冠部牙本质深龋细菌学分析
作者：顾淑萍 刘 正 宋培智
单位：上海第二医科大学第九人民医院口腔内科 200011
关键词：龋齿；乳杆菌属；变异链球菌
实用口腔医学杂志990401 〔摘要〕 目的：探明牙本质深龋中的主要相关菌。方法：利用色谱法、裂解法等对龋坏牙本质分三层作细菌分离、鉴定、分析。结果：牙本质龋中的主要相关菌为乳杆菌和变链菌，龋内层牙本质中的细菌含量较外层少。结论：乳杆菌促进牙本质龋的发展，在牙本质龋进展中脱矿在先，细菌入侵在后。
An analysis of bacteriology on dentin caries of crown
Gu Shuping, Liu Zheng, Song Peizhi. Department of Oral Medicine of No.9 People's Hospital, Shanghai Second Medical University,Shanghai 200011
, 百拇医药
〔Abstract〕Objective: To determine the cariogenic bacteria in deep dentinal caries.Method:The bacteria in outer and inner layer of carious dentin and pulp were isolated,identificated and analysed with chromatography and pyrolysis. Result:Lactobacillus and streptococcus mutans were found to be the main bacteria in the carious dentin.There were more bacteria in the outer layer than in the inner layer. Conclusion:Lactobacillus may promote the progress of dentinal caries,during the progression of dentin demineralization,then invasion of bacteria follows.
, 百拇医药
Key words Dental caries; Lactobacillus; Streptococcus mutans
牙本质深龋为临床常见牙体疾患，其细菌学研究对临床适宜地处理深龋、保存活髓具有重要参考价值，而国内这方面的报道较少见。本实验在对深龋细菌分离、鉴定的基础上进行了细菌学分析，为临床治疗工作提供细菌学参考资料。
1 材料和方法
1.1 牙齿 新拔除的冠部牙本质龋坏牙20个，13个牙髓穿露，7个牙髓未穿露(其中4个活髓牙，3个死髓牙)。
1.2 细菌检验 用龋蚀检知液(含5 g/L食用大红色素的丙二醇)染色龋部5 min后，将牙齿沿长轴劈开，分三层取样，即染色层龋坏牙本质、染色与未染色临界处牙本质、牙髓。将样本放入已称重的小试管，再称重得样本湿重，按常规法分离、培养龋相关菌〔1〕。
, 百拇医药
1.3 鉴定 根据Bergey细菌手册中的标准鉴定细菌〔2〕。
2 结 果
所有20个牙齿的染色层龋坏牙本质均检出细菌，18个牙在临界层检出细菌，2个龋坏未达牙髓者在临界层未检出细菌，17个牙在牙髓中检出细菌，3个龋未达牙髓者在牙髓中未检出细菌。各层中检出的主要细菌为微需氧菌，厌氧菌较少。染色层20个、临界层18个、牙髓层17个样本检出的细菌的几何均数比较见表1，各菌种占可培养菌百分比、各菌种的检出率见表2。经统计分析，几何均数：染色层的总菌、总链球菌、变链菌、乳杆菌、血链菌CFU(菌落计数单位，Counting flora unite)显著高于临界层和牙髓(P<0.05)，临界层与牙髓间无显著差异(P>0.05)，其它各种细菌的CFU在3层间无显著差异(P>0.005)；占可培养菌百分比：每层中变链菌、乳杆菌显著高于其它各菌种(P<0.01)，临界层中乳杆菌显著高于变链菌(P<0.05)，各菌种在3层间无显著差异(P>0.05)；检出率：每层中，变链菌、乳杆菌显著高于其它各菌种(P<0.05)，变链菌与乳杆菌之间无显著差异(P>0.05)，各菌种在3层间无显著差异(P>0.05)。
, 百拇医药
表1 3层中细菌的几何均数比较
细菌
G(CFU/mg)
lgG±s(CFU/mg)
染色层(n=20)
临界层(n=18)
牙髓层(n=17)
染色层
临界层
牙髓层
, 百拇医药
总菌
3.17×105
5.10×104
3.40×104
5.44±0.26
4.45±0.51
4.32±0.45
总链菌
1.20×105
1.33×104
1.11×104
, http://www.100md.com
4.71±1.17
3.42±1.39
3.57±1.04
变链菌
8.81×104
8.40×103
8.88×103
4.31±1.54
2.99±1.51
3.12±1.33
血链菌
, 百拇医药
2.08×104
3.05×103
1.71×103
2.65±2.23
2.01±1.87
2.09±1.63
轻链菌
7.24×103
1.74×103
4.64×102
, 百拇医药 1.81±2.07
1.27±1.68
1.05±1.49
放线菌
1.60×104
3.17×103
7.01×102
2.17±2.24
1.63±1.90
1.46±1.60
粘放菌
, http://www.100md.com
1.03×104
2.84×103
6.13×102
1.89±2.16
1.60±1.87
1.29±1.59
乳杆菌
1.28×105
2.63×104
1.61×104
, 百拇医药 4.49±1.59
3.60±1.45
3.62±1.11
类杆菌
1.85×103
1.16×103
6.45×102
1.44±1.82
1.61±1.68
1.12±1.57
韦荣菌
, http://www.100md.com
3.02×103
1.78×103
1.01×103
1.68±1.92
1.37±1.78
1.34±1.67
消链菌
6.27×102
7.36×102
1.01×103
, 百拇医药 0.84±1.50
0.76±1.48
0.64±1.44
核梭菌
8.61×102
8.39×102
5.45×102
0.72±1.48
0.79±1.53
0.59±1.33
表2 3层中各菌种占可培养菌的百分比和检出率(%)
, http://www.100md.com
细菌
染色层(n=20)
临界层(n=18)
牙髓层(n=17)
百分比
检出率
百分比
检出率
百分比
检出率
总链菌
38.823±6.016
95.00
, 百拇医药
35.376±6.663
88.89
31.901±5.634
94.12
变链菌
28.412±5.331
90.00
18.521±4.274
83.33
20.039±4.731
88.24
血链菌
, http://www.100md.com
8.017±3.672
60.00
10.224±4.138
55.56
9.221±2.925
64.71
轻链菌
2.099±0.981
45.00
5.117±3.832
38.89
2.586±1.111
, 百拇医药
35.29
放线菌
4.642±1.613
50.00
4.505±1.818
44.44
2.516±0.896
47.06
粘放菌
3.156±1.189
45.00
4.120±1.762
, http://www.100md.com
44.44
2.255±0.825
41.18
乳杆菌
37.323±5.516
90.00
42.231±6.670
88.89
37.335±5.408
94.12
类杆菌
1.035±0.382
, 百拇医药
40.00
3.307±1.425
50.00
3.689±1.501
35.29
韦荣菌
1.186±0.380
40.00
6.797±3.450
38.89
10.021±4.757
41.18
, 百拇医药
消链菌
0.209±0.111
25.00
5.205±2.847
22.22
4.605±3.108
17.65
核梭菌
0.288±0.165
20.00
2.855±1.743
22.22
, 百拇医药
3.033±1.704
17.65
经Kruskal-Wallis秩和检验：总菌、总链球菌、变链菌、血链菌、乳杆菌的CFU染色层显著高于临界层和牙髓层(P<0.01)，后两层间无显著差异(P>0.05)，其他各种细菌CFU在3层间无显著差异(P>0.05)。每层中变链菌、乳杆菌的占可培养菌百分比显著高于其它各菌种(P<0.01)；临界层中乳杆菌的占可培养菌百分比显著高于变链菌 (P<0.05) ；各菌种的占可培养菌百分比在3层间无显著差异(P>0.05)。经χ2检验：每层中变链菌、乳杆菌的检出率显著高于其它菌种(P<0.01)，变链菌、乳杆菌间无显著差异(P>0.05)，各菌种的检出率在各层间无显著差异(P>0.05)。
3 讨 论
本实验在对20个深龋牙的内外两层龋坏牙本质及牙髓的细菌进行了分离鉴定和分析。在三层中均可检出变链菌、乳杆菌、血链菌、轻链菌、粘放菌、产黑色素类杆菌、韦荣菌、厌氧消化链球菌、核梭杆菌，其中以微需氧菌为主，厌氧菌则较少，无论哪一层检出的主要细菌均为变链菌和乳杆菌。变链菌占可培养菌百分比在18.52%～28.41%间，检出率在83.33%～90.00%间；乳杆菌占可培养菌百分比在37.32%～42.23%间，检出率在88.89%～94.12%间，远高于其它几种细菌，乳杆菌的占可培养菌百分比和检出率稍高于变链菌，但无统计学意义。这个结果与Weerheijm(1990)〔3〕、邵家珏(1985)〔4〕的报道一致。但Soet(1995)〔5〕报道：
面龋中主要检出的细菌为变链菌和远缘链球菌，乳杆菌检出很少，与本结果不完全一致。可能是因其采样部位在窝沟和较浅的平滑面，乳杆菌对牙表面既无亲和力又在牙菌斑中所占比例极少〔6〕。而本实验样本为深层龋坏牙本质，故在乳杆菌的检出率上有较大差异。
, http://www.100md.com
变链菌为主要致龋菌，在釉质龋中检出率极高〔4，7〕。牙本质龋为釉质龋的纵深扩展，故常认为在牙本质深龋中变链菌为优势菌。乳杆菌在牙菌斑和釉质龋中检出极低，只有当龋坏深达牙本质时，其检出率和占可培养菌百分比显著增高，且随龋坏程度而递增〔4〕。故对乳杆菌在牙本质龋中作用的评估，到目前仍有不同看法。有人认为：乳杆菌为一种耐酸、产酸菌，当龋坏达牙本质形成窝洞时，洞内的环境相对与口腔环境相隔离，由于致龋菌的产酸，使得洞内pH下降达到5.0以下，成为乳杆菌最适生长环境，故而数量迅速增多。同时乳杆菌又产生大量有机酸如乳酸、己酸，使pH进一步下降，引起牙本质大量脱矿，对牙本质龋的进展有推波助澜的作用〔7，8〕。而有人认为牙本质龋坏部位环境酸度大，利于乳杆菌生长，其中乳杆菌多是龋坏的结果，而不是龋坏的原因〔4〕。本实验结果显示在龋坏层中乳杆菌和变链菌的占可培养菌百分比无显著差异，而在龋内层乳杆菌的占可培养菌百分比显著高于变链菌，因而推测乳杆菌可能促进牙本质龋的发展。
, http://www.100md.com
近年来放线菌特别是粘放菌的致龋作用越来越受到重视。本实验粘放菌的检出率仅为45%，占可培养菌百分比仅为3.16%～4.12%，显著低于变链菌和乳杆菌。这与多数学者报道一致，但与Houte(1991)〔9〕报道：根面牙本质龋中，放线菌的检出率和占可培养菌百分比均高于变链菌和乳杆菌不一致。这可能是因为牙根面与牙冠的解剖、生理、生态环境不完全一致，故粘附其上的致龋菌也不完全一致，粘放菌与冠部牙本质龋相关不大。血链菌、轻链菌的检出率和占可培养菌百分比均较低。
本实验还对三层中的厌氧菌进行了分离分析，结果发现产黑色素类杆菌、韦荣菌、厌氧消化链球菌、核梭杆菌等厌氧菌在龋外层、龋内层及牙髓中均有所检出，但其检出率和占可培养菌百分比均很低，且三层间无明显差异；3个闭锁坏死牙髓样本中，仅2个检出产黑色素类杆菌和核梭杆菌，且两菌的CFU低于外层龋坏牙本质。可见龋源性牙髓炎是以致龋菌为主的混合细菌感染，是龋坏部位感染细菌的延续，故厌氧菌不是引起龋源性牙髓感染的主要细菌。
, 百拇医药
本实验中发现龋坏牙本质的内外层检出细菌的数量不一致，外层腐败牙本质中细菌计数比内层高10倍左右，这与Hahn的结果一致〔8〕。提示在牙本质龋坏过程中，即使牙本质已脱矿，仍有一定的阻挡细菌入侵的能力，这与吴奇光对深龋病变琥珀酸脱氢酶分布研究结果：牙本质龋中脱矿在先细菌入侵在后〔10〕一致。刘正(1987)〔11〕报道：龋内层脱矿牙本质中残存的部分细菌经封氢氧化钙、氧化锌等药物后，绝大多数可被杀灭。因此，在临床治疗深龋时，考虑到细菌组成、分布、药物作用等特点，就可选用适宜的消毒药物或基底材料进行处理，保留龋内层牙本质。
参考文献
1刘正.口腔微生物学.南京:南京出版社,1995.94
2 Sneath-Peter H A,Mair S,Sharpe NS,et al.Bergey' s manual of systematic bacteriology,2nd ed. Baltimore;William Wilkins,1986.604～637,681～684,1054～1062,1083～1092,1209～1235
, http://www.100md.com
3 Weerheijm KL,Soet JJ,Graaf J,et al.Occlusal hidden caries:A bacteriological profile.J Dent Child,1990,57:428
4 邵家珏,乌爱菊,翁方敏,等.变形链球菌和乳杆菌与龋病发病的关系.口腔医学, 1985，5:1
5 Soet JJ,Weerheijm KL,Amerongen WE,et al.A comparison of the microbial flora in carious dentin of clinical detectable and undetectable occlusal lessions.Caries Res,1995,29:46
6 Ozaki K,Matsuo T,Nakae H,et al.A quantitative comparison of selected bacteria in human carious dentin by microscopic counts.Caries Res,1994,28:137
, 百拇医药
7 Fitzgerald RJ,Adams BO,Davis ME.A microbiological study of recurrent dentinal caries.Caries Res,1994,28:409
8 Hahn CL,Falkler WA,Minah GE.Microbiological studies of carious dentine from human teeth with irreversible pulpitis.Arch Oral Biol,1991,36:147
9 Houte J,Lopman J,Kent R.The predominant cultivable flora of sound and carious human root surfaces.J Dent Res,1994,73:1727
10吴奇光.龋齿病变的琥珀酸脱氢酶分布.中华口腔科杂志，1979，14：70
11刘正,翁方敏.深龋保存治疗的临床和细菌学研究.中华口腔医学杂志，1987，22：82
(收稿：1998-11-18 修回：1999-03-10), 百拇医药
单位：上海第二医科大学第九人民医院口腔内科 200011
关键词：龋齿；乳杆菌属；变异链球菌
实用口腔医学杂志990401 〔摘要〕 目的：探明牙本质深龋中的主要相关菌。方法：利用色谱法、裂解法等对龋坏牙本质分三层作细菌分离、鉴定、分析。结果：牙本质龋中的主要相关菌为乳杆菌和变链菌，龋内层牙本质中的细菌含量较外层少。结论：乳杆菌促进牙本质龋的发展，在牙本质龋进展中脱矿在先，细菌入侵在后。
An analysis of bacteriology on dentin caries of crown
Gu Shuping, Liu Zheng, Song Peizhi. Department of Oral Medicine of No.9 People's Hospital, Shanghai Second Medical University,Shanghai 200011
, 百拇医药
〔Abstract〕Objective: To determine the cariogenic bacteria in deep dentinal caries.Method:The bacteria in outer and inner layer of carious dentin and pulp were isolated,identificated and analysed with chromatography and pyrolysis. Result:Lactobacillus and streptococcus mutans were found to be the main bacteria in the carious dentin.There were more bacteria in the outer layer than in the inner layer. Conclusion:Lactobacillus may promote the progress of dentinal caries,during the progression of dentin demineralization,then invasion of bacteria follows.
, 百拇医药
Key words Dental caries; Lactobacillus; Streptococcus mutans
牙本质深龋为临床常见牙体疾患，其细菌学研究对临床适宜地处理深龋、保存活髓具有重要参考价值，而国内这方面的报道较少见。本实验在对深龋细菌分离、鉴定的基础上进行了细菌学分析，为临床治疗工作提供细菌学参考资料。
1 材料和方法
1.1 牙齿 新拔除的冠部牙本质龋坏牙20个，13个牙髓穿露，7个牙髓未穿露(其中4个活髓牙，3个死髓牙)。
1.2 细菌检验 用龋蚀检知液(含5 g/L食用大红色素的丙二醇)染色龋部5 min后，将牙齿沿长轴劈开，分三层取样，即染色层龋坏牙本质、染色与未染色临界处牙本质、牙髓。将样本放入已称重的小试管，再称重得样本湿重，按常规法分离、培养龋相关菌〔1〕。
, 百拇医药
1.3 鉴定 根据Bergey细菌手册中的标准鉴定细菌〔2〕。
2 结 果
所有20个牙齿的染色层龋坏牙本质均检出细菌，18个牙在临界层检出细菌，2个龋坏未达牙髓者在临界层未检出细菌，17个牙在牙髓中检出细菌，3个龋未达牙髓者在牙髓中未检出细菌。各层中检出的主要细菌为微需氧菌，厌氧菌较少。染色层20个、临界层18个、牙髓层17个样本检出的细菌的几何均数比较见表1，各菌种占可培养菌百分比、各菌种的检出率见表2。经统计分析，几何均数：染色层的总菌、总链球菌、变链菌、乳杆菌、血链菌CFU(菌落计数单位，Counting flora unite)显著高于临界层和牙髓(P<0.05)，临界层与牙髓间无显著差异(P>0.05)，其它各种细菌的CFU在3层间无显著差异(P>0.005)；占可培养菌百分比：每层中变链菌、乳杆菌显著高于其它各菌种(P<0.01)，临界层中乳杆菌显著高于变链菌(P<0.05)，各菌种在3层间无显著差异(P>0.05)；检出率：每层中，变链菌、乳杆菌显著高于其它各菌种(P<0.05)，变链菌与乳杆菌之间无显著差异(P>0.05)，各菌种在3层间无显著差异(P>0.05)。
, 百拇医药
表1 3层中细菌的几何均数比较
细菌
G(CFU/mg)lg
G±s(CFU/mg)染色层(n=20)
临界层(n=18)
牙髓层(n=17)
染色层
临界层
牙髓层
, 百拇医药
总菌
3.17×105
5.10×104
3.40×104
5.44±0.26
4.45±0.51
4.32±0.45
总链菌
1.20×105
1.33×104
1.11×104
, http://www.100md.com
4.71±1.17
3.42±1.39
3.57±1.04
变链菌
8.81×104
8.40×103
8.88×103
4.31±1.54
2.99±1.51
3.12±1.33
血链菌
, 百拇医药
2.08×104
3.05×103
1.71×103
2.65±2.23
2.01±1.87
2.09±1.63
轻链菌
7.24×103
1.74×103
4.64×102
, 百拇医药 1.81±2.07
1.27±1.68
1.05±1.49
放线菌
1.60×104
3.17×103
7.01×102
2.17±2.24
1.63±1.90
1.46±1.60
粘放菌
, http://www.100md.com
1.03×104
2.84×103
6.13×102
1.89±2.16
1.60±1.87
1.29±1.59
乳杆菌
1.28×105
2.63×104
1.61×104
, 百拇医药 4.49±1.59
3.60±1.45
3.62±1.11
类杆菌
1.85×103
1.16×103
6.45×102
1.44±1.82
1.61±1.68
1.12±1.57
韦荣菌
, http://www.100md.com
3.02×103
1.78×103
1.01×103
1.68±1.92
1.37±1.78
1.34±1.67
消链菌
6.27×102
7.36×102
1.01×103
, 百拇医药 0.84±1.50
0.76±1.48
0.64±1.44
核梭菌
8.61×102
8.39×102
5.45×102
0.72±1.48
0.79±1.53
0.59±1.33
表2 3层中各菌种占可培养菌的百分比和检出率(%)
, http://www.100md.com
细菌
染色层(n=20)
临界层(n=18)
牙髓层(n=17)
百分比
检出率
百分比
检出率
百分比
检出率
总链菌
38.823±6.016
95.00
, 百拇医药
35.376±6.663
88.89
31.901±5.634
94.12
变链菌
28.412±5.331
90.00
18.521±4.274
83.33
20.039±4.731
88.24
血链菌
, http://www.100md.com
8.017±3.672
60.00
10.224±4.138
55.56
9.221±2.925
64.71
轻链菌
2.099±0.981
45.00
5.117±3.832
38.89
2.586±1.111
, 百拇医药
35.29
放线菌
4.642±1.613
50.00
4.505±1.818
44.44
2.516±0.896
47.06
粘放菌
3.156±1.189
45.00
4.120±1.762
, http://www.100md.com
44.44
2.255±0.825
41.18
乳杆菌
37.323±5.516
90.00
42.231±6.670
88.89
37.335±5.408
94.12
类杆菌
1.035±0.382
, 百拇医药
40.00
3.307±1.425
50.00
3.689±1.501
35.29
韦荣菌
1.186±0.380
40.00
6.797±3.450
38.89
10.021±4.757
41.18
, 百拇医药
消链菌
0.209±0.111
25.00
5.205±2.847
22.22
4.605±3.108
17.65
核梭菌
0.288±0.165
20.00
2.855±1.743
22.22
, 百拇医药
3.033±1.704
17.65
经Kruskal-Wallis秩和检验：总菌、总链球菌、变链菌、血链菌、乳杆菌的CFU染色层显著高于临界层和牙髓层(P<0.01)，后两层间无显著差异(P>0.05)，其他各种细菌CFU在3层间无显著差异(P>0.05)。每层中变链菌、乳杆菌的占可培养菌百分比显著高于其它各菌种(P<0.01)；临界层中乳杆菌的占可培养菌百分比显著高于变链菌 (P<0.05) ；各菌种的占可培养菌百分比在3层间无显著差异(P>0.05)。经χ2检验：每层中变链菌、乳杆菌的检出率显著高于其它菌种(P<0.01)，变链菌、乳杆菌间无显著差异(P>0.05)，各菌种的检出率在各层间无显著差异(P>0.05)。
3 讨 论
本实验在对20个深龋牙的内外两层龋坏牙本质及牙髓的细菌进行了分离鉴定和分析。在三层中均可检出变链菌、乳杆菌、血链菌、轻链菌、粘放菌、产黑色素类杆菌、韦荣菌、厌氧消化链球菌、核梭杆菌，其中以微需氧菌为主，厌氧菌则较少，无论哪一层检出的主要细菌均为变链菌和乳杆菌。变链菌占可培养菌百分比在18.52%～28.41%间，检出率在83.33%～90.00%间；乳杆菌占可培养菌百分比在37.32%～42.23%间，检出率在88.89%～94.12%间，远高于其它几种细菌，乳杆菌的占可培养菌百分比和检出率稍高于变链菌，但无统计学意义。这个结果与Weerheijm(1990)〔3〕、邵家珏(1985)〔4〕的报道一致。但Soet(1995)〔5〕报道：
面龋中主要检出的细菌为变链菌和远缘链球菌，乳杆菌检出很少，与本结果不完全一致。可能是因其采样部位在窝沟和较浅的平滑面，乳杆菌对牙表面既无亲和力又在牙菌斑中所占比例极少〔6〕。而本实验样本为深层龋坏牙本质，故在乳杆菌的检出率上有较大差异。, http://www.100md.com
变链菌为主要致龋菌，在釉质龋中检出率极高〔4，7〕。牙本质龋为釉质龋的纵深扩展，故常认为在牙本质深龋中变链菌为优势菌。乳杆菌在牙菌斑和釉质龋中检出极低，只有当龋坏深达牙本质时，其检出率和占可培养菌百分比显著增高，且随龋坏程度而递增〔4〕。故对乳杆菌在牙本质龋中作用的评估，到目前仍有不同看法。有人认为：乳杆菌为一种耐酸、产酸菌，当龋坏达牙本质形成窝洞时，洞内的环境相对与口腔环境相隔离，由于致龋菌的产酸，使得洞内pH下降达到5.0以下，成为乳杆菌最适生长环境，故而数量迅速增多。同时乳杆菌又产生大量有机酸如乳酸、己酸，使pH进一步下降，引起牙本质大量脱矿，对牙本质龋的进展有推波助澜的作用〔7，8〕。而有人认为牙本质龋坏部位环境酸度大，利于乳杆菌生长，其中乳杆菌多是龋坏的结果，而不是龋坏的原因〔4〕。本实验结果显示在龋坏层中乳杆菌和变链菌的占可培养菌百分比无显著差异，而在龋内层乳杆菌的占可培养菌百分比显著高于变链菌，因而推测乳杆菌可能促进牙本质龋的发展。
, http://www.100md.com
近年来放线菌特别是粘放菌的致龋作用越来越受到重视。本实验粘放菌的检出率仅为45%，占可培养菌百分比仅为3.16%～4.12%，显著低于变链菌和乳杆菌。这与多数学者报道一致，但与Houte(1991)〔9〕报道：根面牙本质龋中，放线菌的检出率和占可培养菌百分比均高于变链菌和乳杆菌不一致。这可能是因为牙根面与牙冠的解剖、生理、生态环境不完全一致，故粘附其上的致龋菌也不完全一致，粘放菌与冠部牙本质龋相关不大。血链菌、轻链菌的检出率和占可培养菌百分比均较低。
本实验还对三层中的厌氧菌进行了分离分析，结果发现产黑色素类杆菌、韦荣菌、厌氧消化链球菌、核梭杆菌等厌氧菌在龋外层、龋内层及牙髓中均有所检出，但其检出率和占可培养菌百分比均很低，且三层间无明显差异；3个闭锁坏死牙髓样本中，仅2个检出产黑色素类杆菌和核梭杆菌，且两菌的CFU低于外层龋坏牙本质。可见龋源性牙髓炎是以致龋菌为主的混合细菌感染，是龋坏部位感染细菌的延续，故厌氧菌不是引起龋源性牙髓感染的主要细菌。
, 百拇医药
本实验中发现龋坏牙本质的内外层检出细菌的数量不一致，外层腐败牙本质中细菌计数比内层高10倍左右，这与Hahn的结果一致〔8〕。提示在牙本质龋坏过程中，即使牙本质已脱矿，仍有一定的阻挡细菌入侵的能力，这与吴奇光对深龋病变琥珀酸脱氢酶分布研究结果：牙本质龋中脱矿在先细菌入侵在后〔10〕一致。刘正(1987)〔11〕报道：龋内层脱矿牙本质中残存的部分细菌经封氢氧化钙、氧化锌等药物后，绝大多数可被杀灭。因此，在临床治疗深龋时，考虑到细菌组成、分布、药物作用等特点，就可选用适宜的消毒药物或基底材料进行处理，保留龋内层牙本质。
参考文献
1刘正.口腔微生物学.南京:南京出版社,1995.94
2 Sneath-Peter H A,Mair S,Sharpe NS,et al.Bergey' s manual of systematic bacteriology,2nd ed. Baltimore;William Wilkins,1986.604～637,681～684,1054～1062,1083～1092,1209～1235
, http://www.100md.com
3 Weerheijm KL,Soet JJ,Graaf J,et al.Occlusal hidden caries:A bacteriological profile.J Dent Child,1990,57:428
4 邵家珏,乌爱菊,翁方敏,等.变形链球菌和乳杆菌与龋病发病的关系.口腔医学, 1985，5:1
5 Soet JJ,Weerheijm KL,Amerongen WE,et al.A comparison of the microbial flora in carious dentin of clinical detectable and undetectable occlusal lessions.Caries Res,1995,29:46
6 Ozaki K,Matsuo T,Nakae H,et al.A quantitative comparison of selected bacteria in human carious dentin by microscopic counts.Caries Res,1994,28:137
, 百拇医药
7 Fitzgerald RJ,Adams BO,Davis ME.A microbiological study of recurrent dentinal caries.Caries Res,1994,28:409
8 Hahn CL,Falkler WA,Minah GE.Microbiological studies of carious dentine from human teeth with irreversible pulpitis.Arch Oral Biol,1991,36:147
9 Houte J,Lopman J,Kent R.The predominant cultivable flora of sound and carious human root surfaces.J Dent Res,1994,73:1727
10吴奇光.龋齿病变的琥珀酸脱氢酶分布.中华口腔科杂志，1979，14：70
11刘正,翁方敏.深龋保存治疗的临床和细菌学研究.中华口腔医学杂志，1987，22：82
(收稿：1998-11-18 修回：1999-03-10), 百拇医药