对现行《药品标准》中溶血与凝聚试验方法的修改建议
作者：张德波 吴宝慧 刘大凤
单位：张德波(成都市药品检验所，四川 成都 610021)；吴宝慧 刘大凤(成都市第十人民医院)
关键词：药品标准；溶血试验；凝聚试验
成都中医药大学学报000129 中图分类号： R282；R944.1 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(2000)01-0062-01
中草药注射剂，特别是静脉给药的中草药注射液，对其溶血与凝聚试验的把关是非常重要的。现行卫生部《药品标准》和各地方《药品标准》对中草注射剂的溶血与凝聚试验方法均作如下规定：“取试管3支，分别加入供试品0.0、0.3、0.3 mL，然后分别加生理盐水2.5、2.2、2.2 mL和2%兔红细胞混悬液2.5 mL。摇匀，迅速置恒温箱中，保持36.5℃±0.5 ℃的温度，观察3 小时，不得有溶血和凝聚现象。若有凝聚，可取其中加有供试品的一支振摇，凝聚物应能均匀分散。”笔者在实践中发现上述规定有不尽人意之处，主要是规定的方法较粗略，对结果的判断不严密，因而造成了实际操作中的困难，故提出以下修改意见，以供同道参考。
, 百拇医药
1 溶血试验
有的中草药注射剂如丹参或复方丹参注射液，其药液的颜色比较深，恒温3小时后加有供试品的试管上层液仍带有药液的颜色。而少数的溶血上层液也是暗黄色。那么究竟是药液的颜色还是有了少量的溶血，检验员只能直观地目测供试品管上层液颜色相对于阴性管上层液颜色的深浅来作出判断结论，其主观性和随机性比较大。为此，笔者建议，在试验中增设“供试品药液颜色对照管”和“阳性对照管”。前者试管中加入0.3 mL 供试液和4.7 mL生理盐水；后者加入2.5 mL蒸馏水和2%兔红细胞混悬液2.5 mL。在作结果判断时，以供试品管上层液颜色与供试品药液颜色对照管的溶液颜色对比。如果前者的颜色比后者的颜色深或红，则表示有溶血发生；反之则无溶血。
如果目测判断有溶血现象，最好进一步确定溶血率的大小。
溶血率的测定方法：取试验中各试管离心，吸取各管上清液，以阴性管上清液为空白，按照分光光度法在545 nm波长处分别测定吸收度。将所测得的吸收度值代入下式计算溶血率。
, 百拇医药
溶血率=供试品管吸收度值-供试品药液颜色对照管吸收度值(阳性管吸收度值)×100%
笔者采用目测法和测溶血率法对2 种中药注射剂的溶血试验作过比较观察，结果如表1。
表1 目测法与测溶血率法对2种注射剂溶血试验比较 厂 名
品 名
批 号
供试品管
颜色对照管
目测判断
溶血率
复方丹参注射液
970730
, 百拇医药
淡红
淡黄
不合格
19%
A厂
复方丹参注射液
970828
较红
淡黄
不合格
23%
复方丹参注射液
970704
, 百拇医药
深红
淡黄
不合格
32%
B厂
生脉注射液
980801
近无色
微黄
合 格
0
生脉注射液
980901
, 百拇医药
近无色
微黄
合 格
0
C厂
复方丹参注射液
980514
淡黄
微黄
合 格
3%
从表1可见，直观目测判断与测溶血率判断结果大致相同，但测溶血率法对溶血的大小有了量化认识，因而更加准确，特别是对边缘样品更能说明问题。由于实验存在着一定的偏差、误差，建议可将溶血率合格限度定在不得超过5%～10%的范围。
, 百拇医药
2 凝聚试验
现行《标准》中规定：“若有凝聚，可取其中加供试品的一支试管振摇，凝聚物应能均匀分散。”作为常识，这里的振摇应是手持试管上部，用腕力作左右轻轻振摇3～4次即可。但因为标准里没有明确振摇的力度和时间，在检查出不合格品时就容易引起争议。也有人提出将阴性管和供试品管一起振摇，只要阴性管的红细胞已经分散均匀，供试品管的红细胞还没有分散均匀，则判有凝聚。我们认为，这样处理是不妥的。因为阴性管的红细胞本身无任何凝聚，而供试品管是允许有凝聚的，只不过要能够振摇得均匀分散，这是个假凝聚现象，标准称为凝聚。
基于此，我们建议在《标准》中增加显微检查法，即取振摇后的上层混悬液几滴，装片在显微镜下观察。如有红细胞二三个地粘集在一起，且在载玻片边缘滴加生理盐水而不能将这种粘集冲散开，则表示有凝聚。同时作阴性管振摇后的混悬液装片显微镜观察，不得有红细胞凝聚现象。
3 对照品的使用
要很好地解决本实验判断上的问题，最艰的办法还是在试验中使用对照品。即由国家药品监督管理局指定单位生产各种中草药注射剂溶血与凝聚试验的对照品，经标定后发放给各药检部门、相关药厂和使用单位。在进行检验时，供试品与对照品在一起用相同方法操作，其结果判断的客观性和准确性必然提高，在出现争议时也便于仲裁。
作者简介：张德波，男，1969年4月生；医学学士；研究方向：药品检验。
(收稿日期：1999-11-10), 百拇医药
单位：张德波(成都市药品检验所，四川 成都 610021)；吴宝慧 刘大凤(成都市第十人民医院)
关键词：药品标准；溶血试验；凝聚试验
成都中医药大学学报000129 中图分类号： R282；R944.1 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(2000)01-0062-01
中草药注射剂，特别是静脉给药的中草药注射液，对其溶血与凝聚试验的把关是非常重要的。现行卫生部《药品标准》和各地方《药品标准》对中草注射剂的溶血与凝聚试验方法均作如下规定：“取试管3支，分别加入供试品0.0、0.3、0.3 mL，然后分别加生理盐水2.5、2.2、2.2 mL和2%兔红细胞混悬液2.5 mL。摇匀，迅速置恒温箱中，保持36.5℃±0.5 ℃的温度，观察3 小时，不得有溶血和凝聚现象。若有凝聚，可取其中加有供试品的一支振摇，凝聚物应能均匀分散。”笔者在实践中发现上述规定有不尽人意之处，主要是规定的方法较粗略，对结果的判断不严密，因而造成了实际操作中的困难，故提出以下修改意见，以供同道参考。
, 百拇医药
1 溶血试验
有的中草药注射剂如丹参或复方丹参注射液，其药液的颜色比较深，恒温3小时后加有供试品的试管上层液仍带有药液的颜色。而少数的溶血上层液也是暗黄色。那么究竟是药液的颜色还是有了少量的溶血，检验员只能直观地目测供试品管上层液颜色相对于阴性管上层液颜色的深浅来作出判断结论，其主观性和随机性比较大。为此，笔者建议，在试验中增设“供试品药液颜色对照管”和“阳性对照管”。前者试管中加入0.3 mL 供试液和4.7 mL生理盐水；后者加入2.5 mL蒸馏水和2%兔红细胞混悬液2.5 mL。在作结果判断时，以供试品管上层液颜色与供试品药液颜色对照管的溶液颜色对比。如果前者的颜色比后者的颜色深或红，则表示有溶血发生；反之则无溶血。
如果目测判断有溶血现象，最好进一步确定溶血率的大小。
溶血率的测定方法：取试验中各试管离心，吸取各管上清液，以阴性管上清液为空白，按照分光光度法在545 nm波长处分别测定吸收度。将所测得的吸收度值代入下式计算溶血率。
, 百拇医药
溶血率=供试品管吸收度值-供试品药液颜色对照管吸收度值(阳性管吸收度值)×100%
笔者采用目测法和测溶血率法对2 种中药注射剂的溶血试验作过比较观察，结果如表1。
表1 目测法与测溶血率法对2种注射剂溶血试验比较 厂 名
品 名
批 号
供试品管
颜色对照管
目测判断
溶血率
复方丹参注射液
970730
, 百拇医药
淡红
淡黄
不合格
19%
A厂
复方丹参注射液
970828
较红
淡黄
不合格
23%
复方丹参注射液
970704
, 百拇医药
深红
淡黄
不合格
32%
B厂
生脉注射液
980801
近无色
微黄
合 格
0
生脉注射液
980901
, 百拇医药
近无色
微黄
合 格
0
C厂
复方丹参注射液
980514
淡黄
微黄
合 格
3%
从表1可见，直观目测判断与测溶血率判断结果大致相同，但测溶血率法对溶血的大小有了量化认识，因而更加准确，特别是对边缘样品更能说明问题。由于实验存在着一定的偏差、误差，建议可将溶血率合格限度定在不得超过5%～10%的范围。
, 百拇医药
2 凝聚试验
现行《标准》中规定：“若有凝聚，可取其中加供试品的一支试管振摇，凝聚物应能均匀分散。”作为常识，这里的振摇应是手持试管上部，用腕力作左右轻轻振摇3～4次即可。但因为标准里没有明确振摇的力度和时间，在检查出不合格品时就容易引起争议。也有人提出将阴性管和供试品管一起振摇，只要阴性管的红细胞已经分散均匀，供试品管的红细胞还没有分散均匀，则判有凝聚。我们认为，这样处理是不妥的。因为阴性管的红细胞本身无任何凝聚，而供试品管是允许有凝聚的，只不过要能够振摇得均匀分散，这是个假凝聚现象，标准称为凝聚。
基于此，我们建议在《标准》中增加显微检查法，即取振摇后的上层混悬液几滴，装片在显微镜下观察。如有红细胞二三个地粘集在一起，且在载玻片边缘滴加生理盐水而不能将这种粘集冲散开，则表示有凝聚。同时作阴性管振摇后的混悬液装片显微镜观察，不得有红细胞凝聚现象。
3 对照品的使用
要很好地解决本实验判断上的问题，最艰的办法还是在试验中使用对照品。即由国家药品监督管理局指定单位生产各种中草药注射剂溶血与凝聚试验的对照品，经标定后发放给各药检部门、相关药厂和使用单位。在进行检验时，供试品与对照品在一起用相同方法操作，其结果判断的客观性和准确性必然提高，在出现争议时也便于仲裁。
作者简介：张德波，男，1969年4月生；医学学士；研究方向：药品检验。
(收稿日期：1999-11-10), 百拇医药