乙型肝炎病毒S基因经显微注射导入SMMC-7721细胞核内的表达
作者：黄良田
单位：
关键词：
第四军医大学学报001068 [焦成松, 周永兴, 朱德生 et al. 世界华人消化杂志, 2000; 8(1): 25-27]
目的 探讨细胞核显微注射导入外源基因的方法,观察HBV-S基因导入人肝癌细胞株SMMC-7721后的表达及其稳定性. 方法 将含有HBV-S片段的质粒pCR3.1-S线性化,通过显微注射仪直接注入培养的SMMC-7721细胞核内,G418筛选后,经EIA和免疫荧光法分别检测细胞培养上清和细胞内HBsAg的表达. 结果 每注射100～150个细胞可筛选出一个阳性克隆,3个阳性克隆经扩大培养后,其中1个克隆的培养上清经EIA法检测HBsAg阳性,免疫荧光显示细胞膜及细胞质均有HBsAg表达,并持续6 mo以上. 结论 HBV-S基因经显微注射导入SMMC-7721细胞后获得持续稳定的表达., http://www.100md.com
单位：
关键词：
第四军医大学学报001068 [焦成松, 周永兴, 朱德生 et al. 世界华人消化杂志, 2000; 8(1): 25-27]
目的 探讨细胞核显微注射导入外源基因的方法,观察HBV-S基因导入人肝癌细胞株SMMC-7721后的表达及其稳定性. 方法 将含有HBV-S片段的质粒pCR3.1-S线性化,通过显微注射仪直接注入培养的SMMC-7721细胞核内,G418筛选后,经EIA和免疫荧光法分别检测细胞培养上清和细胞内HBsAg的表达. 结果 每注射100～150个细胞可筛选出一个阳性克隆,3个阳性克隆经扩大培养后,其中1个克隆的培养上清经EIA法检测HBsAg阳性,免疫荧光显示细胞膜及细胞质均有HBsAg表达,并持续6 mo以上. 结论 HBV-S基因经显微注射导入SMMC-7721细胞后获得持续稳定的表达., http://www.100md.com