知母的研究进展
作者：徐冬英 谢崇源 韦衮政
单位：广西中医学院药学系(南宁 530001)
关键词：知母；化学成分；药理作用；综述
广西中医学院学报990453 中图分类号 R282.71
知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的根茎，具有清热泻火、生津润燥的功效，常用于外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘等证[1]，现将其近年来的研究从化学成分、药理、炮制等方面综述如下。
1 化学成分
1.1 分离与鉴定 知母主含皂甙[2]，分别是知母皂甙A-Ⅰ、A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ、B-Ⅰ和B-Ⅱ，其中知母皂甙A-Ⅲ是萨尔萨皂甙元与知母双糖结合而成的双糖甙，知母皂甙A-Ⅰ是萨尔萨皂甙元β-D-吡喃半乳糖甙。其皂甙元主要是萨尔萨皂甙元。边氏等[3]从知母根茎乙醇提取物中分离得到20个化合物，采用光谱法和化学方法鉴定其中15个化合物的结构，分别为二十九烷醇(Ⅰ)、二十八烷酸混合物(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜甙(Ⅳ)、菝葜皂甙元(Ⅴ)、马尔可皂甙元(Ⅵ)、知母皂甙AⅢ(Ⅶ)、知母皂甙BⅠ(Ⅷ)、知母皂甙BⅢ(Ⅸ)、2，6，4’一三羟基-4-甲氧基苯酰酮(Ⅹ)、宝藿甙Ⅰ(Ⅺ)、淫羊藿甙-Ⅰ(Ⅹ Ⅱ)、芒果甙(Ⅹ Ⅲ)、7-O-葡萄糖基芒果甙(Ⅺ Ⅴ)、知母双糖(Ⅹ Ⅴ)。其中化合物Ⅴ Ⅲ为新的天然产物，化合物Ⅰ、Ⅺ、Ⅹ Ⅱ、Ⅹ Ⅳ为首次从知母中分得的已知化合物，体外抗流感甲-Ⅲ型病毒试验表明：化合物Ⅴ、Ⅵ、知母皂甙A Ⅲ及芒果甙有较强活性。马氏等[4]从知母根茎乙醇提取物中，经硅胶层析和制备型HPLC分得四种呋甾皂甙，化合物Ⅳ为首次从知母中分离得到，命名为知母皂甙E。孟氏等从知母干燥根茎，经温水浸、大孔吸附树脂柱层析、正相硅胶柱层析、HPLC、制备薄层等手段，从中分离出三种新的呋甾皂苷化合物，并初步鉴定其化学结构，分别命名为timosaponin-B Ⅳ，timosaponin-B Ⅴ，timosaponin-B Ⅵ。三种物质经水解，所得到的苷元全是菝葜皂苷元，糖部分检出葡萄糖和半乳糖(4∶1)。洪氏等[6]从西陵采集新鲜的知母根茎中分离得到两种口 山酮甙，即芒果甙(Ⅰ)和7-O-β-D-葡萄糖基芒果甙(7-O-β-D-glucopyranosyl-mangiferin, Ⅱ)，后者为一新的化合物，命名为新芒果甙(neomangiferin,Ⅱ)。
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1.2 含量测定 关于知母的质量评价《中国药典》1995年版收载了“薄层色谱法”[1]，按干燥品计菝葜皂甙元(C27H45O3)不得少于1.0%。王氏等用反相高效液相色谱法分别分离并测定了知母中菝葜皂甙元、萨尔萨皂甙元，建立了中药中菝葜皂甙元、萨尔萨皂甙元分离、测定的色谱方法[7，8]。
在一些以知母作为君药的组方中，可通过测定知母中的菝葜皂甙元含量来控制质量。苏氏等[9]用树脂吸附-薄层扫描法测定抗病毒口服液中菝葜皂甙元含量以控制抗病毒口服液的内在质量。甄氏[10]采用薄层扫描法测定知柏地黄丸中菝葜皂甙元和盐酸小檗碱的含量以作为该药的质量控制手段。
2 药理作用
2.1 抗衰老作用 人和动物衰老时常出现脑功能障碍，这种障碍和大脑M胆碱系统的功能低下有密切关系，包括M胆碱受体密度降低。知母水提物长期口服同时促进脑M受体的合成和降解，对合成的加快作用更强，其提高衰老时脑M受体密度的机制主要在促进受体分子的生成，从而纠正生成和降低的失平衡。范氏等研究结果表明[11]，知母皂甙元(ZMS)能使培养9～15天的原代培养的大鼠神经细胞的M受体密度上调，但并非ZMS直接作用于M受体结合位点所引起的，而是由于ZMS能促进M受体的生成。用M受体选择性烷化剂BCM将脑内原有受体不可逆地阻断[12]，用3H-QNB测定新生受体的时相曲线，通过数学模型救解生成速率(Pr)和降解速率常数(K)。二批平行实验表明，ZMS通过相对加快受体的合成来调节衰老动物降低的脑M受体数。范氏等[13]用放射免疫分析法测定细胞内cGMP水平，观察知母皂甙元不同作用时间对Carbachol刺激下cGMP生成的影响，结果表明知母皂甙元5min作用于原代培养的神经细胞对Carbachol刺激下cGMP的生成无影响，而48h作用明显提高cGMP生成量。因此，知母皂甙元作用与激动剂和拮抗剂不同，需要较长时间的作用才能发挥作用。徐氏等[14]研究表明，雄性SD大鼠19～20月龄时起在饲料中加一定量从知母中提取的ZMS，到23～24月龄时用三臂等长Y型迷宫作实验，其学习和记忆能力明显高于饲料中不加ZMS的平行对照老年大鼠。
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知母对老龄大鼠心肌M受体亦有调整作用[15]，竞争抑制实验表明，大鼠心肌M受体85%以上是M2亚型，提示知母能上调M\-2亚型。知母宁为知母皂甙AⅢ和芒果甙，王氏等[16]观察不同浓度的知母宁温育后的老化红细胞免疫指标和过氧化脂质(LPO)水平的改变，发现知母宁5、15、50、100μg温育后的老化红细胞LPO含量的改变，以知母宁50、100μg浓度时LPO水平明显降低，和对照组相比差异有显著意义(P<0.05)。提示一定剂量知母宁提高红细胞CR\-1活性，可能与抑制脂质过氧化反应有关。
2.2 对内分泌系统的影响 刘氏等[17]以放射免疫分析法和放射配基结合分析法观察了知母对甲亢模型β肾上腺素受体-cAMP系统的调节作用，结果表明甲亢模型β受体-cAMP系统对β受体激动剂异丙肾上腺素的反应性显著增强，肾脏β受体最大结合容量也显著增加，知母能使两者降至正常水平，但对β受体的亲和力无影响。此外，知母尚可降低甲亢模型的耗氧率，但不影响其血清T\-3和T\-4的水平。王氏等[18]研究了知母多糖的降血糖活性，结果表明知母多糖可使小鼠的血糖及肝糖元含量明显降低，而血脂含量几乎没有变化。
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2.3 其它作用 李氏等[19]观察知母宁对急性常压低氧肺动脉高压SD大鼠模型平均肺动脉压(mPAP)、血浆丙二醛(MDA)水平及肺组织磷脂酶A\-2(PLA\-2)活力的影响，并以加内皮素-1(ET-1)和血小板活化因子(PAF)分别进一步对其作用机理进行探讨。结果表明知母宁确有降低缺氧性肺动脉高压的作用，其机理可能与拮抗ET-1和PAF的作用有关。此外，知母宁有与肾上腺糖皮质激素相似的预防哮喘发作的作用[20]。金氏等[21]初步实验结果表明，知母皂甙D具有保护心肌I/R损伤的作用，这一作用可能与其抗PAF、抗血小板聚集和清除自由基等机理有关。知母宁在5-80μg/ml浓度范围内对HL-60细胞生长和增殖有抑制作用，并呈明显的剂量依赖关系[22]。知母水提物及总多糖能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀和醋酸致腹腔毛细血管通透性，且知母水提物的抑制作用具有剂量依赖性[23]。此外，知母口服易致呕吐，徐氏研究表明[24]，知母皂甙对粘膜无明显刺激性，其易致呕吐，是其所含的烟酸引起的。
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3 炮制
知母经炮制，可起到杀酶保甙作用，有利于药材的贮存，传统制法以盐炙、酒炙，麸炒和清炒为多，曹氏等[25]采用薄层扫描法测定各炮制品中菝葜皂甙元的含量以初步探讨各炮制方法的合理性。结果表明知母不同炮制品中菝葜皂甙元含量都较生品为高，其中盐炙品增加最为显著。增高的顺序为盐炙>麸炒>清炒>酒炙>生品，初步证明了传统炮制方法的合理性。陈氏等研究亦表明[26]，加工炮制可显著影响知母的有效成分含量，知母入药不必去皮，不同的加工炮制品药理作用存在差异，生品的抗炎作用较好，而镇静作用以酒炒，炒知母效果最佳。
参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典一部.广州：广东科技出版社，1995.182
[2] 江苏新医学院.中药大辞典(上册).上海：上海科学技术出版社，1985.1366
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[3] 边际，徐绥绪，黄 松，等.知母化学成分的研究.沈阳药科大学学报.1996，13(1)：341
[4] 马百平，董俊兴，王秉亻 及，等.知母中呋甾皂甙的研究.药学学报.1996，31(4)：271
[5] 孟志元，徐绥绪.知母中三个新的呋甾皂苷.沈阳药科大学学报.1998，15(2)：130
[6] 洪永福，韩公羽，郭学敏.西陵知母中新芒果甙的分离与结构鉴定.药学学报.1997，32(6)：473
[7] 王天勇，杨文远.反相高效液相色谱法分离和测定知母中菝葜皂甙元.中药材.1996，19(9)：460
[8] 王天勇，杨文远.知母中萨尔萨皂甙元的反相高效液相色谱测定.中医药学报.1995，(6)：46
, 百拇医药
[9] 苏子仁，周莉玲.树脂吸附-薄层扫描法测定抗病毒口服液菝葜皂甙元含量.中国实验方剂学杂志.1998，4(2)：6
[10] 甄汉深.知柏地黄丸含量测定的实验研究.中国实验方剂学杂志.1997，3(4)：4
[11] 范国煌，易宁育，夏宗勤.知母皂甙元对原代培养的神经细胞M受体密度和代谢动力学的影响.中国中医基础医学杂志.1997，3(6)：15
[12] 何路明，胡雅儿，易宁育，等.知母皂甙元对老年小鼠脑M受体上调机理的研究.上海第二医科大学学报.1996，16(5)：346
[13] 范国煌，易宁育，夏宗勤.知母皂甙元对原代培养神经细胞M受体刺激后cGMP生成速率的影响.中药药理与临床.1997，13(2)：14
[14] 徐建中，陆 敏，照日格图，等.知母甙元ZMS对老龄大鼠学习、记忆的影响.中药药理与临床.1995，11(3)：18
, 百拇医药
[15] 何 恺，夏宗勤，易宁育.知母对老龄大鼠心肌M受体的调整作用.中药药理与临床.1995，11(4)：11
[16] 王 伟，祝其锋，郭 峰，等.知母宁对老化红细胞CR\-1活性及脂质过氧化物水平的影响.中国药理学通报.1996，12(1)：77
[17] 刘 洁，翁世艾，曹永舒，等.知母对甲亢模型β受体cAMP系统的调节作用.中药药理与临床.1996，12(4)：16
[18] 王 靖，葛盛芳，陈 琦，等.知母多糖降血糖活性研究.中草药.1996，27(10)：605
[19] 李惠萍，全新娟，李 明.知母宁对大鼠急性常压低氧时肺动脉高压的影响.中国中医药科技.1997，4(6)：351
[20] 李惠萍，丁劲松，李 明，等.知母宁对肠鼠哮喘的预防作用及体内一氧化氮和内皮素的影响.中国中药杂志.1999，34(1)：14
, 百拇医药
[21] 金有豫，耿朝晖.知母皂甙D对心肌缺血/复灌性损伤的保护作用的分析.首都医学院学报.1994，15(2)：138
[22] 侯 敢，黄迪南，祝其锋.三种天然抗氧化剂对早幼粒白血病细胞(HL-60)的生长抑制作用研究.湖南中医学院学报.1996，16(1)：49
[23] 陈万生，乔传卓.知母抗炎作用初探.药学情报通讯.1993，11(3)：14
[24] 徐挺兰.知母的粘膜刺激性实验.时珍国药研究.1997，8(2)：149
[25] 曹爱民，贾天柱，方晓明，等.薄层扫描法测定知母不同炮制品中菝葜皂甙元的含量.中药材.1994，17(4)：29
[26] 陈万生，乔传卓.加工炮制对知母品质的影响.中国中药杂志.1997，22(4)：212
收稿日期：1999-03-03, http://www.100md.com
单位：广西中医学院药学系(南宁 530001)
关键词：知母；化学成分；药理作用；综述
广西中医学院学报990453 中图分类号 R282.71
知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的根茎，具有清热泻火、生津润燥的功效，常用于外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘等证[1]，现将其近年来的研究从化学成分、药理、炮制等方面综述如下。
1 化学成分
1.1 分离与鉴定 知母主含皂甙[2]，分别是知母皂甙A-Ⅰ、A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ、B-Ⅰ和B-Ⅱ，其中知母皂甙A-Ⅲ是萨尔萨皂甙元与知母双糖结合而成的双糖甙，知母皂甙A-Ⅰ是萨尔萨皂甙元β-D-吡喃半乳糖甙。其皂甙元主要是萨尔萨皂甙元。边氏等[3]从知母根茎乙醇提取物中分离得到20个化合物，采用光谱法和化学方法鉴定其中15个化合物的结构，分别为二十九烷醇(Ⅰ)、二十八烷酸混合物(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜甙(Ⅳ)、菝葜皂甙元(Ⅴ)、马尔可皂甙元(Ⅵ)、知母皂甙AⅢ(Ⅶ)、知母皂甙BⅠ(Ⅷ)、知母皂甙BⅢ(Ⅸ)、2，6，4’一三羟基-4-甲氧基苯酰酮(Ⅹ)、宝藿甙Ⅰ(Ⅺ)、淫羊藿甙-Ⅰ(Ⅹ Ⅱ)、芒果甙(Ⅹ Ⅲ)、7-O-葡萄糖基芒果甙(Ⅺ Ⅴ)、知母双糖(Ⅹ Ⅴ)。其中化合物Ⅴ Ⅲ为新的天然产物，化合物Ⅰ、Ⅺ、Ⅹ Ⅱ、Ⅹ Ⅳ为首次从知母中分得的已知化合物，体外抗流感甲-Ⅲ型病毒试验表明：化合物Ⅴ、Ⅵ、知母皂甙A Ⅲ及芒果甙有较强活性。马氏等[4]从知母根茎乙醇提取物中，经硅胶层析和制备型HPLC分得四种呋甾皂甙，化合物Ⅳ为首次从知母中分离得到，命名为知母皂甙E。孟氏等从知母干燥根茎，经温水浸、大孔吸附树脂柱层析、正相硅胶柱层析、HPLC、制备薄层等手段，从中分离出三种新的呋甾皂苷化合物，并初步鉴定其化学结构，分别命名为timosaponin-B Ⅳ，timosaponin-B Ⅴ，timosaponin-B Ⅵ。三种物质经水解，所得到的苷元全是菝葜皂苷元，糖部分检出葡萄糖和半乳糖(4∶1)。洪氏等[6]从西陵采集新鲜的知母根茎中分离得到两种口 山酮甙，即芒果甙(Ⅰ)和7-O-β-D-葡萄糖基芒果甙(7-O-β-D-glucopyranosyl-mangiferin, Ⅱ)，后者为一新的化合物，命名为新芒果甙(neomangiferin,Ⅱ)。
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1.2 含量测定 关于知母的质量评价《中国药典》1995年版收载了“薄层色谱法”[1]，按干燥品计菝葜皂甙元(C27H45O3)不得少于1.0%。王氏等用反相高效液相色谱法分别分离并测定了知母中菝葜皂甙元、萨尔萨皂甙元，建立了中药中菝葜皂甙元、萨尔萨皂甙元分离、测定的色谱方法[7，8]。
在一些以知母作为君药的组方中，可通过测定知母中的菝葜皂甙元含量来控制质量。苏氏等[9]用树脂吸附-薄层扫描法测定抗病毒口服液中菝葜皂甙元含量以控制抗病毒口服液的内在质量。甄氏[10]采用薄层扫描法测定知柏地黄丸中菝葜皂甙元和盐酸小檗碱的含量以作为该药的质量控制手段。
2 药理作用
2.1 抗衰老作用 人和动物衰老时常出现脑功能障碍，这种障碍和大脑M胆碱系统的功能低下有密切关系，包括M胆碱受体密度降低。知母水提物长期口服同时促进脑M受体的合成和降解，对合成的加快作用更强，其提高衰老时脑M受体密度的机制主要在促进受体分子的生成，从而纠正生成和降低的失平衡。范氏等研究结果表明[11]，知母皂甙元(ZMS)能使培养9～15天的原代培养的大鼠神经细胞的M受体密度上调，但并非ZMS直接作用于M受体结合位点所引起的，而是由于ZMS能促进M受体的生成。用M受体选择性烷化剂BCM将脑内原有受体不可逆地阻断[12]，用3H-QNB测定新生受体的时相曲线，通过数学模型救解生成速率(Pr)和降解速率常数(K)。二批平行实验表明，ZMS通过相对加快受体的合成来调节衰老动物降低的脑M受体数。范氏等[13]用放射免疫分析法测定细胞内cGMP水平，观察知母皂甙元不同作用时间对Carbachol刺激下cGMP生成的影响，结果表明知母皂甙元5min作用于原代培养的神经细胞对Carbachol刺激下cGMP的生成无影响，而48h作用明显提高cGMP生成量。因此，知母皂甙元作用与激动剂和拮抗剂不同，需要较长时间的作用才能发挥作用。徐氏等[14]研究表明，雄性SD大鼠19～20月龄时起在饲料中加一定量从知母中提取的ZMS，到23～24月龄时用三臂等长Y型迷宫作实验，其学习和记忆能力明显高于饲料中不加ZMS的平行对照老年大鼠。
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知母对老龄大鼠心肌M受体亦有调整作用[15]，竞争抑制实验表明，大鼠心肌M受体85%以上是M2亚型，提示知母能上调M\-2亚型。知母宁为知母皂甙AⅢ和芒果甙，王氏等[16]观察不同浓度的知母宁温育后的老化红细胞免疫指标和过氧化脂质(LPO)水平的改变，发现知母宁5、15、50、100μg温育后的老化红细胞LPO含量的改变，以知母宁50、100μg浓度时LPO水平明显降低，和对照组相比差异有显著意义(P<0.05)。提示一定剂量知母宁提高红细胞CR\-1活性，可能与抑制脂质过氧化反应有关。
2.2 对内分泌系统的影响 刘氏等[17]以放射免疫分析法和放射配基结合分析法观察了知母对甲亢模型β肾上腺素受体-cAMP系统的调节作用，结果表明甲亢模型β受体-cAMP系统对β受体激动剂异丙肾上腺素的反应性显著增强，肾脏β受体最大结合容量也显著增加，知母能使两者降至正常水平，但对β受体的亲和力无影响。此外，知母尚可降低甲亢模型的耗氧率，但不影响其血清T\-3和T\-4的水平。王氏等[18]研究了知母多糖的降血糖活性，结果表明知母多糖可使小鼠的血糖及肝糖元含量明显降低，而血脂含量几乎没有变化。
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2.3 其它作用 李氏等[19]观察知母宁对急性常压低氧肺动脉高压SD大鼠模型平均肺动脉压(mPAP)、血浆丙二醛(MDA)水平及肺组织磷脂酶A\-2(PLA\-2)活力的影响，并以加内皮素-1(ET-1)和血小板活化因子(PAF)分别进一步对其作用机理进行探讨。结果表明知母宁确有降低缺氧性肺动脉高压的作用，其机理可能与拮抗ET-1和PAF的作用有关。此外，知母宁有与肾上腺糖皮质激素相似的预防哮喘发作的作用[20]。金氏等[21]初步实验结果表明，知母皂甙D具有保护心肌I/R损伤的作用，这一作用可能与其抗PAF、抗血小板聚集和清除自由基等机理有关。知母宁在5-80μg/ml浓度范围内对HL-60细胞生长和增殖有抑制作用，并呈明显的剂量依赖关系[22]。知母水提物及总多糖能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀和醋酸致腹腔毛细血管通透性，且知母水提物的抑制作用具有剂量依赖性[23]。此外，知母口服易致呕吐，徐氏研究表明[24]，知母皂甙对粘膜无明显刺激性，其易致呕吐，是其所含的烟酸引起的。
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3 炮制
知母经炮制，可起到杀酶保甙作用，有利于药材的贮存，传统制法以盐炙、酒炙，麸炒和清炒为多，曹氏等[25]采用薄层扫描法测定各炮制品中菝葜皂甙元的含量以初步探讨各炮制方法的合理性。结果表明知母不同炮制品中菝葜皂甙元含量都较生品为高，其中盐炙品增加最为显著。增高的顺序为盐炙>麸炒>清炒>酒炙>生品，初步证明了传统炮制方法的合理性。陈氏等研究亦表明[26]，加工炮制可显著影响知母的有效成分含量，知母入药不必去皮，不同的加工炮制品药理作用存在差异，生品的抗炎作用较好，而镇静作用以酒炒，炒知母效果最佳。
参考文献
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[4] 马百平，董俊兴，王秉亻 及，等.知母中呋甾皂甙的研究.药学学报.1996，31(4)：271
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[8] 王天勇，杨文远.知母中萨尔萨皂甙元的反相高效液相色谱测定.中医药学报.1995，(6)：46
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[10] 甄汉深.知柏地黄丸含量测定的实验研究.中国实验方剂学杂志.1997，3(4)：4
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[16] 王 伟，祝其锋，郭 峰，等.知母宁对老化红细胞CR\-1活性及脂质过氧化物水平的影响.中国药理学通报.1996，12(1)：77
[17] 刘 洁，翁世艾，曹永舒，等.知母对甲亢模型β受体cAMP系统的调节作用.中药药理与临床.1996，12(4)：16
[18] 王 靖，葛盛芳，陈 琦，等.知母多糖降血糖活性研究.中草药.1996，27(10)：605
[19] 李惠萍，全新娟，李 明.知母宁对大鼠急性常压低氧时肺动脉高压的影响.中国中医药科技.1997，4(6)：351
[20] 李惠萍，丁劲松，李 明，等.知母宁对肠鼠哮喘的预防作用及体内一氧化氮和内皮素的影响.中国中药杂志.1999，34(1)：14
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[21] 金有豫，耿朝晖.知母皂甙D对心肌缺血/复灌性损伤的保护作用的分析.首都医学院学报.1994，15(2)：138
[22] 侯 敢，黄迪南，祝其锋.三种天然抗氧化剂对早幼粒白血病细胞(HL-60)的生长抑制作用研究.湖南中医学院学报.1996，16(1)：49
[23] 陈万生，乔传卓.知母抗炎作用初探.药学情报通讯.1993，11(3)：14
[24] 徐挺兰.知母的粘膜刺激性实验.时珍国药研究.1997，8(2)：149
[25] 曹爱民，贾天柱，方晓明，等.薄层扫描法测定知母不同炮制品中菝葜皂甙元的含量.中药材.1994，17(4)：29
[26] 陈万生，乔传卓.加工炮制对知母品质的影响.中国中药杂志.1997，22(4)：212
收稿日期：1999-03-03, http://www.100md.com
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