菊苣提取物对高糖复合高血脂模型兔血浆vWF、ET及PGI2/TXA2含量的影响
作者：张冰 刘小青 胡京红 高云艳 李云谷 何轶
单位：北京中医药大学 北京100029
关键词：菊苣；药理；vW因子；内皮素；前列环素；血栓素
北京中医药大学学报000619
摘要：观察高糖复合高血脂和菊苣提取物对复合模型兔血浆vWF、内皮素(ET)、前 列环素(PGI2)和血栓素(TXA2)水平变化；分析其抗动脉粥样硬化的机理。选用高脂 饲料，Allo xan静注方法制造高血糖复合高血脂模型，预防给药。实验10周后，以放射性同位素免疫法 检测vWF、ET 、PGI2 、TXB2水平。结果发现①模型动物与正常组比较，血浆vWF、ET水 平明显升 高，TXA2水平升高，PGI2含量明显下降。②菊苣提取物能降低模型动物vWF、ET 、TXA 2含量，升高PGI2水平，改善PGI2/TXA2比值。表明：菊苣提取物能有效降低复合模 型兔血浆vWF、ET、TXA2含量，升高PGI2含量，此作用可能与之抗动脉粥样硬化作用相 关。
, 百拇医药
中图分类号：R285.5
The Effects of Chicory Extract on the Levels of vWF, ET, TXA2, PGI2
and the Ratio of PGI2/TXA2 in the Rabbit Model of
Hyperglycemia with Hyperlipidemia
Zhang Bing (张 冰), Liu Xiaoqing (刘小青), Hu Jinghong (胡京红), et al.
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
, 百拇医药
Aim: to observe the levels of von Willebrand factor (vWF), endot helin (ET), thromboxane A2 (TXA2) and prostacyclin (PGI2) in the plasma of the rabbit model of hyperglycemia combined with hyperlipidemia, and the effects of chicory extract on the vWF, ET, TXA2 and PGI2. Method: the rabbit model was establis hed by using high fat diet and intravenous injection of alloxan, and the levels of t he vWF, ET, TXA2 and PGI2 were determined by radioisotope immunoassay. Resul ts: the results showed that the levels of the vWF, ET, TXA2 were increased and the level of the PGI2 was decreased in the model rabbits, compared with those in the healthy rabbits. The chicory extract had the effects of decreasing the levels of the vWF, ET, TXA2 and increasing the level of the PGI2 with improvement of the ratio of PGI2/TXA2. Conclusion: the effects of chicory extract may be re lated with the antiatherosclerotic mechanism.
, http://www.100md.com
KEY WORDS: Chicory; Pharmacology; von Willebrand Factor; Endothelin; Prost acyclin; Thromboxane A2
我们的前期工作已证明菊苣提取物对家兔高糖高脂复合模型有良好的降糖降脂及改善 血液流变性作用，对兔动脉平滑肌细胞(SMC)膜有良好的保护作用[1]。为了进一 步探讨其作用机理，我们对模型动物血浆相关因子作了测试并进行分析。
1 实验材料
1.1 动物
新西兰兔，雄性45只，体重1.5～2.0 kg，中国生物制品检定所动物室提供。
1.2 药物
, 百拇医药 菊苣提取物：菊苣(北京中医药大学中药学院鉴定教研室鉴定)由山东奇可力保 健品有限公司提供，北京中医药大学中药学院制剂研究室提供制剂(4 g/mL)；金芪片，天 津达仁堂制药厂生产，批号：9605103。
1.3 试剂
血浆内皮素(ET)试剂盒，卫药准字R-68号；血浆TXA2试剂盒，卫药准字R-70号 ，PGI2试剂盒，卫药准字R-69号，均由301医院北京东亚免疫研究所提供；血浆vWF试剂盒 ，由苏州医学院提供。
1.4 仪器
LD-R4-84C冷冻离心机，法国制造；SN-682型放射免疫γ-计数器，上 海核辐射光电仪器有限公司，FT-646A微机单头放免仪，北京核仪器厂。
2 实验方法
, 百拇医药
2.1 动物分组与喂养、造模
动物在本室饲养3～5 d后，随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、受试药大剂 量组、受试药小剂量组，每组9只。除正常组动物予耳缘静脉注射同样体积生理盐水外，各 组动物均在空腹状态下耳缘静脉一次性注射Alloxan 120 mg/kg；并定量给予高脂饲料 [2]。 正常对照组动物予正常饲料。同时阳性药对照组动物予金芪片8.0 g/(kg.d)，受试药大 剂 量组予菊苣提取物相当生药16 g/(kg.d)，受试药小剂量组予菊苣提取物相当生药8 g/( kg.d)(均将药拌入定量的高脂料内食入)连续10周。
2.2 检测
实验进行10周后，动物禁食12 h，颈静脉取血抗凝，取血浆，-20 ℃备用，检测vWF、ET、PGI2、TXA2。vWF以双抗体夹心固相酶免疫法，LD 492 nm；ET、PGI2、TXA2 采用单克隆抗体放射性同位素法。
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3 实验结果
各组动物血浆PGI2、TXA2及PGI2/TXA2 比值变化见表1。高脂高糖复合模型兔血浆P GI2含量较正常组显著降低(P<0.01)，而TXA2含量较正常组高，故PGI2/TXA 2 差异非常显著，P<0.01；阳性药可降低动物血浆TXA2(P<0.05),升高PGI2 及PGI2/TXA2比值。受试药大剂量显 著降低TXA2，并显著升高PGI2含量，调节PGI2/TXA2 比值，与模型组比较，均为 P<0.05； 小剂量受试药有降低TXA2含量趋势，并能显著升高PGI2含量(P<0.01)，调节PGI 2/TXA2值。
, 百拇医药
表1 各组动物血浆PGI2、TXA2含量比较 (ng/L；
±s) 组 别
n
PGI2
TXA2
PGI2/TXA2
对 照 组
8
976.13±388.71**
600.24±240.09
, 百拇医药
1.62±0.51**
模 型 组
8
402.56±203.33
693.10±161.32
0.84±0.42
阳性药组
8
696.77±347.26
480.17±146.27*
1.18±0.63*
, http://www.100md.com
受试药大剂量组
8
744.84±340.16*
500.65±135.80*
1.32±0.41*
受试药小剂量组
9
690.96±143.55**
538.21±210.34
1.30±0.61
注：与模型组比*P<0.05 **P<0.01 各组动物血浆ET水平比较(见表2)，可以看到复合模型动物内皮素水平较正常组明显升高 ，差异极显著(P<0.01)，阳性对照组动物ET水平明显降低(P<0.01)， 受试 药大剂量可降低模型动物ET (P<0.05)，小剂量组亦有显著作用，经统计学处理P <0.01。
, 百拇医药
表2 各组动物血浆ET含量比较 (±s) 组 别
n
ET ng/L
对照组
8
170.33±43.13**
模型组
7
240.30±40.84
阳性药组
9
, http://www.100md.com
192.41±20.51**
受试药大剂量组
8
179.85±41.59*
受试药小剂量组
9
178.42±32.54**
注：与模型组比*P<0.05 **P<0.01 各组动物血浆vWF(见表3)含量比较显示；复合模型动物血浆vWF显著高于正常组(P <0.001)，受试药大、小剂量组显著降低模型动物vWF水平，与模型组比较，差异极显著 (P均<0.001)。阳性药组动物血浆vWF水平与模型组比较明显降低，有极显著差异( P<0.001)。
, 百拇医药
表3 各组动物血浆vWF含量比较 (±s) 组 别
n
vWF/U/L
对 照 组
9
0.46±0.11***
模 型 组
9
1.20±0.13
阳性药组
8
, http://www.100md.com
0.80±0.14***
受试药大剂量组
8
0.42±0.16***
受试药小剂量组
9
0.68±0.12***
注：与模型组比***P<0.0014 讨论
菊苣(Cichroii.L),民间称奇可力，功能清热解毒，健脾祛湿，临床用于治糖尿病、 高血脂症。为了进一步阐明其作用机理，我们筛选了其中有效成分，并进行了体内外实验 观察，结果证实菊苣提取物能降低复合模型小鼠血糖血脂水平，降低血液粘稠度； 还可抑制高脂 复合高糖模型兔AS斑块形成。初步分析认为：菊苣抗AS作用不仅与直接调节血糖血脂含量， 抑制兔主动脉细胞(SMC)增殖，改善细胞膜流动性相关[1，5]，还可 能与之调节内皮细胞功能，减少模型动物vWF、ET含量，调节PGI2/TXA2比值有关。
, 百拇医药
已知血管内皮细胞分泌多种血管活性物质，参与动脉壁细胞生物功能的调节。其中，内皮素 是最强的缩血管多肽和强烈的促细胞分裂剂之一，它促进血管收缩与细胞增殖[2] ，参与动 脉粥样硬化斑块的形成。vWF是内皮细胞与单核细胞产生的一种高分子糖蛋白的聚合物，参 与血小板与内皮细胞的相互作用，促进血小板凝聚，因而在AS形成中亦有促进作用。前列环 素(PGI2) 在心血管疾病中具有保护作用[3]，它作用于vSMC，能扩张血管及抑制 血管平滑肌细胞增殖；TXA2与PGI2呈拮抗关系，TXA2是最强的血小板聚集剂，能促进 血管 收缩并刺激血管细胞增殖，促进动脉粥样硬化形成，当PGI2减少时，TXA2合成增加。所 以二者含量变化在AS形成发展中起到重要作用。本实验已表明，当模型兔体内高血脂同时合 并高血糖血症时， 可导致上述各因子之间失去平衡，如PGI2与TXA2比值失衡，ET水平及vWF因子含量显著 升高，促进动脉粥样硬化病理的发生。
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该提取物能通过改善血浆多种细胞因子水平，减少高糖高脂等不良因素对血管壁的刺激，大 、 小剂量均可对抗由高脂高糖导致的ET、vWF水平升高， 调节PGI2与TXA2比值， 维持 正常舒缩状态，减少对SMC异常增殖的刺激， 减少斑块的形成， 起到抗AS的综合作用。本 实验大、 小剂量间药效未见明显量效关系， 抗动脉粥样硬化的最佳剂量尚待进一步探讨。
国家自然科学基金资助项目(No.39970936)
张冰，女，41岁，医学博士，副教授
参 考 文 献
1，张 冰，刘小青，高云艳.菊苣胶囊对复合模型兔血脂血糖血尿酸的影响. 中药 新药与临床药理， 1998, 9 (4)：221～223
2，Masaki T.Molecular and Cellular Mechanism of endothelin regulation-implicatio n for vascular function. Circulation，1991,84：1457
, http://www.100md.com
3，Szderes L.Endogerous Cardioprotective mechanisms.A acute delayedprotection by PGI2.J Mol Cell Cardiol，1990,22(suppl. Ⅲ)：131
4，张 冰，刘小青，胡京红.菊苣提取物Amyrin对兔主动脉SMC的作用研究.中国药理学通报 ，1999,15(1)：170～172
5，张 冰，胡京红，刘小青.菊苣正己烷提取物药理活性研究. 中药药理与临床，1998，14 (5)：15～17
(收稿日期：2000-06-10), http://www.100md.com
单位：北京中医药大学 北京100029
关键词：菊苣；药理；vW因子；内皮素；前列环素；血栓素
北京中医药大学学报000619
摘要：观察高糖复合高血脂和菊苣提取物对复合模型兔血浆vWF、内皮素(ET)、前 列环素(PGI2)和血栓素(TXA2)水平变化；分析其抗动脉粥样硬化的机理。选用高脂 饲料，Allo xan静注方法制造高血糖复合高血脂模型，预防给药。实验10周后，以放射性同位素免疫法 检测vWF、ET 、PGI2 、TXB2水平。结果发现①模型动物与正常组比较，血浆vWF、ET水 平明显升 高，TXA2水平升高，PGI2含量明显下降。②菊苣提取物能降低模型动物vWF、ET 、TXA 2含量，升高PGI2水平，改善PGI2/TXA2比值。表明：菊苣提取物能有效降低复合模 型兔血浆vWF、ET、TXA2含量，升高PGI2含量，此作用可能与之抗动脉粥样硬化作用相 关。
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中图分类号：R285.5
The Effects of Chicory Extract on the Levels of vWF, ET, TXA2, PGI2
and the Ratio of PGI2/TXA2 in the Rabbit Model of
Hyperglycemia with Hyperlipidemia
Zhang Bing (张 冰), Liu Xiaoqing (刘小青), Hu Jinghong (胡京红), et al.
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
, 百拇医药
Aim: to observe the levels of von Willebrand factor (vWF), endot helin (ET), thromboxane A2 (TXA2) and prostacyclin (PGI2) in the plasma of the rabbit model of hyperglycemia combined with hyperlipidemia, and the effects of chicory extract on the vWF, ET, TXA2 and PGI2. Method: the rabbit model was establis hed by using high fat diet and intravenous injection of alloxan, and the levels of t he vWF, ET, TXA2 and PGI2 were determined by radioisotope immunoassay. Resul ts: the results showed that the levels of the vWF, ET, TXA2 were increased and the level of the PGI2 was decreased in the model rabbits, compared with those in the healthy rabbits. The chicory extract had the effects of decreasing the levels of the vWF, ET, TXA2 and increasing the level of the PGI2 with improvement of the ratio of PGI2/TXA2. Conclusion: the effects of chicory extract may be re lated with the antiatherosclerotic mechanism.
, http://www.100md.com
KEY WORDS: Chicory; Pharmacology; von Willebrand Factor; Endothelin; Prost acyclin; Thromboxane A2
我们的前期工作已证明菊苣提取物对家兔高糖高脂复合模型有良好的降糖降脂及改善 血液流变性作用，对兔动脉平滑肌细胞(SMC)膜有良好的保护作用[1]。为了进一 步探讨其作用机理，我们对模型动物血浆相关因子作了测试并进行分析。
1 实验材料
1.1 动物
新西兰兔，雄性45只，体重1.5～2.0 kg，中国生物制品检定所动物室提供。
1.2 药物
, 百拇医药 菊苣提取物：菊苣(北京中医药大学中药学院鉴定教研室鉴定)由山东奇可力保 健品有限公司提供，北京中医药大学中药学院制剂研究室提供制剂(4 g/mL)；金芪片，天 津达仁堂制药厂生产，批号：9605103。
1.3 试剂
血浆内皮素(ET)试剂盒，卫药准字R-68号；血浆TXA2试剂盒，卫药准字R-70号 ，PGI2试剂盒，卫药准字R-69号，均由301医院北京东亚免疫研究所提供；血浆vWF试剂盒 ，由苏州医学院提供。
1.4 仪器
LD-R4-84C冷冻离心机，法国制造；SN-682型放射免疫γ-计数器，上 海核辐射光电仪器有限公司，FT-646A微机单头放免仪，北京核仪器厂。
2 实验方法
, 百拇医药
2.1 动物分组与喂养、造模
动物在本室饲养3～5 d后，随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、受试药大剂 量组、受试药小剂量组，每组9只。除正常组动物予耳缘静脉注射同样体积生理盐水外，各 组动物均在空腹状态下耳缘静脉一次性注射Alloxan 120 mg/kg；并定量给予高脂饲料 [2]。 正常对照组动物予正常饲料。同时阳性药对照组动物予金芪片8.0 g/(kg.d)，受试药大 剂 量组予菊苣提取物相当生药16 g/(kg.d)，受试药小剂量组予菊苣提取物相当生药8 g/( kg.d)(均将药拌入定量的高脂料内食入)连续10周。
2.2 检测
实验进行10周后，动物禁食12 h，颈静脉取血抗凝，取血浆，-20 ℃备用，检测vWF、ET、PGI2、TXA2。vWF以双抗体夹心固相酶免疫法，LD 492 nm；ET、PGI2、TXA2 采用单克隆抗体放射性同位素法。
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3 实验结果
各组动物血浆PGI2、TXA2及PGI2/TXA2 比值变化见表1。高脂高糖复合模型兔血浆P GI2含量较正常组显著降低(P<0.01)，而TXA2含量较正常组高，故PGI2/TXA 2 差异非常显著，P<0.01；阳性药可降低动物血浆TXA2(P<0.05),升高PGI2 及PGI2/TXA2比值。受试药大剂量显 著降低TXA2，并显著升高PGI2含量，调节PGI2/TXA2 比值，与模型组比较，均为 P<0.05； 小剂量受试药有降低TXA2含量趋势，并能显著升高PGI2含量(P<0.01)，调节PGI 2/TXA2值。
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表1 各组动物血浆PGI2、TXA2含量比较 (ng/L；
±s) 组 别n
PGI2
TXA2
PGI2/TXA2
对 照 组
8
976.13±388.71**
600.24±240.09
, 百拇医药
1.62±0.51**
模 型 组
8
402.56±203.33
693.10±161.32
0.84±0.42
阳性药组
8
696.77±347.26
480.17±146.27*
1.18±0.63*
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受试药大剂量组
8
744.84±340.16*
500.65±135.80*
1.32±0.41*
受试药小剂量组
9
690.96±143.55**
538.21±210.34
1.30±0.61
注：与模型组比*P<0.05 **P<0.01 各组动物血浆ET水平比较(见表2)，可以看到复合模型动物内皮素水平较正常组明显升高 ，差异极显著(P<0.01)，阳性对照组动物ET水平明显降低(P<0.01)， 受试 药大剂量可降低模型动物ET (P<0.05)，小剂量组亦有显著作用，经统计学处理P <0.01。
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表2 各组动物血浆ET含量比较 (
±s) 组 别n
ET ng/L
对照组
8
170.33±43.13**
模型组
7
240.30±40.84
阳性药组
9
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192.41±20.51**
受试药大剂量组
8
179.85±41.59*
受试药小剂量组
9
178.42±32.54**
注：与模型组比*P<0.05 **P<0.01 各组动物血浆vWF(见表3)含量比较显示；复合模型动物血浆vWF显著高于正常组(P <0.001)，受试药大、小剂量组显著降低模型动物vWF水平，与模型组比较，差异极显著 (P均<0.001)。阳性药组动物血浆vWF水平与模型组比较明显降低，有极显著差异( P<0.001)。
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表3 各组动物血浆vWF含量比较 (
±s) 组 别n
vWF/U/L
对 照 组
9
0.46±0.11***
模 型 组
9
1.20±0.13
阳性药组
8
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0.80±0.14***
受试药大剂量组
8
0.42±0.16***
受试药小剂量组
9
0.68±0.12***
注：与模型组比***P<0.0014 讨论
菊苣(Cichroii.L),民间称奇可力，功能清热解毒，健脾祛湿，临床用于治糖尿病、 高血脂症。为了进一步阐明其作用机理，我们筛选了其中有效成分，并进行了体内外实验 观察，结果证实菊苣提取物能降低复合模型小鼠血糖血脂水平，降低血液粘稠度； 还可抑制高脂 复合高糖模型兔AS斑块形成。初步分析认为：菊苣抗AS作用不仅与直接调节血糖血脂含量， 抑制兔主动脉细胞(SMC)增殖，改善细胞膜流动性相关[1，5]，还可 能与之调节内皮细胞功能，减少模型动物vWF、ET含量，调节PGI2/TXA2比值有关。
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已知血管内皮细胞分泌多种血管活性物质，参与动脉壁细胞生物功能的调节。其中，内皮素 是最强的缩血管多肽和强烈的促细胞分裂剂之一，它促进血管收缩与细胞增殖[2] ，参与动 脉粥样硬化斑块的形成。vWF是内皮细胞与单核细胞产生的一种高分子糖蛋白的聚合物，参 与血小板与内皮细胞的相互作用，促进血小板凝聚，因而在AS形成中亦有促进作用。前列环 素(PGI2) 在心血管疾病中具有保护作用[3]，它作用于vSMC，能扩张血管及抑制 血管平滑肌细胞增殖；TXA2与PGI2呈拮抗关系，TXA2是最强的血小板聚集剂，能促进 血管 收缩并刺激血管细胞增殖，促进动脉粥样硬化形成，当PGI2减少时，TXA2合成增加。所 以二者含量变化在AS形成发展中起到重要作用。本实验已表明，当模型兔体内高血脂同时合 并高血糖血症时， 可导致上述各因子之间失去平衡，如PGI2与TXA2比值失衡，ET水平及vWF因子含量显著 升高，促进动脉粥样硬化病理的发生。
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该提取物能通过改善血浆多种细胞因子水平，减少高糖高脂等不良因素对血管壁的刺激，大 、 小剂量均可对抗由高脂高糖导致的ET、vWF水平升高， 调节PGI2与TXA2比值， 维持 正常舒缩状态，减少对SMC异常增殖的刺激， 减少斑块的形成， 起到抗AS的综合作用。本 实验大、 小剂量间药效未见明显量效关系， 抗动脉粥样硬化的最佳剂量尚待进一步探讨。
国家自然科学基金资助项目(No.39970936)
张冰，女，41岁，医学博士，副教授
参 考 文 献
1，张 冰，刘小青，高云艳.菊苣胶囊对复合模型兔血脂血糖血尿酸的影响. 中药 新药与临床药理， 1998, 9 (4)：221～223
2，Masaki T.Molecular and Cellular Mechanism of endothelin regulation-implicatio n for vascular function. Circulation，1991,84：1457
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3，Szderes L.Endogerous Cardioprotective mechanisms.A acute delayedprotection by PGI2.J Mol Cell Cardiol，1990,22(suppl. Ⅲ)：131
4，张 冰，刘小青，胡京红.菊苣提取物Amyrin对兔主动脉SMC的作用研究.中国药理学通报 ，1999,15(1)：170～172
5，张 冰，胡京红，刘小青.菊苣正己烷提取物药理活性研究. 中药药理与临床，1998，14 (5)：15～17
(收稿日期：2000-06-10), http://www.100md.com