银杏叶活性成分的提取制备及测定方法的研究进展
作者：佘佳红 袁伯俊 柳正良
单位：佘佳红 袁伯俊(第二军医大学新药评价中心，上海 200433)；柳正良(第二军医大学药学院， 上海 200433)
关键词：银杏叶；活性成分；提取工艺；测定方法
中国新药杂志000403
摘要 银杏叶制剂是治疗心脑血管病的高效、安全的天然产物制剂，其活性成分与产地、采收季节 、植株性别、提取工艺及测定方法等有很大关系。本研究就其最新研究进展作一综述。
THE DEVELOPMENT IN STUDIES OF EXTRACTION PROCESSES AND
DETERMINATION METHODS FOR ACTIVE COMPONENTS OF GINKGO BILOBA LEAVES
, 百拇医药
She Jiahong Yuan Bojun Liu Zhengliang
(The Center of New Drug Evaluation, The Second Military University of Medical Sciences, Shanghai 200433)
ABSTRACT Extracts of the leaves of Ginkgo biloba L. (GBE) are used as phytomedicines to i ncrease peripheral and cerebral blood flow. The quantity of available compositio ns of GBE has relation to many factors, such as the time of collection, the plac e it has been planted and the sex of the plant etc. The studies on its development were reviewed in this paper.
, 百拇医药
KEY WORDS Ginkgo biloba leaves; Active components; Extraction; Determination
银杏叶提取物(GBE)具有独特的药理活性及巨大的临床应用价值，因此对银杏叶的药 用、保健等综合价值的深入挖掘和开发日益受到重视。本文就银杏叶的化学成分、提取分离 及其质量控制方面的最新进展作一综述。
1 银杏叶的化学成分
银杏叶的化学成分较为复杂，迄今为止，已从银杏叶中分离出大量的极性和非极性化合物， 其中主要为黄酮类化合物、萜类内酯，此外还有有机酸、烷基酚和烷基酚酸、甾体化合物及 微量元素等。
1.1 EGb761的化学组成 GBE具有多种生理活性，目前国际上标准银杏 叶提取物是按德国Schwabe专利工艺生产的EGb761，其中黄酮含量为24%，萜内酯为6%，白果 酸小于0.0005%，原花青素类7.0%，羧酸类成分13.0%，儿茶素类2.0%，非黄酮苷类20%，高 分子化合物4.0%，无机物5.0%，水分溶剂3.0%，其他3.0%。提取物的各种成 分是一个 整体中有机的组成部分，EGb761的药理作用是各种相对固定组成的各组分共同作用的结果。
, 百拇医药
1.2 化学成分的动态变化 目前比较公认的GBE的有效成分为黄酮类化合物和萜类内酯，而 它们在叶中的含量随季节变化和植株性别差异会有较大变化。苑可武等[1]测定了 北京地区 银杏叶中黄酮含量的季节性变化，结果认为银杏叶总黄酮含量在4月份为最高，8月份时居次 ；同时发现大部分时期内以槲皮素为主而异鼠李素比例相对一直较小。南京大学药物研究所 对银杏叶中黄酮苷与萜类内酯含量分别进行研究[2，3]，结果发现黄酮苷含量以 5月份为最 高，以后逐月降低，雄性植株叶中黄酮含量明显高于雌性植株；而同株银杏树叶中萜类内酯 含量随季节变化规律与黄酮苷相异，同时发现雌性植株叶子中内酯含量明显高于雄性植株， 分别为0.22%,0.09%。这一发现为我们充分利用自然资源提供了有价值的参考。
比较各地测定的银杏叶总内酯及黄酮苷含量，结果相差较大，除各自测定的方法的准确度或 系统误差外，银杏总内酯与黄酮苷是否与各地的土壤、气候、环境及银杏树的性别、树龄等 因素相关，还需做大量实验研究和分析统计工作。
, 百拇医药
2 银杏叶提取物的制备
2.1 有机溶剂提取法 这是国内外使用最为广泛的方法。由于银杏叶中含黄酮类化合物和内 酯较少(分别为1.7%及0.6%左右)，因此最终所得浸膏中此两类成分含量往往不高，所含杂 质较多，离目前通行的“24+6”标准较远。为得到能用于制药原料的GBE，则必须将此浸膏 进行进一步的分离纯化。常用的分离纯化方法有液-液萃取法、沉淀法和吸附洗脱法。胡敏 等[4]探讨了溶剂萃取和树脂吸附精制银杏叶黄酮的机制，比较了两种方 法，结果表明，树脂吸附精制法优于溶剂萃取精制法。
树脂吸附纯化法近年来有较大的发展。陈冲等[5]将银杏叶以65%乙醇回流提取，减 压浓缩， ZTC澄清剂沉降。其黄酮苷和内酯含量分别达到26%和6%以上。李新岗等[6]对吸附 银杏叶中 银杏总内酯的树脂法进行研究，用50%乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上724吸附树脂柱,最后 得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别为27.4%，10.6%。该法操作简单，能耗 低，投资少，安全可靠。树脂吸附生产工艺应用于银杏叶，其主要特点是成本低、回收率高 、有机溶剂残留少。
, 百拇医药
Teris等[7]对银杏内酯A，B，C，J与白果内酯的制备分离进行了研究。作者使用质 量分数为6.5% NaOAc浸泡的硅胶柱，以中压液相色谱分离GA，GB，GC，GJ和BB的方法 ， 先精制再分离 ，仅含1种内酯的色谱部位经重结晶3～4次可得纯品单体。
2.2 超临界CO2提取法 近年来，随着国际上超临界流体提取技术的迅速发展，用该技术提取植物中的活性 成分也越 来越广泛。与有机溶剂法相比，具有提取效率高，无溶剂残留，活性成分和热不稳定成分不 易被分解破坏等优点，通过控制温度和压力以及调节改性剂的种类和用量，还可以实现选择 性萃取和分离纯化，欧洲已有专利报道采用SFE技术除去银杏叶粗提物中的杂质。近年来国 内学者[8]也开始探索和研究用该技术提取银杏叶黄酮类化合物，得黄绿色精提物 ，收率为4.1%，其中黄酮苷含量在35%以上。邓启焕等[9]以银杏叶有效成分分离为 对象，建立了一套超临界流体小试、中试装置和实验方法，所得的提取物中银杏黄酮含量为 28%，银杏内酯含量为7.2%，均高于国际现行公认的质量标准。据夏开元等[10]报 道，以乙醇和用大孔树脂提取的银杏叶精提物，于CO2-SFE精制前，毒性成分白果酸含量 为2.0%，而用CO2-SFE精提后，白果酸含量降低到0.02%。Chen等[11]对SFE萃取 银杏内酯和白果内酯进行研究，认为在萃取过程中必须有改性剂的参与。用超临界CO2提 取银杏叶中的药用成分，已引起各国学者关注，成为新热点之一。
, 百拇医药
2.3 高速逆流色谱技术提取法 高速逆流色谱(high-speed counter current chromatogra phy, HSCCC)技术是一种不用任何固定载体的液-液分配色谱技术，具有两大突出优点：① 无因使用载体而固有的吸附现象；② 具有不同于一般色谱的分离方式，使其特别适用于 制备性分离。
用HSCCC技术提取分离银杏叶中黄酮苷及总内酯成分，已引起各国专家的重视。Yang等 [ 12]以及蔡定国等[13]先后报道了应用HSCCC技术，从银杏叶提取物中分离纯化 得到3种主要 苷元：槲皮素、山奈素、异鼠李素。我们还对HSCCC分离银杏总内酯的条件进行探索，目前 已成功分离制得白果内酯单体，和以GA，GB为主要成分的混合物，并仍在继续摸索新的分离 条件，以实现对银杏内酯的分离。HSCCC对样品的高分离效率、高产品纯度、无吸附和污染 等优点，将使其成为制备银杏黄酮苷元以及各银杏内酯和白果内酯对照品的较佳手段。
, 百拇医药
2.4 细胞和组织培养合成法 银杏黄酮类化合物以及萜类内酯主要存在于银杏叶片和根皮中 ，其含量较低，易受地域、季节、气候及植株性别限制而发生较大的含量变化，且银杏总体 资源十分有限，叶的采收具有季节性。继1991年Carrier等首次肯定了银杏组织培养物中有 银杏内酯存在后，陆续已有较多成功的实验室研究成果。孙天恩等[14]利用发根 农杆菌的 Ri质粒转化成功银杏叶的发根，其中银杏内酯的含量比较接近叶片，而银杏黄酮的含量则偏 低。但银杏发根具有生长速度快、有克隆性、遗传性稳定、筛选方便，无环境污染等优点， 是继细胞培养后发展起来的又一新的培养系统，并已有有关专利公布。虽然目前商品化产生 银杏内酯还是以叶片提取为主，但利用组织法生产及发根培养技术的前景令人注目。
3 银杏叶提取物及其制剂的质量研究进展
目前，国外生产银杏叶制剂的大厂将其制剂的标准化内涵进行了延伸，不仅建立在以有效成 分和毒性成分的基础上所制订的质控标准，还包括了原生药的种植采收和储藏的标准化，提 取分离以及其制剂生产工艺的标准化。EGb761即有其特殊的工艺和标准配合于每一道工序的 具体过程。而国际上一般公认的GBE质量指标仅着眼于最终产品的含量监控，国内外学者均 围绕这一标准，对银杏叶提取物及其制剂的主要成分的含量测定进行了广泛深入的研究 ，本文就其最新进展作一综述。
, 百拇医药
3.1 黄酮苷类 近年来对黄酮类成分的定量多采用酸水解后HPLC测定其中3种主要苷元的 含量。最近，杨天鸣等[15]报道了在含KBr的盐酸介质中，以KBrO3标准液为滴定 剂，用示波滴 定法测定银杏叶提取物中总黄酮的含量(以芦丁计)，方法简单方便，快速准确，与分光光 度法的测定结果无显著性差异(99%置信度)。刘志敏等[16]运用最新发展起来的 超临界流 体色谱法成功地分离了黄酮类化合物，为银杏叶提取物中黄酮类化合物的分离分析开辟了一 条新的途径。
3.2 萜类内酯 由于萜类内酯在银杏叶中含量较低，且自身的特征紫外吸收峰很弱，用紫外 检测器测定比较困难，受杂质干扰严重，因而其定量多采用示差折光检测器(RI)检测。St uart 等[17]报道了运用MECC法分离分析银杏内酯A，B及白果内酯，于波长185nm 处进行检测 ，成功也将三者进行分离，但至今尚未见进一步报道。陈维军等[18]研究并提出了 应用羟肟酸 铁反应测定银杏叶及其提取物中总内酯含量的分光光度法，其最低检测限为45μg/ml，线性 范围为0～0.9mg/ml，方法操作简便快速，对设备要求不高，可应用于银杏叶制剂的含量测 定。Biber等[19]在对银杏内酯及白果内酯的生物利用度进行研究时，运用G C-MS法测 定血浆中GA，GB，BB的浓度，以最低剂量给药时测得血药浓度峰值分别为68，40，159μg/m l。
, 百拇医药
4 结语
银杏叶提取物及其制剂是近代植物药开发研究的热点之一，要使我国的银杏叶相关产业摆脱 低水平重复、产品不稳定的因素造成的落后局面，使之有能力参与国际大市场的激烈竞争， 应借鉴国外的先进经验，以标准化的原料和标准化的生产工艺来生产高质量的标准化银杏叶 提取物及其制剂。在此基础上，紧密结合药理学、植物化学、分析化学等各学科，在进一步 深入研究银杏叶中确切的有效成分的同时，将传统的中医中药理论融入对资源的充分合理利 用中，则银杏叶的综合开发必将展现广阔的前景，成为中药现代化进程中坚实的一步。
参考文献
1，苑可武，孟宪惠，徐文豪.银杏叶中黄酮含量的季节性变化.中草药，1 997，28(4)∶ 211
2，范怡梅，王勇，谭仁祥，等.银杏叶黄酮苷含量与生长季节和植株性别的相 关性研究.中国中药杂志.1998,23(5)∶ 267
, http://www.100md.com
3，范怡梅，王勇，张祖暄.银杏叶中萜类内酯含量与生长季节及植株性别的相 关性研究.中国中药杂志，1999，24(2)∶ 82
4，胡敏，张声华.银杏黄酮苷的不同提取精制方法比较.武汉大学学报(自然科学 版).1998，44(2)∶ 255
5，陈冲，罗思齐.银杏叶提取物的生产工艺条件的研究.中草药，1997，28(7)∶ 402
6，李新岗，韦玮，陈薇.富含银杏内酯的银杏叶干浸膏制备工.中国医药工业杂志 ，1998，29(1)∶ 8
7，Teris A, Van Beek, Gerrit P. Preparative isolation and separation procedure for Ginkgolides A, B, C, J and Bilobalide. J Nat Prod, 1997, 60(7)∶ 735
, 百拇医药
8，姚渭溪.银杏叶中活性成分的提取工艺测定及其进展.中草药，1995，26(3)∶ 157
9，邓启焕，高勇. 第二类超临界流体萃取银杏叶有效成分的实验研究.中草药,199 9,30(6)∶ 419
10，夏开元.二氧化碳超临界流体萃取研究进展.中成药，1997，19(5)∶ 43
11，Chen Po, Su XL, Nie LH, et al. Analysis of G inkgolides and Bilobalide in Ginkgo biloba L. Extract for its production process control by high-performance liquid chromatography. J Chrom atogr Sci, 1998, 36(1-2)∶ 197
, http://www.100md.com 12，Yang FQ, Zhang TT, Mo BX, et al. Preparative Separation and pnrification of baempferol, isorhamnetin, and quercetin by high-speed countercurrent chromatography. J Liq Chromatogr Relat Technol, 1998, 21(1)∶ 209
13，蔡定国，缪平，顾明娟.高速逆流色谱法从银杏叶分离异鼠李素、山奈酚和 槲皮素对照品.中药新药与临床药理，1999，10(1)∶ 44
14，孙天恩，李根保.银杏发根克隆及其培养技术研究展.中草药，1998，29 (增刊)∶25
15，杨天鸣，陆俭洁，吴士筠，等.示波滴定法测定银杏叶提取物中总黄酮的含量.中草药， 1998(增刊)∶ 54
, 百拇医药
16，刘志敏，赵锁奇，王仁安，等.黄酮类化合物的超临界流体色谱分离.分析化学，1997， 25(3)∶ 272
17，Stuart A. Oehrle Aralysis of Ginkgolides and Bilobalides by capillary electrophoresis. J Liq Chromatogr, 1995, 18(14)∶ 2855
18，陈维军，谢笔钧，胡慰望.分光光度法快速测定银杏叶中萜内酯含量的研究. 中草药，1998，29(增刊)∶ 45
19，Biber A, Koch E. Bioavailaility of Gindglides and Bilobalide from extracts of Ginkgo biloba using GC/MS. Planta Med, 1999,65(1)∶ 1921
收稿：1999-10-18
修回：2000-01-25, 百拇医药
单位：佘佳红 袁伯俊(第二军医大学新药评价中心，上海 200433)；柳正良(第二军医大学药学院， 上海 200433)
关键词：银杏叶；活性成分；提取工艺；测定方法
中国新药杂志000403
摘要 银杏叶制剂是治疗心脑血管病的高效、安全的天然产物制剂，其活性成分与产地、采收季节 、植株性别、提取工艺及测定方法等有很大关系。本研究就其最新研究进展作一综述。
THE DEVELOPMENT IN STUDIES OF EXTRACTION PROCESSES AND
DETERMINATION METHODS FOR ACTIVE COMPONENTS OF GINKGO BILOBA LEAVES
, 百拇医药
She Jiahong Yuan Bojun Liu Zhengliang
(The Center of New Drug Evaluation, The Second Military University of Medical Sciences, Shanghai 200433)
ABSTRACT Extracts of the leaves of Ginkgo biloba L. (GBE) are used as phytomedicines to i ncrease peripheral and cerebral blood flow. The quantity of available compositio ns of GBE has relation to many factors, such as the time of collection, the plac e it has been planted and the sex of the plant etc. The studies on its development were reviewed in this paper.
, 百拇医药
KEY WORDS Ginkgo biloba leaves; Active components; Extraction; Determination
银杏叶提取物(GBE)具有独特的药理活性及巨大的临床应用价值，因此对银杏叶的药 用、保健等综合价值的深入挖掘和开发日益受到重视。本文就银杏叶的化学成分、提取分离 及其质量控制方面的最新进展作一综述。
1 银杏叶的化学成分
银杏叶的化学成分较为复杂，迄今为止，已从银杏叶中分离出大量的极性和非极性化合物， 其中主要为黄酮类化合物、萜类内酯，此外还有有机酸、烷基酚和烷基酚酸、甾体化合物及 微量元素等。
1.1 EGb761的化学组成 GBE具有多种生理活性，目前国际上标准银杏 叶提取物是按德国Schwabe专利工艺生产的EGb761，其中黄酮含量为24%，萜内酯为6%，白果 酸小于0.0005%，原花青素类7.0%，羧酸类成分13.0%，儿茶素类2.0%，非黄酮苷类20%，高 分子化合物4.0%，无机物5.0%，水分溶剂3.0%，其他3.0%。提取物的各种成 分是一个 整体中有机的组成部分，EGb761的药理作用是各种相对固定组成的各组分共同作用的结果。
, 百拇医药
1.2 化学成分的动态变化 目前比较公认的GBE的有效成分为黄酮类化合物和萜类内酯，而 它们在叶中的含量随季节变化和植株性别差异会有较大变化。苑可武等[1]测定了 北京地区 银杏叶中黄酮含量的季节性变化，结果认为银杏叶总黄酮含量在4月份为最高，8月份时居次 ；同时发现大部分时期内以槲皮素为主而异鼠李素比例相对一直较小。南京大学药物研究所 对银杏叶中黄酮苷与萜类内酯含量分别进行研究[2，3]，结果发现黄酮苷含量以 5月份为最 高，以后逐月降低，雄性植株叶中黄酮含量明显高于雌性植株；而同株银杏树叶中萜类内酯 含量随季节变化规律与黄酮苷相异，同时发现雌性植株叶子中内酯含量明显高于雄性植株， 分别为0.22%,0.09%。这一发现为我们充分利用自然资源提供了有价值的参考。
比较各地测定的银杏叶总内酯及黄酮苷含量，结果相差较大，除各自测定的方法的准确度或 系统误差外，银杏总内酯与黄酮苷是否与各地的土壤、气候、环境及银杏树的性别、树龄等 因素相关，还需做大量实验研究和分析统计工作。
, 百拇医药
2 银杏叶提取物的制备
2.1 有机溶剂提取法 这是国内外使用最为广泛的方法。由于银杏叶中含黄酮类化合物和内 酯较少(分别为1.7%及0.6%左右)，因此最终所得浸膏中此两类成分含量往往不高，所含杂 质较多，离目前通行的“24+6”标准较远。为得到能用于制药原料的GBE，则必须将此浸膏 进行进一步的分离纯化。常用的分离纯化方法有液-液萃取法、沉淀法和吸附洗脱法。胡敏 等[4]探讨了溶剂萃取和树脂吸附精制银杏叶黄酮的机制，比较了两种方 法，结果表明，树脂吸附精制法优于溶剂萃取精制法。
树脂吸附纯化法近年来有较大的发展。陈冲等[5]将银杏叶以65%乙醇回流提取，减 压浓缩， ZTC澄清剂沉降。其黄酮苷和内酯含量分别达到26%和6%以上。李新岗等[6]对吸附 银杏叶中 银杏总内酯的树脂法进行研究，用50%乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上724吸附树脂柱,最后 得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别为27.4%，10.6%。该法操作简单，能耗 低，投资少，安全可靠。树脂吸附生产工艺应用于银杏叶，其主要特点是成本低、回收率高 、有机溶剂残留少。
, 百拇医药
Teris等[7]对银杏内酯A，B，C，J与白果内酯的制备分离进行了研究。作者使用质 量分数为6.5% NaOAc浸泡的硅胶柱，以中压液相色谱分离GA，GB，GC，GJ和BB的方法 ， 先精制再分离 ，仅含1种内酯的色谱部位经重结晶3～4次可得纯品单体。
2.2 超临界CO2提取法 近年来，随着国际上超临界流体提取技术的迅速发展，用该技术提取植物中的活性 成分也越 来越广泛。与有机溶剂法相比，具有提取效率高，无溶剂残留，活性成分和热不稳定成分不 易被分解破坏等优点，通过控制温度和压力以及调节改性剂的种类和用量，还可以实现选择 性萃取和分离纯化，欧洲已有专利报道采用SFE技术除去银杏叶粗提物中的杂质。近年来国 内学者[8]也开始探索和研究用该技术提取银杏叶黄酮类化合物，得黄绿色精提物 ，收率为4.1%，其中黄酮苷含量在35%以上。邓启焕等[9]以银杏叶有效成分分离为 对象，建立了一套超临界流体小试、中试装置和实验方法，所得的提取物中银杏黄酮含量为 28%，银杏内酯含量为7.2%，均高于国际现行公认的质量标准。据夏开元等[10]报 道，以乙醇和用大孔树脂提取的银杏叶精提物，于CO2-SFE精制前，毒性成分白果酸含量 为2.0%，而用CO2-SFE精提后，白果酸含量降低到0.02%。Chen等[11]对SFE萃取 银杏内酯和白果内酯进行研究，认为在萃取过程中必须有改性剂的参与。用超临界CO2提 取银杏叶中的药用成分，已引起各国学者关注，成为新热点之一。
, 百拇医药
2.3 高速逆流色谱技术提取法 高速逆流色谱(high-speed counter current chromatogra phy, HSCCC)技术是一种不用任何固定载体的液-液分配色谱技术，具有两大突出优点：① 无因使用载体而固有的吸附现象；② 具有不同于一般色谱的分离方式，使其特别适用于 制备性分离。
用HSCCC技术提取分离银杏叶中黄酮苷及总内酯成分，已引起各国专家的重视。Yang等 [ 12]以及蔡定国等[13]先后报道了应用HSCCC技术，从银杏叶提取物中分离纯化 得到3种主要 苷元：槲皮素、山奈素、异鼠李素。我们还对HSCCC分离银杏总内酯的条件进行探索，目前 已成功分离制得白果内酯单体，和以GA，GB为主要成分的混合物，并仍在继续摸索新的分离 条件，以实现对银杏内酯的分离。HSCCC对样品的高分离效率、高产品纯度、无吸附和污染 等优点，将使其成为制备银杏黄酮苷元以及各银杏内酯和白果内酯对照品的较佳手段。
, 百拇医药
2.4 细胞和组织培养合成法 银杏黄酮类化合物以及萜类内酯主要存在于银杏叶片和根皮中 ，其含量较低，易受地域、季节、气候及植株性别限制而发生较大的含量变化，且银杏总体 资源十分有限，叶的采收具有季节性。继1991年Carrier等首次肯定了银杏组织培养物中有 银杏内酯存在后，陆续已有较多成功的实验室研究成果。孙天恩等[14]利用发根 农杆菌的 Ri质粒转化成功银杏叶的发根，其中银杏内酯的含量比较接近叶片，而银杏黄酮的含量则偏 低。但银杏发根具有生长速度快、有克隆性、遗传性稳定、筛选方便，无环境污染等优点， 是继细胞培养后发展起来的又一新的培养系统，并已有有关专利公布。虽然目前商品化产生 银杏内酯还是以叶片提取为主，但利用组织法生产及发根培养技术的前景令人注目。
3 银杏叶提取物及其制剂的质量研究进展
目前，国外生产银杏叶制剂的大厂将其制剂的标准化内涵进行了延伸，不仅建立在以有效成 分和毒性成分的基础上所制订的质控标准，还包括了原生药的种植采收和储藏的标准化，提 取分离以及其制剂生产工艺的标准化。EGb761即有其特殊的工艺和标准配合于每一道工序的 具体过程。而国际上一般公认的GBE质量指标仅着眼于最终产品的含量监控，国内外学者均 围绕这一标准，对银杏叶提取物及其制剂的主要成分的含量测定进行了广泛深入的研究 ，本文就其最新进展作一综述。
, 百拇医药
3.1 黄酮苷类 近年来对黄酮类成分的定量多采用酸水解后HPLC测定其中3种主要苷元的 含量。最近，杨天鸣等[15]报道了在含KBr的盐酸介质中，以KBrO3标准液为滴定 剂，用示波滴 定法测定银杏叶提取物中总黄酮的含量(以芦丁计)，方法简单方便，快速准确，与分光光 度法的测定结果无显著性差异(99%置信度)。刘志敏等[16]运用最新发展起来的 超临界流 体色谱法成功地分离了黄酮类化合物，为银杏叶提取物中黄酮类化合物的分离分析开辟了一 条新的途径。
3.2 萜类内酯 由于萜类内酯在银杏叶中含量较低，且自身的特征紫外吸收峰很弱，用紫外 检测器测定比较困难，受杂质干扰严重，因而其定量多采用示差折光检测器(RI)检测。St uart 等[17]报道了运用MECC法分离分析银杏内酯A，B及白果内酯，于波长185nm 处进行检测 ，成功也将三者进行分离，但至今尚未见进一步报道。陈维军等[18]研究并提出了 应用羟肟酸 铁反应测定银杏叶及其提取物中总内酯含量的分光光度法，其最低检测限为45μg/ml，线性 范围为0～0.9mg/ml，方法操作简便快速，对设备要求不高，可应用于银杏叶制剂的含量测 定。Biber等[19]在对银杏内酯及白果内酯的生物利用度进行研究时，运用G C-MS法测 定血浆中GA，GB，BB的浓度，以最低剂量给药时测得血药浓度峰值分别为68，40，159μg/m l。
, 百拇医药
4 结语
银杏叶提取物及其制剂是近代植物药开发研究的热点之一，要使我国的银杏叶相关产业摆脱 低水平重复、产品不稳定的因素造成的落后局面，使之有能力参与国际大市场的激烈竞争， 应借鉴国外的先进经验，以标准化的原料和标准化的生产工艺来生产高质量的标准化银杏叶 提取物及其制剂。在此基础上，紧密结合药理学、植物化学、分析化学等各学科，在进一步 深入研究银杏叶中确切的有效成分的同时，将传统的中医中药理论融入对资源的充分合理利 用中，则银杏叶的综合开发必将展现广阔的前景，成为中药现代化进程中坚实的一步。
参考文献
1，苑可武，孟宪惠，徐文豪.银杏叶中黄酮含量的季节性变化.中草药，1 997，28(4)∶ 211
2，范怡梅，王勇，谭仁祥，等.银杏叶黄酮苷含量与生长季节和植株性别的相 关性研究.中国中药杂志.1998,23(5)∶ 267
, http://www.100md.com
3，范怡梅，王勇，张祖暄.银杏叶中萜类内酯含量与生长季节及植株性别的相 关性研究.中国中药杂志，1999，24(2)∶ 82
4，胡敏，张声华.银杏黄酮苷的不同提取精制方法比较.武汉大学学报(自然科学 版).1998，44(2)∶ 255
5，陈冲，罗思齐.银杏叶提取物的生产工艺条件的研究.中草药，1997，28(7)∶ 402
6，李新岗，韦玮，陈薇.富含银杏内酯的银杏叶干浸膏制备工.中国医药工业杂志 ，1998，29(1)∶ 8
7，Teris A, Van Beek, Gerrit P. Preparative isolation and separation procedure for Ginkgolides A, B, C, J and Bilobalide. J Nat Prod, 1997, 60(7)∶ 735
, 百拇医药
8，姚渭溪.银杏叶中活性成分的提取工艺测定及其进展.中草药，1995，26(3)∶ 157
9，邓启焕，高勇. 第二类超临界流体萃取银杏叶有效成分的实验研究.中草药,199 9,30(6)∶ 419
10，夏开元.二氧化碳超临界流体萃取研究进展.中成药，1997，19(5)∶ 43
11，Chen Po, Su XL, Nie LH, et al. Analysis of G inkgolides and Bilobalide in Ginkgo biloba L. Extract for its production process control by high-performance liquid chromatography. J Chrom atogr Sci, 1998, 36(1-2)∶ 197
, http://www.100md.com 12，Yang FQ, Zhang TT, Mo BX, et al. Preparative Separation and pnrification of baempferol, isorhamnetin, and quercetin by high-speed countercurrent chromatography. J Liq Chromatogr Relat Technol, 1998, 21(1)∶ 209
13，蔡定国，缪平，顾明娟.高速逆流色谱法从银杏叶分离异鼠李素、山奈酚和 槲皮素对照品.中药新药与临床药理，1999，10(1)∶ 44
14，孙天恩，李根保.银杏发根克隆及其培养技术研究展.中草药，1998，29 (增刊)∶25
15，杨天鸣，陆俭洁，吴士筠，等.示波滴定法测定银杏叶提取物中总黄酮的含量.中草药， 1998(增刊)∶ 54
, 百拇医药
16，刘志敏，赵锁奇，王仁安，等.黄酮类化合物的超临界流体色谱分离.分析化学，1997， 25(3)∶ 272
17，Stuart A. Oehrle Aralysis of Ginkgolides and Bilobalides by capillary electrophoresis. J Liq Chromatogr, 1995, 18(14)∶ 2855
18，陈维军，谢笔钧，胡慰望.分光光度法快速测定银杏叶中萜内酯含量的研究. 中草药，1998，29(增刊)∶ 45
19，Biber A, Koch E. Bioavailaility of Gindglides and Bilobalide from extracts of Ginkgo biloba using GC/MS. Planta Med, 1999,65(1)∶ 1921
收稿：1999-10-18
修回：2000-01-25, 百拇医药