哮喘患者肺泡巨噬细胞释放粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、细胞间黏附分子-1及转化生长因子-β1的研究
作者：李玉 侯怀水 吴大玮 王淑贞 许仁和
单位：250012 济南，山东医科大学附属医院呼吸科
关键词：
中华内科杂志990916 我们用ELISA法测定支气管哮喘患者肺泡巨噬细胞(AM)体外培养过程中释放的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)以及药物对其的影响，探讨AM在哮喘发病中的作用。
一、 对象与方法
1.对象：哮喘组：哮喘轻中度发作期患者13例，男8例，女5例，年龄21～52岁。就诊前3天内未用糖皮质激素，48小时内未用茶碱类药物，12小时内未用β2受体兴奋剂。对照组10例，男7例，女3例，年龄21～57岁。CT或X线胸片正常，肺通气功能正常。两组均无吸烟史。
, 百拇医药
2.方法：空腹取静脉血，保留血清及血浆。经患者本人同意，按常规行纤维支气管镜检查，过程顺利，经支气管肺泡灌洗获得AM，调整AM至1×109/L，分为5孔，对照孔、低浓度氨茶碱(5 mg/L)孔、治疗浓度氨茶碱(15 mg/L)孔、抗原(室内尘土、螨、夏秋花粉1∶104)孔和氟美松(1 mg/L)孔。每孔1 ml，培养2小时使AM贴壁，吸出培养液，重新加入无血清1640培养液0.9 ml及药液0.1 ml。再于37℃，5% CO2，100%湿度下培养6小时，取上清液保存，对照组只做对照孔。采用ELISA法测定血清或血浆上清液中GM-CSF、TGF-β1及ICAM-1。
3.统计学方法：采用成组间t检验、配伍组方差分析及q检验。
二、 结果
1.两组血GM-CSF、ICAM-1和TGF-β1水平见表1。
, 百拇医药
表1 两组血GM-CSF、ICAM-1和TGF-β1的测定结果(
±s) 组别
例数
GM-CSF
(ng/L)
ICAM-1
(×103 U/L)
TGF-β1
(μg/L)
哮喘组
13
, http://www.100md.com 8.12±2.94
23.17±8.39
66.70±23.82
对照组
10
6.54±0.83
14.17±7.98
45.34±22.83
t值
2.389
2.606
2.03
, 百拇医药
P值
<0.05
<0.02
>0.05
注：GM-CSF：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；ICAM-1：细胞间黏附分子-1；TGF-β1：转化生长因子-β1 2.AM释放GM-CSF、ICAM-1和TGF-β1水平见表2。
表2 肺泡巨噬细胞释放GM-CSF、ICAM-1及TGF-β1的结果(±s) 组别
例数
GM-CSF
(ng/L)
, 百拇医药
ICAM-1
(×103 U/L)
TGF-β1
(μg/L)
哮喘组
13
9.059±1.770
0.673±0.138
0.688±1.198
对照组
10
7.062±1.596
, http://www.100md.com
0.510±0.398
0.220±0.193
t值
2.797
1.370
1.216
P值
<0.02
>0.10
>0.20
注：GM-CSF：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；ICAM-1：细胞间黏附分子-1；TGF-β1：转化生长因子-β1
, http://www.100md.com
3.哮喘组加入氨茶碱和氟美松后均明显抑制AM释放GM-CSF，对AM释放TGF-β1及ICAM-1无影响。抗原对AM释放上述三种因子无影响。
讨论 支气管哮喘是以嗜酸粒细胞浸润为主的气道炎症，GM-CSF 可延长嗜酸粒细胞的寿命并有直接激活作用，ICAM-1则引起白细胞趋化、黏附，两者均与气道炎症形成有关。本组资料显示：发作期哮喘患者血GM-CSF及ICAM-1均明显高于对照组，两者从不同途径参与气道炎症形成。AM是气道内主要细胞成份，本组资料显示：发作期哮喘患者AM释放GM-CSF明显高于对照组，说明在哮喘患者AM可释放GM-CSF激活嗜酸粒细胞加重气道炎症。TGF-β1主要促进平滑肌细胞增生、肥大及细胞外基质沉积，与哮喘患者气道重塑有关。Vignola等[1]发现：哮喘患者气道黏膜上皮及黏膜下层TGF-β1 mRNA表达较健康对照显著增多，且与基底膜厚度及成纤维细胞数目显著相关，提示TGF-β1参与气道重塑。本组哮喘患者AM仅释放极少量的TGF-β1，与对照组无差异。Chanez等[2]用免疫组化法发现哮喘患者ICAM-1阳性的AM明显高于对照组，本组哮喘患者AM仅释放极少量的ICAM-1，与对照组无差异。以上结果表明，哮喘患者AM不是体内TGF-β1及ICAM-1的主要来源。Oddera等[3]发现：糖皮质激素可明显抑制外周血单个核细胞释放GM-CSF。本组资料提示：氟美松可明显抑制哮喘患者AM释放GM-CSF，这可能是吸入类固醇治疗机制之一。近已证明，氨茶碱为5 mg/L及15 mg/L时均具有抗炎作用。本组资料提示：两种浓度的氨茶碱均明显抑制AM释放GM-CSF，与氟美松相似，进一步支持氨茶碱具有抗炎的作用。
, http://www.100md.com
参考文献
[1] Vignola AM, Chanez P, Chiappara C, et al. Transforming growth factor-beta expression in mucosal biopsies in asthma and chronic bronchitis. Am J Respir Crit Care Med, 1997, 156(2 Pt 1):591-599.
[2] Chanez P, Vignola AM, Lacoste P, et al. Increased expression of adhesion molecules (ICAM-1 and LFA-1)on alveolar macrophages from asthmatic patients. Allergy, 1993,48:576-580.
[3] Oddera S, Silvestri M, Sacco O, et al. Evaluation of the inhibitory effects of budesonide on the mitogen-induced or the allergen-induced activation of blood mononuclear cells isolated from asthmatic patients. Ann Allergy Asthma Immunol, 1995,75:33-40.
(收稿：1998-10-20 修回：1999-06-05), http://www.100md.com
单位：250012 济南，山东医科大学附属医院呼吸科
关键词：
中华内科杂志990916 我们用ELISA法测定支气管哮喘患者肺泡巨噬细胞(AM)体外培养过程中释放的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)以及药物对其的影响，探讨AM在哮喘发病中的作用。
一、 对象与方法
1.对象：哮喘组：哮喘轻中度发作期患者13例，男8例，女5例，年龄21～52岁。就诊前3天内未用糖皮质激素，48小时内未用茶碱类药物，12小时内未用β2受体兴奋剂。对照组10例，男7例，女3例，年龄21～57岁。CT或X线胸片正常，肺通气功能正常。两组均无吸烟史。
, 百拇医药
2.方法：空腹取静脉血，保留血清及血浆。经患者本人同意，按常规行纤维支气管镜检查，过程顺利，经支气管肺泡灌洗获得AM，调整AM至1×109/L，分为5孔，对照孔、低浓度氨茶碱(5 mg/L)孔、治疗浓度氨茶碱(15 mg/L)孔、抗原(室内尘土、螨、夏秋花粉1∶104)孔和氟美松(1 mg/L)孔。每孔1 ml，培养2小时使AM贴壁，吸出培养液，重新加入无血清1640培养液0.9 ml及药液0.1 ml。再于37℃，5% CO2，100%湿度下培养6小时，取上清液保存，对照组只做对照孔。采用ELISA法测定血清或血浆上清液中GM-CSF、TGF-β1及ICAM-1。
3.统计学方法：采用成组间t检验、配伍组方差分析及q检验。
二、 结果
1.两组血GM-CSF、ICAM-1和TGF-β1水平见表1。
, 百拇医药
表1 两组血GM-CSF、ICAM-1和TGF-β1的测定结果(
±s) 组别例数
GM-CSF
(ng/L)
ICAM-1
(×103 U/L)
TGF-β1
(μg/L)
哮喘组
13
, http://www.100md.com 8.12±2.94
23.17±8.39
66.70±23.82
对照组
10
6.54±0.83
14.17±7.98
45.34±22.83
t值
2.389
2.606
2.03
, 百拇医药
P值
<0.05
<0.02
>0.05
注：GM-CSF：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；ICAM-1：细胞间黏附分子-1；TGF-β1：转化生长因子-β1 2.AM释放GM-CSF、ICAM-1和TGF-β1水平见表2。
表2 肺泡巨噬细胞释放GM-CSF、ICAM-1及TGF-β1的结果(
±s) 组别例数
GM-CSF
(ng/L)
, 百拇医药
ICAM-1
(×103 U/L)
TGF-β1
(μg/L)
哮喘组
13
9.059±1.770
0.673±0.138
0.688±1.198
对照组
10
7.062±1.596
, http://www.100md.com
0.510±0.398
0.220±0.193
t值
2.797
1.370
1.216
P值
<0.02
>0.10
>0.20
注：GM-CSF：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；ICAM-1：细胞间黏附分子-1；TGF-β1：转化生长因子-β1
, http://www.100md.com
3.哮喘组加入氨茶碱和氟美松后均明显抑制AM释放GM-CSF，对AM释放TGF-β1及ICAM-1无影响。抗原对AM释放上述三种因子无影响。
讨论 支气管哮喘是以嗜酸粒细胞浸润为主的气道炎症，GM-CSF 可延长嗜酸粒细胞的寿命并有直接激活作用，ICAM-1则引起白细胞趋化、黏附，两者均与气道炎症形成有关。本组资料显示：发作期哮喘患者血GM-CSF及ICAM-1均明显高于对照组，两者从不同途径参与气道炎症形成。AM是气道内主要细胞成份，本组资料显示：发作期哮喘患者AM释放GM-CSF明显高于对照组，说明在哮喘患者AM可释放GM-CSF激活嗜酸粒细胞加重气道炎症。TGF-β1主要促进平滑肌细胞增生、肥大及细胞外基质沉积，与哮喘患者气道重塑有关。Vignola等[1]发现：哮喘患者气道黏膜上皮及黏膜下层TGF-β1 mRNA表达较健康对照显著增多，且与基底膜厚度及成纤维细胞数目显著相关，提示TGF-β1参与气道重塑。本组哮喘患者AM仅释放极少量的TGF-β1，与对照组无差异。Chanez等[2]用免疫组化法发现哮喘患者ICAM-1阳性的AM明显高于对照组，本组哮喘患者AM仅释放极少量的ICAM-1，与对照组无差异。以上结果表明，哮喘患者AM不是体内TGF-β1及ICAM-1的主要来源。Oddera等[3]发现：糖皮质激素可明显抑制外周血单个核细胞释放GM-CSF。本组资料提示：氟美松可明显抑制哮喘患者AM释放GM-CSF，这可能是吸入类固醇治疗机制之一。近已证明，氨茶碱为5 mg/L及15 mg/L时均具有抗炎作用。本组资料提示：两种浓度的氨茶碱均明显抑制AM释放GM-CSF，与氟美松相似，进一步支持氨茶碱具有抗炎的作用。
, http://www.100md.com
参考文献
[1] Vignola AM, Chanez P, Chiappara C, et al. Transforming growth factor-beta expression in mucosal biopsies in asthma and chronic bronchitis. Am J Respir Crit Care Med, 1997, 156(2 Pt 1):591-599.
[2] Chanez P, Vignola AM, Lacoste P, et al. Increased expression of adhesion molecules (ICAM-1 and LFA-1)on alveolar macrophages from asthmatic patients. Allergy, 1993,48:576-580.
[3] Oddera S, Silvestri M, Sacco O, et al. Evaluation of the inhibitory effects of budesonide on the mitogen-induced or the allergen-induced activation of blood mononuclear cells isolated from asthmatic patients. Ann Allergy Asthma Immunol, 1995,75:33-40.
(收稿：1998-10-20 修回：1999-06-05), http://www.100md.com