋白的降解,与Blinc等〔8〕的研究结果一致。说明体外超声助溶血栓的机理可能还有更深层次的问题有待我们进一步研究。
参考文献
[1]贾如意,沈学东,李志善,等.从诱发兔耳血管损伤后再出血评价体外超声助溶血栓的效果.中华物理医学杂志,1998,20:14~16
[2]贾如意,沈学东,李志善,等.体外治疗性超声促进兔股动脉血栓溶解的实验研究.亚洲医药,1997,4:33~37
, http://www.100md.com
[3]沈学东,贾如意,蔡乃绳,等.体外超声助溶血栓治疗急性心肌梗塞的初步临床研究.中国超声医学杂志,1998,14(4续):6~8
[4]张德俊.空化效应与超声治疗仪.中国超声医学杂志,1998,14:19~23
[5]Tachibana K,Tachibana S.Albumin micro-bubble echo-contrast material as an enhancer for ultrasound accelerated thrombolysis.Circulation,1995,92:1148~1151
[6]Francis CW,Onundarson PT,Carstensen EL,et al.ULtrasound accelerates recombinant tissue-type plasminogen activator into clots.Ultrasound Med Biol,1995,21:419~422
[7]Kornowski R,Meltzer RS,BSc AC,et al.Does external ultrasound accelerate thrombolysis:Results from a rabbit model.Circulation,1994,89:339~342
[8]Blinc A,Francis CW,Trudnowski JL,et al.Characterization of ultrasound-potentiated fibrinolysis in vitro.Blood,1993,81:2636~2639
(1998-07-20收稿), 百拇医药
单位:200032 上海医科大学中山医院暨上海市心血管病研究所
关键词:体外超声;重组链激酶;纤维蛋白降解产物;血浆D二聚体
中国超声医学杂志990102 摘 要 目的:探讨体外超声(ETUS)助溶血栓的机理。方法:我们对18只新西兰兔双侧股动 脉血栓模型进行研究,实验对象被随机分为三组:不治疗对照组;重组链激酶(rSK)30000U/kg联用和不联用ETUS组。ETUS的频率和强度分别为0.8MHz和1.2W/cm2。治疗前和治疗后动脉采血测定血清纤维蛋白降解产物(FDP)和血浆D二聚体(D-Dimer)水平。结果:对照组、rSK组和rSK联用ETUS组治疗前血清FDP的平均值分别为0.15±0.01mg/L,0.23±0.07mg/L和0.27±0.17mg/L;血浆D-Dimer的平均值分别为1.82±0.85mg/L,1.53±0.80mg/L和1.50±0.40mg/L,各组治疗前血清FDP和血浆D-Dimer水平无差异(p>0.05)。上述三组治疗后血清FDP的平均值分别为0.15±0.02mg/L,2.23±1.30mg/L和4.22±1.88mg/L;血浆D-Dimer的平均值分别为2.45±0.72mg/L,5.58±2.56mg/L和6.00±1.83mg/L。结论:除对照组外,各组治疗后FDP和血浆D-Dimer水平均高于治疗前,差别有显著意义(p<0.05),但单用rSK组和rSK联用ETUS组之间FDP和血浆D-Dimer水平的差别无显著意义(p>0.05)。
, 百拇医药
Evaluation of Fibrin Degradation Products in External Therapeutic
Ultrasound Accelerating Thrombolysis in Rabbit Femoral Aterial Thrombosis
Bai Jin,Shen Xuedong,Cai Naisheng,et al
Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases,Zhong Shan Hospital,Shanghai Medical University,Shanghai 200032
ABSTRACT Objective:To explore the mechanism of external therapeutic ultrasound(ETUS)accelerating thrombolysis.Method:Bilateral femoral arterial thrombosis models were established in 18 New Zealand rabbits.Rabbits were randomized into three groups:rabbits without any treatment;streptokinase combined(rSK)at 30000U/kg with and without ETUS groups.The fibrin degradation products(FDP) and D-Dimer were measured before and after thrombolytic therany.Results:Before the treatment,the levels of FDP in the control group,rSK alone group and rSK plus ETUS group were 0.15±0.01mg/L,0.23±0.07mg/L and 0.27±0.17mg/L respectively;D-Dimer were 1.82±0.85mg/L,1.53±0.80mg/L and 1.50±0.40 mg/L respectively.The levels of FDP and D-Dimer before treatment have no significant difference among three groups(p>0.05).After the treatment,the levels of FDP in above three groups were 0.15±0.02mg/L,2.23±1.30mg/L and 4.22±1.88mg/L respectively;D-Dimer were 2.45±0.72mg/L,5.58±2.56mg/L and 6.00±1.83mg/L respectively.Conclusion:Except the confrot group,the levels after treatment were significantly higher than those before treatment (p<0.05).However,there were no differences between the rSK alone group and rSK plus ETUS group both in FDP and D-Dimer levels after treatment(p>0.05).Our study showed that ETUS might not increase the fibrin degradation products during the course of accelerating thrombolysis.
, 百拇医药
KEY WORDS External therapeutic ultrasound FDP D-Dimer
我们以往的研究证实,体外治疗性超声(ETUS)与经静脉药物溶栓同时运用可促进溶栓效果〔1〕,但机理不甚明了。本研究通过测定溶栓后纤维蛋白的降解产物(FDP)和血浆D二聚体(D-Dimer)的水平,探讨ETUS与纤维蛋白溶解的关系。
资料与方法
股动脉血栓模型的建立和分组 纯种新西兰白兔18只,平均体重2.73±0.23kg(购自上海申旺实验动物养殖场)。以戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉,采用我们以往介绍的方法建立18对双侧股动脉血栓模型〔2〕。随机分为三组,每组6只:不治疗对照组,静脉注射0.9%生理盐水;单用rSK治疗组,rSK剂量30000U/kg;rSK(30,000U/kg)联用ETUS治疗组。
, 百拇医药
仪器和试剂盒 采用上海亚医实业有限公司生产的UTU-3000型心血管超声治疗仪。该仪有4个直径1.5cm换能器轮流发射,每个工作2秒,停6秒。频率0.8kMz,功率输出强度1.0~1.7W/cm2。rSK由上海实业医大生物医学有限公司提供(批号971022)。采用上海捷门生物技术公司提供的FDP定量酶联免疫快速检测试剂盒(批号9803)。金标法D-Dimer检测试剂盒(NycoCard-D-Dimer,NYOCOMED PHARMA AS,NORWAY,批号801095)。酶标仪采用Elx800(BIO-TEK INSTRUMENT.INC)。
超声助溶 ETUS换能器置于股动脉血栓之上,中间用水囊隔开,使两者之间保持0.5cm的距离。超声强度1.2W/cm2,与rSK同时进行,处理时间和药物静脉摘注时间同样为60分钟。
标本血样的收集和检测 分离兔右侧颈总动脉作为采血通道。分别于血栓模型建立前和开始治疗后120分钟采血。FDP标本离心后留取血清,D-Dimer标本以3.8%枸橼酸钠抗凝留取血浆。血清和血浆于-30℃冰箱保存。酶联免疫快速检测法测定FDP。用金标法测定D-Dimer。
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结 果
FDP测定 治疗前对照组、rSK组和rSK联用ETUS组治疗前血清FDP的平均值分别为0.15±0.01mg/L,0.23±0.07mg/L和0.27±0.17mg/L。各组治疗前血清FDP水平无差异(p>0.05)。治疗后血清FDP的平均值分别为0.15±0.02mg/L,2.23±1.30mg/L和4.22±1.88mg/L。除对照组外,单用rSK组和rSk联用ETUS组治疗后FDP水平均高于治疗前,差别有显著意义(p<0.05),但单用rSK组和rSK联用ETUS组之间FDP水平的差别无显著意义(p>0.05)(图1)。
*与不治疗组相比差别有意义(p<0.05)
#与rSK组相比差别无意义(p>0.05)
, http://www.100md.com 图1 各组治疗前后血清FDP比较
D-Dimer测定 治疗前血浆D-Dimer的平均值分别为1.82±0.85mg/L,1.53±0.80mg/L和1.50±0.40mg/L。各组治疗前血浆D-Dimer水平无差异(p>0.05)。治疗后血浆D-Dimer的平均值分别为2.45±0.72mg/L,5.58±2.56mg/L和6.00±1.83mg/L。除对照组外,单用rSK组和rSK联用ETUS组治疗后血浆D-Dimer水平均高于治疗前,差别有显著意义(p<0.05),但单用rSK组和rSK联用ETUS组之间血浆D-Dimer水平的差别无显著意义(p>0.05)(图2)。
*与不治疗组相比差别有意义(p<0.05)
#与rSK组相比差别无意义(p>0.05)
, 百拇医药
图2 各组治疗前后血浆D-Dimer的比较
讨 论
ETUS的助溶作用 体外超声助溶血栓的效果已被多项研究证实。我们曾对12对犬股动脉血栓模型进行超声助溶研究,发现超声助溶组和单用药组股动脉血栓的再通率分别为100%(12/12根)和67%(8/12根),差别有显著意义(p<0.05)。超声助溶组和单用药组犬股动脉再通时间分别为
31.25±6.41min和56.25±18.47min(p<0.01),。以后我们〔3〕又对一组26例急性心肌梗塞患者进行研究,超声助溶后,10/13例(77%)与梗塞相关的冠状动脉均达到再通标准。4例梗塞时间超过10小时的患者治疗后全部再通,其中1例梗塞超过15小时的患者,仅用了半量的链激酶也获得冠脉再通。单用药物组治疗后有7/13例(53%)冠脉再通。5例梗塞时间超过10小时的患者,治疗后仅1例再通。但是有关体外超声助溶血栓的机理方面国内研究甚少。
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ETUS助溶的机理 据信ETUS输助溶栓的机理主要与超声空化作用能加速溶栓药物向血栓内渗透有关。超声空化是指液态物质在超声作用下,其中的微小气泡随超声频发生迅速、重复地生长-闭合-破灭运动,由此产生一系列物理效应〔4〕。为证实超声空化在ETUS促溶血栓中的作用,Tachibana等〔5〕用超声诊断用的造影剂-白蛋白微泡与ETUS及尿激酶联合溶栓,发现溶栓效果比单用尿激酶和尿激酶加ETUS两组都强。白蛋白微泡可降低空化产生的阈值。因而证明ETUS促进血栓溶解的机制是超声空化。Francis等〔6〕的离体实验结果显示,1MKz,4.0W/cm2的ETUS可提高血浆血块对1251标记的rt-PA的摄取率,促进tr-PA向血块内渗透。但Kornowski等〔7〕又发现如超声功率增大,空化作用加强,溶栓效果反而下降,提示超声助溶还有其他机制参与。前苏联学者研究证实治疗性超声可抑制凝血系统活性,防止血栓形成。这与治疗性超声治疗时,血浆对肝素的耐受性降低,凝血酶原和纤维蛋白原消耗增多,纤溶活性和血中的肝素增加有关。从而认为,超声除能促进药物渗入血栓外,还可能引起体内凝血和纤溶系统的变化,从而促进血栓溶解。
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纤溶系统是机体防止血管内血栓形成的主要的内源性机制,FDP和D-Dimer是纤维蛋白降解的最终产物,本研究通过建立兔股动脉血栓模型,分析了各实验组纤维蛋白降解产物FDP和D-Dimer的水平,结果显示,0.8MKz、1.2W/cm2的ETUS联用rSK组溶栓后FDP和D-Dimer水平与单用rSK组的相比并无有意义的差别,说明在常规超声强度下ETUS并未促进纤维蛋白的降解,与Blinc等〔8〕的研究结果一致。说明体外超声助溶血栓的机理可能还有更深层次的问题有待我们进一步研究。
参考文献
[1]贾如意,沈学东,李志善,等.从诱发兔耳血管损伤后再出血评价体外超声助溶血栓的效果.中华物理医学杂志,1998,20:14~16
[2]贾如意,沈学东,李志善,等.体外治疗性超声促进兔股动脉血栓溶解的实验研究.亚洲医药,1997,4:33~37
, http://www.100md.com
[3]沈学东,贾如意,蔡乃绳,等.体外超声助溶血栓治疗急性心肌梗塞的初步临床研究.中国超声医学杂志,1998,14(4续):6~8
[4]张德俊.空化效应与超声治疗仪.中国超声医学杂志,1998,14:19~23
[5]Tachibana K,Tachibana S.Albumin micro-bubble echo-contrast material as an enhancer for ultrasound accelerated thrombolysis.Circulation,1995,92:1148~1151
[6]Francis CW,Onundarson PT,Carstensen EL,et al.ULtrasound accelerates recombinant tissue-type plasminogen activator into clots.Ultrasound Med Biol,1995,21:419~422
[7]Kornowski R,Meltzer RS,BSc AC,et al.Does external ultrasound accelerate thrombolysis:Results from a rabbit model.Circulation,1994,89:339~342
[8]Blinc A,Francis CW,Trudnowski JL,et al.Characterization of ultrasound-potentiated fibrinolysis in vitro.Blood,1993,81:2636~2639
(1998-07-20收稿), 百拇医药