血清白细胞介素-6、透明质酸评价丹参治疗慢性肝炎的意义
作者：汪毅 李谨革 潘蕾 白雪帆
单位：北京军区总医院肝病研究所，北京 100700 汪毅 第四军医大学唐都医院传染科，西安 710038 李谨革 潘蕾 白雪帆
关键词：慢性肝炎；丹参；白细胞介素-6；透明质酸
血清白细胞介素 摘要 目的：探讨血清白细胞介素-6 (IL-6) 和透明质酸(HA)评价丹参注射液治疗慢性肝炎的临床价值。方法：采用双抗体夹心ELISA法和放射免疫分析法(RIA)，分别检测 20 例健康献血员及 32 例慢性病毒性肝炎(中度)患者血清 IL-6、HA水平，随机将患者分为两组，分别给予丹参注射液或葡萄糖治疗 4 周后复查，观察血清 IL-6、HA水平及其与ALT、TBIL的关系、和丹参治疗前后上述指标的变化。结果：慢性肝炎患者血清 IL-6 和HA明显高于正常组，其水平与ALT及TBIL呈显著正相关(P均<0.01)；丹参注射液治疗慢性肝炎，在降低ALT(P<0.01)的同时，可明显降低血清 IL-6 和HA(P均<0.05)。结论：血清 IL-6 和HA可作为肝细胞损伤的检测指标，可用于丹参治疗慢性肝炎的评价，同时本文提示丹参治疗在保护肝细胞、抗纤维化的同时，可能具有一定的免疫调节作用。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R 512.62
Evaluation of the therapeutic effects of radix salviae miltiorrhizae on patients with chronic hepatitis by serum interleukin-6 and hyaluronic acid
Wang Yi, Li Jingge, Pan Lei, Bai Xuefan
(Institute of Hepatology, Beijing Army General Hospital, Beijing 100700)
Abstract Objective:To study the clinic value of serum interleukin-6 (IL-6) and hyaluronic acid (HA) in evaluation the therapeutic effects of radix salviae miltiorrhizae (RSM) on patients with chronic hepatitis. Methods:serum IL-6 and HA were measured in 20 health blood donors and 32 patients with moderate degree of chronic hepatitis by using ELISA and RIA, and which were also determined in patients after RSM or glucose (control group) treatment for 4 weeks. Results:Serum IL-6 and HA in patients with chronic hepatitis were significantly higher than which in health donors, and their levels correlated positively with ALT and TBIL (P<0.01, respectively). RSM therapy decreased significantly the levels of IL-6 and HA (P<0.05, respectively), meanwhile declined serum ALT in the hepatitis patients (P<0.01). Conclusion:Serum IL-6 and HA determination may provide some clinic value in evaluation of hepatocellular lesions and the RSM therapeutic effects on patients with chronic hepatitis. The results also suggest that RSM therapy may have some benefit for immune regulation in hepatitis patients.
, 百拇医药
Key words chronic hepatitis; radix salviae miltiorrhizae (RSM); interleukin-6(IL-6)； hyaluronic acid(HA)
研究表明慢性病毒性肝炎发病机制中，免疫损伤具有十分重要的意义，许多细胞因子，如白细胞介素-2 (IL-2)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等，均参与了其免疫应答的调节并与肝细胞的炎症性损伤密切相关〔1〕；透明质酸(HA)升高是肝细胞损伤和活动性纤维化的定位标志〔2〕。但二者作为肝细胞损伤指标的临床价值有待探讨。而丹参用于临床治疗慢性肝炎，以其改善微循环、消除内毒素、保护肝细胞、抗纤维化等作用得到肯定。本文测定了 20 例健康献血员和 32 例慢性病毒性肝炎(中度)患者丹参注射液治疗前后血清 IL-6 和HA水平，旨在探讨 IL-6 和HA作为肝细胞损伤指标的意义。
1 对象和方法
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1.1 对象 慢性病毒性肝炎(中度) 32 例，系第四军医大学唐都医院传染科 1996 年 9 月～12 月间住院患者，诊断标准参照 1995 年 5 月北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议制定的病毒性肝炎防治方案〔3〕。其中男 25 例，女 7 例，年龄 24～49 岁(平均 35 岁)。经病毒血清学及PCR检测确诊为：乙型肝炎 25 例，丙型肝炎 7 例。 20 例血库献血员为正常对照组。
1.2 方法 ①治疗组：丹参注射液 20 ml (含生药 30 g)，加入 5% 葡萄糖 500 ml， 1/d，静点；②对照组： 5% 葡萄糖 500 ml， 1/d，静点，共 4 周。其它治疗两组同为口服维生素、肌苷、肝泰乐等，治疗前 1 月及治疗期间避免使用联苯双酯、五灵丸等强力降酶药或免疫调节剂和抗纤维化药物。分别于治疗前后留取血清， -20 ℃ 保存待检。
1.3 检测与统计 IL-6 和HA检测分别采用双抗体夹心ELISA法及放射免疫分析法，检测试剂盒分别由第四军医大学免疫学教研室和上海海军医学研究所生物技术中心提供。严格按说明操作，复孔(管)测定。统计学处理采用t检验及多元回归分析。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 慢性肝炎患者血清 IL-6、HA及其与丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)之间的关系 慢性肝炎(中度)患者血清 IL-6 和HA明显高于正常组(表 1)，同时 IL-6 和HA分别与ALT、TBIL呈显著正相关，其多元回归方程分别为： IL-6 (pg/ml)=50.00 + 0.41ALT (U/L) +1.98 TBIL (μmol/L) (R2＝0.8814，P<0.01)； HA (ng/ml)=89.62 + 0.49ALT (U/L) + 2.94 TBIL (μmol/L) (R2＝0.8190，P<0.01)。提示血清 IL-6 和HA可作为慢性肝炎肝细胞损伤的检测指标。而乙型和丙型肝炎间血清 IL-6 及HA水平无统计学差异(资料未显示)。
表1 慢性肝炎患者血清 IL-6、HA及ALT、TBIL水平
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组 别
例数
IL-6(pg/ml)
HA(ng/ml)
ALT(U/L)
TBIL(μmol/L)
正常组
20
77.15±15.13
54.16±6.26
25.01±3.19
10.40±5.31
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慢性肝炎
32
176.13±54.89**
256.62±74.43**
179.22±68.76**
39.44±31.21*
* 与正常组比较 P<0.05；** 与正常组比较 P<0.01
2.2 丹参注射液治疗前后血清 IL-6，HA及ALT、TBIL水平的变化 慢性肝炎患者丹参治疗后ALT及血清 IL-6、HA均显著下降(表 2)，提示血清 IL-6 和HA作为丹参对慢性肝炎治疗的评价指标具有一定的临床价值，同时提示丹参治疗可能具有一定的免疫调节作用。 表2 慢性肝炎患者丹参治疗前后血清 IL-6、HA及ALT、TBIL水平
, http://www.100md.com
分 组
IL-6(pg/ml)
HA(ng/ml)
ALT(U/L)
TBIL(μmol/L)
对照组 治疗前
169.82±41.86
261.24±74.30
179.72±68.76
39.44±31.27
治疗后
132.44±30.21*
, http://www.100md.com
202.98±60.12*
86.52±33.96**
27.86±21.45
治疗组 治疗前
178.03±45.75
256.62±68.73
168.46±55.38
42.36±28.05
治疗后
109.67±29.14**△
, 百拇医药 156.07±64.51**△
54.47±23.81**△△
29.08±17.11
注：对照组 12 例；治疗组 20 例。
* 与治疗前比较 P<0.05；** 与治疗前比较 P<0.01；△与对照组比较 P<0.05；△△与对照组比较 P<0.01
3 讨 论
IL-6 具有十分活跃的生物学活性，广泛参与机体的免疫调节，如B细胞的增殖分化、抗体产生、T细胞的激活转化及机体的应急反应等过程。研究表明在各型病毒性肝炎的发病机制中，免疫损伤占有十分重要的位置，许多细胞因子参与其免疫调节及炎症过程〔1〕。慢性肝炎时肝组织中浸润大量的淋巴及非淋巴细胞均可产生 IL-6 等细胞因子，过量的细胞因子可促进肝内的炎症反应，介导肝细胞损伤，诱导肝内各类细胞的分化与增殖〔4〕。本文发现慢性肝炎患者血清 IL-6 明显高于正常组，与ALT、TBIL呈显著正相关，提示 IL-6 在慢性肝炎的免疫损伤中可能具有一定的意义，可作为慢性肝炎肝细胞损伤的一项检测指标，与Antonic〔5〕及王新〔4〕等的报道一致。HA是由间质细胞产生的与纤维化密切相关的细胞外间质成分，可反映肝脏内皮细胞功能及肝纤维化的程度。慢性肝炎时肝内皮细胞受到损伤，影响了HA的摄取与分解，同时肝细胞坏死导致间质细胞增生，HA合成加速，二者共同作用使血中HA水平升高〔2〕。高峰〔6〕等亦报道血清HA与肝细胞损伤密切相关，HA水平与ATL呈正相关，和本文结果一致，提示HA同样可作为肝细胞损伤的标志。
, 百拇医药
大量研究证实丹参具有改善肝脏微循环、消除内毒素、保护肝细胞、抗纤维化等方面的作用，已被广泛用于慢性肝炎及肝纤维化的治疗。国内报道丹参可降低中毒性大鼠血清的脂质过氧化物和ALT水平，减轻肝细胞的变性坏死，提示丹参具有保护肝细胞和抗纤维化作用〔7〕。本研究发现使用丹参注射治疗 4 周，ALT降低的同时，血清 IL-6 及HA明显下降，进一步提示血清 IL-6、HA作为肝细胞损伤检测指标的意义。叶红军〔8〕等报告丹参可增强网状内皮细胞的吞噬作用和调理素活性，并是天然的抗氧化剂，可清除对细胞有害的氧自由基，保护肝细胞膜和线粒体膜等的完整性和通透性，从而降低血清 IL-6 水平。除与其保护肝细胞、抑制间质细胞增生作用等有关外，丹参还可能通过调节细胞因子水平及免疫系统的功能，降低肝细胞的免疫损伤。提示丹参治疗在保护肝细胞和抗纤维化的同时可能具有一定的免疫调节作用，在慢性肝炎的治疗中不失为一种价廉而有效的方法。
参考文献
, 百拇医药 1 Forre D, Zenoli V, Giola M et al. Serum levels of interleukin-1 & interleukin-1β, interleukin-6 and tumor necrosis factor in patients with acute viral hepatitis. Clin Infect Dis, 1994，18:194
2 李伟道，林 丁，刘兴民等.血清透明质酸测定诊断肝病的初步评价.中华内科杂志，1992，31：92
3 中华医学会.病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13：241
4 王 新，许才绂，赵国宁等.TNF-α、IL-6 和 IL-8 与慢性肝病的关系.中华传染病杂志，1997，15；85
5 Antonic J, Marlin QJ, Paras M et al. Serum levels soluble immune factors and pathogenisis of chronic hepatitis C and their relation to therapeutic response to interferon-α. Dis and Sci, 1994,39:2485
6 高 峰，孔宪涛，王笑利等.细胞外间质成分与肝病关系的研究.中华内科杂志，1994，33：109
7 叶红军，宋维汉，陈致诚等.丹参和白细胞介素-1 防治大鼠免疫性肝纤维化的实验研究.中华消化杂志，1994，14：266
8 叶红军，高洪文，刘少田等.丹参及干扰素对成纤维细胞分泌和形态的影响.临床肝胆病杂志，1997，13：134
(1999—01—15收稿，1999—02—15修回), 百拇医药
单位：北京军区总医院肝病研究所，北京 100700 汪毅 第四军医大学唐都医院传染科，西安 710038 李谨革 潘蕾 白雪帆
关键词：慢性肝炎；丹参；白细胞介素-6；透明质酸
血清白细胞介素 摘要 目的：探讨血清白细胞介素-6 (IL-6) 和透明质酸(HA)评价丹参注射液治疗慢性肝炎的临床价值。方法：采用双抗体夹心ELISA法和放射免疫分析法(RIA)，分别检测 20 例健康献血员及 32 例慢性病毒性肝炎(中度)患者血清 IL-6、HA水平，随机将患者分为两组，分别给予丹参注射液或葡萄糖治疗 4 周后复查，观察血清 IL-6、HA水平及其与ALT、TBIL的关系、和丹参治疗前后上述指标的变化。结果：慢性肝炎患者血清 IL-6 和HA明显高于正常组，其水平与ALT及TBIL呈显著正相关(P均<0.01)；丹参注射液治疗慢性肝炎，在降低ALT(P<0.01)的同时，可明显降低血清 IL-6 和HA(P均<0.05)。结论：血清 IL-6 和HA可作为肝细胞损伤的检测指标，可用于丹参治疗慢性肝炎的评价，同时本文提示丹参治疗在保护肝细胞、抗纤维化的同时，可能具有一定的免疫调节作用。
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中国图书资料分类法分类号 R 512.62
Evaluation of the therapeutic effects of radix salviae miltiorrhizae on patients with chronic hepatitis by serum interleukin-6 and hyaluronic acid
Wang Yi, Li Jingge, Pan Lei, Bai Xuefan
(Institute of Hepatology, Beijing Army General Hospital, Beijing 100700)
Abstract Objective:To study the clinic value of serum interleukin-6 (IL-6) and hyaluronic acid (HA) in evaluation the therapeutic effects of radix salviae miltiorrhizae (RSM) on patients with chronic hepatitis. Methods:serum IL-6 and HA were measured in 20 health blood donors and 32 patients with moderate degree of chronic hepatitis by using ELISA and RIA, and which were also determined in patients after RSM or glucose (control group) treatment for 4 weeks. Results:Serum IL-6 and HA in patients with chronic hepatitis were significantly higher than which in health donors, and their levels correlated positively with ALT and TBIL (P<0.01, respectively). RSM therapy decreased significantly the levels of IL-6 and HA (P<0.05, respectively), meanwhile declined serum ALT in the hepatitis patients (P<0.01). Conclusion:Serum IL-6 and HA determination may provide some clinic value in evaluation of hepatocellular lesions and the RSM therapeutic effects on patients with chronic hepatitis. The results also suggest that RSM therapy may have some benefit for immune regulation in hepatitis patients.
, 百拇医药
Key words chronic hepatitis; radix salviae miltiorrhizae (RSM); interleukin-6(IL-6)； hyaluronic acid(HA)
研究表明慢性病毒性肝炎发病机制中，免疫损伤具有十分重要的意义，许多细胞因子，如白细胞介素-2 (IL-2)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等，均参与了其免疫应答的调节并与肝细胞的炎症性损伤密切相关〔1〕；透明质酸(HA)升高是肝细胞损伤和活动性纤维化的定位标志〔2〕。但二者作为肝细胞损伤指标的临床价值有待探讨。而丹参用于临床治疗慢性肝炎，以其改善微循环、消除内毒素、保护肝细胞、抗纤维化等作用得到肯定。本文测定了 20 例健康献血员和 32 例慢性病毒性肝炎(中度)患者丹参注射液治疗前后血清 IL-6 和HA水平，旨在探讨 IL-6 和HA作为肝细胞损伤指标的意义。
1 对象和方法
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1.1 对象 慢性病毒性肝炎(中度) 32 例，系第四军医大学唐都医院传染科 1996 年 9 月～12 月间住院患者，诊断标准参照 1995 年 5 月北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议制定的病毒性肝炎防治方案〔3〕。其中男 25 例，女 7 例，年龄 24～49 岁(平均 35 岁)。经病毒血清学及PCR检测确诊为：乙型肝炎 25 例，丙型肝炎 7 例。 20 例血库献血员为正常对照组。
1.2 方法 ①治疗组：丹参注射液 20 ml (含生药 30 g)，加入 5% 葡萄糖 500 ml， 1/d，静点；②对照组： 5% 葡萄糖 500 ml， 1/d，静点，共 4 周。其它治疗两组同为口服维生素、肌苷、肝泰乐等，治疗前 1 月及治疗期间避免使用联苯双酯、五灵丸等强力降酶药或免疫调节剂和抗纤维化药物。分别于治疗前后留取血清， -20 ℃ 保存待检。
1.3 检测与统计 IL-6 和HA检测分别采用双抗体夹心ELISA法及放射免疫分析法，检测试剂盒分别由第四军医大学免疫学教研室和上海海军医学研究所生物技术中心提供。严格按说明操作，复孔(管)测定。统计学处理采用t检验及多元回归分析。
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2 结 果
2.1 慢性肝炎患者血清 IL-6、HA及其与丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)之间的关系 慢性肝炎(中度)患者血清 IL-6 和HA明显高于正常组(表 1)，同时 IL-6 和HA分别与ALT、TBIL呈显著正相关，其多元回归方程分别为： IL-6 (pg/ml)=50.00 + 0.41ALT (U/L) +1.98 TBIL (μmol/L) (R2＝0.8814，P<0.01)； HA (ng/ml)=89.62 + 0.49ALT (U/L) + 2.94 TBIL (μmol/L) (R2＝0.8190，P<0.01)。提示血清 IL-6 和HA可作为慢性肝炎肝细胞损伤的检测指标。而乙型和丙型肝炎间血清 IL-6 及HA水平无统计学差异(资料未显示)。
表1 慢性肝炎患者血清 IL-6、HA及ALT、TBIL水平
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组 别
例数
IL-6(pg/ml)
HA(ng/ml)
ALT(U/L)
TBIL(μmol/L)
正常组
20
77.15±15.13
54.16±6.26
25.01±3.19
10.40±5.31
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慢性肝炎
32
176.13±54.89**
256.62±74.43**
179.22±68.76**
39.44±31.21*
* 与正常组比较 P<0.05；** 与正常组比较 P<0.01
2.2 丹参注射液治疗前后血清 IL-6，HA及ALT、TBIL水平的变化 慢性肝炎患者丹参治疗后ALT及血清 IL-6、HA均显著下降(表 2)，提示血清 IL-6 和HA作为丹参对慢性肝炎治疗的评价指标具有一定的临床价值，同时提示丹参治疗可能具有一定的免疫调节作用。 表2 慢性肝炎患者丹参治疗前后血清 IL-6、HA及ALT、TBIL水平
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分 组
IL-6(pg/ml)
HA(ng/ml)
ALT(U/L)
TBIL(μmol/L)
对照组 治疗前
169.82±41.86
261.24±74.30
179.72±68.76
39.44±31.27
治疗后
132.44±30.21*
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202.98±60.12*
86.52±33.96**
27.86±21.45
治疗组 治疗前
178.03±45.75
256.62±68.73
168.46±55.38
42.36±28.05
治疗后
109.67±29.14**△
, 百拇医药 156.07±64.51**△
54.47±23.81**△△
29.08±17.11
注：对照组 12 例；治疗组 20 例。
* 与治疗前比较 P<0.05；** 与治疗前比较 P<0.01；△与对照组比较 P<0.05；△△与对照组比较 P<0.01
3 讨 论
IL-6 具有十分活跃的生物学活性，广泛参与机体的免疫调节，如B细胞的增殖分化、抗体产生、T细胞的激活转化及机体的应急反应等过程。研究表明在各型病毒性肝炎的发病机制中，免疫损伤占有十分重要的位置，许多细胞因子参与其免疫调节及炎症过程〔1〕。慢性肝炎时肝组织中浸润大量的淋巴及非淋巴细胞均可产生 IL-6 等细胞因子，过量的细胞因子可促进肝内的炎症反应，介导肝细胞损伤，诱导肝内各类细胞的分化与增殖〔4〕。本文发现慢性肝炎患者血清 IL-6 明显高于正常组，与ALT、TBIL呈显著正相关，提示 IL-6 在慢性肝炎的免疫损伤中可能具有一定的意义，可作为慢性肝炎肝细胞损伤的一项检测指标，与Antonic〔5〕及王新〔4〕等的报道一致。HA是由间质细胞产生的与纤维化密切相关的细胞外间质成分，可反映肝脏内皮细胞功能及肝纤维化的程度。慢性肝炎时肝内皮细胞受到损伤，影响了HA的摄取与分解，同时肝细胞坏死导致间质细胞增生，HA合成加速，二者共同作用使血中HA水平升高〔2〕。高峰〔6〕等亦报道血清HA与肝细胞损伤密切相关，HA水平与ATL呈正相关，和本文结果一致，提示HA同样可作为肝细胞损伤的标志。
, 百拇医药
大量研究证实丹参具有改善肝脏微循环、消除内毒素、保护肝细胞、抗纤维化等方面的作用，已被广泛用于慢性肝炎及肝纤维化的治疗。国内报道丹参可降低中毒性大鼠血清的脂质过氧化物和ALT水平，减轻肝细胞的变性坏死，提示丹参具有保护肝细胞和抗纤维化作用〔7〕。本研究发现使用丹参注射治疗 4 周，ALT降低的同时，血清 IL-6 及HA明显下降，进一步提示血清 IL-6、HA作为肝细胞损伤检测指标的意义。叶红军〔8〕等报告丹参可增强网状内皮细胞的吞噬作用和调理素活性，并是天然的抗氧化剂，可清除对细胞有害的氧自由基，保护肝细胞膜和线粒体膜等的完整性和通透性，从而降低血清 IL-6 水平。除与其保护肝细胞、抑制间质细胞增生作用等有关外，丹参还可能通过调节细胞因子水平及免疫系统的功能，降低肝细胞的免疫损伤。提示丹参治疗在保护肝细胞和抗纤维化的同时可能具有一定的免疫调节作用，在慢性肝炎的治疗中不失为一种价廉而有效的方法。
参考文献
, 百拇医药 1 Forre D, Zenoli V, Giola M et al. Serum levels of interleukin-1 & interleukin-1β, interleukin-6 and tumor necrosis factor in patients with acute viral hepatitis. Clin Infect Dis, 1994，18:194
2 李伟道，林 丁，刘兴民等.血清透明质酸测定诊断肝病的初步评价.中华内科杂志，1992，31：92
3 中华医学会.病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13：241
4 王 新，许才绂，赵国宁等.TNF-α、IL-6 和 IL-8 与慢性肝病的关系.中华传染病杂志，1997，15；85
5 Antonic J, Marlin QJ, Paras M et al. Serum levels soluble immune factors and pathogenisis of chronic hepatitis C and their relation to therapeutic response to interferon-α. Dis and Sci, 1994,39:2485
6 高 峰，孔宪涛，王笑利等.细胞外间质成分与肝病关系的研究.中华内科杂志，1994，33：109
7 叶红军，宋维汉，陈致诚等.丹参和白细胞介素-1 防治大鼠免疫性肝纤维化的实验研究.中华消化杂志，1994，14：266
8 叶红军，高洪文，刘少田等.丹参及干扰素对成纤维细胞分泌和形态的影响.临床肝胆病杂志，1997，13：134
(1999—01—15收稿，1999—02—15修回), 百拇医药