口腔扁平苔藓患者血浆一氧化氮含量的检测
作者：焦艳军
单位：030001太原,山西医科大学第一附属医院
关键词：口腔扁平苔藓；一氧化氮；发病机理
临床口腔医学杂志990216 提 要 目的 观察一氧化氮在口腔扁平苔藓发病机理中的作用。方法 采用Greiss方法测定了30例口腔扁平苔藓患者及30例正常对照者血浆中一氧化氮的稳定代谢产物亚硝酸基/硝酸基(NO2-/NO3-)的含量。结果 口腔扁平苔藓患者与正常对照相比血浆NO2-/NO3-水平明显升高(P<0.001)。结论 一氧化氮在口腔扁平苔藓的免疫防御方面具有重要作用，在口腔扁平苔藓的免疫发病机理中也有重要意义。
The Change of Plasma Nitric Oxide in Patients with oral Lichen Planus Jiao yan jun Department of Stomatology, The First Affiliated of Hospital ShanXi Medical University Tai yuan 030001
, 百拇医药
Abstract Objective To observe the effec t of nitric oxide(No)levels changes in oral Lichen Planus(OLP). Methods 30 pitentes with OLP and 30 healthy were studied. The plasma NO2-/N O3- levels, the stable metabolic end products of NO were measured with gr eiss reagent. Result The plasma concentration of NO2-/NO 3- in patients were significantly higher than controls. Conclusion The increased of No may affect immunoprophylaxis and pathogenesis of OLP.
, 百拇医药
Key Words Oral Lichen Planus Nitric Oxide Pathogenesis
材料与方法
1. 研究对象 30例OLP患者均选自口腔科门诊就诊患者，根据临床表现结合病理学检查确诊为OLP者，病损无糜烂，无全身系统性疾病，近3月内未接受任何免疫治疗，年龄在20～60岁，平均40.77岁，其中男7例，女23例。另选30名正常对照，年龄20～60岁，平均41.87岁，女20例，男10例。OLP患者与正常对照者的年龄与性别经t检验及x2检验无显著性差异(P>0.05)，使两组之间具有可比性。
2. 标本采集 采受检者空腹静脉血2ml，经1500r/min离心15分钟后，取血浆置-40℃冰箱保存待测。
3. 检测方法 NO2-/NO3-是NO代谢的终产物。由于血红蛋白等的氧化作用，NO主要以NO3-存在于血浆中，NO2-能对氨基苯磺酸反应，生成化学发光物质，易被敏感的方法测定。因而需要将血浆中的NO3-还原为NO2-。还原的有效方法是将待侧血浆标本进行镉过柱。
, 百拇医药
取待测血浆0.5ml，用去离子水稀释1倍，加入30%ZnSO4溶液，混匀，3000r/min离心10分钟，取上清液0.5ml过柱，加入3.5ml缓冲液洗涤。取过柱液100μl，加Griess试剂100μl，反应15分钟后，测定540nm波长的光密度值。以1-100μmol/LnaNO2为标准，测定方法同上(不过柱)。求出还原曲线，根据还原曲线计算出标本的NO2-值。
由于血浆中NO2-含量极少，因此，一般均以NO2-/NO3-表示，而不对其进行区分。血浆NO2-/NO3-的浓度以μmol/L表示。
结果
, 百拇医药
对30例OLP患者及30例正常对照者血浆NO2-/NO3-检测结果(表1)，由表1可以看出，OLP患者血浆NO2-/NO3-含量明显高于正常对照者，经t检验差异具有显著性(P<0.001)。
表1 OLP患者与正常对照者血浆NO2-/NO3-含量的比较
x±s(μmol/L)
t
P
OLP组
3.602±1.156
, 百拇医药
正常对照组
2.595±0.918
3.312
<0.001
讨论
本实验通过对30名OLP患者及30名正常对照者血浆NO2-/NO3-含量的检测，发现OLP患者血浆NO2-/NO3-含量明显高于正常人。
大量研究表明，OLP的发病是一个由T细胞介导的过程[1，2，3]，病变组织内浸润的T淋巴细胞主要包括CD4+和CD8+淋巴细胞，由T淋巴细胞产生的细胞因子特别是IFN—γ能活化多种细胞产生NO，但现在的研究表明NO对IFN—γ的合成存在反馈性抑制作用[4，5]。Tayior-Robinsen等报道[4]，在特异性抗原或ConA刺激下，Th1(CD4+)能产生大量NO，而当合成NO的浓度高时，NO能反馈抑制Th1分泌IL-2和IFN-γ。已知IL-2是一种主要的T细胞生长因子，IFN-γ能有效地诱导NO合成，因此他们认为，NO通过对Th1的自我负反馈调节作用，使Th1不致过度增生，同时避免产生过量NO，引起自身免疫等与Th1有关的多种免疫病理过程。由此可见OLP患者增高的NO2-/NO3-在其免疫防御方面具有重要作用，在OLP的免疫与发病机理中也有重要意义。
, 百拇医药
此外，NO还具有抑制IL-6的分泌，促进NK细胞的活化、调节肥大细胞的反应性以及通过一种cGMP非依赖性机制激活人外周血单核细胞等作用，这些都可能与OLP的发生、发展密切相关，但其具体的作用机制还有待于我们作进一步的研究。
参考文献
[1]Walsh LJ, Savage W,Ishii T,et al. Immuno path ogenesis of oral lichen planus. J Oral Pathol Med, 1990,19:389～396
[2]Robertson WD,Wray D.Immunohistochemical study oforal keratoses including lichen planus. J Oral Pathol Med, 1993,22:180～182
[3]Eversoie LR,Dam J Ficarra G,et al. Leukocyte adhesion molecules in oral lichen planus: a T cell mediated immunpathologic process. Oral Microbi ol I mmunol, 1994,immunpathologic process. Oral Microbiol Immunol, 1994,9:376～383
, 百拇医药
[4]Talor Robinson AW, Liew FY,Severn A,et al. Regulation of the immun e response by nitric oxide differentially produced by T helper type 1 and T help er type 2 cell. Eur J Immunol, 1994;24:980～984
[5]Peter H, Meide V,Labie MC,et al. Nitric Oxide Suppresses IFN-r pro duction in the Spleen of Merarie Chloride-Exposed Brown Norway Rats. Cell Immun ol, 1995;161:195～206
(收稿：1998—02—23), 百拇医药
单位：030001太原,山西医科大学第一附属医院
关键词：口腔扁平苔藓；一氧化氮；发病机理
临床口腔医学杂志990216 提 要 目的 观察一氧化氮在口腔扁平苔藓发病机理中的作用。方法 采用Greiss方法测定了30例口腔扁平苔藓患者及30例正常对照者血浆中一氧化氮的稳定代谢产物亚硝酸基/硝酸基(NO2-/NO3-)的含量。结果 口腔扁平苔藓患者与正常对照相比血浆NO2-/NO3-水平明显升高(P<0.001)。结论 一氧化氮在口腔扁平苔藓的免疫防御方面具有重要作用，在口腔扁平苔藓的免疫发病机理中也有重要意义。
The Change of Plasma Nitric Oxide in Patients with oral Lichen Planus Jiao yan jun Department of Stomatology, The First Affiliated of Hospital ShanXi Medical University Tai yuan 030001
, 百拇医药
Abstract Objective To observe the effec t of nitric oxide(No)levels changes in oral Lichen Planus(OLP). Methods 30 pitentes with OLP and 30 healthy were studied. The plasma NO2-/N O3- levels, the stable metabolic end products of NO were measured with gr eiss reagent. Result The plasma concentration of NO2-/NO 3- in patients were significantly higher than controls. Conclusion The increased of No may affect immunoprophylaxis and pathogenesis of OLP.
, 百拇医药
Key Words Oral Lichen Planus Nitric Oxide Pathogenesis
材料与方法
1. 研究对象 30例OLP患者均选自口腔科门诊就诊患者，根据临床表现结合病理学检查确诊为OLP者，病损无糜烂，无全身系统性疾病，近3月内未接受任何免疫治疗，年龄在20～60岁，平均40.77岁，其中男7例，女23例。另选30名正常对照，年龄20～60岁，平均41.87岁，女20例，男10例。OLP患者与正常对照者的年龄与性别经t检验及x2检验无显著性差异(P>0.05)，使两组之间具有可比性。
2. 标本采集 采受检者空腹静脉血2ml，经1500r/min离心15分钟后，取血浆置-40℃冰箱保存待测。
3. 检测方法 NO2-/NO3-是NO代谢的终产物。由于血红蛋白等的氧化作用，NO主要以NO3-存在于血浆中，NO2-能对氨基苯磺酸反应，生成化学发光物质，易被敏感的方法测定。因而需要将血浆中的NO3-还原为NO2-。还原的有效方法是将待侧血浆标本进行镉过柱。
, 百拇医药
取待测血浆0.5ml，用去离子水稀释1倍，加入30%ZnSO4溶液，混匀，3000r/min离心10分钟，取上清液0.5ml过柱，加入3.5ml缓冲液洗涤。取过柱液100μl，加Griess试剂100μl，反应15分钟后，测定540nm波长的光密度值。以1-100μmol/LnaNO2为标准，测定方法同上(不过柱)。求出还原曲线，根据还原曲线计算出标本的NO2-值。
由于血浆中NO2-含量极少，因此，一般均以NO2-/NO3-表示，而不对其进行区分。血浆NO2-/NO3-的浓度以μmol/L表示。
结果
, 百拇医药
对30例OLP患者及30例正常对照者血浆NO2-/NO3-检测结果(表1)，由表1可以看出，OLP患者血浆NO2-/NO3-含量明显高于正常对照者，经t检验差异具有显著性(P<0.001)。
表1 OLP患者与正常对照者血浆NO2-/NO3-含量的比较
x±s(μmol/L)
t
P
OLP组
3.602±1.156
, 百拇医药
正常对照组
2.595±0.918
3.312
<0.001
讨论
本实验通过对30名OLP患者及30名正常对照者血浆NO2-/NO3-含量的检测，发现OLP患者血浆NO2-/NO3-含量明显高于正常人。
大量研究表明，OLP的发病是一个由T细胞介导的过程[1，2，3]，病变组织内浸润的T淋巴细胞主要包括CD4+和CD8+淋巴细胞，由T淋巴细胞产生的细胞因子特别是IFN—γ能活化多种细胞产生NO，但现在的研究表明NO对IFN—γ的合成存在反馈性抑制作用[4，5]。Tayior-Robinsen等报道[4]，在特异性抗原或ConA刺激下，Th1(CD4+)能产生大量NO，而当合成NO的浓度高时，NO能反馈抑制Th1分泌IL-2和IFN-γ。已知IL-2是一种主要的T细胞生长因子，IFN-γ能有效地诱导NO合成，因此他们认为，NO通过对Th1的自我负反馈调节作用，使Th1不致过度增生，同时避免产生过量NO，引起自身免疫等与Th1有关的多种免疫病理过程。由此可见OLP患者增高的NO2-/NO3-在其免疫防御方面具有重要作用，在OLP的免疫与发病机理中也有重要意义。
, 百拇医药
此外，NO还具有抑制IL-6的分泌，促进NK细胞的活化、调节肥大细胞的反应性以及通过一种cGMP非依赖性机制激活人外周血单核细胞等作用，这些都可能与OLP的发生、发展密切相关，但其具体的作用机制还有待于我们作进一步的研究。
参考文献
[1]Walsh LJ, Savage W,Ishii T,et al. Immuno path ogenesis of oral lichen planus. J Oral Pathol Med, 1990,19:389～396
[2]Robertson WD,Wray D.Immunohistochemical study oforal keratoses including lichen planus. J Oral Pathol Med, 1993,22:180～182
[3]Eversoie LR,Dam J Ficarra G,et al. Leukocyte adhesion molecules in oral lichen planus: a T cell mediated immunpathologic process. Oral Microbi ol I mmunol, 1994,immunpathologic process. Oral Microbiol Immunol, 1994,9:376～383
, 百拇医药
[4]Talor Robinson AW, Liew FY,Severn A,et al. Regulation of the immun e response by nitric oxide differentially produced by T helper type 1 and T help er type 2 cell. Eur J Immunol, 1994;24:980～984
[5]Peter H, Meide V,Labie MC,et al. Nitric Oxide Suppresses IFN-r pro duction in the Spleen of Merarie Chloride-Exposed Brown Norway Rats. Cell Immun ol, 1995;161:195～206
(收稿：1998—02—23), 百拇医药