纸片血清标本肝功能体检实验研究及临床应用
作者：刘德喜 胡金贵 马丽侠
单位：武警甘肃总队医院核医学科
关键词：肝功能试验；HBsAg；ALT；CG；纸片血清标本
纸片血清标本肝功能体检实验研究及临床应用摘要：目的：探索一种用纸片血清标本法为基层部队广大官兵进行肝功能体检的新途径。方法：采用信件邮寄纸片血清标本进行HBsAg、ALT及CG等肝功能测定实验研究及临床应用。结果：100例HBsAg对照测定结果完全相同,100例CG及80例ALT对照测定结果无显著性差异(P>0.05)。1 728名基层部队官兵中HBsAg阳性者55例(3.2%)，伴有肝功能受损者20例(占HBsAg阳性者36.0%)；778名刚入伍新兵中HBsAg阳性者3例(0.4%)。结论：本研究为基层部队广大官兵就地进行肝功能体检提供了一种简便、可靠的方法。
分类号：R 446.61
, 百拇医药
文献标识码：A
文章编号：1007-8622(1999)01-0015-16
Experimental Study and Clinical Application of Serum-on-paper Samples in General Survey of Liver Function
LIU Dexi, HU Jingui, MA Lixia
Department of Nuclear Medicine, Hospital of Gansu Armed Police Division, 730050
Abstract:Purpose: To explore a new method of liver function examination with the serum-on-paper samples for basic army units. Methods: The serum-on-paper samples collected by post from basic army units were tested for HBsAg, ALT and CG. Results: The results of HBsAg examination in 100 cases were completely as same as the controls. The results of CG and ALT examinations respectively in 100 and 80 cases hadn’t significant differences as comparing with the controls(P>0.05). 55 cases were HBsAg positive in 1 728 officers and men of basic units, and 20 cases coexisted liver function damage (36.0%). 3 cases were HBsAg positive in 778 new recruits (0.4%). Conclusion: This research offered a reliable and convenient method to test the liver function for officers and men of basic units on the spot.
, 百拇医药
Key words: Liver function test; HBsAg; ALT; CG; Serum-on-paper sample
近几年的资料显示，病毒性肝炎在军队中的发病率占传染病总发病率的39.1%，居传染病首位，已成为威胁部队官兵健康的主要传染病之一[1]。加强对部队病毒性肝炎的监测具有重要意义。大多基层部队驻地偏远、分散，定期对人员集中进行肝功能测定困难较多。本文对肝功能测定的血清标本进行了纸片法远距离信件邮寄的研究，为广大基层部队官兵就地进行肝功能体检提供了一种简便、可靠的方法。目前已在武警部队多个支队2 506名官兵中进行了推广应用，取得了良好效果,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 滤纸：采用杭州产直径9 cm新华201型定量滤纸。
, 百拇医药
1.1.2 试剂：HBsAg测定采用兰州生物制品研究所供应的反向血凝法试剂盒；丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定按赖氏法配制；甘胆酸(CG)测定采用北京原子能院的放射免疫分析(RIA)试剂盒。
1.1.3 测定仪器：为西安FJ-2008自动r免疫计数器，上海自动生化分析仪等。
1.1.4 实验用血清标本：取自日常检测后的剩余标本，其中HBsAg100例，CG100例，ALT80例。
1.2 临床资料
基层部队官兵2 506名(含刚入伍新兵778人)，均为男性，年龄为17～40岁。来自武警甘肃总队定西、武威、酒泉、嘉峪关等支队、中队及机关。
1.3 方法
1.3.1 实验研究：采用我们曾报道的纸片血清标本浸离提取法[2]，对HBsAg、CG及ALT进行模拟条件下的纸片血清标本测定研究。
, 百拇医药
1.3.2 临床应用：①将滤纸用0.5%DXL稳定剂浸泡处理，晾干后剪成1/4大小，呈扇形，装入一专用袋内，每袋80人份，提供给有关基层部队。②基层部队卫生人员或下部队巡回医疗的人员采集官兵空腹静脉血2 ml，静置后分离出血清，用0.3 ml定量加样器吸取足量血清，均匀地涂加在滤纸片上，自然晾干。每份纸片预先在角处用铅笔编号，其顺序与血标本一致。将晾干后的纸片血清标本分别装入原袋内，用挂号信件邮寄给医院。③医院将收到的纸片血清标本折叠成筒状，放入小试管内，用微量加样器向纸筒内加入0.3 ml蒸馏水，用橡皮塞将试管口塞紧，浸泡2 h左右。将浸透后的纸片标本以1 000 rpm离心数分钟，弃去甩干的纸片，将试管底部的提取血清摇匀，直接吸取与新鲜标本等量的纸片标本提取血清进行测定。HBsAg及CG测定完全按照试剂盒规定的步骤操作，ALT测定在加基质前先加入0.2 mmol/L PP液0.1 ml，37℃温育5 min，其它步骤不变。
2 结果
2.1 准确度检验
, 百拇医药
2.1.1 与新鲜标本对照：100例HBsAg实验标本中阴性者46例，阳性者(滴度1∶8～>1∶256)54例，纸片血清标本与新鲜血清标本对照测定结果完全相同。100例CG及80例ALT对照测定结果无显著性差异(P>0.05)
2.1.2 回收试验：三种测定各取3份已知浓度的血清，分别加入三种不同浓度的标准品，作纸片法回收试验，回收率98.4%～108.6%。
2.2 精确度检验：取7～10种不同浓度血清进行双份纸片标本测定，其中HBsAg结果完全相同；CG及ALT批内平均CV<5%，RER<0.04。
2.3 温度及时间试验：在30℃左右气温条件下，将纸片血清标本放置1周后再进行浸泡提取，并与冰冻保存的新鲜血清标本分别进行HBsAg、ALT及CG对照测定，其结果均无显著性差异(P>0.05)。
2.4 基层部队肝功能测定：1 728名基层官兵纸片血清标本HBsAg阳性者55例(3.2%)，伴有CG异常者20例(占HBsAg阳性者36.0%)；其中13例HBsAg阳性者同时作了ALT测定，异常者2例(15.4%)。778例名刚入伍新兵纸片血清标本HBsAg阳性者3例(0.4%)，伴有CG异常者2例；其中滴度1∶8、1∶16及>1∶256者各1例，2例低滴度者来医院复查新鲜血HBsAg，其结果完全相符。
, 百拇医药
3 讨论
病毒性肝炎有多种类型，检测方法也有多种。作为部队定期健康查体，没有必要将所有的检测项目全部检测。合理的作法是先初筛，然后再对异常者进一步检查。目前对部队官兵进行体检时，常用的作法是检测肝功能指标ALT加测HBsAg。本文为提高患病的检出率，增加了CG测定项目。
CG是胆汁酸中主要成份之一，正常情况下肝脏能有效地清除门静脉中的胆汁酸，被溢流入体循环的总量少于1%。当肝功能障碍时，血中CG浓度则增高。大量的研究结果表明，血清CG测定是一项极敏感的肝功能试验，优于常规肝功能测定[3～6]。我们曾观察到：57例急性肝炎、23例肝硬化和6例重症肝炎患者CG测定阳性率均为100%，而ALT测定阳性率则分别为73.4%、21.7%、和50.0%[6]。因此CG测定对严重肝病的诊断具有决定性作用。
HBsAg阳性者如伴有CG值异常，说明同时有肝功能受损的情况，需要进行必要的治疗；如果CG值正常，一般认为是病毒携带者。本文查出的HBsAg阳性者中36%伴有肝功能受损，说明乙肝对部队的威胁是比较大的，应引起有关部门足够的重视。本文从刚到部队的新兵中查出0.4%HBsAg阳性者，提示基层部队在防治工作中不可忽视这部分传染源及患者。
, 百拇医药
由于日光对标本有破坏作用，取样后的纸片血清标本应置室内晾干，避免阳光直晒，晾干后及时装入原包装袋内封存、邮寄。
作者简介：刘德喜，男，48岁，主任医师，武警甘肃总队医院核医学科，兰州，730050
参考文献
[1] 韩光红，张习坦，范国英. 军队病毒性肝炎的流行特征及其预防对策探讨[J].解放军预防医学杂志，1997,15(1)：16
[2] 刘德喜，高若云，胡金贵. 纸片血清标本(浸离法)放免分析研究[J]. 武警医学，1990,1(3)：55
[3] Blankenstein MV. Endogenous bile acid tolerance test for liver function[J]. Dig Dis Sci, 1983,28(2):137
, http://www.100md.com
[4] Ferraeis R. Diagnostic value of serum bile acids and routine liver function tests in hepatobiliary disease[J]. Dig Dis Sci, 1983,28(2):129
[5] 袁爱力，刘为汶，罗元辉 等. 胆酸试验对肝胆胰疾病诊断价值的再评价[J]. 中华内科杂志，1985,24(7)：398
[6] 刘德喜. 885例CG-RIA与常规肝功能测定结果对照分析[J]. 放射免疫学杂志，1988,1：67
收稿日期：1998-06-13 修回：1998-09-21, 百拇医药
单位：武警甘肃总队医院核医学科
关键词：肝功能试验；HBsAg；ALT；CG；纸片血清标本
纸片血清标本肝功能体检实验研究及临床应用摘要：目的：探索一种用纸片血清标本法为基层部队广大官兵进行肝功能体检的新途径。方法：采用信件邮寄纸片血清标本进行HBsAg、ALT及CG等肝功能测定实验研究及临床应用。结果：100例HBsAg对照测定结果完全相同,100例CG及80例ALT对照测定结果无显著性差异(P>0.05)。1 728名基层部队官兵中HBsAg阳性者55例(3.2%)，伴有肝功能受损者20例(占HBsAg阳性者36.0%)；778名刚入伍新兵中HBsAg阳性者3例(0.4%)。结论：本研究为基层部队广大官兵就地进行肝功能体检提供了一种简便、可靠的方法。
分类号：R 446.61
, 百拇医药
文献标识码：A
文章编号：1007-8622(1999)01-0015-16
Experimental Study and Clinical Application of Serum-on-paper Samples in General Survey of Liver Function
LIU Dexi, HU Jingui, MA Lixia
Department of Nuclear Medicine, Hospital of Gansu Armed Police Division, 730050
Abstract:Purpose: To explore a new method of liver function examination with the serum-on-paper samples for basic army units. Methods: The serum-on-paper samples collected by post from basic army units were tested for HBsAg, ALT and CG. Results: The results of HBsAg examination in 100 cases were completely as same as the controls. The results of CG and ALT examinations respectively in 100 and 80 cases hadn’t significant differences as comparing with the controls(P>0.05). 55 cases were HBsAg positive in 1 728 officers and men of basic units, and 20 cases coexisted liver function damage (36.0%). 3 cases were HBsAg positive in 778 new recruits (0.4%). Conclusion: This research offered a reliable and convenient method to test the liver function for officers and men of basic units on the spot.
, 百拇医药
Key words: Liver function test; HBsAg; ALT; CG; Serum-on-paper sample
近几年的资料显示，病毒性肝炎在军队中的发病率占传染病总发病率的39.1%，居传染病首位，已成为威胁部队官兵健康的主要传染病之一[1]。加强对部队病毒性肝炎的监测具有重要意义。大多基层部队驻地偏远、分散，定期对人员集中进行肝功能测定困难较多。本文对肝功能测定的血清标本进行了纸片法远距离信件邮寄的研究，为广大基层部队官兵就地进行肝功能体检提供了一种简便、可靠的方法。目前已在武警部队多个支队2 506名官兵中进行了推广应用，取得了良好效果,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 滤纸：采用杭州产直径9 cm新华201型定量滤纸。
, 百拇医药
1.1.2 试剂：HBsAg测定采用兰州生物制品研究所供应的反向血凝法试剂盒；丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定按赖氏法配制；甘胆酸(CG)测定采用北京原子能院的放射免疫分析(RIA)试剂盒。
1.1.3 测定仪器：为西安FJ-2008自动r免疫计数器，上海自动生化分析仪等。
1.1.4 实验用血清标本：取自日常检测后的剩余标本，其中HBsAg100例，CG100例，ALT80例。
1.2 临床资料
基层部队官兵2 506名(含刚入伍新兵778人)，均为男性，年龄为17～40岁。来自武警甘肃总队定西、武威、酒泉、嘉峪关等支队、中队及机关。
1.3 方法
1.3.1 实验研究：采用我们曾报道的纸片血清标本浸离提取法[2]，对HBsAg、CG及ALT进行模拟条件下的纸片血清标本测定研究。
, 百拇医药
1.3.2 临床应用：①将滤纸用0.5%DXL稳定剂浸泡处理，晾干后剪成1/4大小，呈扇形，装入一专用袋内，每袋80人份，提供给有关基层部队。②基层部队卫生人员或下部队巡回医疗的人员采集官兵空腹静脉血2 ml，静置后分离出血清，用0.3 ml定量加样器吸取足量血清，均匀地涂加在滤纸片上，自然晾干。每份纸片预先在角处用铅笔编号，其顺序与血标本一致。将晾干后的纸片血清标本分别装入原袋内，用挂号信件邮寄给医院。③医院将收到的纸片血清标本折叠成筒状，放入小试管内，用微量加样器向纸筒内加入0.3 ml蒸馏水，用橡皮塞将试管口塞紧，浸泡2 h左右。将浸透后的纸片标本以1 000 rpm离心数分钟，弃去甩干的纸片，将试管底部的提取血清摇匀，直接吸取与新鲜标本等量的纸片标本提取血清进行测定。HBsAg及CG测定完全按照试剂盒规定的步骤操作，ALT测定在加基质前先加入0.2 mmol/L PP液0.1 ml，37℃温育5 min，其它步骤不变。
2 结果
2.1 准确度检验
, 百拇医药
2.1.1 与新鲜标本对照：100例HBsAg实验标本中阴性者46例，阳性者(滴度1∶8～>1∶256)54例，纸片血清标本与新鲜血清标本对照测定结果完全相同。100例CG及80例ALT对照测定结果无显著性差异(P>0.05)
2.1.2 回收试验：三种测定各取3份已知浓度的血清，分别加入三种不同浓度的标准品，作纸片法回收试验，回收率98.4%～108.6%。
2.2 精确度检验：取7～10种不同浓度血清进行双份纸片标本测定，其中HBsAg结果完全相同；CG及ALT批内平均CV<5%，RER<0.04。
2.3 温度及时间试验：在30℃左右气温条件下，将纸片血清标本放置1周后再进行浸泡提取，并与冰冻保存的新鲜血清标本分别进行HBsAg、ALT及CG对照测定，其结果均无显著性差异(P>0.05)。
2.4 基层部队肝功能测定：1 728名基层官兵纸片血清标本HBsAg阳性者55例(3.2%)，伴有CG异常者20例(占HBsAg阳性者36.0%)；其中13例HBsAg阳性者同时作了ALT测定，异常者2例(15.4%)。778例名刚入伍新兵纸片血清标本HBsAg阳性者3例(0.4%)，伴有CG异常者2例；其中滴度1∶8、1∶16及>1∶256者各1例，2例低滴度者来医院复查新鲜血HBsAg，其结果完全相符。
, 百拇医药
3 讨论
病毒性肝炎有多种类型，检测方法也有多种。作为部队定期健康查体，没有必要将所有的检测项目全部检测。合理的作法是先初筛，然后再对异常者进一步检查。目前对部队官兵进行体检时，常用的作法是检测肝功能指标ALT加测HBsAg。本文为提高患病的检出率，增加了CG测定项目。
CG是胆汁酸中主要成份之一，正常情况下肝脏能有效地清除门静脉中的胆汁酸，被溢流入体循环的总量少于1%。当肝功能障碍时，血中CG浓度则增高。大量的研究结果表明，血清CG测定是一项极敏感的肝功能试验，优于常规肝功能测定[3～6]。我们曾观察到：57例急性肝炎、23例肝硬化和6例重症肝炎患者CG测定阳性率均为100%，而ALT测定阳性率则分别为73.4%、21.7%、和50.0%[6]。因此CG测定对严重肝病的诊断具有决定性作用。
HBsAg阳性者如伴有CG值异常，说明同时有肝功能受损的情况，需要进行必要的治疗；如果CG值正常，一般认为是病毒携带者。本文查出的HBsAg阳性者中36%伴有肝功能受损，说明乙肝对部队的威胁是比较大的，应引起有关部门足够的重视。本文从刚到部队的新兵中查出0.4%HBsAg阳性者，提示基层部队在防治工作中不可忽视这部分传染源及患者。
, 百拇医药
由于日光对标本有破坏作用，取样后的纸片血清标本应置室内晾干，避免阳光直晒，晾干后及时装入原包装袋内封存、邮寄。
作者简介：刘德喜，男，48岁，主任医师，武警甘肃总队医院核医学科，兰州，730050
参考文献
[1] 韩光红，张习坦，范国英. 军队病毒性肝炎的流行特征及其预防对策探讨[J].解放军预防医学杂志，1997,15(1)：16
[2] 刘德喜，高若云，胡金贵. 纸片血清标本(浸离法)放免分析研究[J]. 武警医学，1990,1(3)：55
[3] Blankenstein MV. Endogenous bile acid tolerance test for liver function[J]. Dig Dis Sci, 1983,28(2):137
, http://www.100md.com
[4] Ferraeis R. Diagnostic value of serum bile acids and routine liver function tests in hepatobiliary disease[J]. Dig Dis Sci, 1983,28(2):129
[5] 袁爱力，刘为汶，罗元辉 等. 胆酸试验对肝胆胰疾病诊断价值的再评价[J]. 中华内科杂志，1985,24(7)：398
[6] 刘德喜. 885例CG-RIA与常规肝功能测定结果对照分析[J]. 放射免疫学杂志，1988,1：67
收稿日期：1998-06-13 修回：1998-09-21, 百拇医药