甲硝唑葡萄糖注射液的细菌内毒素检测可行性探讨
作者：潘碧英 翁爱彬
单位：潘碧英 莆田市药品检验所；翁爱彬 莆田县医院
关键词：
海峡药学990221 甲硝唑葡萄糖注射液为临床上常用药且需做热原检测，笔者根据中国药典1995年版二部附录收载的细菌内毒素检查法，对甲硝唑葡萄糖注射液细菌内毒素检测方法进行初步探讨。结果报告如下。
1 材料
1.1 甲硝唑葡萄糖注射液 批号990308，990324，990326，规格250 ml：GS12.5 g，甲硝唑0.5 g，莆田县医院制剂室。
1.2 细菌内毒素国家标准品 批号981，规格9000 EU支-1，中国药品生物制品检定所。
, 百拇医药
1.3 鲎试剂 批号980910，980905，规格0.1 ml支-1，标示灵敏度0.5 EU支-1，厦门鲎试剂厂。
1.4 细菌内毒素检查用水 批号980905，厦门鲎试剂厂。
2 方法与结果
2.1 鲎试剂灵敏度复核 按中国药典1995年版二部[1]规定方法复核灵敏度(λ0.5 EU.ml-1)，结果2批均符合规定。
2.2 细菌内毒素限值计算 按中国药典1995年版二部，本品热原试验注射剂量M为10 ml.kg-1，细菌内毒素致热阈值K为10 EU.kg-1，因此本品细菌内毒素限值为L＝K/M＝1 EU.ml-1。样品最大有效稀释倍数(MVD)。MVD＝L/λ＝2。
, 百拇医药
2.3 抑制增强试验 用细菌内毒素检查用水，将样品稀释成下列浓度：原液(A)1∶1(B)1∶2(C)，各稀释浓度样品与细菌内毒素工作标准品按1→2等比稀释配成2λ，λ，0.5λ，0.25λ细菌内毒素溶液，分别对两批鲎试剂作抑制增强试验[2]结果(见表1)。
表1 两 批 鲎 试 剂 抑 制 增 强 试 验 结 果 比 较 样品
鲎试剂
灵敏度
0.5EU.ml-1
细菌内毒素工作标准品浓度
(EU.ml-1)
, 百拇医药
1
0.5
0.25
0.125
阴性对照
A
980910
++++
++++------------
980905
++++
++++------------
, 百拇医药 B
980910
++++
++++------------
980905
++++
++++------------
C
980910
++++
++++------------
980905
, 百拇医药
++++
++++------------
从表1表明3批甲硝唑葡萄糖注射液原液及各稀释度对细菌内毒素试验均无抑制作用。
2.4 样品细菌内毒素检测 对加入内毒素和不加入内毒素的样品进行细菌内毒素检测以判断本法的可靠性(见表2)。
表2 3批样品内毒素检测结果 批号
样品
样品+内毒素
阳性管
阴性管
990308---
, 百拇医药
+++
+++---
990324---
+++
+++---
990326---
+++
+++---
甲硝唑葡萄糖注射液细菌内毒素的检查(鲎试剂批号980910为0.5 EU.ml-1)
从表2可见3批甲硝唑葡萄糖注射液细菌内毒素检查均符合规定，本法可靠。
, 百拇医药 3 讨论
根据对该院自1996年生产甲硝唑葡萄糖注射液200批次，经临床使用后无热原反应，试验结果表明，甲硝唑葡萄糖注射液无需稀释对标示灵敏度为0.5 EU.ml-1的2批鲎试剂无抑制增强作用，本品MVD为2，样品的细菌内毒素试验表明，将样品原液，以标示灵敏度为0.5 EU.ml-1的鲎试剂可用于样品的细菌内毒素检测，这为基层医院提供便捷可靠的检测方法。
参考文献
1.卫生部药典委员会：细菌内毒素检查，中国药典1995年版二部，北京，化学工业出版社，广州，广东科技出版社，1995；附录76
2.冯聚锦：细菌内毒素检查的抑制或增强试验 中国生化药物杂志1994；15(2)∶141, 百拇医药
单位：潘碧英 莆田市药品检验所；翁爱彬 莆田县医院
关键词：
海峡药学990221 甲硝唑葡萄糖注射液为临床上常用药且需做热原检测，笔者根据中国药典1995年版二部附录收载的细菌内毒素检查法，对甲硝唑葡萄糖注射液细菌内毒素检测方法进行初步探讨。结果报告如下。
1 材料
1.1 甲硝唑葡萄糖注射液 批号990308，990324，990326，规格250 ml：GS12.5 g，甲硝唑0.5 g，莆田县医院制剂室。
1.2 细菌内毒素国家标准品 批号981，规格9000 EU支-1，中国药品生物制品检定所。
, 百拇医药
1.3 鲎试剂 批号980910，980905，规格0.1 ml支-1，标示灵敏度0.5 EU支-1，厦门鲎试剂厂。
1.4 细菌内毒素检查用水 批号980905，厦门鲎试剂厂。
2 方法与结果
2.1 鲎试剂灵敏度复核 按中国药典1995年版二部[1]规定方法复核灵敏度(λ0.5 EU.ml-1)，结果2批均符合规定。
2.2 细菌内毒素限值计算 按中国药典1995年版二部，本品热原试验注射剂量M为10 ml.kg-1，细菌内毒素致热阈值K为10 EU.kg-1，因此本品细菌内毒素限值为L＝K/M＝1 EU.ml-1。样品最大有效稀释倍数(MVD)。MVD＝L/λ＝2。
, 百拇医药
2.3 抑制增强试验 用细菌内毒素检查用水，将样品稀释成下列浓度：原液(A)1∶1(B)1∶2(C)，各稀释浓度样品与细菌内毒素工作标准品按1→2等比稀释配成2λ，λ，0.5λ，0.25λ细菌内毒素溶液，分别对两批鲎试剂作抑制增强试验[2]结果(见表1)。
表1 两 批 鲎 试 剂 抑 制 增 强 试 验 结 果 比 较 样品
鲎试剂
灵敏度
0.5EU.ml-1
细菌内毒素工作标准品浓度
(EU.ml-1)
, 百拇医药
1
0.5
0.25
0.125
阴性对照
A
980910
++++
++++------------
980905
++++
++++------------
, 百拇医药 B
980910
++++
++++------------
980905
++++
++++------------
C
980910
++++
++++------------
980905
, 百拇医药
++++
++++------------
从表1表明3批甲硝唑葡萄糖注射液原液及各稀释度对细菌内毒素试验均无抑制作用。
2.4 样品细菌内毒素检测 对加入内毒素和不加入内毒素的样品进行细菌内毒素检测以判断本法的可靠性(见表2)。
表2 3批样品内毒素检测结果 批号
样品
样品+内毒素
阳性管
阴性管
990308---
, 百拇医药
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990324---
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990326---
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甲硝唑葡萄糖注射液细菌内毒素的检查(鲎试剂批号980910为0.5 EU.ml-1)
从表2可见3批甲硝唑葡萄糖注射液细菌内毒素检查均符合规定，本法可靠。
, 百拇医药 3 讨论
根据对该院自1996年生产甲硝唑葡萄糖注射液200批次，经临床使用后无热原反应，试验结果表明，甲硝唑葡萄糖注射液无需稀释对标示灵敏度为0.5 EU.ml-1的2批鲎试剂无抑制增强作用，本品MVD为2，样品的细菌内毒素试验表明，将样品原液，以标示灵敏度为0.5 EU.ml-1的鲎试剂可用于样品的细菌内毒素检测，这为基层医院提供便捷可靠的检测方法。
参考文献
1.卫生部药典委员会：细菌内毒素检查，中国药典1995年版二部，北京，化学工业出版社，广州，广东科技出版社，1995；附录76
2.冯聚锦：细菌内毒素检查的抑制或增强试验 中国生化药物杂志1994；15(2)∶141, 百拇医药