反相高效液相色谱法测定复方红景天心脑冲剂中红景天苷的含量
作者：刘玉珍 郑健 王力健 徐飞 郑璐 张贵
单位：郑璐(沈阳药科大学，沈阳 110015)；张贵(吉林省榆树市药品检验所， 榆树 130400)；刘玉珍 郑健 王力健 徐飞(吉林省药品检验所，长春 130062)
关键词：复方红景天心脑冲剂；红景天苷
中国新药杂志000309 摘要 目的：建立测定复方红景天心脑冲剂中红景天苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了红景天苷的含量。以C18化学键合硅胶为固定相，甲醇-水(10∶100)为流动相，紫外检测波长278nm。结果：方法的平均加标回收率为98.84%(n=5)，相对标准差RSD为2.2%(n=5)，红景天苷在4～12μg范围内，浓度与面积呈良好的线性关系，r=0.9997。结论：方法简便、快速，结果准确，重现性好，有效地控制了产品的质量。
, 百拇医药
REVERSED PHASE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHIC
DETERMINATION OF SALIDROSICIE IN RHODIOLA XINNAOCHONGJI
Liu Yuzhen Zheng Jian Wang Lijian
(Jilin Provincial Institute for Drug Control,Changchun 130062)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish a method for determination of Salidrosicie in Rhodiola xinnaochongji. METHODS:The Salidrosicie content was determined by RP-HPLC using methanol∶H2O(10∶100)as mobile phase and a UV detector at 278nm.RESULTS:An average recoverage of 98.84%(n=5)was obtained with a RSD of 2.2%(n=5)and a linear range of 4～12μg,r=0.9997.CONCLUSION:A simple,rapid method for determination of Salidrosicie in Rhodiola xinnaochongji is established with an excellent reproducibility.
, 百拇医药
KEY WORDS Rhodiola xinnaochongji ; Salidrosicie
本品系由新药源高山红景天及人参等7味中药组成的复方制剂[1],主要用于心脑血管疾病的治疗。其主药红景天为景天科植物高山红景天(Rhodiola sachinensis A.Bor.)的干燥根及根茎，主要成分为红景天苷及其苷元酪醇等多种结构相近的组分[2]。其他药材尚含有人参皂苷、蒺藜皂苷、淫羊藿苷等多种苷类，组成复杂，干扰严重。本实验对前处理进行了实验研究，并采用RP-HPLC法测定了高山红景天中有效成分的含量，方法简单、快速，结果准确，有效地控制了产品的质量。
材料和方法
1 仪器与试药
1.1 仪器 吉尔森高效液相色谱仪(法国)，紫外检测器，日立3390A色谱数据处理机(日本)。
, http://www.100md.com
1.2 试药 红景天苷对照品由沈阳药科大学生药教研室提供(经结构鉴定，纯度为98%以上)，甲醇为优级纯。
2 实验方法
2.1 提取方法的选择 实验比较了依次用乙醚、氯仿-醋酸乙酯(1∶1)脱脂，再用甲醇提取，正丁醇萃取及用乙醚、氯仿依次脱脂，然后同上提取分离，结果示出前者为佳，故选用前者为提取方法。
2.2 系统适用性试验
2.2.1 检测波长的选择 取红景天苷对照品，用甲醇精密制成约1mg/ml的溶液，以甲醇为空白，照分光光度法，在265紫外可见光分光光度计上，于200～350nm波长范围内扫描，结果在278nm波长处有最大吸收，选定检测波长为278nm。
2.2.2 流动相的选择 实验比较了甲醇-水(10∶100)，乙腈-水(15∶85)溶剂系统的分离效果，结果前者为佳，故选用该溶剂系统作为流动相，流速为1.1ml/min。
, 百拇医药
2.2.3 线性关系的考察 如上精密制备对照品溶液，分别精密吸取4，6，8，10，12μl，注入液相色谱仪，测试。以浓度对峰面积作图，得一通过原点的良好直线，回归方程为：y=334105x-285，r=0.9997，红景天苷在4～12μg范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.3 方法准确性与精密性的考察
2.3.1 测定方法 对照品溶液的制备：取红景天苷对照品，加甲醇精密制成约含1mg/ml的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品6g，加乙醚40ml,回流提取2h，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加水20ml溶解，加氯仿-醋酸乙酯(1∶1)的混合液萃取3次，20ml/次，弃去萃取液，水层加水饱和的正丁醇萃取5次，20ml/次，合并正丁醇萃取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶于2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得。分别精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，结果见图1。
, 百拇医药
图1 复方红景天心脑冲剂HPLC图谱
2.3.2 方法准确性的考察 以同法测得已知含量的复方红景天心脑冲剂为基底，加入对照品适量，依法提取、分离，测定加标回收率，见表1。
表1 加标回收率实验结果 项目
样品含量(mg)
加标品(mg)
测得量(mg)
回收率(%)
1
0.7741
0.7760
, http://www.100md.com 1.2623
99.76
2
0.7634
0.7760
1.1961
98.38
3
0.7597
0.7760
1.1945
97.90
4
, http://www.100md.com
0.7733
0.7760
1.2475
99.65
5
0.7644
0.7760
1.2296
98.51
均值
0.7670
0.7760
1.2260
, http://www.100md.com
98.84
如表所示，红景天苷的平均加标回收率可达98.84%。
2.3.3 方法精密性的考察 依法对同一样品进行5次独立测定，结果红景天苷的平均含量为每袋重0.96mg(分别为0.9750,0.9615,0.9762,0.9843,0.9453mg)，RSD为1.56%。结 果
1 样品的测定
依法测定样品3批，批号为981004产品结果为2.19mg/袋，批号981006产品为1.80mg/袋，批号981009为1.62mg/袋。
讨 论
用乙醚、氯仿-醋酸乙酯(1∶1)脱去脂溶性成分，大大地缩短了保留时间，用甲醇提取，正丁醇萃取的方法提取分离了有效成分，排除了其他组分的干扰，用RP-HPLC测定复方红景天心脑冲剂中红景天苷的含量，有效控制了产品的质量。
参考文献
1，中国科学院林业与土壤研究所.东北草本植物志.北京：科学出版社，1980.97
2，卢希贤，郑俊民，王志清，等. 国产红景天的研究.中草药，1980，11(4)∶147
收稿：1999-10-22
修回：2000-01-10, http://www.100md.com
单位：郑璐(沈阳药科大学，沈阳 110015)；张贵(吉林省榆树市药品检验所， 榆树 130400)；刘玉珍 郑健 王力健 徐飞(吉林省药品检验所，长春 130062)
关键词：复方红景天心脑冲剂；红景天苷
中国新药杂志000309 摘要 目的：建立测定复方红景天心脑冲剂中红景天苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了红景天苷的含量。以C18化学键合硅胶为固定相，甲醇-水(10∶100)为流动相，紫外检测波长278nm。结果：方法的平均加标回收率为98.84%(n=5)，相对标准差RSD为2.2%(n=5)，红景天苷在4～12μg范围内，浓度与面积呈良好的线性关系，r=0.9997。结论：方法简便、快速，结果准确，重现性好，有效地控制了产品的质量。
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REVERSED PHASE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHIC
DETERMINATION OF SALIDROSICIE IN RHODIOLA XINNAOCHONGJI
Liu Yuzhen Zheng Jian Wang Lijian
(Jilin Provincial Institute for Drug Control,Changchun 130062)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish a method for determination of Salidrosicie in Rhodiola xinnaochongji. METHODS:The Salidrosicie content was determined by RP-HPLC using methanol∶H2O(10∶100)as mobile phase and a UV detector at 278nm.RESULTS:An average recoverage of 98.84%(n=5)was obtained with a RSD of 2.2%(n=5)and a linear range of 4～12μg,r=0.9997.CONCLUSION:A simple,rapid method for determination of Salidrosicie in Rhodiola xinnaochongji is established with an excellent reproducibility.
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KEY WORDS Rhodiola xinnaochongji ; Salidrosicie
本品系由新药源高山红景天及人参等7味中药组成的复方制剂[1],主要用于心脑血管疾病的治疗。其主药红景天为景天科植物高山红景天(Rhodiola sachinensis A.Bor.)的干燥根及根茎，主要成分为红景天苷及其苷元酪醇等多种结构相近的组分[2]。其他药材尚含有人参皂苷、蒺藜皂苷、淫羊藿苷等多种苷类，组成复杂，干扰严重。本实验对前处理进行了实验研究，并采用RP-HPLC法测定了高山红景天中有效成分的含量，方法简单、快速，结果准确，有效地控制了产品的质量。
材料和方法
1 仪器与试药
1.1 仪器 吉尔森高效液相色谱仪(法国)，紫外检测器，日立3390A色谱数据处理机(日本)。
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1.2 试药 红景天苷对照品由沈阳药科大学生药教研室提供(经结构鉴定，纯度为98%以上)，甲醇为优级纯。
2 实验方法
2.1 提取方法的选择 实验比较了依次用乙醚、氯仿-醋酸乙酯(1∶1)脱脂，再用甲醇提取，正丁醇萃取及用乙醚、氯仿依次脱脂，然后同上提取分离，结果示出前者为佳，故选用前者为提取方法。
2.2 系统适用性试验
2.2.1 检测波长的选择 取红景天苷对照品，用甲醇精密制成约1mg/ml的溶液，以甲醇为空白，照分光光度法，在265紫外可见光分光光度计上，于200～350nm波长范围内扫描，结果在278nm波长处有最大吸收，选定检测波长为278nm。
2.2.2 流动相的选择 实验比较了甲醇-水(10∶100)，乙腈-水(15∶85)溶剂系统的分离效果，结果前者为佳，故选用该溶剂系统作为流动相，流速为1.1ml/min。
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2.2.3 线性关系的考察 如上精密制备对照品溶液，分别精密吸取4，6，8，10，12μl，注入液相色谱仪，测试。以浓度对峰面积作图，得一通过原点的良好直线，回归方程为：y=334105x-285，r=0.9997，红景天苷在4～12μg范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.3 方法准确性与精密性的考察
2.3.1 测定方法 对照品溶液的制备：取红景天苷对照品，加甲醇精密制成约含1mg/ml的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品6g，加乙醚40ml,回流提取2h，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加水20ml溶解，加氯仿-醋酸乙酯(1∶1)的混合液萃取3次，20ml/次，弃去萃取液，水层加水饱和的正丁醇萃取5次，20ml/次，合并正丁醇萃取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶于2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得。分别精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，结果见图1。
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图1 复方红景天心脑冲剂HPLC图谱
2.3.2 方法准确性的考察 以同法测得已知含量的复方红景天心脑冲剂为基底，加入对照品适量，依法提取、分离，测定加标回收率，见表1。
表1 加标回收率实验结果 项目
样品含量(mg)
加标品(mg)
测得量(mg)
回收率(%)
1
0.7741
0.7760
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99.76
2
0.7634
0.7760
1.1961
98.38
3
0.7597
0.7760
1.1945
97.90
4
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0.7733
0.7760
1.2475
99.65
5
0.7644
0.7760
1.2296
98.51
均值
0.7670
0.7760
1.2260
, http://www.100md.com
98.84
如表所示，红景天苷的平均加标回收率可达98.84%。
2.3.3 方法精密性的考察 依法对同一样品进行5次独立测定，结果红景天苷的平均含量为每袋重0.96mg(分别为0.9750,0.9615,0.9762,0.9843,0.9453mg)，RSD为1.56%。结 果
1 样品的测定
依法测定样品3批，批号为981004产品结果为2.19mg/袋，批号981006产品为1.80mg/袋，批号981009为1.62mg/袋。
讨 论
用乙醚、氯仿-醋酸乙酯(1∶1)脱去脂溶性成分，大大地缩短了保留时间，用甲醇提取，正丁醇萃取的方法提取分离了有效成分，排除了其他组分的干扰，用RP-HPLC测定复方红景天心脑冲剂中红景天苷的含量，有效控制了产品的质量。
参考文献
1，中国科学院林业与土壤研究所.东北草本植物志.北京：科学出版社，1980.97
2，卢希贤，郑俊民，王志清，等. 国产红景天的研究.中草药，1980，11(4)∶147
收稿：1999-10-22
修回：2000-01-10, http://www.100md.com