5种氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性比较
作者：罗东 林彩
单位：第三军医大学附属西南医院药剂科，重庆 400038
关键词：滴眼液；抗菌活性；氟喹诺酮
第三军医大学学报991123
提要 目的：测定5种氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性并进行比较。方法：用微量二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，对倍稀释平板活菌计数法测定最低杀菌浓度(MBC)。结果：5种氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性由高到低分别为左氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、洛美沙星及诺氟沙星。结论：氟喹诺酮类滴眼液具有良好的体外抗菌作用，为眼科感染适宜选用的药物之一。
中图法分类号 R988.1 文献标识码 B
Comparison of the antibacterial activity of five kinds of
, 百拇医药
fluoroquinolone ophthalmic solution in vitro
氟喹诺酮抗菌药是80年代陆续开发出来的第三代新型抗菌药，它的抗菌谱较广，具有较强的抗菌活性[1]；且具有明显的抗生素后效应(PAE)；较难形成耐药性[2]。近几年来，氟喹诺酮类抗菌药由一种治疗全身各部位疾病的药物迅速向眼科局部用药发展，用于外眼部细菌性感染，主要以滴眼液供临床使用[3～5]。氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性仅有个别研究报道[6，7]，本文就市售的氧氟沙星滴眼液、诺氟沙星滴眼液与自配的环丙沙星滴眼液、洛美沙星滴眼液及左氟沙星滴眼液对几种常见眼部感染细菌的体外抗菌活性作一比较，以期能为临床合理应用氟喹诺酮类滴眼液提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料
, 百拇医药
1.1.1 药品 氧氟沙星(OFLX)滴眼液(日本参天制药株式会社)；诺氟沙星(NFLX)滴眼液(芜湖市第三制药厂，批号 960830)；环丙沙星(CPLX)(西南合成制药厂，批号 930510，配成0.3%滴眼液)；左氟沙星(LVLX)(日本第一株式会社，配制成0.3%滴眼液)。
1.1.2 受试细菌 系我院检验科细菌室由临床标本分离并鉴定的189株菌，其中包括金黄色葡萄球菌54株，铜绿假单胞菌27株，大肠杆菌36株，淋球菌31株，肺炎克雷伯氏菌23株，链球菌属18株。实验中质控菌株为国家标准质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923，大肠杆菌ATCC25922。
1.1.3 培养基 MH培养基(中国药品生物制品检定所，批号951120)；MH肉汤(中国药品生物制品检定所，批号951227)；GBECⅢ型桂敏淋球菌培养基(广西桂林皮肤病研究所提供)；培养链球菌使用含5%脱纤维兔血的MH培养基。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 菌液的配制 将各试验菌接种于MH琼脂培养基上，经35℃培养24 h，取其菌落用MH肉汤制成约105 cfu/ml的菌悬液。
1.2.2 最小抑菌浓度(MIC)测定 淋球菌采用平皿二倍稀释法，其它细菌采用微量二倍稀释法测定MIC。于含有系列浓度抗菌药液100 μl的96微孔板中，加入菌液100 μl，37℃培养18 h，未见细菌生长的最低浓度为其最小抑菌浓度。
1.2.3 最低杀菌浓度(MBC)测定 采用肉汤对倍稀释平板活菌计数法，即先测出MIC，再依次将未见细菌生长的微孔中培养液10 μl接种于不含抗菌药物的MH琼脂平皿表面，37℃培养18 h，未见细菌生长的最低药物浓度为最低杀菌浓度。
2 结果
, 百拇医药 2.1 5氟喹诺酮类滴眼液对上述6种临床常见致病菌的MIC，见表1
表1 5种氟喹诺酮类滴眼液对6种试验菌的MIC(μg/ml) 细菌种类
药物
MIC50
MIC90
MICrange
金黄色葡萄球菌G+(54)
NFFLX
<0.5
32
, 百拇医药
<0.5～64
CPLX
<0.5
8
<0.5～64
LMLX
1
16
<0.5～64
LVLX
<0.5
8
<0.5～32
, 百拇医药
铜绿假单胞菌G-(27)
NFLX
<0.5
2
<0.5～1
CPLX
<0.5
<0.5
<0.5～64
LMLX
1
<0.5
<0.5～>128
, 百拇医药
OFLX
<0.5
1
<0.5～1
LVLX
<0.5
<0.5
<0.5～1
淋球菌G-(31)
NFLX
1
4
<0.25～32
, http://www.100md.com
CPLX
<0.5
2
<0.125～6
LMLX
2
8
<0.125～64
OFLX
<0.25
4
<0.125～16
LVLX
, 百拇医药
<0.25
2
<0.125～4
大肠杆菌G-(36)
NFLX
8
32
<0.5～128
CPLX
4
32
<0.5～64
LMLX
, http://www.100md.com
16
64
<0.5～128
OFLX
8
32
<0.5～64
LVLX
4
32
<0.5～64
链球菌属G+(18)
NFLX
, 百拇医药
2
16
<0.5～16
CPLX
2
4
<0.5～4
LMLX
1
16
<0.5～32
OFLX
1
, 百拇医药
8
1～8
LVLX
1
2
<0.5～4
肺炎克雷伯氏菌G-(23)
NFLX
<0.5
4
<0.5～32
CPLX
<0.5
, 百拇医药
1
<0.5～2
LMLX
<0.5
2
<0.5～4
OFLX
<0.5
2
<0.5～64
LVLX
<0.5
<0.5
, 百拇医药
<0.5～1
从表1可见：左氟沙星、环丙沙星滴眼液对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、淋球菌及链球菌的抗菌活性最强，其MIC90为<0.5～4 μg/ml，其次为氧氟沙星、洛美沙星及诺氟沙星滴眼液，其MIC90分别为<0.5～16 μg/ml、2～16 μg/ml。氧氟沙星滴眼液对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强，MIC90为4 μg/ml，其次为左氟沙星滴眼液和环丙沙星滴眼液，其MIC90均为8 μg/ml，再次为洛美沙星及诺氟沙星滴眼液，其MIC90分别为16 μg/ml及32 μg/ml。
2.2 5种氟诺酮类滴眼液对5种临床常见致病菌的MBC，见表2表2 5种氟诺酮类滴眼液的MBC(μg/ml) 细菌种类
NFLX
, 百拇医药
CPLX
LMLX
OFLX
LVLX
金黄色葡萄球菌(20)
128
64
128
16
8
铜绿假单胞菌(10)
8
4
, 百拇医药
16
4
4
大肠杆菌(10)
64
16
32
32
16
链球菌属(10)
8
8
8
, 百拇医药 8
4
肺炎克雷伯氏菌(10)
8
2
4
4
1
从表2中可见，5种氟诺酮类滴眼液对5种致病菌均有一定的杀菌作用，其作用强弱不一，依次为LVLX、CPLX、OFLX、LMLX、NFLX。
3 讨论
氟喹诺酮类为80年代开发出来的抗菌谱更广、抗菌作用更强的新一代喹诺酮，结构上的特点是于喹啉环或萘啶环的6位上有氟，并在7位上都连有哌嗪基或吡咯啉基的衍生物。目前，氟喹诺酮类抗菌药已成为抗感染化疗中重要的抗菌药物之一，其作用机制是抑制细菌DNA旋转酶[6]，从而抑制DNA双螺旋结构的形成而发挥快速杀菌作用。在临床上可广泛应用于治疗呼吸道、肠道、胆道、泌尿道感染以及口腔科、皮肤科、妇产科、眼科、耳鼻喉科等各种感染性疾病。近几年来，氟喹诺酮类抗菌药特别在眼科局部应用中有新的发展，如国内生产的诺氟沙星滴眼液和眼膏，以及正在研制中的洛美沙星滴眼液，国外生产的氧氟沙星(泰利必妥)滴眼液和眼膏以及环丙沙星滴眼液等，临床上均用于治疗急性、亚急性细菌性结膜炎、细菌性角膜炎及细菌性角膜溃疡，疗效较好。
, 百拇医药
细菌性结膜炎、角膜炎是临床常见病、多发病，后者又是常见的致盲原因之一。张立贵等[9]对其进行了细菌学分析，指出结膜炎和角膜炎的病原体相似，主要为葡萄球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌等；万修华[10]调查表明，引起角膜溃疡的病原菌有铜绿假单胞菌、金葡菌、表葡菌、链球菌、淋球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌等；张文华[11]指出，60～70年代肺炎链球菌是细菌性角膜炎的主要致病菌，而近年来感染菌发生了变迁，革兰阴性杆菌明显增多，革兰阳性球菌中以葡萄球菌(金葡菌、表葡菌)为主，在化脓性角膜溃疡的致病菌中以铜绿假单胞菌居首位，其次是葡萄球菌，第三才是肺炎链球菌。我们根据上述情况，选择了金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、淋球菌、链球菌、肺炎克雷伯氏菌6种菌作为试验菌。实验结果显示：左氟沙星、环丙沙星滴眼液对革兰阳性菌及革兰阴性菌均有较强的抗菌作用，氧氟沙星次之，但氧氟沙星滴眼液对金黄色葡萄球菌的抗菌活性却最强。洛美沙星、诺氟沙星滴眼液的抗菌作用较前三者弱。
作者简介：罗 东，女，36岁，主管药师
, http://www.100md.com
参考文献
[1] Eliopouls G M. In vitro activity of Fluoroquinolones against Gram-positive bacteria[J]. Drugs,1995,49(Suppl 2):48-52.
[2] 张志平.喹诺酮类抗菌素研究的新进展[J].中国抗生素杂志，1995，20(2)：79-82.
[3] 罗兴中，方玉香，罗能明.氧氟沙星滴眼液治疗急性细菌性结膜炎的观察[J].中国实用眼科杂志，1995，13(7)：429-433.
[4] Leibowita H M. Antibacterial effectiveness of ciproflox-acin 0.3% ophthalmic solution in the treatment of bacterial conjunctivitis[J]. Am J Ophthalmol,1991,112(Supp14)：29-41.
, 百拇医药
[5] Miller J M. Vogel R. Cook T J, et al. Topically administered norfloxacin compared with topically adminstered gentamicin for the treatment of external ocular bacterial infections[J]. Am J Ophthalmol,1992,113(6):638-645.
[6] 张秀芝，宗 莉，童明庆，等.盐酸洛美沙星滴眼液的药效学研究[J].中国药学杂志，1997，17(5)：198-200.
[7] 张志萍，王 睿，陈 迁.盐酸环丙沙星滴眼液的制备及药效学研究[J].中国医院药学杂志，1995，15(3)：118-121.
[8] Shen L L. Kohlbrenner W E. Weigl D, et al. Mechanism of quinolone inhibition of DNA gyrase[J]. J Biol Chem,1989,264(5):2973-2981.
[9] 张立贵，仇宜解，吕秀文，等.细菌性结膜炎的病原菌[J].中国实用眼科杂志，1996，14(11)：671-674.
[10] 万修华，王栾弟，安玉亮.103例角膜溃疡的病因和病原及药物敏感试验的统计分析[J].中国实用眼科杂志，1997，15(7)：423-424.
[11] 张文华.感染性角膜疾病[J].中国眼科杂志，1995，31(2)：156-158.
收稿日期：1998-10-05；修回日期：1999-04-09, 百拇医药
单位：第三军医大学附属西南医院药剂科，重庆 400038
关键词：滴眼液；抗菌活性；氟喹诺酮
第三军医大学学报991123
提要 目的：测定5种氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性并进行比较。方法：用微量二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，对倍稀释平板活菌计数法测定最低杀菌浓度(MBC)。结果：5种氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性由高到低分别为左氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、洛美沙星及诺氟沙星。结论：氟喹诺酮类滴眼液具有良好的体外抗菌作用，为眼科感染适宜选用的药物之一。
中图法分类号 R988.1 文献标识码 B
Comparison of the antibacterial activity of five kinds of
, 百拇医药
fluoroquinolone ophthalmic solution in vitro
氟喹诺酮抗菌药是80年代陆续开发出来的第三代新型抗菌药，它的抗菌谱较广，具有较强的抗菌活性[1]；且具有明显的抗生素后效应(PAE)；较难形成耐药性[2]。近几年来，氟喹诺酮类抗菌药由一种治疗全身各部位疾病的药物迅速向眼科局部用药发展，用于外眼部细菌性感染，主要以滴眼液供临床使用[3～5]。氟喹诺酮类滴眼液的体外抗菌活性仅有个别研究报道[6，7]，本文就市售的氧氟沙星滴眼液、诺氟沙星滴眼液与自配的环丙沙星滴眼液、洛美沙星滴眼液及左氟沙星滴眼液对几种常见眼部感染细菌的体外抗菌活性作一比较，以期能为临床合理应用氟喹诺酮类滴眼液提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料
, 百拇医药
1.1.1 药品 氧氟沙星(OFLX)滴眼液(日本参天制药株式会社)；诺氟沙星(NFLX)滴眼液(芜湖市第三制药厂，批号 960830)；环丙沙星(CPLX)(西南合成制药厂，批号 930510，配成0.3%滴眼液)；左氟沙星(LVLX)(日本第一株式会社，配制成0.3%滴眼液)。
1.1.2 受试细菌 系我院检验科细菌室由临床标本分离并鉴定的189株菌，其中包括金黄色葡萄球菌54株，铜绿假单胞菌27株，大肠杆菌36株，淋球菌31株，肺炎克雷伯氏菌23株，链球菌属18株。实验中质控菌株为国家标准质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923，大肠杆菌ATCC25922。
1.1.3 培养基 MH培养基(中国药品生物制品检定所，批号951120)；MH肉汤(中国药品生物制品检定所，批号951227)；GBECⅢ型桂敏淋球菌培养基(广西桂林皮肤病研究所提供)；培养链球菌使用含5%脱纤维兔血的MH培养基。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 菌液的配制 将各试验菌接种于MH琼脂培养基上，经35℃培养24 h，取其菌落用MH肉汤制成约105 cfu/ml的菌悬液。
1.2.2 最小抑菌浓度(MIC)测定 淋球菌采用平皿二倍稀释法，其它细菌采用微量二倍稀释法测定MIC。于含有系列浓度抗菌药液100 μl的96微孔板中，加入菌液100 μl，37℃培养18 h，未见细菌生长的最低浓度为其最小抑菌浓度。
1.2.3 最低杀菌浓度(MBC)测定 采用肉汤对倍稀释平板活菌计数法，即先测出MIC，再依次将未见细菌生长的微孔中培养液10 μl接种于不含抗菌药物的MH琼脂平皿表面，37℃培养18 h，未见细菌生长的最低药物浓度为最低杀菌浓度。
2 结果
, 百拇医药 2.1 5氟喹诺酮类滴眼液对上述6种临床常见致病菌的MIC，见表1
表1 5种氟喹诺酮类滴眼液对6种试验菌的MIC(μg/ml) 细菌种类
药物
MIC50
MIC90
MICrange
金黄色葡萄球菌G+(54)
NFFLX
<0.5
32
, 百拇医药
<0.5～64
CPLX
<0.5
8
<0.5～64
LMLX
1
16
<0.5～64
LVLX
<0.5
8
<0.5～32
, 百拇医药
铜绿假单胞菌G-(27)
NFLX
<0.5
2
<0.5～1
CPLX
<0.5
<0.5
<0.5～64
LMLX
1
<0.5
<0.5～>128
, 百拇医药
OFLX
<0.5
1
<0.5～1
LVLX
<0.5
<0.5
<0.5～1
淋球菌G-(31)
NFLX
1
4
<0.25～32
, http://www.100md.com
CPLX
<0.5
2
<0.125～6
LMLX
2
8
<0.125～64
OFLX
<0.25
4
<0.125～16
LVLX
, 百拇医药
<0.25
2
<0.125～4
大肠杆菌G-(36)
NFLX
8
32
<0.5～128
CPLX
4
32
<0.5～64
LMLX
, http://www.100md.com
16
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<0.5～128
OFLX
8
32
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LVLX
4
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链球菌属G+(18)
NFLX
, 百拇医药
2
16
<0.5～16
CPLX
2
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<0.5～4
LMLX
1
16
<0.5～32
OFLX
1
, 百拇医药
8
1～8
LVLX
1
2
<0.5～4
肺炎克雷伯氏菌G-(23)
NFLX
<0.5
4
<0.5～32
CPLX
<0.5
, 百拇医药
1
<0.5～2
LMLX
<0.5
2
<0.5～4
OFLX
<0.5
2
<0.5～64
LVLX
<0.5
<0.5
, 百拇医药
<0.5～1
从表1可见：左氟沙星、环丙沙星滴眼液对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、淋球菌及链球菌的抗菌活性最强，其MIC90为<0.5～4 μg/ml，其次为氧氟沙星、洛美沙星及诺氟沙星滴眼液，其MIC90分别为<0.5～16 μg/ml、2～16 μg/ml。氧氟沙星滴眼液对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强，MIC90为4 μg/ml，其次为左氟沙星滴眼液和环丙沙星滴眼液，其MIC90均为8 μg/ml，再次为洛美沙星及诺氟沙星滴眼液，其MIC90分别为16 μg/ml及32 μg/ml。
2.2 5种氟诺酮类滴眼液对5种临床常见致病菌的MBC，见表2表2 5种氟诺酮类滴眼液的MBC(μg/ml) 细菌种类
NFLX
, 百拇医药
CPLX
LMLX
OFLX
LVLX
金黄色葡萄球菌(20)
128
64
128
16
8
铜绿假单胞菌(10)
8
4
, 百拇医药
16
4
4
大肠杆菌(10)
64
16
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16
链球菌属(10)
8
8
8
, 百拇医药 8
4
肺炎克雷伯氏菌(10)
8
2
4
4
1
从表2中可见，5种氟诺酮类滴眼液对5种致病菌均有一定的杀菌作用，其作用强弱不一，依次为LVLX、CPLX、OFLX、LMLX、NFLX。
3 讨论
氟喹诺酮类为80年代开发出来的抗菌谱更广、抗菌作用更强的新一代喹诺酮，结构上的特点是于喹啉环或萘啶环的6位上有氟，并在7位上都连有哌嗪基或吡咯啉基的衍生物。目前，氟喹诺酮类抗菌药已成为抗感染化疗中重要的抗菌药物之一，其作用机制是抑制细菌DNA旋转酶[6]，从而抑制DNA双螺旋结构的形成而发挥快速杀菌作用。在临床上可广泛应用于治疗呼吸道、肠道、胆道、泌尿道感染以及口腔科、皮肤科、妇产科、眼科、耳鼻喉科等各种感染性疾病。近几年来，氟喹诺酮类抗菌药特别在眼科局部应用中有新的发展，如国内生产的诺氟沙星滴眼液和眼膏，以及正在研制中的洛美沙星滴眼液，国外生产的氧氟沙星(泰利必妥)滴眼液和眼膏以及环丙沙星滴眼液等，临床上均用于治疗急性、亚急性细菌性结膜炎、细菌性角膜炎及细菌性角膜溃疡，疗效较好。
, 百拇医药
细菌性结膜炎、角膜炎是临床常见病、多发病，后者又是常见的致盲原因之一。张立贵等[9]对其进行了细菌学分析，指出结膜炎和角膜炎的病原体相似，主要为葡萄球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌等；万修华[10]调查表明，引起角膜溃疡的病原菌有铜绿假单胞菌、金葡菌、表葡菌、链球菌、淋球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌等；张文华[11]指出，60～70年代肺炎链球菌是细菌性角膜炎的主要致病菌，而近年来感染菌发生了变迁，革兰阴性杆菌明显增多，革兰阳性球菌中以葡萄球菌(金葡菌、表葡菌)为主，在化脓性角膜溃疡的致病菌中以铜绿假单胞菌居首位，其次是葡萄球菌，第三才是肺炎链球菌。我们根据上述情况，选择了金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、淋球菌、链球菌、肺炎克雷伯氏菌6种菌作为试验菌。实验结果显示：左氟沙星、环丙沙星滴眼液对革兰阳性菌及革兰阴性菌均有较强的抗菌作用，氧氟沙星次之，但氧氟沙星滴眼液对金黄色葡萄球菌的抗菌活性却最强。洛美沙星、诺氟沙星滴眼液的抗菌作用较前三者弱。
作者简介：罗 东，女，36岁，主管药师
, http://www.100md.com
参考文献
[1] Eliopouls G M. In vitro activity of Fluoroquinolones against Gram-positive bacteria[J]. Drugs,1995,49(Suppl 2):48-52.
[2] 张志平.喹诺酮类抗菌素研究的新进展[J].中国抗生素杂志，1995，20(2)：79-82.
[3] 罗兴中，方玉香，罗能明.氧氟沙星滴眼液治疗急性细菌性结膜炎的观察[J].中国实用眼科杂志，1995，13(7)：429-433.
[4] Leibowita H M. Antibacterial effectiveness of ciproflox-acin 0.3% ophthalmic solution in the treatment of bacterial conjunctivitis[J]. Am J Ophthalmol,1991,112(Supp14)：29-41.
, 百拇医药
[5] Miller J M. Vogel R. Cook T J, et al. Topically administered norfloxacin compared with topically adminstered gentamicin for the treatment of external ocular bacterial infections[J]. Am J Ophthalmol,1992,113(6):638-645.
[6] 张秀芝，宗 莉，童明庆，等.盐酸洛美沙星滴眼液的药效学研究[J].中国药学杂志，1997，17(5)：198-200.
[7] 张志萍，王 睿，陈 迁.盐酸环丙沙星滴眼液的制备及药效学研究[J].中国医院药学杂志，1995，15(3)：118-121.
[8] Shen L L. Kohlbrenner W E. Weigl D, et al. Mechanism of quinolone inhibition of DNA gyrase[J]. J Biol Chem,1989,264(5):2973-2981.
[9] 张立贵，仇宜解，吕秀文，等.细菌性结膜炎的病原菌[J].中国实用眼科杂志，1996，14(11)：671-674.
[10] 万修华，王栾弟，安玉亮.103例角膜溃疡的病因和病原及药物敏感试验的统计分析[J].中国实用眼科杂志，1997，15(7)：423-424.
[11] 张文华.感染性角膜疾病[J].中国眼科杂志，1995，31(2)：156-158.
收稿日期：1998-10-05；修回日期：1999-04-09, 百拇医药