银屑病患者血清可溶性APO/Fas的表达
作者：张行 程浩 严建良 茅晓红
单位：张行 程浩 310009杭州，浙江大学肿瘤研究所；严建良 茅晓红 浙江大学附属第二医院皮肤科
关键词：
中华皮肤科杂志/990613
银屑病的发病机制的现代概念认为其与免疫-炎症网络和免疫活性细胞凋亡密切相关。为了进一步探讨银屑病发病与细胞凋亡和免疫应答调控的关系,我们对银屑病患者血清中的可溶性APO/Fas(sAPO/Fas)进行了检测。
一、材料和方法
1.检测对象:40例临床和病理确诊的门诊或住院银屑病患者,其中寻常型进行期银屑病35例,脓疱型3例,红皮病型2例；男31例,女9例；年龄11～67岁,平均44.26岁。正常对照组30例均为本院健康献血员。各抽取静脉血2mL,分离血清后置-40℃保存待测。
2.实验方法：采用双抗体夹心ELISA法。sAPO-1/Fas(CD95)ELISA试剂盒购于美国Biosource公司。具体步骤如下:将标本和标准品加入已包被抗人APO-1/Fas单抗的96孔酶标板中与单抗结合,37℃孵育2h;加入生物素化抗人sAPO-1/Fas抗体,经酶联并与TMB底物显色;终止后在450nm处测A值。A450值与sAPO-1/Fas浓度之间关系成正比,绘制标准曲线,从中求得标本中sAPO-1/Fas浓度(单位pg/mL)。所有患者血清及对照血清均同步测定。
3.实验数据及统计处理采用SPSS软件统计包进行。显著性概率水平为0.05。
二、结果
40例银屑病患者的血清sAPO-1/Fas水平在0.55～67.25(16.99±15.76)pg/mL,其四分位间距为7.63～18.38pg/mL;30例正常对照组的血清sAPO-1/Fas水平在0.07～15.75(4.61±5.01)pg/mL,其四分位间距为0.50～7.40pg/mL;两者差异有显著性(P<0.01)。其中寻常型银屑病患者(35例)血清sAPO-1/Fas水平为2.34～67.25(16.67±15.00)pg/mL,其四分位间距为8.00～18.00pg/mL;脓疱型银屑病(3例)均数为9.76pg/mL,红皮病型(2例)均数为33.5pg/mL。寻常型与正常对照组差异有显著性(P<0.01)。因脓疱型及红皮病型例数较少,故未做显著性检验。
三、讨论
APO-1/Fas(CD95)为相对分子质量48000的跨膜糖蛋白,属于TNF/NGF受体超家族,分布于正常人淋巴细胞及各种组织。APO-1/Fas与其配体或某些抗体结合后可导致快速的细胞凋亡。当APO-1/Fas以缺少跨膜区的可溶性形式出现时(sAPO-1),则可阻止APO-1配体诱导的细胞凋亡[1]。我们的实验表明银屑病患者外周血中sAPO-1显著增高,提示银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)表面的APO-1/Fas有较多的跨膜区丢失,即银屑病患者的PBMC表面的APO-1/Fas有缺陷。
我们检测的结果仅仅反映血液中的sAPO-1/Fas水平,至于皮损中的sAPO-1/Fas水平及其与CD4+T淋巴细胞的联系尚待进一步研究。我们的实验结果提示sAPO-1/Fas水平增高可能参与了银屑病的发病。此外红皮病型银屑病和脓疱型银屑病患者的sAPO-1水平较高,推测病情的轻重可能与sAPO-1水平有关。
参考文献
1 Tokano Y, Miake S, Kayagaki N, et al. Soluble Fas molecule in the serum of patients with systemic lupus erythematosus. J Clin Immunol, 1996,16:261-265.
(收稿：1998-11-20修回：1999-03-01), 百拇医药
单位：张行 程浩 310009杭州，浙江大学肿瘤研究所；严建良 茅晓红 浙江大学附属第二医院皮肤科
关键词：
中华皮肤科杂志/990613
银屑病的发病机制的现代概念认为其与免疫-炎症网络和免疫活性细胞凋亡密切相关。为了进一步探讨银屑病发病与细胞凋亡和免疫应答调控的关系,我们对银屑病患者血清中的可溶性APO/Fas(sAPO/Fas)进行了检测。
一、材料和方法
1.检测对象:40例临床和病理确诊的门诊或住院银屑病患者,其中寻常型进行期银屑病35例,脓疱型3例,红皮病型2例；男31例,女9例；年龄11～67岁,平均44.26岁。正常对照组30例均为本院健康献血员。各抽取静脉血2mL,分离血清后置-40℃保存待测。
2.实验方法：采用双抗体夹心ELISA法。sAPO-1/Fas(CD95)ELISA试剂盒购于美国Biosource公司。具体步骤如下:将标本和标准品加入已包被抗人APO-1/Fas单抗的96孔酶标板中与单抗结合,37℃孵育2h;加入生物素化抗人sAPO-1/Fas抗体,经酶联并与TMB底物显色;终止后在450nm处测A值。A450值与sAPO-1/Fas浓度之间关系成正比,绘制标准曲线,从中求得标本中sAPO-1/Fas浓度(单位pg/mL)。所有患者血清及对照血清均同步测定。
3.实验数据及统计处理采用SPSS软件统计包进行。显著性概率水平为0.05。
二、结果
40例银屑病患者的血清sAPO-1/Fas水平在0.55～67.25(16.99±15.76)pg/mL,其四分位间距为7.63～18.38pg/mL;30例正常对照组的血清sAPO-1/Fas水平在0.07～15.75(4.61±5.01)pg/mL,其四分位间距为0.50～7.40pg/mL;两者差异有显著性(P<0.01)。其中寻常型银屑病患者(35例)血清sAPO-1/Fas水平为2.34～67.25(16.67±15.00)pg/mL,其四分位间距为8.00～18.00pg/mL;脓疱型银屑病(3例)均数为9.76pg/mL,红皮病型(2例)均数为33.5pg/mL。寻常型与正常对照组差异有显著性(P<0.01)。因脓疱型及红皮病型例数较少,故未做显著性检验。
三、讨论
APO-1/Fas(CD95)为相对分子质量48000的跨膜糖蛋白,属于TNF/NGF受体超家族,分布于正常人淋巴细胞及各种组织。APO-1/Fas与其配体或某些抗体结合后可导致快速的细胞凋亡。当APO-1/Fas以缺少跨膜区的可溶性形式出现时(sAPO-1),则可阻止APO-1配体诱导的细胞凋亡[1]。我们的实验表明银屑病患者外周血中sAPO-1显著增高,提示银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)表面的APO-1/Fas有较多的跨膜区丢失,即银屑病患者的PBMC表面的APO-1/Fas有缺陷。
我们检测的结果仅仅反映血液中的sAPO-1/Fas水平,至于皮损中的sAPO-1/Fas水平及其与CD4+T淋巴细胞的联系尚待进一步研究。我们的实验结果提示sAPO-1/Fas水平增高可能参与了银屑病的发病。此外红皮病型银屑病和脓疱型银屑病患者的sAPO-1水平较高,推测病情的轻重可能与sAPO-1水平有关。
参考文献
1 Tokano Y, Miake S, Kayagaki N, et al. Soluble Fas molecule in the serum of patients with systemic lupus erythematosus. J Clin Immunol, 1996,16:261-265.
(收稿：1998-11-20修回：1999-03-01), 百拇医药