HLA Ⅱ类抗原与病毒性心肌炎相关性的研究
作者：沈晓丽 林立芳 潘棱 邓玉莲 胡锡衷
单位：福建省心血管病研究所，福州市，350001
关键词：病毒性心肌炎；HLAⅡ类抗原
心血管康复医学杂志000104
摘 要：目的：探讨人白细胞Ⅱ类抗原(HLAⅡ)与病毒性心肌炎(VMC)的相关性。方法：用HLA单克隆抗体以微量淋巴细胞毒性试验调查32例福建地区VMC患者HLA-DR和DQ位点共20个特异性抗原频率，并与43例本地区正常人加以对照。结果：VMC病人与HLA-DQ7(RR=7.600，PC=0.002)和DQ2(RR=0.161，PC=0.002)抗原分别为显著正、负相关。结论：VMC与HLAⅡ类抗原异常表达有关。
The study for correlation between HLA classⅡ and viral myocarditis
, 百拇医药
SHEN Xiaoli LIN Lifang PAN Leng, et al.
(Chinese Journal of Cardiovascular Rehabilitation Medicine)
Abstract：Objective:Explore the correlation between human leukocyte antigen(HLA) classⅡ and viral myocarditis(VMC).Methods:Survey 20 special antigen frequency of site of HLA\|DR and DQ in 32 Fujian's patients with VMC by lymphocytotoxicity testing with monoclone antibody of HLA.Results:There were positive correlation between VMC and HLA\|DQ7(RR=7.600，PC=0.002)，and negative correlation between VMC and HLA\|DQ2(There were incremental tendency of antigen frequency of DR4(RR=5.21，EP=0.013),DR9(RR=3.300，EP=0.01),DQ4(RR=4.219，EP=0.007).Conclusion:There are correlation between VMC and abnormal expression of HLA classⅡ.
, 百拇医药
Author′s address Fujian Cardiovascular Disease Institute,Fuzhou,350001
Key words：Viral myocarditis;Human leukocyte antigen(HLA) classⅡ▲
病毒性心肌炎患者的体液、细胞免疫异常参与其心肌损伤机制已被反复证明。实验与临床资料亦提示心肌炎与扩张型心肌病有关，认为病毒感染诱发宿主的自身免疫应答，导致心肌炎，继而进展为扩张型心肌病。心肌炎和扩张型心肌病可能代表了器官特异的自身免疫性心肌病循序渐进的阶段。
HLA作为一种遗传标记证明与一些自身免疫疾病的关联。尤其作为HLA基因产物的Ⅱ类抗原决定了对胸腺依赖抗原的特异性免疫反应，它直接参与抗体的免疫调节，并在T辅助细胞活化及产生T杀伤细胞和T抑制细胞过程中起着重要作用。中国人病毒性心肌炎(VMC)与HLA是否关联尚未见报道，本研究调查了32例福建籍VMC患者20个HLAⅡ类特异性抗原的频率，以期了解HLAⅡ类抗原与该病的关系。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1一般资料
VMC组：32例，为病程1个月以上的我院住院VMC病人，平均年龄27±12岁，均符合1995年全国心肌炎心肌病专题研讨会制订的标准。对照组：43例,随机安排的正常人，年龄33±16岁。以上研究对象均为福建地区的血缘关系。
1.2 方法
1.2.1 HLAⅡ类单克隆抗体板：所识别的HLAⅡ类抗原有20个(不包括亚型)。HLA-DR、DQ单克隆抗体反应板及兔补体由ONELAMBDA公司(美国)提供。
1.2.2 HLA-DR、DQ分型方法：以B淋巴细胞分离剂(ONELAMBDA公司，美国)分离B细胞，以标准微量淋巴细胞毒性试验作HLA-DR、DQ分型。
, 百拇医药 1.3 统计学方法
使用Woolf和Haldane方法计算相对危险率(RR)并测验其显著性，χ值>3.84者按Fisher法求确切P值(EP)，将P值乘以所测抗原数为校正P值(Pc)。
2 结 果
对VMC组与对照组HLAⅡ类抗原频率进行比较(表1)，发现HLA-DR抗原与VMC正相关的有DR4(RR=5.217，FP=0.013)，DR9(RR=3.300，FP=0.011)，但经P值校正后均失去统计学意义；HLA-DQ抗原与VMC正相关的有DQ4(RR=4.219，FP=0.007)，DQ7(RR=7.600，FP=0.0003)，负相关抗原有DQ2(RR=0.161，FP=0.0002)，经P值校正后有显著性差异的仅有DQ7和DQ2，Pc均<0.005。
3 讨 论
, 百拇医药
已有资料表明，在VMC患者活检心肌的心脏内皮细胞有HLAⅡ类抗原的异常表达。Caforio认为VMC、扩张性心肌病(DCM)与HLA-DR4弱相关。Lozano发现VMC患者中HLA-DQ5阳性。本组结果表明福建地区VMC患者DR4、DR9、DQ4、DQ7抗原频率明显增加，但仅DQ7与VMC有显著正相关；DQ2频率明显减少，与VMC呈负相关。提示DQ7可能为VMC的易感抗原，而DQ2抗原对该病可能具有保护性，VMC与HLAⅡ类抗原的异常表达有关，表明后者在心肌炎继发性免疫发病机制中可能起着一定的作用。本组VMC患者DR4、DR9和DQ4有增高趋势，但经P值校正后失去统计学意义，可能与样本小有关。
表1 两组HLA-DR、DQ抗原频率分布 HLA抗原
抗原频率
RR
χ
, 百拇医药
FP
Pc
VMC组
对照组
DR1
0.03125
0.11628
0.238
1.9316
NS
NS
DR3
0.06250
, 百拇医药
0.04651
1.367
0.0929
NS
NS
DR4
0.28125
0.06977
5.217
6.1053
0.01325
0.22525
DR7
, 百拇医药
0.15625
0.16280
1.750
0.4730
NS
NS
DR8
0.09375
0.13953
0.638
0.3642
NS
NS
, 百拇医药
DR9
0.50000
0.23256
3.300
5.7939
0.01149
0.19380
DR10
0.18750
0.34884
0.431
2.3688
, http://www.100md.com NS
NS
DR11
0.06250
0.04651
1.367
0.0929
NS
NS
DR12
0.12500
0.13953
0.881
, 百拇医药
0.0335
NS
NS
DR13
0.06250
0.06977
1.333
0.0519
NS
NS
DR14
0.09375
0.09302
, 百拇医药
1.009
0.0115
NS
NS
DR15，16
0.18750
0.27907
0.596
0.8434
NS
NS
DR18
0.03125
, 百拇医药
0.06977
0.430
0.5391
NS
NS
DQ1
0.21875
0.32558
0.580
1.0386
NS
NS
DQ2
, http://www.100md.com
0.25000
0.67442
0.161
13.2216
0.00024
0.00192
DQ3
0.15625
0.20930
0.700
0.3401
NS
, 百拇医药 NS
DQ4
0.40625
0.13953
4.219
6.8997
0.00738
0.05904
DQ6
0.17500
0.23256
0.486
1.3021
, 百拇医药
NS
NS
DQ7
0.50000
0.11628
7.600
13.3998
0.00028
0.00224
DQ8，9
0.06250
0.04651
1.367
, http://www.100md.com
0.0929
NS
NS
HLA抗原分布存在着种族差异、地区差异和抽样误差。本研究尚需进一步扩大样本，并从基因水平进一步探讨VMC发病的分子基础。■
参考文献：
[1]Kuhi H,Daun R,Seeherg B,et al.Dilated Cardiomyopathy-a chronic myocarditis?lmmunohistogic characterizaion of lymphocytic infiltrates.Hera,1992 Apr,17(2):97～106
[2]全国心肌炎心肌病专题研讨会.成人急性心肌炎诊断参考标准.临床心血管病杂志，1995，11：325
, 百拇医药
[3]Lozano MD,Rubocki RJ,Wilson JE,et al.Human leukocyte antigen classⅡ associations in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy.Myocarditis Treatment Trial lnvestigators.J Card Fail,1997 Jun,3(2):97～103
[4]Caforio AL,Goldman JH,Haven AJ,et al.Evidence for autoimmunity to myosin and other heart-specific autoantigens in patients with dilated cardiomyopathy and their relatives.Int J Cardiol,1996 May,54(2):157～163, 百拇医药
单位：福建省心血管病研究所，福州市，350001
关键词：病毒性心肌炎；HLAⅡ类抗原
心血管康复医学杂志000104
摘 要：目的：探讨人白细胞Ⅱ类抗原(HLAⅡ)与病毒性心肌炎(VMC)的相关性。方法：用HLA单克隆抗体以微量淋巴细胞毒性试验调查32例福建地区VMC患者HLA-DR和DQ位点共20个特异性抗原频率，并与43例本地区正常人加以对照。结果：VMC病人与HLA-DQ7(RR=7.600，PC=0.002)和DQ2(RR=0.161，PC=0.002)抗原分别为显著正、负相关。结论：VMC与HLAⅡ类抗原异常表达有关。
The study for correlation between HLA classⅡ and viral myocarditis
, 百拇医药
SHEN Xiaoli LIN Lifang PAN Leng, et al.
(Chinese Journal of Cardiovascular Rehabilitation Medicine)
Abstract：Objective:Explore the correlation between human leukocyte antigen(HLA) classⅡ and viral myocarditis(VMC).Methods:Survey 20 special antigen frequency of site of HLA\|DR and DQ in 32 Fujian's patients with VMC by lymphocytotoxicity testing with monoclone antibody of HLA.Results:There were positive correlation between VMC and HLA\|DQ7(RR=7.600，PC=0.002)，and negative correlation between VMC and HLA\|DQ2(There were incremental tendency of antigen frequency of DR4(RR=5.21，EP=0.013),DR9(RR=3.300，EP=0.01),DQ4(RR=4.219，EP=0.007).Conclusion:There are correlation between VMC and abnormal expression of HLA classⅡ.
, 百拇医药
Author′s address Fujian Cardiovascular Disease Institute,Fuzhou,350001
Key words：Viral myocarditis;Human leukocyte antigen(HLA) classⅡ▲
病毒性心肌炎患者的体液、细胞免疫异常参与其心肌损伤机制已被反复证明。实验与临床资料亦提示心肌炎与扩张型心肌病有关，认为病毒感染诱发宿主的自身免疫应答，导致心肌炎，继而进展为扩张型心肌病。心肌炎和扩张型心肌病可能代表了器官特异的自身免疫性心肌病循序渐进的阶段。
HLA作为一种遗传标记证明与一些自身免疫疾病的关联。尤其作为HLA基因产物的Ⅱ类抗原决定了对胸腺依赖抗原的特异性免疫反应，它直接参与抗体的免疫调节，并在T辅助细胞活化及产生T杀伤细胞和T抑制细胞过程中起着重要作用。中国人病毒性心肌炎(VMC)与HLA是否关联尚未见报道，本研究调查了32例福建籍VMC患者20个HLAⅡ类特异性抗原的频率，以期了解HLAⅡ类抗原与该病的关系。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1一般资料
VMC组：32例，为病程1个月以上的我院住院VMC病人，平均年龄27±12岁，均符合1995年全国心肌炎心肌病专题研讨会制订的标准。对照组：43例,随机安排的正常人，年龄33±16岁。以上研究对象均为福建地区的血缘关系。
1.2 方法
1.2.1 HLAⅡ类单克隆抗体板：所识别的HLAⅡ类抗原有20个(不包括亚型)。HLA-DR、DQ单克隆抗体反应板及兔补体由ONELAMBDA公司(美国)提供。
1.2.2 HLA-DR、DQ分型方法：以B淋巴细胞分离剂(ONELAMBDA公司，美国)分离B细胞，以标准微量淋巴细胞毒性试验作HLA-DR、DQ分型。
, 百拇医药 1.3 统计学方法
使用Woolf和Haldane方法计算相对危险率(RR)并测验其显著性，χ值>3.84者按Fisher法求确切P值(EP)，将P值乘以所测抗原数为校正P值(Pc)。
2 结 果
对VMC组与对照组HLAⅡ类抗原频率进行比较(表1)，发现HLA-DR抗原与VMC正相关的有DR4(RR=5.217，FP=0.013)，DR9(RR=3.300，FP=0.011)，但经P值校正后均失去统计学意义；HLA-DQ抗原与VMC正相关的有DQ4(RR=4.219，FP=0.007)，DQ7(RR=7.600，FP=0.0003)，负相关抗原有DQ2(RR=0.161，FP=0.0002)，经P值校正后有显著性差异的仅有DQ7和DQ2，Pc均<0.005。
3 讨 论
, 百拇医药
已有资料表明，在VMC患者活检心肌的心脏内皮细胞有HLAⅡ类抗原的异常表达。Caforio认为VMC、扩张性心肌病(DCM)与HLA-DR4弱相关。Lozano发现VMC患者中HLA-DQ5阳性。本组结果表明福建地区VMC患者DR4、DR9、DQ4、DQ7抗原频率明显增加，但仅DQ7与VMC有显著正相关；DQ2频率明显减少，与VMC呈负相关。提示DQ7可能为VMC的易感抗原，而DQ2抗原对该病可能具有保护性，VMC与HLAⅡ类抗原的异常表达有关，表明后者在心肌炎继发性免疫发病机制中可能起着一定的作用。本组VMC患者DR4、DR9和DQ4有增高趋势，但经P值校正后失去统计学意义，可能与样本小有关。
表1 两组HLA-DR、DQ抗原频率分布 HLA抗原
抗原频率
RR
χ
, 百拇医药
FP
Pc
VMC组
对照组
DR1
0.03125
0.11628
0.238
1.9316
NS
NS
DR3
0.06250
, 百拇医药
0.04651
1.367
0.0929
NS
NS
DR4
0.28125
0.06977
5.217
6.1053
0.01325
0.22525
DR7
, 百拇医药
0.15625
0.16280
1.750
0.4730
NS
NS
DR8
0.09375
0.13953
0.638
0.3642
NS
NS
, 百拇医药
DR9
0.50000
0.23256
3.300
5.7939
0.01149
0.19380
DR10
0.18750
0.34884
0.431
2.3688
, http://www.100md.com NS
NS
DR11
0.06250
0.04651
1.367
0.0929
NS
NS
DR12
0.12500
0.13953
0.881
, 百拇医药
0.0335
NS
NS
DR13
0.06250
0.06977
1.333
0.0519
NS
NS
DR14
0.09375
0.09302
, 百拇医药
1.009
0.0115
NS
NS
DR15，16
0.18750
0.27907
0.596
0.8434
NS
NS
DR18
0.03125
, 百拇医药
0.06977
0.430
0.5391
NS
NS
DQ1
0.21875
0.32558
0.580
1.0386
NS
NS
DQ2
, http://www.100md.com
0.25000
0.67442
0.161
13.2216
0.00024
0.00192
DQ3
0.15625
0.20930
0.700
0.3401
NS
, 百拇医药 NS
DQ4
0.40625
0.13953
4.219
6.8997
0.00738
0.05904
DQ6
0.17500
0.23256
0.486
1.3021
, 百拇医药
NS
NS
DQ7
0.50000
0.11628
7.600
13.3998
0.00028
0.00224
DQ8，9
0.06250
0.04651
1.367
, http://www.100md.com
0.0929
NS
NS
HLA抗原分布存在着种族差异、地区差异和抽样误差。本研究尚需进一步扩大样本，并从基因水平进一步探讨VMC发病的分子基础。■
参考文献：
[1]Kuhi H,Daun R,Seeherg B,et al.Dilated Cardiomyopathy-a chronic myocarditis?lmmunohistogic characterizaion of lymphocytic infiltrates.Hera,1992 Apr,17(2):97～106
[2]全国心肌炎心肌病专题研讨会.成人急性心肌炎诊断参考标准.临床心血管病杂志，1995，11：325
, 百拇医药
[3]Lozano MD,Rubocki RJ,Wilson JE,et al.Human leukocyte antigen classⅡ associations in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy.Myocarditis Treatment Trial lnvestigators.J Card Fail,1997 Jun,3(2):97～103
[4]Caforio AL,Goldman JH,Haven AJ,et al.Evidence for autoimmunity to myosin and other heart-specific autoantigens in patients with dilated cardiomyopathy and their relatives.Int J Cardiol,1996 May,54(2):157～163, 百拇医药