五项血清学指标在诊断肝纤维化中的应用和筛选
作者：罗瑞虹 杨绍基 谢俊强 赵志新 何有成 姚集鲁
单位：510630 广州，中山医科大学附属第三医院传染病科
关键词：
中华内科杂志000623 我们检测了116例病毒性肝炎患者的血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层黏蛋白(LN)和转化生长因子β1(TGFβ1)水平，并与其中87例患者的肝组织病理作对照，以比较这5项指标对肝纤维化的诊断价值。
一、对象与方法
1.对象：116例病毒性肝炎患者是1998年5～12月在我科的住院病人，男85例，女31例，平均年龄(38±12)岁。诊断参照第五届全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。正常对照(NC)20例，是1998年12月的健康献血员，男14例，女6例，平均年龄(31±9)岁。
, 百拇医药
2.试剂与方法：血清HA、CⅣ、LN、PCⅢ均采用放射免疫(RIA)法检测， 血清TGFβ1采用酶免疫(EIA)法检测。研究组中临床诊断为慢性肝炎的患者中87例行肝组织活检，参照上述诊断标准进行病理诊断。
3.数据分析中的分组方法：(1)S2期以上与S2期以下肝纤维化组：以肝组织纤维化程度S2～S4及临床确诊为肝炎肝硬化的病例为S2期以上肝纤维化组，共86例；以正常对照者、肝组织纤维化程度S0、S1的病例为S2期以下肝纤维化组，共50例。(2)肝硬化组与非肝硬化组：以肝组织纤维化程度S4及临床确诊为肝炎肝硬化的病例为肝硬化组，共48例；以正常对照、肝组织纤维化程度S0～S3的病例为非肝硬化组，共88例。(3)肝纤维化程度的分组：根据病理诊断将肝组织纤维化程度分为S0～S4 5期，同时将20例正常对照拟定为肝组织纤维化程度S0。
, 百拇医药
4.统计学处理：两组计量资料之间的相关性采用等级相关分析。血清学指标的诊断评价采用ROC曲线评价方法。血清学指标对肝纤维化程度的估计及筛选采用Bayes逐步判别分析及χ2检验。
二、结果
1. 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1与肝组织纤维化程度、肝组织炎症活动度的关系：见表1,2。
表1 肝组织纤维化各期血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1的检测结果及两者的相关性 分组
例数
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
CⅣ(μg/L)
, 百拇医药
LN(μg/L)
TGFβ1(μg/L)
±s
M±s
M±s
M±s±s
NC
, http://www.100md.com 20
57±28
57
90±36
87
55±23
59
81±29
41±19
S0
3
65±15
65
, 百拇医药
90±61
60
60±20
80
78±18
42±15
S1
27
97±52
80
91±46
80
69±56
, http://www.100md.com
50
81±24
65±21
S2
23
188±185
110
160±122
120
95±106
75
112±41
77±25
, http://www.100md.com
S3
15
217±147
180
208±138
180
110±103
70
120±42
82±21
S4
19
, http://www.100md.com 403±242
360
216±134
180
161±132
120
125±49
117±35
相关性
r=0.584, P=0.000
r=0.454, P=0.000
r=0.319,P=0.003
, 百拇医药
r=0.414,P=0.000
r=0.612,P=0.000
表2 肝组织炎症活动度各级血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1的检测结果及两者的相关性 分组
例数
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
CⅣ(μg/L)
LN(μg/L)
TGFβ1(μg/L)±s
, http://www.100md.com
M±s
M±s
M±s±s
NC
20
57±28
57
90±36
, http://www.100md.com
87
55±23
59
81±29
41±19
G0
4
73±15
80
100±42
105
58±33
55
, 百拇医药
96±6
54±17
G1
13
214±268
95
151±128
120
95±66
80
101±27
88±33
G2
, 百拇医药
33
150±160
100
141±114
100
84±97
50
95±38
76±31
G3
27
247±189
180
, http://www.100md.com
149±109
120
101±88
70
102±45
77±28
G4
10
346±179
280
219±157
160
220±176
, http://www.100md.com
147
137±50
97±49
相关性
r=0.393, P=0.000
r=0.144, P=0.183
r=0.190, P=0.078
r=0.117,P=0.370
r=0.147,P=0.185
2. 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1判断S2期以上肝纤维化及诊断肝硬化的ROC曲线下面积(AUC)：见表3,4。表3 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1判断S2期
, 百拇医药
以上肝纤维化的AUC及其s
HA
PCⅢ
CⅣ
LN
TGFβ1
AUC
0.849
0.702
0.721
0.819
0.836
, http://www.100md.com
0.0316
0.0447
0.0487
0.0528
0.0283
注：血清HA、LN、TGFβ1的AUC均明显大于血清PCⅢ、CⅣ者(P<0.05)表4 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1
诊断肝硬化的AUC及其s
HA
PCⅢ
CⅣ
LN
, 百拇医药
TGFβ1
AUC
0.904
0.784
0.815
0.805
0.828
0.0291
0.0433
0.0401
0.0464
, http://www.100md.com
0.0351
注：血清HA的AUC明显大于血清PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1者(P<0.05) 3.血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1联合应用对肝纤维化程度的估计： 根据血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1在肝纤维化程度分组的检测结果(表1)，作Bayes逐步判别分析：血清HA、TGFβ1被选入；根据χ2检验，判别效果中除S1与S3、S2与S3 的差异无显著性(P>0.05)外，其余各期的差异有显著性(P<0.05)；正确预测率为43.93%。若将S1、S2、S3不作判别，作Bayes逐步判别分析：血清HA、TGFβ1被选入；判别效果中判别各期的差异有显著性(P<0.001)；正确预测率为72.90%。
, 百拇医药
讨论 国内外已有报道，血清或尿TGFβ1水平能较好地反映肝纤维化程度[1，2]； 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平改变能反映肝内细胞外基质(ECM)代谢异常的情况[3，4]。本研究结果显示，肝组织纤维化程度、炎症活动度与5项指标的相关性提示血清HA、PCⅢ、LN、TGFβ1能在一定程度上反映肝纤维化的进展，血清CⅣ反映肝纤维化的情况则相对较差，5项指标均较难反映肝组织炎症程度。用单项指标判断慢性肝炎患者是否存在S2期以上肝纤维化和诊断肝硬化，前者以血清HA、LN、TGFβ1的判断效果较好，后者以血清HA的诊断价值最大。对于估计肝纤维化程度，5项指标中只需同时检测血清HA与TGFβ1，但只能估计慢性肝炎患者是“无肝纤维化”还是“处于肝纤维化阶段”或已经是“肝硬化”，因而不能取代肝组织病理活检。
参考文献
, 百拇医药 1，Tsai JF, Jeng JE, Chuang LY, et al. Urinary transforming growth factor beta 1 levels in hepatitis C virus-related chronic liver disease: correlation between high levels and severity of disease. Hepatology,1997，25:1141-1146.
2，张立煌，方海林，裘云庆，等. 病毒性肝炎患者血清转化生长因子-β1活性及其与肝纤维化的关系. 中华传染病杂志，1997, 15：82-84.
3，Guechot J, Laudat A, Loria A, et al. Diagnostic accuracy of hyaluronan and type III procollagen amino-terminal peptide serum assays as markers of liver fibrosis in chronic viral hepatitis C evaluated by ROC curve analysis. Clin Chem, 1996, 42: 558-563.
4，彭安国，陈东风，冷恩仁,等. 透明质酸、层粘蛋白对肝纤维化诊断价值的研究. 中国实用内科杂志，1996，16：495-496.
(收稿日期：1999-09-02), 百拇医药
单位：510630 广州，中山医科大学附属第三医院传染病科
关键词：
中华内科杂志000623 我们检测了116例病毒性肝炎患者的血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层黏蛋白(LN)和转化生长因子β1(TGFβ1)水平，并与其中87例患者的肝组织病理作对照，以比较这5项指标对肝纤维化的诊断价值。
一、对象与方法
1.对象：116例病毒性肝炎患者是1998年5～12月在我科的住院病人，男85例，女31例，平均年龄(38±12)岁。诊断参照第五届全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。正常对照(NC)20例，是1998年12月的健康献血员，男14例，女6例，平均年龄(31±9)岁。
, 百拇医药
2.试剂与方法：血清HA、CⅣ、LN、PCⅢ均采用放射免疫(RIA)法检测， 血清TGFβ1采用酶免疫(EIA)法检测。研究组中临床诊断为慢性肝炎的患者中87例行肝组织活检，参照上述诊断标准进行病理诊断。
3.数据分析中的分组方法：(1)S2期以上与S2期以下肝纤维化组：以肝组织纤维化程度S2～S4及临床确诊为肝炎肝硬化的病例为S2期以上肝纤维化组，共86例；以正常对照者、肝组织纤维化程度S0、S1的病例为S2期以下肝纤维化组，共50例。(2)肝硬化组与非肝硬化组：以肝组织纤维化程度S4及临床确诊为肝炎肝硬化的病例为肝硬化组，共48例；以正常对照、肝组织纤维化程度S0～S3的病例为非肝硬化组，共88例。(3)肝纤维化程度的分组：根据病理诊断将肝组织纤维化程度分为S0～S4 5期，同时将20例正常对照拟定为肝组织纤维化程度S0。
, 百拇医药
4.统计学处理：两组计量资料之间的相关性采用等级相关分析。血清学指标的诊断评价采用ROC曲线评价方法。血清学指标对肝纤维化程度的估计及筛选采用Bayes逐步判别分析及χ2检验。
二、结果
1. 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1与肝组织纤维化程度、肝组织炎症活动度的关系：见表1,2。
表1 肝组织纤维化各期血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1的检测结果及两者的相关性 分组
例数
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
CⅣ(μg/L)
, 百拇医药
LN(μg/L)
TGFβ1(μg/L)
±sM
±sM
±sM
±s±sNC
, http://www.100md.com 20
57±28
57
90±36
87
55±23
59
81±29
41±19
S0
3
65±15
65
, 百拇医药
90±61
60
60±20
80
78±18
42±15
S1
27
97±52
80
91±46
80
69±56
, http://www.100md.com
50
81±24
65±21
S2
23
188±185
110
160±122
120
95±106
75
112±41
77±25
, http://www.100md.com
S3
15
217±147
180
208±138
180
110±103
70
120±42
82±21
S4
19
, http://www.100md.com 403±242
360
216±134
180
161±132
120
125±49
117±35
相关性
r=0.584, P=0.000
r=0.454, P=0.000
r=0.319,P=0.003
, 百拇医药
r=0.414,P=0.000
r=0.612,P=0.000
表2 肝组织炎症活动度各级血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1的检测结果及两者的相关性 分组
例数
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
CⅣ(μg/L)
LN(μg/L)
TGFβ1(μg/L)
±s, http://www.100md.com
M
±sM
±sM
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57±28
57
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, http://www.100md.com
87
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41±19
G0
4
73±15
80
100±42
105
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55
, 百拇医药
96±6
54±17
G1
13
214±268
95
151±128
120
95±66
80
101±27
88±33
G2
, 百拇医药
33
150±160
100
141±114
100
84±97
50
95±38
76±31
G3
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, http://www.100md.com
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10
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, http://www.100md.com
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相关性
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r=0.147,P=0.185
2. 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1判断S2期以上肝纤维化及诊断肝硬化的ROC曲线下面积(AUC)：见表3,4。表3 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1判断S2期
, 百拇医药
以上肝纤维化的AUC及其s
HA
PCⅢ
CⅣ
LN
TGFβ1
AUC
0.849
0.702
0.721
0.819
0.836
, http://www.100md.com
0.0316
0.0447
0.0487
0.0528
0.0283
注：血清HA、LN、TGFβ1的AUC均明显大于血清PCⅢ、CⅣ者(P<0.05)表4 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1
诊断肝硬化的AUC及其s
HA
PCⅢ
CⅣ
LN
, 百拇医药
TGFβ1
AUC
0.904
0.784
0.815
0.805
0.828
0.0291
0.0433
0.0401
0.0464
, http://www.100md.com
0.0351
注：血清HA的AUC明显大于血清PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1者(P<0.05) 3.血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1联合应用对肝纤维化程度的估计： 根据血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1在肝纤维化程度分组的检测结果(表1)，作Bayes逐步判别分析：血清HA、TGFβ1被选入；根据χ2检验，判别效果中除S1与S3、S2与S3 的差异无显著性(P>0.05)外，其余各期的差异有显著性(P<0.05)；正确预测率为43.93%。若将S1、S2、S3不作判别，作Bayes逐步判别分析：血清HA、TGFβ1被选入；判别效果中判别各期的差异有显著性(P<0.001)；正确预测率为72.90%。
, 百拇医药
讨论 国内外已有报道，血清或尿TGFβ1水平能较好地反映肝纤维化程度[1，2]； 血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平改变能反映肝内细胞外基质(ECM)代谢异常的情况[3，4]。本研究结果显示，肝组织纤维化程度、炎症活动度与5项指标的相关性提示血清HA、PCⅢ、LN、TGFβ1能在一定程度上反映肝纤维化的进展，血清CⅣ反映肝纤维化的情况则相对较差，5项指标均较难反映肝组织炎症程度。用单项指标判断慢性肝炎患者是否存在S2期以上肝纤维化和诊断肝硬化，前者以血清HA、LN、TGFβ1的判断效果较好，后者以血清HA的诊断价值最大。对于估计肝纤维化程度，5项指标中只需同时检测血清HA与TGFβ1，但只能估计慢性肝炎患者是“无肝纤维化”还是“处于肝纤维化阶段”或已经是“肝硬化”，因而不能取代肝组织病理活检。
参考文献
, 百拇医药 1，Tsai JF, Jeng JE, Chuang LY, et al. Urinary transforming growth factor beta 1 levels in hepatitis C virus-related chronic liver disease: correlation between high levels and severity of disease. Hepatology,1997，25:1141-1146.
2，张立煌，方海林，裘云庆，等. 病毒性肝炎患者血清转化生长因子-β1活性及其与肝纤维化的关系. 中华传染病杂志，1997, 15：82-84.
3，Guechot J, Laudat A, Loria A, et al. Diagnostic accuracy of hyaluronan and type III procollagen amino-terminal peptide serum assays as markers of liver fibrosis in chronic viral hepatitis C evaluated by ROC curve analysis. Clin Chem, 1996, 42: 558-563.
4，彭安国，陈东风，冷恩仁,等. 透明质酸、层粘蛋白对肝纤维化诊断价值的研究. 中国实用内科杂志，1996，16：495-496.
(收稿日期：1999-09-02), 百拇医药