癌痛膏(散)镇痛、消炎作用的临床及实验研究
作者：彭军英 樊锐太 杨 峰 孔令发 王丽萍
单位：(河南省直属第一医院，450003)
关键词：癌痛膏(散)；镇痛；消炎
中国新药杂志990417 摘要 目的：开发一个低毒无成瘾性但有镇痛抗癌作用的中药制剂。方法及结果：临床观察 对36例晚期癌痛患者外敷癌痛膏镇痛有效率94%，显效率55.4%。用药半年，无成瘾、无肝肾损伤。动物实验 镇痛：膏剂外敷，对抗甲醛引起的疼痛(10 min)起效，持续1h以上。消肿：对巴豆油致小鼠耳肿胀抑制率35.5%，虽低于考的松50.6%，证明对无菌性炎症消肿功效可靠。抑菌试验：显示该药对金葡菌、大肠杆菌、克雷白肺炎杆菌、溶血性链球菌MIC均为2.5 μg/ml，有抑菌作用。散剂内服镇痛试验：以散剂1.0～2.0 g/(kg。d)动物灌胃给药，连用3～5d，有明显的抗酒石酸锑钾所致小鼠扭体作用。结论：临床、动物试验均证明癌痛膏(散)具有可靠的镇痛、消炎作用。
, http://www.100md.com
CLINICAL STUDY AND EXPERIMENT OF THE ANALGESIC AND ANTIPHLOGISTIC
ACTIVITIES CANCER-PAIN-PLASTER(POWDER)
Peng Junyiny,Fan Ruitai,Yang Feng,et al.
(The First Hospital Affiliated Henan Province,450003)
ABSTRACT OBJECTIVE：This study is intended to develop a low-toxic and non-addictive Chinese traditional medicine preparation that possess of definite analgesic and antitumor activities.METHODS AND RESUETS:1.Clinical observation:Of the 36 advanced cancer patients with acute pain,the effective and significant effective rates of the plaster were found to be 94 and 55.4 percent respectively,and no addictive as well as no injury of the liver or the kidney were found in patients after the application of the plaster for six mouths.2.Animal studies:① Analgesia:The application of the plaster produces quick effectiveness (10 minutes)which lasts more than 60 minutes in pains caused by formaldehyde.② Detumescence:In mouse ototumefaction caused by crouton oil, the inhibitory rate was 35.5%,which lower than that of cortisone (50.6%),it is reliable in relieving aseptic inflammations.③ Bacteriostatic experiments:The MIC of the bactreiostasis of the plaster is 2.5 μg/ml for staphylococci,bacillus coli,klebsialla pneumonia,hemolytic streptococci,etc.④ Studies on the analgesic effect of the oral powder:The powder,when administered to animals for three to five days at the dosage of 1.0～2.0/(kg。d),produces evident effect on abdominal twitch caused by antimony potassium tartrate.CONCLUSION:Both clinical and animal studies show that this carcinoma-pain-plaster(powder) is effective in relieving pain,extincting inflammation.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Cancer-pain plaster(powder);Analgetic;Antiphlogistic
癌症引起疼痛是当今世界亟待解决的难题，中晚期癌症患者70%以疼痛为主诉，其中30%左右有难以忍受的剧痛。因而，WHO提出：2000年为基本控制癌痛年的战略目标，并将癌症的镇痛治疗列为综合控制癌症四项重点项目之一。我们用癌痛膏(散)对36例中重度疼痛晚期癌症患者进行自身对照观察，并进行了动物试验，现将结果报告如下。
1 临床试验
1.1 病例选择 均为住院或门诊患者，36例中除肝癌3例经B超CT诊断外，余均经病理确诊为食道癌、胃癌、乳腺癌、肺癌骨转移。36例均为重度疼痛病例，其中男22例，女14例，年龄最大85岁，最小32岁。
1.2 用药方法 药品：癌痛膏系本研究组提供的中药制剂，由寒水石、牡蛎、血竭、琥珀、赤石脂、珍珠、冰片、蜂蜡等中药粉碎加猪脂调成膏。方法：将癌痛膏涂于肿瘤在体表的投射区，涂药面积大于瘤体面积，药厚约2～3 mm。
, http://www.100md.com
1.3 观察方法 在涂药前及涂药后1，6，24h用目测标尺法(VAS法)记录疼痛程度，由患者在10 cm的横线相应阶段上目测打“×”，以×的位置来表达患者疼痛的程度。
1.4 疼痛强度及疼痛缓解程度的分级 疼痛强度按WHO分级标准，分为4级：0级无痛；1级轻度疼痛，可忍受，能正常生活，睡眠基本不受干扰，无需镇痛治疗；2级中度，持续疼痛，睡眠受到干扰，需镇痛治疗；3级重度疼痛，强烈持续疼痛，睡眠受到严重干扰，需用镇痛治疗。
疼痛缓解程度分4级：Ⅰ级轻度缓解，疼痛较治疗前约缓解1/4；Ⅱ级中度缓解，疼痛较治疗前约缓解1/2；Ⅲ级明显缓解，疼痛较治疗前约缓解3/4；Ⅳ级完全缓解，患者完全无痛。
1.5 疗效评定 显效：治疗后疼痛缓解Ⅲ～Ⅳ度；有效：疼痛缓解Ⅰ～Ⅱ度；无效：疼痛无缓解或缓解1/4以下；显效率：(完全缓解例数+明显缓解例数)/总观察例数；总有效：(显效例数+有效例数)/总
, http://www.100md.com
观察例数。
1.6 结果
1.6.1 疗效 36例中完全缓解13.9%(5/36)，明显缓解41.5%(15/36)，中度缓解38.5%(14/36)，无缓解5.5%(2/36)，总有效率为94%，显效率为55.4%，无效率占5.5%。
1.6.2 不良反应 36例敷药7d后肝、肾功能均正常，无胃肠道反应，仅3例敷药后出现局部皮肤红、痒，停用5h自行消退。本品无成瘾现象。
2 癌痛膏外用动物试验
2.1 镇痛试验
2.1.1 材料 动物：小白鼠，昆明种，雌雄体重18～22g(天津医科大学提供)；癌痛膏为红棕色膏状物(本研究组提供)；2.5%甲醛溶液。
, 百拇医药
2.1.2 方法 小鼠20只，分为2组，每组10只，实验组动物先于右前足趾背部涂抹癌痛膏约0.1～0.2g，然后于足趾背部皮下注射2.5%甲醛溶液0.03 ml，对照组除涂猪脂外，其余操作相同。在注射后即刻，10，30，60 min分别观察3～5 min，以舔足为3级反应，抬足为2级反应，跛行为1级反应，正常行走为0级反应(置5 000 ml大烧杯中进行观察)。计算各组的平均反应级数，必须达到2级反应为疼痛反应。
2.1.3 镇痛效果 见表1。
表1 癌痛膏对小鼠(甲醛法)的止痛作用(x±s，n=10) 组 别
癌痛强度评分
即 刻
10min
30min
, 百拇医药
60min
对照组
3.0±0.0
2.10±0.74
2.20±0.63
1.90±0.74
实验组
2.9±0.3
1.30±0.48
1.70±0.48
1.2±0.63
由表1可见，癌痛膏在10 min时痛级强度已降至2级以下，而对照组仍达2级以上，两组相比差异十分显著(P<0.01)；在30 min时实验组仍保持在2级以下，对照组仍在2级以上；60 min时实验组继续减轻反应，而对照组仍接近2级，两组也有显著差异(P<0.05)。说明癌痛膏的作用可维持1h，有值得深入研究的价值。2.2 抗炎作用试验
, 百拇医药
2.2.1 材料 动物：昆明种小白鼠，雄性，体重25～28g(中国医学科学院实验动物繁殖中心提供)；药物：癌痛膏为浅红棕色膏状物；氢化可的松为注射用安瓶剂100 mg/20 ml，批号920505(江苏相州制药厂生产)；致炎剂：混合巴豆油(内含2%巴豆油，20%无水乙醇，5%蒸馏水和73%乙醚)，新鲜配置使用。
2.2.2 方法 小鼠30只，按体重随机分成3组，每组10只，即空白对照组，阳性对照药(氢化可的松)组和癌痛膏组。各组动物先用混合巴豆油0.05 ml/只涂于小鼠右耳片正反两面，30 min后再涂氢化可的松0.05 ml/只，癌痛膏0.4 g/只(空白组例外)。于给药后4h用8mm打孔器打下小鼠左右两耳片，用扭力天平称重，肿胀度=右耳片重-左耳片重，与对照组比较求出抑制率。
2.2.3 抗炎效果 见表2。
表2 癌痛膏对巴豆油所致小鼠耳肿胀的作用(x±s，n=10) 组 别
, 百拇医药
给药剂量
耳片肿胀度(mg)
抑制率(%)
空白对照
蒸馏水0.4 ml
22.5±6.0
氢化可的松
11.1±3.7
50.6
癌痛膏
0.4g外涂
14.5±3.3
, 百拇医药
35.5
由表2可见，小鼠耳片外涂癌痛膏0.4g，对混合巴豆油所致的耳肿胀有较好的抑制作用，抑制率35.5%，与对照组比较有十分显著的差异(P<0.01)，证明癌痛膏对无菌性炎症有消肿功效。2.3 抑菌试验
2.3.1 材料 癌痛膏去猪脂粉末，用2%吐温80溶液配制成乳剂1ml(100 μg)。菌株来源：金葡菌(26003)、大肠杆菌(44103)、克雷白肺炎杆菌(46114)及乙型溶液血性链球菌，以上菌株均由北京生物制品检定所提供。
2.3.2 方法 采用平皿琼脂表面点菌双倍稀释法，于37℃培养16～18h，记录无菌生长的MIC。
2.3.3 结果 癌痛散对金葡菌、大肠杆菌、克雷白肺炎杆菌及乙型溶血性链球菌株的MIC均为2.5 μg/ml，经重复，2次结果相同，说明有抑菌作用。
, 百拇医药
3 癌痛散内服动物试验
3.1 镇痛试验(小鼠扭体法)
3.1.1 材料 癌痛散，呈淡粉红色，由癌痛膏去猪脂制成蒸馏水配成混悬剂；酒石酸锑钾(天津南开化工厂生产，批号 880819)，试验前配成适当浓度备用；动物：昆明种健康小鼠(河南医科大学实验动物中心)，体重(20±2)g，雌、雄兼用。
3.1.2 方法 动物90只，随机分为3组，每组30只。① 模型对照组：0.05%酒石酸锑钾0.1 ml/10g体重灌胃；② 癌痛散1.0 g/kg组；③ 癌痛散2.0 g/kg组。第1组经口灌胃蒸馏水2.0 ml/kg，qd，连用5d；第2，3组灌胃癌痛散不同剂量，qd，连用5d；于用药1，3，5d分别于末次用药后30 min，给各组部分动物(10只/组)腹腔注射一次0.05%酒石酸锑钾0.1 ml/10g体重，观察记录各组动物在20 min内的扭体次数，并进行统计学处理，评价本品的镇痛效果。
, http://www.100md.com
3.1.3 镇痛效果 见表3。
表3 癌痛散的镇痛试验(小鼠扭体实验)(x±s，n=10)
(剂量及用法
(g/(kg。d),ig)
小鼠在20min内
扭体次数
酒石酸锑钾
5mg×1
39.0±4.2
癌痛散+酒
1.0×1
, 百拇医药
39.8±4.4
癌痛散+酒
2.0×1
38.6±6.5
酒石酸锑钾
5mg×1
37.0±9.3
癌痛散+酒
1.0×3
21.4±17.0
癌痛散+酒
2.0×3
, http://www.100md.com
11.0±6.9
酒石酸锑钾
5mg×1
42.3±11.6
癌痛散+酒
1.0×5
12.6±9.2
癌痛散+酒
2.0×5
0.4±0.9
酒：即酒石酸锑钾，与对照组浓度相同；各组加用酒石酸锑钾的量均为5 mg/kg,ip 结果：给动物灌胃1次癌痛散1.0～2.0 g/kg时，对酒石酸锑钾所致的小鼠扭体无明显作用，与模型组比无明显差异(P>0.05)；给动物连续灌胃本品3d，大剂量组则有明显的抗扭体作用；而连续用药5d时，大、小剂量组均具有明显的抗扭体作用，与模型组相比，具有极显著性差异(P<0.01)。提示癌痛散在剂量为1.0～2.0 g/kg,给动物灌胃给药，连续用药3～5d，均具有明显的对抗由酒石酸锑钾所致的扭体作用，同时随着用药时间的延长和剂量的增加，则对抗扭体作用加强。
, http://www.100md.com
3.2 急性毒性(LD50)试验
3.2.1 目的 主要观察受试药物一次给小鼠经口灌胃后，7d内的毒性反应及死亡分布情况，为临床用药提供科学依据。
3.2.2 材料 受试药物：癌痛散(本实验组提供)，用0.5%羧甲基纤维素钠配成混悬液备用；动物：昆明种健康小鼠(河南医科大学实验动物中心)，体重(20±2)g雌雄兼有，试验前空腹12h。
3.2.3 方法 取动物50只，随机分为5组，每组10只，然后给动物一次灌胃不同剂量的癌痛散，各剂量组间间距为0.85。剂量分别为：10.0 g/kg,浓度为25%；8.5 g/kg，浓度为21%；7.2 g/kg，浓度为18%；6.0 g/kg，浓度为15%；5.2 g/kg，浓度为13%。均按0.4 ml/10g体重灌胃给药，观察各组动物在7d内所出现的毒性反应及死亡分布情况，用简化机率单位法计算本品的LD50及95%的可信限。对死亡动物应及时进行尸检，若发现主要脏器有异常时，则应实行病理组织学检查。
, 百拇医药
3.2.4 毒性表现 给动物一次大剂量灌胃本品，约10 min即出现镇静，继之出现阵发性跳动，呼吸加快，在12h内因呼吸衰竭而死亡，其他各剂量组(小剂量除外)在7d内均有数量不等的死亡，对死亡动物及时尸检，肉眼观察未发现主要脏器有明显异常。LD50及其95%可信限：按各组动物的死亡分布情况，用简化机率单位计算，结果见表4。
表4 癌痛散LD50试验(n=10) 剂量(g/kg)
对数剂量(X)
死亡动物(只)
死亡率(%)
机率单位(Y)
10.0
1.0000
, 百拇医药
10
100
7.40
8.5
0.9294
8
80
5.84
7.2
0.8573
4
40
4.75
, http://www.100md.com
6.0
0.7782
2
20
4.16
5.2
0.7160
0
0
2.60
LD50及95%可信限为：7.34(6.76～7.92)g/kg4 讨论
目前世界上被公认的镇痛剂吗啡、杜冷丁均有成瘾性，本小组研究癌痛膏(散)旨在开发一个无成瘾的镇痛抗癌中药。① 本组用癌痛膏外敷对36例晚期剧痛患者临床观察镇痛总有效率94%，显效率54%，用药半年不成瘾，亦无肝肾损害。② 动物试验：膏剂外用对抗2.5%甲醛注入足趾间引起的是反应10 min起效，持续60 min以上；对巴豆油所致小鼠耳肿胀抑制率35.5%，作用虽不如氢化可的松50.6%抑制率高，但显示试验结果可靠。证明该药对无菌性炎症有消肿功效，抑菌试验证明该药对金葡萄、大肠杆菌、克雷白肺炎杆菌、溶血性链球菌4个菌种MIC为2.5 μg/ml，有一定的抑菌作用，故能消炎。散剂内服以1.0～2.0 g/(kg。d)动物灌胃给药，连用3～5d，有明显的抗酒石酸锑钾所致的扭体作用。急性毒理试验，LD50及其95%可信限为7.34(6.76～7.92)g/kg，小剂量5.2 g/kg×7d无1例死亡，大剂量6.0 g/kg以上有死亡，死鼠尸检肉眼观察未发现主脏器明显异常，动物实验为临床口服提供科学依据。③ 中医理论认为，癌症多由血淤、痰湿积聚或热毒蕴结所致，疼痛因淤血、痰湿、痹阻络脉，加上热毒灼伤疼痛部位固定，剧烈难忍。癌痛膏为咸、寒、芳香之品，寒者清热解毒，咸者渗湿利水消肿，芳香可开窍可行气通络化淤散结，正针对癌痛之病机。方中寒水石、冰片清热解毒，行气通络止痛。琥珀、血竭，活血化淤止痛，珍珠、牡蛎镇静安神抗过敏止痛。现代医学证明：寒水石、牡蛎、赤石脂、珍珠含硫酸钙、硫酸镁、氧化镁等盐类。盐能渗湿利水消肿、镇静抗过敏止痛。血竭含安息香酸、肉桂酸，琥珀含琥珀香酸，冰片含右旋龙脑，以上均属芳香挥发剂，有开窍理气止痛作用。总之，其止痛机制尚待进一步研究。
参考文献
1 李仪奎，王钦茂主编.中药药理实验方法学.上海：上海科技出版社，1991.397～398
2 中华人民共和国卫生部药政局.中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)，1994.203
(收稿：1998-01-07 修回：1999-03-27), 百拇医药
单位：(河南省直属第一医院，450003)
关键词：癌痛膏(散)；镇痛；消炎
中国新药杂志990417 摘要 目的：开发一个低毒无成瘾性但有镇痛抗癌作用的中药制剂。方法及结果：临床观察 对36例晚期癌痛患者外敷癌痛膏镇痛有效率94%，显效率55.4%。用药半年，无成瘾、无肝肾损伤。动物实验 镇痛：膏剂外敷，对抗甲醛引起的疼痛(10 min)起效，持续1h以上。消肿：对巴豆油致小鼠耳肿胀抑制率35.5%，虽低于考的松50.6%，证明对无菌性炎症消肿功效可靠。抑菌试验：显示该药对金葡菌、大肠杆菌、克雷白肺炎杆菌、溶血性链球菌MIC均为2.5 μg/ml，有抑菌作用。散剂内服镇痛试验：以散剂1.0～2.0 g/(kg。d)动物灌胃给药，连用3～5d，有明显的抗酒石酸锑钾所致小鼠扭体作用。结论：临床、动物试验均证明癌痛膏(散)具有可靠的镇痛、消炎作用。
, http://www.100md.com
CLINICAL STUDY AND EXPERIMENT OF THE ANALGESIC AND ANTIPHLOGISTIC
ACTIVITIES CANCER-PAIN-PLASTER(POWDER)
Peng Junyiny,Fan Ruitai,Yang Feng,et al.
(The First Hospital Affiliated Henan Province,450003)
ABSTRACT OBJECTIVE：This study is intended to develop a low-toxic and non-addictive Chinese traditional medicine preparation that possess of definite analgesic and antitumor activities.METHODS AND RESUETS:1.Clinical observation:Of the 36 advanced cancer patients with acute pain,the effective and significant effective rates of the plaster were found to be 94 and 55.4 percent respectively,and no addictive as well as no injury of the liver or the kidney were found in patients after the application of the plaster for six mouths.2.Animal studies:① Analgesia:The application of the plaster produces quick effectiveness (10 minutes)which lasts more than 60 minutes in pains caused by formaldehyde.② Detumescence:In mouse ototumefaction caused by crouton oil, the inhibitory rate was 35.5%,which lower than that of cortisone (50.6%),it is reliable in relieving aseptic inflammations.③ Bacteriostatic experiments:The MIC of the bactreiostasis of the plaster is 2.5 μg/ml for staphylococci,bacillus coli,klebsialla pneumonia,hemolytic streptococci,etc.④ Studies on the analgesic effect of the oral powder:The powder,when administered to animals for three to five days at the dosage of 1.0～2.0/(kg。d),produces evident effect on abdominal twitch caused by antimony potassium tartrate.CONCLUSION:Both clinical and animal studies show that this carcinoma-pain-plaster(powder) is effective in relieving pain,extincting inflammation.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Cancer-pain plaster(powder);Analgetic;Antiphlogistic
癌症引起疼痛是当今世界亟待解决的难题，中晚期癌症患者70%以疼痛为主诉，其中30%左右有难以忍受的剧痛。因而，WHO提出：2000年为基本控制癌痛年的战略目标，并将癌症的镇痛治疗列为综合控制癌症四项重点项目之一。我们用癌痛膏(散)对36例中重度疼痛晚期癌症患者进行自身对照观察，并进行了动物试验，现将结果报告如下。
1 临床试验
1.1 病例选择 均为住院或门诊患者，36例中除肝癌3例经B超CT诊断外，余均经病理确诊为食道癌、胃癌、乳腺癌、肺癌骨转移。36例均为重度疼痛病例，其中男22例，女14例，年龄最大85岁，最小32岁。
1.2 用药方法 药品：癌痛膏系本研究组提供的中药制剂，由寒水石、牡蛎、血竭、琥珀、赤石脂、珍珠、冰片、蜂蜡等中药粉碎加猪脂调成膏。方法：将癌痛膏涂于肿瘤在体表的投射区，涂药面积大于瘤体面积，药厚约2～3 mm。
, http://www.100md.com
1.3 观察方法 在涂药前及涂药后1，6，24h用目测标尺法(VAS法)记录疼痛程度，由患者在10 cm的横线相应阶段上目测打“×”，以×的位置来表达患者疼痛的程度。
1.4 疼痛强度及疼痛缓解程度的分级 疼痛强度按WHO分级标准，分为4级：0级无痛；1级轻度疼痛，可忍受，能正常生活，睡眠基本不受干扰，无需镇痛治疗；2级中度，持续疼痛，睡眠受到干扰，需镇痛治疗；3级重度疼痛，强烈持续疼痛，睡眠受到严重干扰，需用镇痛治疗。
疼痛缓解程度分4级：Ⅰ级轻度缓解，疼痛较治疗前约缓解1/4；Ⅱ级中度缓解，疼痛较治疗前约缓解1/2；Ⅲ级明显缓解，疼痛较治疗前约缓解3/4；Ⅳ级完全缓解，患者完全无痛。
1.5 疗效评定 显效：治疗后疼痛缓解Ⅲ～Ⅳ度；有效：疼痛缓解Ⅰ～Ⅱ度；无效：疼痛无缓解或缓解1/4以下；显效率：(完全缓解例数+明显缓解例数)/总观察例数；总有效：(显效例数+有效例数)/总
, http://www.100md.com
观察例数。
1.6 结果
1.6.1 疗效 36例中完全缓解13.9%(5/36)，明显缓解41.5%(15/36)，中度缓解38.5%(14/36)，无缓解5.5%(2/36)，总有效率为94%，显效率为55.4%，无效率占5.5%。
1.6.2 不良反应 36例敷药7d后肝、肾功能均正常，无胃肠道反应，仅3例敷药后出现局部皮肤红、痒，停用5h自行消退。本品无成瘾现象。
2 癌痛膏外用动物试验
2.1 镇痛试验
2.1.1 材料 动物：小白鼠，昆明种，雌雄体重18～22g(天津医科大学提供)；癌痛膏为红棕色膏状物(本研究组提供)；2.5%甲醛溶液。
, 百拇医药
2.1.2 方法 小鼠20只，分为2组，每组10只，实验组动物先于右前足趾背部涂抹癌痛膏约0.1～0.2g，然后于足趾背部皮下注射2.5%甲醛溶液0.03 ml，对照组除涂猪脂外，其余操作相同。在注射后即刻，10，30，60 min分别观察3～5 min，以舔足为3级反应，抬足为2级反应，跛行为1级反应，正常行走为0级反应(置5 000 ml大烧杯中进行观察)。计算各组的平均反应级数，必须达到2级反应为疼痛反应。
2.1.3 镇痛效果 见表1。
表1 癌痛膏对小鼠(甲醛法)的止痛作用(x±s，n=10) 组 别
癌痛强度评分
即 刻
10min
30min
, 百拇医药
60min
对照组
3.0±0.0
2.10±0.74
2.20±0.63
1.90±0.74
实验组
2.9±0.3
1.30±0.48
1.70±0.48
1.2±0.63
由表1可见，癌痛膏在10 min时痛级强度已降至2级以下，而对照组仍达2级以上，两组相比差异十分显著(P<0.01)；在30 min时实验组仍保持在2级以下，对照组仍在2级以上；60 min时实验组继续减轻反应，而对照组仍接近2级，两组也有显著差异(P<0.05)。说明癌痛膏的作用可维持1h，有值得深入研究的价值。2.2 抗炎作用试验
, 百拇医药
2.2.1 材料 动物：昆明种小白鼠，雄性，体重25～28g(中国医学科学院实验动物繁殖中心提供)；药物：癌痛膏为浅红棕色膏状物；氢化可的松为注射用安瓶剂100 mg/20 ml，批号920505(江苏相州制药厂生产)；致炎剂：混合巴豆油(内含2%巴豆油，20%无水乙醇，5%蒸馏水和73%乙醚)，新鲜配置使用。
2.2.2 方法 小鼠30只，按体重随机分成3组，每组10只，即空白对照组，阳性对照药(氢化可的松)组和癌痛膏组。各组动物先用混合巴豆油0.05 ml/只涂于小鼠右耳片正反两面，30 min后再涂氢化可的松0.05 ml/只，癌痛膏0.4 g/只(空白组例外)。于给药后4h用8mm打孔器打下小鼠左右两耳片，用扭力天平称重，肿胀度=右耳片重-左耳片重，与对照组比较求出抑制率。
2.2.3 抗炎效果 见表2。
表2 癌痛膏对巴豆油所致小鼠耳肿胀的作用(x±s，n=10) 组 别
, 百拇医药
给药剂量
耳片肿胀度(mg)
抑制率(%)
空白对照
蒸馏水0.4 ml
22.5±6.0
氢化可的松
11.1±3.7
50.6
癌痛膏
0.4g外涂
14.5±3.3
, 百拇医药
35.5
由表2可见，小鼠耳片外涂癌痛膏0.4g，对混合巴豆油所致的耳肿胀有较好的抑制作用，抑制率35.5%，与对照组比较有十分显著的差异(P<0.01)，证明癌痛膏对无菌性炎症有消肿功效。2.3 抑菌试验
2.3.1 材料 癌痛膏去猪脂粉末，用2%吐温80溶液配制成乳剂1ml(100 μg)。菌株来源：金葡菌(26003)、大肠杆菌(44103)、克雷白肺炎杆菌(46114)及乙型溶液血性链球菌，以上菌株均由北京生物制品检定所提供。
2.3.2 方法 采用平皿琼脂表面点菌双倍稀释法，于37℃培养16～18h，记录无菌生长的MIC。
2.3.3 结果 癌痛散对金葡菌、大肠杆菌、克雷白肺炎杆菌及乙型溶血性链球菌株的MIC均为2.5 μg/ml，经重复，2次结果相同，说明有抑菌作用。
, 百拇医药
3 癌痛散内服动物试验
3.1 镇痛试验(小鼠扭体法)
3.1.1 材料 癌痛散，呈淡粉红色，由癌痛膏去猪脂制成蒸馏水配成混悬剂；酒石酸锑钾(天津南开化工厂生产，批号 880819)，试验前配成适当浓度备用；动物：昆明种健康小鼠(河南医科大学实验动物中心)，体重(20±2)g，雌、雄兼用。
3.1.2 方法 动物90只，随机分为3组，每组30只。① 模型对照组：0.05%酒石酸锑钾0.1 ml/10g体重灌胃；② 癌痛散1.0 g/kg组；③ 癌痛散2.0 g/kg组。第1组经口灌胃蒸馏水2.0 ml/kg，qd，连用5d；第2，3组灌胃癌痛散不同剂量，qd，连用5d；于用药1，3，5d分别于末次用药后30 min，给各组部分动物(10只/组)腹腔注射一次0.05%酒石酸锑钾0.1 ml/10g体重，观察记录各组动物在20 min内的扭体次数，并进行统计学处理，评价本品的镇痛效果。
, http://www.100md.com
3.1.3 镇痛效果 见表3。
表3 癌痛散的镇痛试验(小鼠扭体实验)(x±s，n=10)
(剂量及用法
(g/(kg。d),ig)
小鼠在20min内
扭体次数
酒石酸锑钾
5mg×1
39.0±4.2
癌痛散+酒
1.0×1
, 百拇医药
39.8±4.4
癌痛散+酒
2.0×1
38.6±6.5
酒石酸锑钾
5mg×1
37.0±9.3
癌痛散+酒
1.0×3
21.4±17.0
癌痛散+酒
2.0×3
, http://www.100md.com
11.0±6.9
酒石酸锑钾
5mg×1
42.3±11.6
癌痛散+酒
1.0×5
12.6±9.2
癌痛散+酒
2.0×5
0.4±0.9
酒：即酒石酸锑钾，与对照组浓度相同；各组加用酒石酸锑钾的量均为5 mg/kg,ip 结果：给动物灌胃1次癌痛散1.0～2.0 g/kg时，对酒石酸锑钾所致的小鼠扭体无明显作用，与模型组比无明显差异(P>0.05)；给动物连续灌胃本品3d，大剂量组则有明显的抗扭体作用；而连续用药5d时，大、小剂量组均具有明显的抗扭体作用，与模型组相比，具有极显著性差异(P<0.01)。提示癌痛散在剂量为1.0～2.0 g/kg,给动物灌胃给药，连续用药3～5d，均具有明显的对抗由酒石酸锑钾所致的扭体作用，同时随着用药时间的延长和剂量的增加，则对抗扭体作用加强。
, http://www.100md.com
3.2 急性毒性(LD50)试验
3.2.1 目的 主要观察受试药物一次给小鼠经口灌胃后，7d内的毒性反应及死亡分布情况，为临床用药提供科学依据。
3.2.2 材料 受试药物：癌痛散(本实验组提供)，用0.5%羧甲基纤维素钠配成混悬液备用；动物：昆明种健康小鼠(河南医科大学实验动物中心)，体重(20±2)g雌雄兼有，试验前空腹12h。
3.2.3 方法 取动物50只，随机分为5组，每组10只，然后给动物一次灌胃不同剂量的癌痛散，各剂量组间间距为0.85。剂量分别为：10.0 g/kg,浓度为25%；8.5 g/kg，浓度为21%；7.2 g/kg，浓度为18%；6.0 g/kg，浓度为15%；5.2 g/kg，浓度为13%。均按0.4 ml/10g体重灌胃给药，观察各组动物在7d内所出现的毒性反应及死亡分布情况，用简化机率单位法计算本品的LD50及95%的可信限。对死亡动物应及时进行尸检，若发现主要脏器有异常时，则应实行病理组织学检查。
, 百拇医药
3.2.4 毒性表现 给动物一次大剂量灌胃本品，约10 min即出现镇静，继之出现阵发性跳动，呼吸加快，在12h内因呼吸衰竭而死亡，其他各剂量组(小剂量除外)在7d内均有数量不等的死亡，对死亡动物及时尸检，肉眼观察未发现主要脏器有明显异常。LD50及其95%可信限：按各组动物的死亡分布情况，用简化机率单位计算，结果见表4。
表4 癌痛散LD50试验(n=10) 剂量(g/kg)
对数剂量(X)
死亡动物(只)
死亡率(%)
机率单位(Y)
10.0
1.0000
, 百拇医药
10
100
7.40
8.5
0.9294
8
80
5.84
7.2
0.8573
4
40
4.75
, http://www.100md.com
6.0
0.7782
2
20
4.16
5.2
0.7160
0
0
2.60
LD50及95%可信限为：7.34(6.76～7.92)g/kg4 讨论
目前世界上被公认的镇痛剂吗啡、杜冷丁均有成瘾性，本小组研究癌痛膏(散)旨在开发一个无成瘾的镇痛抗癌中药。① 本组用癌痛膏外敷对36例晚期剧痛患者临床观察镇痛总有效率94%，显效率54%，用药半年不成瘾，亦无肝肾损害。② 动物试验：膏剂外用对抗2.5%甲醛注入足趾间引起的是反应10 min起效，持续60 min以上；对巴豆油所致小鼠耳肿胀抑制率35.5%，作用虽不如氢化可的松50.6%抑制率高，但显示试验结果可靠。证明该药对无菌性炎症有消肿功效，抑菌试验证明该药对金葡萄、大肠杆菌、克雷白肺炎杆菌、溶血性链球菌4个菌种MIC为2.5 μg/ml，有一定的抑菌作用，故能消炎。散剂内服以1.0～2.0 g/(kg。d)动物灌胃给药，连用3～5d，有明显的抗酒石酸锑钾所致的扭体作用。急性毒理试验，LD50及其95%可信限为7.34(6.76～7.92)g/kg，小剂量5.2 g/kg×7d无1例死亡，大剂量6.0 g/kg以上有死亡，死鼠尸检肉眼观察未发现主脏器明显异常，动物实验为临床口服提供科学依据。③ 中医理论认为，癌症多由血淤、痰湿积聚或热毒蕴结所致，疼痛因淤血、痰湿、痹阻络脉，加上热毒灼伤疼痛部位固定，剧烈难忍。癌痛膏为咸、寒、芳香之品，寒者清热解毒，咸者渗湿利水消肿，芳香可开窍可行气通络化淤散结，正针对癌痛之病机。方中寒水石、冰片清热解毒，行气通络止痛。琥珀、血竭，活血化淤止痛，珍珠、牡蛎镇静安神抗过敏止痛。现代医学证明：寒水石、牡蛎、赤石脂、珍珠含硫酸钙、硫酸镁、氧化镁等盐类。盐能渗湿利水消肿、镇静抗过敏止痛。血竭含安息香酸、肉桂酸，琥珀含琥珀香酸，冰片含右旋龙脑，以上均属芳香挥发剂，有开窍理气止痛作用。总之，其止痛机制尚待进一步研究。
参考文献
1 李仪奎，王钦茂主编.中药药理实验方法学.上海：上海科技出版社，1991.397～398
2 中华人民共和国卫生部药政局.中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)，1994.203
(收稿：1998-01-07 修回：1999-03-27), 百拇医药