几种方法筛检同种抗体的比较
作者：肖瑞卿 林武存 吴毅
单位：第三军医大学附属西南医院输血科 400038
关键词：
重庆医学000635
医学科学的高速发展，各种高科技的技术已应用到临床输血检 测当中，为了能够准确的检测出同种抗体，减少病人输血反应，达到安全输血的目的，我们 用几种方法对ABO、Rh、MN等血型系统的同种抗体，进行了抗体效价滴定比较，现将结果报 道如下：
1 方法
1.1 室温离心法。
1.2 木瓜酶法。
1.3 37℃盐水离心法。
, 百拇医药
1.4 抗人IgG法。
1.5 四川莱福有限公司提供美国强生公司(JOHNSO & JOHNSON)ORTHO BIOV UE柱状凝集系统。
2 血型试剂的来源
Rh抗-C、抗-c由天津血液中心提供，抗 -D、抗-E、抗-M、抗-N、抗-Mia由我科血型参比室自制，以上抗体分别用上述五种方法鉴定 。
表1 几种方法检测同种抗体效价的比较 方法
Rh抗体
MN抗体
Mia亚型
抗-C
, http://www.100md.com
抗-c
抗-D
抗-E
抗-M
抗-N
抗-Mia
效价
积分
效价
积分
效价
积分
效价
, http://www.100md.com 积分
效价
积分
效价
积分
效价
积分
室温离心
0
0
0
0
0
0
, 百拇医药
0
0
4
30
8
39
2
18
37℃
0
0
0
0
0
, http://www.100md.com
0
0
0
0
0
0
0
0
0
木瓜酶
32
59
16
54
, 百拇医药
32
56
16
49
0
0
0
0
0
0
抗-IgG
16
41
64
, 百拇医药
69
128
8
16
56
8
39
32
61
16
43
Biovue
64
71
, 百拇医药
64
75
128
102
32
65
32
65
16
54
32
63
3 O型人免疫性抗-A(B)，我们选择多个O型人的血清，用AB 型分泌型人的血型物质中和后，在室温对A、B型红细胞鉴定不发生凝集。再用抗人IgG及BIO VUE方法鉴定看有无不完全抗-A(B)抗体，有不完全抗体的，再做不完全抗体效价比较。结果 见表2。
, http://www.100md.com
用试管法同Biovue法试验结果比较见下列图片(1-2)比较。
图片1 木瓜酶法抗-c的试验结果
图片2 Biovue法抗-c的试验结果
表2 检测O型不完全抗-A(B)效价比较 方法
例数
中和后抗-A
中和后抗-B
效价
积分
, http://www.100md.com
效价
积分
抗人-IgG
1
16
43
32
55
Biovue
1
16
45
32
, 百拇医药 59
抗人-IgG
2
16
50
16
56
Biovue
2
32
59
16
54
抗人-IgG
, 百拇医药
3
16
50
32
55
Biovue
3
16
45
32
59
4 讨论
用五种方法鉴定血型抗体的比较，室温离心法可检测出完全抗体，也就是我们所说的IgM抗 体，37℃可检测出温暖型的IgM抗体，木瓜酶法可检测Rh血型IgG抗体，因为他配制、贮存均 比较方便，但对M、N血型抗体及Duffy系统的抗原有破坏作用，对kell、Diego血型系统的抗 体不能检出(尽管后两种血型抗体罕见，尤其是Diego a+在汉族人中少见)。抗球蛋白试验法 是最有权威的检测方法，但是这种方法不算配血孵育时间(45～60min)单是前后洗涤也需要1 5～20min，尤其大医院配血量大，所需标本多，用抗球蛋白法做为常规配血，一是时间问题 ，二是容易出差错，因此用抗球蛋白法作为常规配血是不现实的，ortho Biovue采用柱凝集 技术，利用抗原抗体凝集原理，将被检血清与4%红细胞加入微柱上端反应腔内37℃孵育10分 钟，再直接放置离心机进行梯度离心5min，通过递加离心强度，将红细胞向下挤压，达到微 玻璃珠时，由于玻璃之间的间隙仅为7～8微米，可起到分离过滤作用，抗原抗体反应的红细 胞不能通过，而全部凝集留在玻璃珠的上端，为阳性反应，而无凝集的红细胞顺利通过玻璃 珠的孔隙到达底部，为阴性反应。该方法简单方便、判断结果准确、清楚、试验结果稳定、 有利于质控、操作规程标准化、可同时做大量标本、可排出某些原因引起的假凝集。结果可 保存、便于备查。
从我们试验得分中，Biovue同抗人球蛋白效价基本一致，只有抗-N抗体，抗人球效价与积分 高于Biovue法，其他积分均低于Biovue法，对O型人中的免疫性抗-A(B)用抗球蛋白法，5分 钟后效价降低一个滴度，而Biovue稳定，另外所需血清少。不足之处：①所需的红细胞不 能被纤维蛋白包裹，如有包裹易出现假阳性，因此在吸红细胞混悬液时，应摇匀避开凝块。 ②价格偏贵。
总之通过对配血与检测不完全抗体的实践中，我们认为Biovue柱状凝集法，不管是检测完全 抗体还是不完全抗体都是一种较理想的试验方法。, 百拇医药
单位：第三军医大学附属西南医院输血科 400038
关键词：
重庆医学000635
医学科学的高速发展，各种高科技的技术已应用到临床输血检 测当中，为了能够准确的检测出同种抗体，减少病人输血反应，达到安全输血的目的，我们 用几种方法对ABO、Rh、MN等血型系统的同种抗体，进行了抗体效价滴定比较，现将结果报 道如下：
1 方法
1.1 室温离心法。
1.2 木瓜酶法。
1.3 37℃盐水离心法。
, 百拇医药
1.4 抗人IgG法。
1.5 四川莱福有限公司提供美国强生公司(JOHNSO & JOHNSON)ORTHO BIOV UE柱状凝集系统。
2 血型试剂的来源
Rh抗-C、抗-c由天津血液中心提供，抗 -D、抗-E、抗-M、抗-N、抗-Mia由我科血型参比室自制，以上抗体分别用上述五种方法鉴定 。
表1 几种方法检测同种抗体效价的比较 方法
Rh抗体
MN抗体
Mia亚型
抗-C
, http://www.100md.com
抗-c
抗-D
抗-E
抗-M
抗-N
抗-Mia
效价
积分
效价
积分
效价
积分
效价
, http://www.100md.com 积分
效价
积分
效价
积分
效价
积分
室温离心
0
0
0
0
0
0
, 百拇医药
0
0
4
30
8
39
2
18
37℃
0
0
0
0
0
, http://www.100md.com
0
0
0
0
0
0
0
0
0
木瓜酶
32
59
16
54
, 百拇医药
32
56
16
49
0
0
0
0
0
0
抗-IgG
16
41
64
, 百拇医药
69
128
8
16
56
8
39
32
61
16
43
Biovue
64
71
, 百拇医药
64
75
128
102
32
65
32
65
16
54
32
63
3 O型人免疫性抗-A(B)，我们选择多个O型人的血清，用AB 型分泌型人的血型物质中和后，在室温对A、B型红细胞鉴定不发生凝集。再用抗人IgG及BIO VUE方法鉴定看有无不完全抗-A(B)抗体，有不完全抗体的，再做不完全抗体效价比较。结果 见表2。
, http://www.100md.com
用试管法同Biovue法试验结果比较见下列图片(1-2)比较。
图片1 木瓜酶法抗-c的试验结果
图片2 Biovue法抗-c的试验结果
表2 检测O型不完全抗-A(B)效价比较 方法
例数
中和后抗-A
中和后抗-B
效价
积分
, http://www.100md.com
效价
积分
抗人-IgG
1
16
43
32
55
Biovue
1
16
45
32
, 百拇医药 59
抗人-IgG
2
16
50
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56
Biovue
2
32
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16
54
抗人-IgG
, 百拇医药
3
16
50
32
55
Biovue
3
16
45
32
59
4 讨论
用五种方法鉴定血型抗体的比较，室温离心法可检测出完全抗体，也就是我们所说的IgM抗 体，37℃可检测出温暖型的IgM抗体，木瓜酶法可检测Rh血型IgG抗体，因为他配制、贮存均 比较方便，但对M、N血型抗体及Duffy系统的抗原有破坏作用，对kell、Diego血型系统的抗 体不能检出(尽管后两种血型抗体罕见，尤其是Diego a+在汉族人中少见)。抗球蛋白试验法 是最有权威的检测方法，但是这种方法不算配血孵育时间(45～60min)单是前后洗涤也需要1 5～20min，尤其大医院配血量大，所需标本多，用抗球蛋白法做为常规配血，一是时间问题 ，二是容易出差错，因此用抗球蛋白法作为常规配血是不现实的，ortho Biovue采用柱凝集 技术，利用抗原抗体凝集原理，将被检血清与4%红细胞加入微柱上端反应腔内37℃孵育10分 钟，再直接放置离心机进行梯度离心5min，通过递加离心强度，将红细胞向下挤压，达到微 玻璃珠时，由于玻璃之间的间隙仅为7～8微米，可起到分离过滤作用，抗原抗体反应的红细 胞不能通过，而全部凝集留在玻璃珠的上端，为阳性反应，而无凝集的红细胞顺利通过玻璃 珠的孔隙到达底部，为阴性反应。该方法简单方便、判断结果准确、清楚、试验结果稳定、 有利于质控、操作规程标准化、可同时做大量标本、可排出某些原因引起的假凝集。结果可 保存、便于备查。
从我们试验得分中，Biovue同抗人球蛋白效价基本一致，只有抗-N抗体，抗人球效价与积分 高于Biovue法，其他积分均低于Biovue法，对O型人中的免疫性抗-A(B)用抗球蛋白法，5分 钟后效价降低一个滴度，而Biovue稳定，另外所需血清少。不足之处：①所需的红细胞不 能被纤维蛋白包裹，如有包裹易出现假阳性，因此在吸红细胞混悬液时，应摇匀避开凝块。 ②价格偏贵。
总之通过对配血与检测不完全抗体的实践中，我们认为Biovue柱状凝集法，不管是检测完全 抗体还是不完全抗体都是一种较理想的试验方法。, 百拇医药