外用重组人表皮生长因子对健康人体及烧伤患者不良反应试验
作者：王世岭 周亮 马建丽 严霜
单位：王世岭(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)；周亮(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)；马建丽(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)；严霜(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)
关键词：重组人表皮生长因子；药物不良反应
中国新药杂志000113 摘 要 目的：考察重组人表皮生长因子(rhEGF)对健康人体及烧伤患者的药物不良反应。方法：健康志愿者32例， rhEGF剂量由小到大依次为140，280，700，1400IU，进行随机分组试验，同部位同剂量连续3次给药，观察1周；志愿受试烧伤患者33例，在常规治疗的基础上按上述分组及给药剂量，连续用药15d。结果：rhEGF对正常人皮肤及烧伤患者创面无明显的刺激性，无致敏作用，抗原试验均为阴性。仅有1例健康受试者自觉局部痒感和1例烧伤患者创面用药时有一过性的轻微疼痛。体征及各项生化指标均无明显改变，受试患者创面愈合后期未见组织过度增生现象。结论：rhEGF外用安全剂量范围较大，不良反应轻微，人体对其具有较好的耐受性。
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EXPERIMENTAL OBSERVATION ON ADRs OF RECOMBINANT HUMAN
EPIDERMAL GROWTH FACTOR(rhEGF) IN HEALTHY AND BURNED VOLUNTEERS
Wang Shiling, Zhou Liang, Ma Jianli
(No.304 Hospital of PLA, Beijing 100037)
ABSTRACT：OBJECTIVE：To observe the ADRs of rhEGF in health and burned volunteers. METHODS：32 healthy volunteers were randomly divided to receivea trible daily dose of 140,280,700,and 1 400 IU external rhEGF applied to the same area for 1 week. 33 burned volunteers were treated with the same dosage as the healthy groups for 15 days but they also receive routine treatment. RESULTS：No obvious stimulation and sensitization in both healthy and burned vounteers were observed and all of them have negative antigen test. Only 1 healthy volunteer experienced local itch and 1 burned volunteer felt a mild transition pain during application of the drug. No obvious changes in physical sign and biochemical criterion and no hamartoplasia were observed. CONCLUSION：rhEGF has a wide safety and dosage range in external use and it is highly tolerable in both healthy and burned volunteers.
, 百拇医药
KEY WORDS：Recombinant human epidermal growth factor; ADRs▲
重组人表皮生长因子(rhEGF)为我国Ⅰ类新药，体外试验证实其具有广泛的促细胞增殖和组织再生的生物学活性[1，2]，对体表创伤、烧伤、溃疡等创面均具有加速愈合作用[3,4]。为确定该药安全耐受的人用剂量、用法和剂量范围，受原卫生部药政管理局委托，我们对广州华生元基因工程有限公司研制的rhEGF进行了不良反应试验。
对象和方法
1 研究对象
试验分为2部分，共65例。第一部分为健康志愿者32例，男女各半，年龄18～50岁，平均(3 1.5±10.5)岁，体重45～73kg，平均(56.06±8.72)kg。第二部分为烧伤志愿受试患者33例，男19例，女14例，年龄19～60岁，平均(33.24±12.69)岁，创伤面积1%～30%，平均(12 .26±9.01)%。其中烧伤深Ⅱ度创面16例，Ⅲ度创面6例，烧伤残留创面3例，供皮区创面4例，瘢痕切除创面4例。均符合下列入选及排除标准。
, 百拇医药
入选标准：健康成年志愿者年龄18～50岁，男女各半，体重为标准体重的±15%，既往无严重的躯体和神经精神疾病史，无皮肤疾病，4周内未外用和内服任何药物，体格和实验室( 血、尿、心电图、肝功能、肾功能)检查正常者。
烧伤志愿受试患者年龄18～60岁，受伤面积小于体表面积的30%，无严重的心、肝、肾和血功能障碍，无严重的合并感染症状。神志清楚，有较好的语言表达能力者。
排除标准：体检、神经精神检查或实验室检查异常者；吸烟、嗜酒、既往药物过敏史者或4 周内服用精神药物或其他外用药物者；妊娠、哺乳或月经期妇女；即往精神疾病、癫痫病和严重躯体疾病史或半年内有肝、肾功能检查异常史者；烧伤受试患者主要脏器有明显损害者及严重的合并感染者。
2 研究方法
2.1 受试药物 rhEGF溶液(喷雾型)，700IU/ ml，8ml/支(批号96060B，由深圳华生元基因工程有限公司提供)。
, 百拇医药
2.2 给药方法 健康志愿者32例，按随机数字表进行分组，分别将用药部位先用生理盐水擦净，取10cm×10cm双层纱布1块，置于上述洗净部位，在纱布上滴加不同剂量的受试药物4ml( 使纱布全部湿透)，用硫酸纸覆盖固定，每人在同部位以相同剂量连用3次(qd)，连续观察1 周。剂量组从小到大依次为140，280，700，1 400IU进行试验，各组受试者用药期间禁洗浴。
志愿受试患者33例，按病例入选先后及创面类型随机分组，用药剂量及顺序同上，用药面积控制在10%以内。创面按常规方法清创后，将受试药物均匀喷于创面，再用1%磺胺嘧啶银霜纱布覆盖，同法更换1次/d，连续用药15d。
3 观察指标
3.1 不良反应 被观察的不良反应包括皮肤局部刺激(发红、热、痒、痛) 、全身性反应、毒性、恶心呕吐、口干烦躁、气管痉挛、疲乏嗜睡、兴奋、体温升高、血压改变、肌张力增高、心慌、心电图改变、月经紊乱、意识障碍、思维异常及创面过度增生现象等。用药后1，3 ，5，12，24，48，72及168h记录不良反应。不良反应按以下标准评定：0分指无症状；1分为轻度反应，指询问有症状；2分为中度，指主诉症状，能忍受，无需处理；3分为重度反应，指有客观表现，难以忍受，需要处理。
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3.2 体格检查和精神检查 用药前及用药后健康志愿者于1，3，5，12，24，72，168h及受试患者于1，3，5，7，1 2，15d测量体温、脉博、呼吸、血压。用药后72h进行胸腹部、神经系统和精神检查。
3.3 实验室检查 用药前后检查血、尿常规及肝、肾功能和心电图，若发现异常积极查找原因随访至正常。
3.4 免疫试验 志愿受试患者于用药结束后取患者静脉血分离血清，作为抗体标本, 以 rhEGF溶液作为抗原标本，采用双向免疫扩散试验法[5]检查血清rhEGF抗体。
4 统计分析
试验结果采用t检验、χ2检验和方差分析，并应用SAS统计学软件协助处理。
结 果
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1 不良反应观察
32例健康志愿者及33例志愿受试患者中，各剂量组出现与试验药物有关或可能有关的不良反应共有2例。健康志愿者1例在用药d3，局部自觉有轻微痒感。志愿受试患者1例在开始用药时有一过性轻微疼痛，5min后疼痛消失，未见其他不良反应。志愿受试患者也未见创面组织过度增生现象。
2 血清免疫试验
不同剂量组的志愿受试患者连续用药15d后，血清检查结果表明，rhEGF无免疫反应，33例患者血清中未发现rhEGF抗体存在，结果均为阴性。
3 体格检查及精神检查
健康受试者及受试患者各剂量组用药前后血压、心率、体温均在正常值范围，无显著性差异 (P>0.05)。体格检查无异常发现，精神检查包括一般情况、情感活动及意志行为等均为正常。心电图未见明显改变。
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4 实验室检查
健康受试者及受试患者用药前后肝、肾功能及血、尿常规均无明显变化(P>0 .05)。
讨 论
表皮生长因子(EGF)通过自磷酸化等一系列生化反应诱导或调控细胞增殖的一系列重要基因，启动创面修复过程，对上皮细胞具有强烈的促生长作用，且为这些表皮细胞的主要更新所必需[6]。rhEGF是通过EGF基因片段在大肠杆菌表达系统充分表达而获得的与天然EGF活性和结构高度一致的产物。因此，理论上rhEGF在体内亦参与同样的生理过程，具有相同的生物学活性。基于rhEGF与内源EGF的结构和活性有着高度的一致性，国内外对rhEGF安全性研究均未发现有免疫反应，本试验结果亦证明了这一点。
rhEGF与其受体结合存在着饱和机制的负反馈调节作用，不致引起靶细胞的过度增生。在受试患者中，创面愈合速度较传统治疗方法有加快的趋势，未见组织过度增生或瘢痕肥大现象。皮肤刺激反应极轻微，仅有1例出现一过性的轻微疼痛，与传统外用药物相比，不良反应较少。无论是健康志愿者或是志愿受试患者对rhEGF均有较好的耐受性，高剂量组用药剂量为临床使用剂量的2倍，亦未见与其相关的不良反应。国内中山医科大学对rhEGF的安全性进行了全面系统的毒理、特殊毒理研究，亦充分证明它的安全性。目前为止还没有证据表明应用rhEGF后引起瘢痕和癌变以及肝、肾功能障碍。与其有关的临床试验中亦未见皮疹症状，说明其临床安全性较高。
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本研究结果提示，rhEGF短期内应用对人体正常生化指标无明显影响，安全剂量范围较大，不良反应少，是一种安全有效的加速创面愈合的药物。
参考文献：
[1]付小兵，王德文主编.创伤修复基础.北京:人民军医出版社,1997.127～146
[2]Bennett NT, Schultz GS. Growth factors and wound healing: biochemical properties of growth factors and their receptors. Am J Surg,1993,165∶728
[3]Robinso CT. Growth Factors. Therapeutic advances in wound healing. Am Med,1993,25∶535
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[4]Bennett NT, Schultz GS. Growth factors and wound healing: Part Ⅱ. role in normal and chronic wound healing. Am J Surg,1993,166∶174
[5]冯仁丰主编.实用医学检验学.上海:上海科学技术出版社,1996.883～893
[6]Herndon DN, NguyenTT, Gilin DA. Growth factors local and systemic. Arch Surg, 1993,128∶1227
收稿日期：1999-06-15
修稿日期：1999-11-16, 百拇医药
单位：王世岭(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)；周亮(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)；马建丽(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)；严霜(解放军304医院药剂药理科，北京 100037)
关键词：重组人表皮生长因子；药物不良反应
中国新药杂志000113 摘 要 目的：考察重组人表皮生长因子(rhEGF)对健康人体及烧伤患者的药物不良反应。方法：健康志愿者32例， rhEGF剂量由小到大依次为140，280，700，1400IU，进行随机分组试验，同部位同剂量连续3次给药，观察1周；志愿受试烧伤患者33例，在常规治疗的基础上按上述分组及给药剂量，连续用药15d。结果：rhEGF对正常人皮肤及烧伤患者创面无明显的刺激性，无致敏作用，抗原试验均为阴性。仅有1例健康受试者自觉局部痒感和1例烧伤患者创面用药时有一过性的轻微疼痛。体征及各项生化指标均无明显改变，受试患者创面愈合后期未见组织过度增生现象。结论：rhEGF外用安全剂量范围较大，不良反应轻微，人体对其具有较好的耐受性。
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EXPERIMENTAL OBSERVATION ON ADRs OF RECOMBINANT HUMAN
EPIDERMAL GROWTH FACTOR(rhEGF) IN HEALTHY AND BURNED VOLUNTEERS
Wang Shiling, Zhou Liang, Ma Jianli
(No.304 Hospital of PLA, Beijing 100037)
ABSTRACT：OBJECTIVE：To observe the ADRs of rhEGF in health and burned volunteers. METHODS：32 healthy volunteers were randomly divided to receivea trible daily dose of 140,280,700,and 1 400 IU external rhEGF applied to the same area for 1 week. 33 burned volunteers were treated with the same dosage as the healthy groups for 15 days but they also receive routine treatment. RESULTS：No obvious stimulation and sensitization in both healthy and burned vounteers were observed and all of them have negative antigen test. Only 1 healthy volunteer experienced local itch and 1 burned volunteer felt a mild transition pain during application of the drug. No obvious changes in physical sign and biochemical criterion and no hamartoplasia were observed. CONCLUSION：rhEGF has a wide safety and dosage range in external use and it is highly tolerable in both healthy and burned volunteers.
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KEY WORDS：Recombinant human epidermal growth factor; ADRs▲
重组人表皮生长因子(rhEGF)为我国Ⅰ类新药，体外试验证实其具有广泛的促细胞增殖和组织再生的生物学活性[1，2]，对体表创伤、烧伤、溃疡等创面均具有加速愈合作用[3,4]。为确定该药安全耐受的人用剂量、用法和剂量范围，受原卫生部药政管理局委托，我们对广州华生元基因工程有限公司研制的rhEGF进行了不良反应试验。
对象和方法
1 研究对象
试验分为2部分，共65例。第一部分为健康志愿者32例，男女各半，年龄18～50岁，平均(3 1.5±10.5)岁，体重45～73kg，平均(56.06±8.72)kg。第二部分为烧伤志愿受试患者33例，男19例，女14例，年龄19～60岁，平均(33.24±12.69)岁，创伤面积1%～30%，平均(12 .26±9.01)%。其中烧伤深Ⅱ度创面16例，Ⅲ度创面6例，烧伤残留创面3例，供皮区创面4例，瘢痕切除创面4例。均符合下列入选及排除标准。
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入选标准：健康成年志愿者年龄18～50岁，男女各半，体重为标准体重的±15%，既往无严重的躯体和神经精神疾病史，无皮肤疾病，4周内未外用和内服任何药物，体格和实验室( 血、尿、心电图、肝功能、肾功能)检查正常者。
烧伤志愿受试患者年龄18～60岁，受伤面积小于体表面积的30%，无严重的心、肝、肾和血功能障碍，无严重的合并感染症状。神志清楚，有较好的语言表达能力者。
排除标准：体检、神经精神检查或实验室检查异常者；吸烟、嗜酒、既往药物过敏史者或4 周内服用精神药物或其他外用药物者；妊娠、哺乳或月经期妇女；即往精神疾病、癫痫病和严重躯体疾病史或半年内有肝、肾功能检查异常史者；烧伤受试患者主要脏器有明显损害者及严重的合并感染者。
2 研究方法
2.1 受试药物 rhEGF溶液(喷雾型)，700IU/ ml，8ml/支(批号96060B，由深圳华生元基因工程有限公司提供)。
, 百拇医药
2.2 给药方法 健康志愿者32例，按随机数字表进行分组，分别将用药部位先用生理盐水擦净，取10cm×10cm双层纱布1块，置于上述洗净部位，在纱布上滴加不同剂量的受试药物4ml( 使纱布全部湿透)，用硫酸纸覆盖固定，每人在同部位以相同剂量连用3次(qd)，连续观察1 周。剂量组从小到大依次为140，280，700，1 400IU进行试验，各组受试者用药期间禁洗浴。
志愿受试患者33例，按病例入选先后及创面类型随机分组，用药剂量及顺序同上，用药面积控制在10%以内。创面按常规方法清创后，将受试药物均匀喷于创面，再用1%磺胺嘧啶银霜纱布覆盖，同法更换1次/d，连续用药15d。
3 观察指标
3.1 不良反应 被观察的不良反应包括皮肤局部刺激(发红、热、痒、痛) 、全身性反应、毒性、恶心呕吐、口干烦躁、气管痉挛、疲乏嗜睡、兴奋、体温升高、血压改变、肌张力增高、心慌、心电图改变、月经紊乱、意识障碍、思维异常及创面过度增生现象等。用药后1，3 ，5，12，24，48，72及168h记录不良反应。不良反应按以下标准评定：0分指无症状；1分为轻度反应，指询问有症状；2分为中度，指主诉症状，能忍受，无需处理；3分为重度反应，指有客观表现，难以忍受，需要处理。
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3.2 体格检查和精神检查 用药前及用药后健康志愿者于1，3，5，12，24，72，168h及受试患者于1，3，5，7，1 2，15d测量体温、脉博、呼吸、血压。用药后72h进行胸腹部、神经系统和精神检查。
3.3 实验室检查 用药前后检查血、尿常规及肝、肾功能和心电图，若发现异常积极查找原因随访至正常。
3.4 免疫试验 志愿受试患者于用药结束后取患者静脉血分离血清，作为抗体标本, 以 rhEGF溶液作为抗原标本，采用双向免疫扩散试验法[5]检查血清rhEGF抗体。
4 统计分析
试验结果采用t检验、χ2检验和方差分析，并应用SAS统计学软件协助处理。
结 果
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1 不良反应观察
32例健康志愿者及33例志愿受试患者中，各剂量组出现与试验药物有关或可能有关的不良反应共有2例。健康志愿者1例在用药d3，局部自觉有轻微痒感。志愿受试患者1例在开始用药时有一过性轻微疼痛，5min后疼痛消失，未见其他不良反应。志愿受试患者也未见创面组织过度增生现象。
2 血清免疫试验
不同剂量组的志愿受试患者连续用药15d后，血清检查结果表明，rhEGF无免疫反应，33例患者血清中未发现rhEGF抗体存在，结果均为阴性。
3 体格检查及精神检查
健康受试者及受试患者各剂量组用药前后血压、心率、体温均在正常值范围，无显著性差异 (P>0.05)。体格检查无异常发现，精神检查包括一般情况、情感活动及意志行为等均为正常。心电图未见明显改变。
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4 实验室检查
健康受试者及受试患者用药前后肝、肾功能及血、尿常规均无明显变化(P>0 .05)。
讨 论
表皮生长因子(EGF)通过自磷酸化等一系列生化反应诱导或调控细胞增殖的一系列重要基因，启动创面修复过程，对上皮细胞具有强烈的促生长作用，且为这些表皮细胞的主要更新所必需[6]。rhEGF是通过EGF基因片段在大肠杆菌表达系统充分表达而获得的与天然EGF活性和结构高度一致的产物。因此，理论上rhEGF在体内亦参与同样的生理过程，具有相同的生物学活性。基于rhEGF与内源EGF的结构和活性有着高度的一致性，国内外对rhEGF安全性研究均未发现有免疫反应，本试验结果亦证明了这一点。
rhEGF与其受体结合存在着饱和机制的负反馈调节作用，不致引起靶细胞的过度增生。在受试患者中，创面愈合速度较传统治疗方法有加快的趋势，未见组织过度增生或瘢痕肥大现象。皮肤刺激反应极轻微，仅有1例出现一过性的轻微疼痛，与传统外用药物相比，不良反应较少。无论是健康志愿者或是志愿受试患者对rhEGF均有较好的耐受性，高剂量组用药剂量为临床使用剂量的2倍，亦未见与其相关的不良反应。国内中山医科大学对rhEGF的安全性进行了全面系统的毒理、特殊毒理研究，亦充分证明它的安全性。目前为止还没有证据表明应用rhEGF后引起瘢痕和癌变以及肝、肾功能障碍。与其有关的临床试验中亦未见皮疹症状，说明其临床安全性较高。
, http://www.100md.com
本研究结果提示，rhEGF短期内应用对人体正常生化指标无明显影响，安全剂量范围较大，不良反应少，是一种安全有效的加速创面愈合的药物。
参考文献：
[1]付小兵，王德文主编.创伤修复基础.北京:人民军医出版社,1997.127～146
[2]Bennett NT, Schultz GS. Growth factors and wound healing: biochemical properties of growth factors and their receptors. Am J Surg,1993,165∶728
[3]Robinso CT. Growth Factors. Therapeutic advances in wound healing. Am Med,1993,25∶535
, http://www.100md.com
[4]Bennett NT, Schultz GS. Growth factors and wound healing: Part Ⅱ. role in normal and chronic wound healing. Am J Surg,1993,166∶174
[5]冯仁丰主编.实用医学检验学.上海:上海科学技术出版社,1996.883～893
[6]Herndon DN, NguyenTT, Gilin DA. Growth factors local and systemic. Arch Surg, 1993,128∶1227
收稿日期：1999-06-15
修稿日期：1999-11-16, 百拇医药