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编号:10277935
脊髓运动诱发电位在大鼠胚胎脊髓移植实验中的应用
http://www.100md.com 《中华物理医学与康复杂志》 1998年第1期
     作者:赵刚 廖维宏 蔡锦方 张亚彬

    单位:250031 济南军区总医院骨创伤科(赵刚、蔡锦方、张亚彬);第三军医大学野战外科研究所(廖维宏)

    关键词:脊髓/移植;脊髓损伤/病理生理学;诱发电位,躯体感觉;胚胎移植;大鼠

    中华物理医学杂志980108.htm 摘 要 目的 脊髓运动诱发电位(MEP)直接反映脊髓下行传导功能,将其用于脊髓

    移植实验,检测脊髓运动功能状态。方法 应用多功能神经诱发电位仪,对移植胚胎脊髓及

    单纯损伤对照组大鼠的脊髓MEP进行动态检测。结果 术后4天,移植组MEP波幅及峰潜伏时
, 百拇医药
    已有一定程度的恢复;对照组MEP无明显好转趋势。术后2周、4周和12周,三组的MEP早期反

    应(P1,N1)的波幅,均基本恢复正常,但移植组峰潜伏时的恢复优于对照组(P<0.05)。

    结论
MEP检测能为脊髓的功能状态提供客观资料;在脊髓移植实验中,检测MEP是判断受体

    脊髓运动功能的可靠方法之一。

    

    中图号 R364.34;R322.8

    Application of SpinalMotor Evoked Potential in Transplantation of Embryonic SpinalCord in RatsZhao Gang,Liao Weihong,Cai Jinfang,et al. Departmentof Orthopaedic Surgery, Jinan Military
, 百拇医药
    General Hospital, Jinan 250031

    Abstract Objective Motor evoked potential(MEP),which reflects directly descending conduction

    of spinal cord,was employed in experimental transplantation of spinal cord for functional changes.Methods

    With multiple function nerve evoked potential apparatus,dynamic examination of spinal MEP was performed
, 百拇医药
    in rats of embyro-implanted spinal cord and simple injury.Results After 4 days of grafting,there was some

    recovery in MEP recordings,but the control showed no obvious recovery. After 2,4 and 12 weeks of

    operation,both groups showed no significant differences in the recovery of amplitudes of early wave,but

    the peak latencies of transplanted rats were prior to the control ones(P?.05).Conclusion MEP could provide
, http://www.100md.com
    objective information about the function of spinal cord.In transplantation experiment,MEP is one of reliable

    methods for recipient spinal cord motor function.

     Key words spinal cord/transpl; spinal-cord injuries/physiopathol;evoked potentials,somatosensory;embro

    transfer;rats

    近10余年来,国外不少学者〔1~3〕报道,胚胎脊髓组织植入成年动物急性损伤的脊髓
, 百拇医药
    内,可以生长、分化、充填宿主脊髓洞腔,并可与之建立一定程度的神经纤维联系。然而

    移植后宿主损伤脊髓的功能恢复多不令人满意。本实验采用硬脊膜表面记录脊髓运动诱发

    电位的方法,较客观地反映移植组同对照组脊髓神经传导的不同改变,从而为移植胚胎脊

    髓修复宿主损伤脊髓运动功能提供了可靠的证据。

    材 料 与 方 法

    一、脊髓损伤模型与移植程序

    成年Wistar大鼠,雌雄不拘,体重200 g左右。无菌条件下,在脊髓腰膨大,制成直径

    2~3mm的半切洞腔。剖腹取出孕鼠妊娠14天完整的胚胎,在手术显微镜下,将胚胎脊髓分
, 百拇医药
    离出来,用注射器将胚胎脊髓吸入一尖端孔径1mm的玻璃管内,尖端留少许吸至管口,再

    轻轻注入受体脊髓洞腔内,缝合切开的硬脊膜。

    二、脊髓运动诱发电位检查

    应用第三军医大学研制的多功能神经诱发电位仪,对下列各组大鼠的脊髓运动诱发电

    位(MEP)进行检测。Wistar大鼠60只,包括正常组,损伤即刻组,移植4天、2周、4周和

    12周组,单纯半切洞4天、2周、4周和12周组,每组6只,25%乌拉坦麻醉后,在动物头颅

    后部、腰背部剪毛,清洁皮肤。切开L3~4椎体平面的皮肤及皮下组织,咬除相应的椎板暴

, 百拇医药     露硬脊膜,选距移植或损伤部位6 mm处为记录点。用牙科钻在颅顶冠状缝下3 mm、矢状缝

    旁开1 mm处,各打一盲孔,进行刺激频率4 Hz,波宽0.2 ms,强度40~60V,用银球电极

    在脊髓硬膜外记录,信号经前置放大器放大10万倍,计算机叠加300次。

    结 果

    脊髓腰骶段硬脊膜记录的正常MEP主要由四个波(P1、N1、P2、N2)组成,波形反应

    呈“M”形,脊髓损伤后即刻所有动物MEP均不能记录(波幅明显减低或完全消失),术后

    4天单纯损伤组与损伤即刻组MEP检查结果大致相似,无明显好转趋势;移植组除少数动物
, 百拇医药
    恢复不理想外,已有一定程度的恢复。术后2~12周,移植及非移植各组,其MEP早期反应

    (P1,N1)的波幅,均基本恢复正常;但峰潜伏时改变有差异,不同时间内,移植与非移

    植动物,MEP变化趋势,参见附图。各组(P2,N2)变异较大,无规律性。应用第三军医

    大学研制的PDA-2统计程序,对正常组、移植各组和单纯损伤各组MEP早期反应的潜伏时

    及波幅,进行以下统计处理:①各组与正常组比较;②相同时间,不同处置方式各组比较。

    结果参见表1、表2。

    附图 移植组及非移植组的MEP
, 百拇医药
    表1 移植及对照各组MEP(P1、N1)峰潜伏时变化(±s,ms)

    潜伏时

    正 常

    移植2周

    对照2周

    移植4周

    对照4周

    移植12周

    对照12周

    P1

    2.02±0.20
, 百拇医药
    2.99±0.65

    4.82±1.42△*

    3.11±0.52

    4.29±1.58

    2.34±0.44

    3.98±0.44△*

    N1

    2.93±0.91

    4.21±1.30

    6.43±2.17△*

    3.41±0.82
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    5.07±1.54△*

    3.12±1.41

    4.87±1.69△*

    注 △ 正常组与其余各组比较相差显著 (P<0.05) 。 * 同一时期各组比较相差显著 (P<0.05) 。

    表2 移植及对照各组MEP(P1、N1)波幅变化(±s,μV)

    潜伏时

    正 常

    移植2周

, http://www.100md.com     对照2周

    移植4周

    对照4周

    移植12周

    对照12周

    P1

    5.04±3.13

    3.04±2.90

    6.35±3.12

    6.40±4.01

    4.26±3.29

    5.11±2.87
, 百拇医药
    4.34±3.22

    N1

    6.06±2.16

    3.81±2.58

    3.51±5.04

    4.43±4.36

    6.02±4.87

    5.54±2.96

    4.56±4.00

     讨论

    一、大鼠脊髓伤后运动功能的判定方法
, 百拇医药
    大鼠脊髓伤后,学者们多采用:①后肢运动功能分类;②步态测定;③体感诱发电位(SEP);

    ④脊髓运动诱发电位(MEP)等检查方法判定大鼠脊髓伤后的运动功能状况。前两种是比较

    直观的方法,其中后肢运动功能分类法有多种,如Tarlov氏法、改良Tarlov法、Lemke氏法〔4〕等。欲客观地、定量地反映大鼠肢体运动功能改变情况,还需要借助灵敏的电生理检测方法,当前最常用的就是体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP),一般认为SEP冲动,是通

    过刺激外周神经而诱发,主要由脊髓后索传导,直接反映脊髓上行传导功能的优劣,因此在

    脊髓背侧损伤或缺血时,SEP改变比较敏感;脊髓MEP冲动,是通过刺激大脑皮质运动区而诱

    发,主要由皮质脊髓束直接传导,也可能有网状脊髓束和红核脊髓束的间接参与,直接反映
, 百拇医药
    脊髓下行传导功能的正常与否,因而脊髓MEP可以作为脊髓损伤后运动功能检测的灵敏指标〔5〕

    孙天胜等所做的猫脊髓损伤实验〔6〕也表明MEP要比SEP更为准确地反映脊髓运动功能。

    二、脊髓运动诱发电位在大鼠胚胎脊髓移植实验中的应用

    有报道〔7〕,完全横断的脊髓内植入同种胚胎脊髓组织, 脊髓运动诱发电位检查未提示

    移植物促进宿主脊髓运动功能改善。目前尚未见到利用MEP检测大鼠脊髓半切洞损伤后移植

    胚胎脊髓促进其运动功能恢复的报道。本实验结果提示,脊髓损伤部位以下记录的MEP四天

    组MEP波幅及潜伏时的恢复均较对照组明显,参见附图,晚期(2周以后)两组MEP的波幅改
, 百拇医药
    变虽无统计学差异,但潜伏时改变有意义,移植组恢复优于对照组,参见表1、2。上述结果

    说明,MEP检测受到动物间的个体差异的影响,表现在波幅改变方面较为明显,但潜伏时受

    个体差异的影响较小。国外学者的研究也有类似的体会〔5〕。再者MEP检测受不少人为因素

    的影响,但只要测试者严格控制各种检测条件,尽可能保持其一致性,MEP可以成为检测胚

    胎脊髓移植实验中宿主脊髓运动功能变化的重要手段。

    参 考 文 献

    1 Reier PJ, BregmanBS, Wujek JR, Intraspinal transplantation of embryronic spinalcord tissue in neonatal
, 百拇医药
    and adult rats. J Comp Neurol, 1986, 247:275-296.

    2 Tessler A. Neurological progress: intraspinal transplants.Annals of Neurology, 1991,29:115-123.

    3 Reier PJ,Anderson DK,Thompson FJ, et al. Neural tissuetransplantation and CNS traumar anatomical

    and functional repair of the injured spinal cord. J Neurotrauma,1992,9:S223-248.

    4 Lemke M, Faden AI. Edema development and ion changes in ratspinal cord after impact trauma: Injury
, http://www.100md.com
    dose-response studies. J Neurotrauma, 1990,7:41-54.

    5 Adamson J, Zappulla RA, Fraser A, et al, Effects of selectivespinal cord lesions on the spinal motor

    evoked potential ( MEP ) in the rat. Electroencephalography andClinical Neurophysiology,1989,74:469-480.

    6 孙天胜,胥少汀.实验性脊髓损伤的运动诱发电位检测价值.中华外科杂志,1991, 29(7): 472-476.

    7 Pallini R,Fernandez E, Gangitano C, et al, Studies on embryonic transplantto the transected spinal cord

    of adult rats. J Neurosurg 1989, 70: 454-462.

    (收稿 1996-12-30 修回 1997-12-20), http://www.100md.com