扶正增效方对肺腺癌细胞放射增敏研究
作者：黄金昶 张代钊
单位：北京，中日友好医院肿瘤科 100029
关键词：
中华放射肿瘤学杂志000219 已知扶正增效方(由生黄芪、白术、太子参、枸杞子、鸡血藤、红花、苏木、茯苓、鸡内金、石斛、沙参、银花组成)在临床上配合肺癌放射治疗49例患者有效率为69.4%，1、2、3年生存率分别为79.4%、49.4%、23.3%。现将其对肺腺癌细胞放射增敏作用实验研究报道如下。
1 材料与方法
1.1 在体实验：选用C57雄性小鼠，体重18～20g，共58只；Lewis肺癌瘤株。将每只C57小鼠右大腿内侧皮下注射2×105个(0.2mL)Lewis肺癌细胞后，随机分为空白组、放射组、放射加增效方组。照射方法：接种后第10d给予瘤体5，10，15，20Gy单次X射线照射(空白组不照射)。给药方法：自接种之日起放射加增效方组的小鼠每只每天灌服1.18g(0.4mL)扶正增效方生药，余2个组灌服等容积蒸馏水。观察指标：记录各组平均生长延缓时间(各治疗组瘤积达4 cm3平均时间-对照组瘤积达4cm3平均时间)，经计算机多项式拟合程序计算，得出达到相同生长延缓时间所需放射剂量，计算增敏比(增敏比=放射组放射剂量/放射加增效方组放射剂量)。
, 百拇医药
1.2 在体离体实验：选用4～6周雌性裸小鼠，共24只；PAa人低转移肺腺癌细胞系。将24只裸小鼠左右大腿中上部内侧皮下各接种1.5×106个(0.3mL)PAa细胞，随机均分为空白组、增效方组、放射组、放射加增效方组。照射方法：接种第33d，单次给予放射组、放射加增效方组的瘤体10Gy X射线照射。给药方法：自接种之日起增效方组、放射加增效方组的小鼠每只每天灌服0.9g (0.3mL)扶正增效方生药，余2个组灌服等容积生理盐水。照射后23h取瘤体制备标本。观察指标：(1)应用FACSort流式细胞仪检测各时相细胞在细胞周期中的分布；(2)应用Northern blotting测定p53，C-myc mRNA表达情况，p53，C-myc的cDNA探针长度分别为1.8，1.5kB。
2 结果
2. 1 在体实验结果：(1)生长延缓时间：放射组、放射加增效方组照射剂量在5Gy以下，对瘤体生长至4cm3的时间影响较小。照射10Gy以上时，放射加增效方组在各剂量点的生长至4cm3的时间和生长延缓时间均长于放射组(P<0.05， 0.01)，详见表1。从剂量效应曲线看，两条曲线在15Gy剂量处距离最大，见图1。(2)放射增敏比：扶正增效方平均放射增敏比为1.21。
, 百拇医药
图1 C57小鼠Lewis肺癌的剂量效应关系曲线
表1 各组C57小鼠Lewis肺癌生长情况 组别
剂量
(Gy)
样本数
肿瘤达4cm3平均
时间(d，
±sd)
平均生长延缓
时间(d，±sd)
, 百拇医药
空白组
0
10
16.50±0.96
放射组
5
6
17.65±0.55
1.25±0.45
10
6
22.50±0.50■
6.00±0.47
, 百拇医药
15
6
26.30±1.02★
9.80±0.94
20
6
36.35±1.65★
19.85±1.26
放射加增
效方组
5
6
, http://www.100md.com
18.35±0.45
1.85±0.46
10
6
24.50±0.86■△
8.00±0.20△
15
6
32.46±1.06★▲
15.95±0.91▲
20
, 百拇医药
6
40.50±1.30★△
24.00±0.64△
注：■：与空白组比较 P<0.05，★：P<0.01；△：与放射组比较P<0.05， ▲：P<0.01
2.2 在体离体实验结果：(1)细胞周期分析：放射加增效方组G2+M期细胞数最多，明显高于单纯放射治疗组，S期细胞数最少，见表2。(2)p53，C-myc mRNA表达的影响：放射组、放射加增效方组的p53mRNA表达显著高于空白组，且放射加增效方组的表达又明显高于放射组；放射组比空白组的C-myc mRNA表达略低，放射加增效方组比放射组的表达低，且明显低于空白组。表2 不同组别的细胞增殖周期分布结果比较 组别
, 百拇医药
(%)
样本数
(个)
G0+G1
(%)
S(%)
G2+M(%)
空白组
6
72.3±2.0
20.5±2.3
7.2±2.2
, 百拇医药
增效方组
6
74.6±2.4
15.7±2.7
9.6±2.6
放射组
6
65.5±2.3
12.9±2.3
21.6±2.4
放射加增
效方组
6
, http://www.100md.com
56.0±2.7
10.0±2.6
34.0±2.4Δ
注：Δ与放射组比较 P<0.01
3 结论
本研究结果表明，扶正增效方明显增加放射后瘤体生长延缓时间，其放射增敏比为1.21，说明结合扶正增效方有较好的放射增敏作用。放射结合扶正增效方组 G2+M期细胞数最多，S期细胞数最少；p53 mRNA表达最强，C-myc mRNA表达最弱，提示扶正增效方可通过影响细胞周期及与放射敏感相关基因的表达而达到放射增敏作用。
基金项目：国家中医药管理局“八五”攻关项目(85-919-01-02)
(收稿日期：1999-09-06), http://www.100md.com
单位：北京，中日友好医院肿瘤科 100029
关键词：
中华放射肿瘤学杂志000219 已知扶正增效方(由生黄芪、白术、太子参、枸杞子、鸡血藤、红花、苏木、茯苓、鸡内金、石斛、沙参、银花组成)在临床上配合肺癌放射治疗49例患者有效率为69.4%，1、2、3年生存率分别为79.4%、49.4%、23.3%。现将其对肺腺癌细胞放射增敏作用实验研究报道如下。
1 材料与方法
1.1 在体实验：选用C57雄性小鼠，体重18～20g，共58只；Lewis肺癌瘤株。将每只C57小鼠右大腿内侧皮下注射2×105个(0.2mL)Lewis肺癌细胞后，随机分为空白组、放射组、放射加增效方组。照射方法：接种后第10d给予瘤体5，10，15，20Gy单次X射线照射(空白组不照射)。给药方法：自接种之日起放射加增效方组的小鼠每只每天灌服1.18g(0.4mL)扶正增效方生药，余2个组灌服等容积蒸馏水。观察指标：记录各组平均生长延缓时间(各治疗组瘤积达4 cm3平均时间-对照组瘤积达4cm3平均时间)，经计算机多项式拟合程序计算，得出达到相同生长延缓时间所需放射剂量，计算增敏比(增敏比=放射组放射剂量/放射加增效方组放射剂量)。
, 百拇医药
1.2 在体离体实验：选用4～6周雌性裸小鼠，共24只；PAa人低转移肺腺癌细胞系。将24只裸小鼠左右大腿中上部内侧皮下各接种1.5×106个(0.3mL)PAa细胞，随机均分为空白组、增效方组、放射组、放射加增效方组。照射方法：接种第33d，单次给予放射组、放射加增效方组的瘤体10Gy X射线照射。给药方法：自接种之日起增效方组、放射加增效方组的小鼠每只每天灌服0.9g (0.3mL)扶正增效方生药，余2个组灌服等容积生理盐水。照射后23h取瘤体制备标本。观察指标：(1)应用FACSort流式细胞仪检测各时相细胞在细胞周期中的分布；(2)应用Northern blotting测定p53，C-myc mRNA表达情况，p53，C-myc的cDNA探针长度分别为1.8，1.5kB。
2 结果
2. 1 在体实验结果：(1)生长延缓时间：放射组、放射加增效方组照射剂量在5Gy以下，对瘤体生长至4cm3的时间影响较小。照射10Gy以上时，放射加增效方组在各剂量点的生长至4cm3的时间和生长延缓时间均长于放射组(P<0.05， 0.01)，详见表1。从剂量效应曲线看，两条曲线在15Gy剂量处距离最大，见图1。(2)放射增敏比：扶正增效方平均放射增敏比为1.21。
, 百拇医药
图1 C57小鼠Lewis肺癌的剂量效应关系曲线
表1 各组C57小鼠Lewis肺癌生长情况 组别
剂量
(Gy)
样本数
肿瘤达4cm3平均
时间(d，
±sd)平均生长延缓
时间(d，
±sd), 百拇医药
空白组
0
10
16.50±0.96
放射组
5
6
17.65±0.55
1.25±0.45
10
6
22.50±0.50■
6.00±0.47
, 百拇医药
15
6
26.30±1.02★
9.80±0.94
20
6
36.35±1.65★
19.85±1.26
放射加增
效方组
5
6
, http://www.100md.com
18.35±0.45
1.85±0.46
10
6
24.50±0.86■△
8.00±0.20△
15
6
32.46±1.06★▲
15.95±0.91▲
20
, 百拇医药
6
40.50±1.30★△
24.00±0.64△
注：■：与空白组比较 P<0.05，★：P<0.01；△：与放射组比较P<0.05， ▲：P<0.01
2.2 在体离体实验结果：(1)细胞周期分析：放射加增效方组G2+M期细胞数最多，明显高于单纯放射治疗组，S期细胞数最少，见表2。(2)p53，C-myc mRNA表达的影响：放射组、放射加增效方组的p53mRNA表达显著高于空白组，且放射加增效方组的表达又明显高于放射组；放射组比空白组的C-myc mRNA表达略低，放射加增效方组比放射组的表达低，且明显低于空白组。表2 不同组别的细胞增殖周期分布结果比较 组别
, 百拇医药
(%)
样本数
(个)
G0+G1
(%)
S(%)
G2+M(%)
空白组
6
72.3±2.0
20.5±2.3
7.2±2.2
, 百拇医药
增效方组
6
74.6±2.4
15.7±2.7
9.6±2.6
放射组
6
65.5±2.3
12.9±2.3
21.6±2.4
放射加增
效方组
6
, http://www.100md.com
56.0±2.7
10.0±2.6
34.0±2.4Δ
注：Δ与放射组比较 P<0.01
3 结论
本研究结果表明，扶正增效方明显增加放射后瘤体生长延缓时间，其放射增敏比为1.21，说明结合扶正增效方有较好的放射增敏作用。放射结合扶正增效方组 G2+M期细胞数最多，S期细胞数最少；p53 mRNA表达最强，C-myc mRNA表达最弱，提示扶正增效方可通过影响细胞周期及与放射敏感相关基因的表达而达到放射增敏作用。
基金项目：国家中医药管理局“八五”攻关项目(85-919-01-02)
(收稿日期：1999-09-06), http://www.100md.com